专利名称：药物组合物二十五味鬼臼丸及其制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物制剂的质量检测方法，特别涉及一种药物组合物二十五味鬼白丸及其制剂的质量检测方法，属于医药技术领域。
背景技术：
痛经是妇女常见病,尤其以青年妇女多见。目前治疗痛经仍以激素治疗为主,但有一定副作用。二十五味鬼臼丸收载于部颁标准，标准编号WS3-BC-0154-95。二十五味鬼臼丸由鬼白、藏茜草、石榴子、藏紫草、肉桂、矮紫堇、朱砂等27味药组成的。具有祛风镇痛，调经血的作用。用于妇女血症，风症，子宮虫病，下肢关节疼痛，小腹、肝、胆、上肢疼痛在临床上有较满意的疗效。二十五味鬼臼丸中鬼臼为主要药味，但鬼臼中鬼臼毒素如服用过量可能引起中毒，甚至死亡等各种不良反应。同时处方中朱砂主要成分为硫化汞，大量服用或少量久服， 均可能造成汞中毒，危害人体健康。二十五味鬼臼丸原标准(WS3-BC-0154-95)均未对上述两种药味进行控制，也未见有关二十五味鬼白丸专利文献，造成二十五味鬼白丸产品存在安全隐患。因此，质量标准有待提闻。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种药物组合物二十五味鬼白丸及其制剂的质量检测方法。发明概述本发明提供了一种检测药物组合物二十五味鬼白丸及其制剂中鬼白毒素及汞含量的方法，保证了制剂中鬼白毒素及汞含量均在安全范围之内，使该制剂在治疗疾病的同时，保证了用药的安全性。术语说明二十五味鬼臼丸是部颁标准记载的药品名称。二十五味鬼白丸及其制剂包括二十五味鬼白丸及用二十五味鬼白丸原料药配方制备的其他制剂。本发明的技术方案如下ー种原料药组成为鬼白50-150重量份、藏茜草25-75重量份、石榴子35-100重量份、藏紫草40-120重量份、肉桂20-60重量份、矮紫堇35-100重量份、巴夏嘎30-90重量份、光明盐10-30重量份、硇砂10-30重量份、榜嘎25-75重量份、藏木香50-150重量份、诃子50-150重量份、熊胆1-3重量份、胡椒15-45重量份、喜马拉雅紫茉莉40-120重量份、余甘子40-120重量份、花蛇肉(去毒)20-60重量份、山柰25-75重量份、火硝20-45重量份、 降香40-100重量份、沙棘膏50-150重量份、沉香25-75重量份、朱砂10-30重量份、肉豆蘧 10-30重量份、枸杞25-75重量份、紫草茸25-75重量份、芫荽果25-75重量份的二十五味鬼臼丸及其制剂的质量检测方法，该方法包括如下含量測定方法中的ー种或几种
A.鬼臼的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比 35 45 65 55的甲醇-水为流动相；检测波长为280_300nm ;理论板数按鬼曰毒素计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取鬼臼毒素对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液， 即得；供试品溶液的制备取药物组合物二十五味鬼白丸或制剂，研碎后取粉末lg，精密称定，加入甲醇25ml，称定重量，功率250W，频率33kHz的超声处理I小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。本品鬼臼含量以鬼臼毒素计不得过O. 5mg/g0B.朱砂的含量测定取药物组合物二十五味鬼白丸或制剂，研碎后取粉末2g，精密称定，置250ml凯式烧瓶中，加98%浓硫酸30ml与硝酸钾3g，使凯式烧瓶成45°角，瓶口放置一玻璃漏斗，加热2-6小时，使成近无色，内有白色不溶物时,放冷,加水50ml，并加质量体积份数比为1% 高锰酸钾溶液至显粉红色，再滴加质量体积份数比为2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml，用O. Olmol/L硫氰酸铵滴定液滴定；每Iml的O. Olmol/L硫氰酸铵滴定液相当于O. 63 Img的硫化萊。本品朱砂含量以硫化萊计应为12. 86mg/g 16. 08mg/g。所述的制剂是指取药物组合物二十五味鬼白丸原料药，按常规工艺，加入常规辅料制备成临床可接受的任何一种剂型，包括微丸、滴丸、片剂、胶囊、颗粒、饮片或分散片。优选的，一种原料药组成为鬼白100重量份、藏茜草50重量份、石榴子70重量份、 藏紫草80重量份、肉桂40重量份、矮紫堇70重量份、巴夏嘎60重量份、光明盐20重量份、 硇砂20重量份、榜嘎50重量份、藏木香100重量份、诃子100重量份、熊胆2重量份、胡椒 30重量份、喜马拉雅紫茉莉80重量份、余甘子80重量份、花蛇肉(去毒)40重量份、山柰 50重量份、火硝35重量份、降香75重量份、沙棘膏100重量份、沉香50重量份、朱砂20重量份、肉豆蘧20重量份、枸杞50重量份、紫草茸50重量份、芫荽果50重量份的药物组合物二十五味鬼白丸及其制剂的质量检测方法，该方法包括如下含量测定方法中的一种或几种A.鬼臼的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比40 60的甲醇-水为流动相；检测波长为290nm;理论板数按鬼臼毒素计算应不低于 2000 ；对照品溶液的制备取鬼臼毒素对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液， 即得；供试品溶液的制备取药物组合物二十五味鬼白丸，研碎后取粉末lg，精密称定，加入甲醇25ml，称定重量，功率250W，频率33kHz的超声处理I小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；測定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10 yl，注入液相色谱仪，測定，即得。本品鬼臼含量以鬼臼毒素计不得过0. 5mg/g0B.朱砂的含量测定取药物组合物二十五味鬼白丸粉末2g，置250ml凯式烧瓶中，加98%浓硫酸30ml 与硝酸钾3g，使凯式烧瓶成45°角，瓶ロ放置一玻璃漏斗，加热4小吋，使成近无色，内有白色不溶物吋，放冷，加水50ml，并加质量体积份数比为I %高锰酸钾溶液至显粉红色，再滴加质量体积份数比为2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml，用0. Olmol/ L硫氰酸铵滴定液滴定；姆Iml的0. 01mol/L硫氰酸铵滴定液相当于0. 631mg的硫化萊。本品朱砂含量以硫化萊计应为12. 86mg/g 16. 08mg/g。本说明书中所述的重量份与体积份的单位对应关系为g/ml或kg/1。本发明第一次对药物组合物二十五味鬼白丸的毒性进行了检测并进行了控制。使用了专属性较强的高效液相色谱法(HPLC法)对鬼白毒素进行了检测，使用操作简便、准确的滴定法对朱砂中硫化汞进行了含量检测，既保证了药效又保证不至于食用过多造成的汞中毒。同时检测药物组合物二十五味鬼白丸中鬼白和朱砂2味有毒药材的含量，使该制剂的安全性得到了较大的提升，进ー步确保了产品质量安全、均一、稳定、质量可控。同时本法还可用于二十五味鬼白的其他制剂，如二十五味鬼白胶囊、二十五味鬼白散等。下述实验例和实施例用于进ー步说明但不限于本发明。实验例I :鬼臼的含量测定实验I.仪器、试药和供试样品仪器高效液相色谱仪日立L-2100泵，日立检测器L-2400检测器；岛津AuW220D
电子天平。对照品鬼臼毒素对照品(中国药品生物制品检定所)，批号111645_200301。样品二十五味鬼臼丸(青海金诃藏药药业股份有限公司提供)，Ig/丸，批号 20090501、20090502、20090503。2.检测波长的选择取鬼臼毒素对照品，于190_400nm波长范围内进行扫描，根据紫外吸收图谱，选定 290nm为检测波长。3.流动相选择选择毒性较小且简便的甲醇-水体系为流动相。分别考察了甲醇-水不同体积比例为流动相时的分离效果，体积份数比35 45 65 55甲醇-水为流动相时可达到较好分离效果，且甲醇-水体积份数比为40 60时，鬼白毒素主峰保留时间为43min，分离效
果最好。4.系统适用性试验在上述色谱条件下，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10 yl，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，供试品色谱中鬼白毒素与其相邻色谱峰的分离度均大于I. 5。 见附图
I、图2。
5.对照品制备取鬼臼毒素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含5μ g的溶液，即得。6.供试品制备6. I提取方法选择取本品，研细，取约lg，精密称定，精密加入甲醇25ml，称定重量，分别超声、回流I 小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。见表I.表I提取方法考察试验结果
权利要求
1.一种原料药组成为鬼白50-150重量份、藏茜草25-75重量份、石榴子35-100重量份、藏紫草40-120重量份、肉桂20-60重量份、矮紫堇35-100重量份、巴夏嘎30-90重量份、光明盐10-30重量份、硇砂10-30重量份、榜嘎25-75重量份、藏木香50-150重量份、诃子50-150重量份、熊胆1-3重量份、胡椒15-45重量份、喜马拉雅紫茉莉40-120重量份、余甘子40-120重量份、花蛇肉(去毒)20-60重量份、山柰25-75重量份、火硝20-45重量份、 降香40-100重量份、沙棘膏50-150重量份、沉香25-75重量份、朱砂10-30重量份、肉豆蘧 10-30重量份、枸杞25-75重量份、紫草茸25-75重量份、芫荽果25-75重量份的二十五味鬼臼丸及其制剂的质量检测方法，该方法包括如下含量测定方法中的一种或几种A.鬼臼的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比35 45 65 55的甲醇-水为流动相；检测波长为280-300nm;理论板数按鬼臼毒素计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取鬼臼毒素对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，即得;供试品溶液的制备取药物组合物二十五味鬼白丸或制剂，研碎后取粉末lg，精密称定，加入甲醇25ml，称定重量，功率250W，频率33kHz的超声处理I小时，放冷，再称定重量， 用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品含鬼臼以鬼臼毒素计不得过O. 5mg/g ；B.朱砂的含量测定取药物组合物二十五味鬼白丸或制剂，研碎后取粉末2g，精密称定，置250ml凯式烧瓶中，加98%浓硫酸30ml与硝酸钾3g，使凯式烧瓶成45°角，瓶口放置一玻璃漏斗，加热2_6 小时，使成近无色，内有白色不溶物时，放冷，加水50ml，并加质量体积份数比为1%高锰酸钾溶液至显粉红色，再滴加质量体积份数比为2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml,用O. 01mol/L硫氰酸铵滴定液滴定；每Iml的O. 01mol/L硫氰酸铵滴定液相当于O. 63 Img的硫化萊；本品含朱砂以硫化萊计应为12. 86mg/g 16. 08mg/g。
2.如权利要求I所述的一种药物组合物二十五味鬼白丸及其制剂的质量检测方法，其特征在于所述的制剂是指取药物组合物二十五味鬼白丸原料药，按常规工艺，加入常规辅料制备成临床可接受的任何一种剂型，包括微丸、滴丸、丸剂、散剂、片剂、胶囊、颗粒。
3.如权利要求I或2所述的一种原料药组成为鬼白100重量份、藏茜草50重量份、石榴子70重量份、藏紫草80重量份、肉桂40重量份、矮紫堇70重量份、巴夏嘎60重量份、光明盐20重量份、硇砂20重量份、榜嘎50重量份、藏木香100重量份、诃子100重量份、熊胆 2重量份、胡椒30重量份、喜马拉雅紫茉莉80重量份、余甘子80重量份、花蛇肉(去毒)40 重量份、山柰50重量份、火硝35重量份、降香75重量份、沙棘膏100重量份、沉香50重量份、朱砂20重量份、肉豆蘧20重量份、枸杞50重量份、紫草茸50重量份、芫荽果50重量份的药物组合物二十五味鬼白丸及其制剂的质量检测方法，其特征在于，该方法包括如下含量测定方法中的一种或几种A.鬼臼的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比 40 60的甲醇-水为流动相；检测波长为290nm;理论板数按胡鬼臼毒素计算应不低于 2000 ；对照品溶液的制备取鬼臼毒素对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，即得;供试品溶液的制备取药物组合物二十五味鬼白丸，研碎后取粉末lg，精密称定，加入甲醇25ml，称定重量，功率250W，频率33kHz的超声处理I小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各IOy 1，注入液相色谱仪，测定，即得； 本品鬼臼含量以鬼臼毒素计不得过O. 5mg/g ；B.朱砂的含量测定取药物组合物二十五味鬼白丸粉末2g，置250ml凯式烧瓶中，加98%浓硫酸30ml与硝酸钾3g，使凯式烧瓶成45°角，瓶口放置一玻璃漏斗，加热4小时，使成近无色，内有白色不溶物时，放冷，加水50ml，并加质量体积分数比为I %高锰酸钾溶液至显粉红色，再滴加质量体积份数比为2%硫酸亚铁溶液至红色消失后，加硫酸铁铵指示液2ml，用O. Olmol/L硫氰酸铵滴定液滴定；每Iml的O. 01mol/L硫氰酸铵滴定液相当于0. 631mg的硫化萊；本品朱砂含量以硫化萊计应为12. 86mg/g 16. 08mg/g。
全文摘要
本发明涉及一种药物组合物二十五味鬼臼丸及其制剂的质量检测方法，属于医药技术领域。本发明第一次对药物组合物二十五味鬼臼丸的鬼臼和朱砂2种毒性药材进行了检测。使用了专属性较强的高效液相色谱法(HPLC法)对鬼臼中的鬼臼毒素进行了检测，使用了操作简便、准确的滴定法对朱砂中硫化汞进行了含量检测，既保证了药效又保证不至于食用过多造成的汞中毒。同时检测药物组合物二十五味鬼臼丸中鬼臼和朱砂2味有毒药材的含量，使该制剂的安全性得到了较大的提升，进一步确保了产品质量安全、有效、质量可控。
文档编号G01N31/16GK102590426SQ20121008790
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月29日 优先权日2012年3月29日
发明者张义智, 李怀平, 王振, 邵成雷, 郑亭亭 申请人:山东阿如拉药物研究开发有限公司