专利名称：银菊散结颗粒剂制备方法及质量标准检测方法
技术领域：
本发明涉及药品制备方法及质量标准检测方法，特别涉及银菊散结颗粒剂制备方法及质量标准检测方法，属医药领域。
背景技术：
桥本氏病(HT)又名桥本氏甲状腺炎，也称为慢性淋巴细胞性甲状腺炎，甲状腺炎。 1912年由桥本首先报告，有报道年发病率为O. 15%，且近几年本病的发病率呈逐渐上升的趋势，约占甲状腺疾病的7. 3% 一 20. 5%。尸解报告2%的女性有本病的组织特征。其临床表现为甲状腺肿大，部分患者伴见甲状腺功能异常，尤以原发性甲减多见。西医对HT的治疗，甲状腺激素替代治疗是终身的，一旦中断，甲减会在一定时间后重现，甚至加重。免疫疗法是近年研究的热点，短期使皮质激素，也可采用雷公藤或其它免疫抑制剂疗，但大量临床资料表明对自身免疫性反应本身不具显的免疫调节作用，更多患者在甲状腺功能纠正后长时间抗体滴度不能恢复正常，高滴度甲状腺自身抗体不降， 复发率高。更由于全身免疫抑制剂的严重副作用，使人有所顾虑。而对于手术治疗，尽管有人认为，在HT基础上发生甲状腺恶性肿瘤的可能极大，主张对明确诊断者，尤其是细针穿刺细胞学检查发现异常细胞及放射性核素检查表现为冷结节的HT患者，应该及时手术。但大多数内分泌学专家认为，HT—般不宜手术治疗，只有在患者出现明显压迫症状或考虑恶变可能时才考虑手术治疗。因此，对于如何正确、有效、安全地治疗HT，西医目前遇到了不小的困惑。中医对HT的治疗确实取得了一些成就，但也存在很多问题。比如，辨证论治是中医的精华，但证型的不一致，处方的多样性同时却给中医学的发展、治疗的一体化带来了相当的困难。发明专利《一种消瘿化结药物》(专利号941105261)公开了一种治疗甲状腺肿瘤疾病的药物，原料百分比组成是金银花20-55、菊花10-20、桔梗8-18、麦冬15-32、玄参 8-15、夏枯草4-7。甲状腺肿瘤属应属中医“瘿病”的范畴，中医瘿病包括颈前结块肿大为特征的病证。明代薛己将其分为气瘿、血瘿、肉瘿、石瘿与筋瘿五类，就包括了现代医学的地方性甲状腺肿、单纯性甲状腺肿、甲状腺肿瘤、甲状腺炎、甲状腺功能异常、甲状腺发育异常等疾病。因此桥本氏病不同于瘿病，也不同于甲状腺肿瘤。桥本氏病是以甲状腺组织中大量淋巴细胞浸润和血清中出现大量抗甲状腺抗体为主要病理特征的自身免疫性疾病。所以发明专利941105261，不是针对桥本氏病的治疗。《标记免疫分析与临床》杂志，2009年10月第16卷第5期第313页，刘爱武报道了 《消瘿化结汤治疗230例桥本氏病患者的临床疗效分析》，处方主要由金银花、菊花、桔梗、夏枯草、玄参等组成，但处方中没有麦冬，对桥本氏病的心脏症状效果较差，另外，该报道没有公开处方量，本领域技术人员无法实施。发明专利《一种治疗桥本氏病的药物组合物》(专利号)由下列重量份的原料药组成金银花9-30g、菊花3-9g、桔梗3-9g、夏枯草3-6g、麦冬6_30g、玄参3_6g。由于原料药组成中有金银花、菊花等药物，本发明制成颗粒剂，故本发明叫“银菊散结颗粒剂”。
现有技术还没有“银菊散结颗粒剂”的制备方法及质量标准检测方法，无法在生产和使用中有效的保证产品质量，进而药品疗效得不到保证。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种治疗桥本氏病的“银菊散结颗粒剂”的制备方法。该方法工艺简单合理，能较多的保留药物有效成分，生产成本低。本发明另一个目的是提供一种“银菊散结颗粒剂”的质量标准检测方法，使“银菊散结颗粒剂”在生产和使用中有效的保证产品质量，进而保证药品疗效。本发明目的一种治疗桥本氏病的“银菊散结颗粒剂”的制备方法是这样实现的 本发明的药物重量配比为金银花9-30g、菊花3-9g、桔梗3-9g、夏枯草3-6g、麦冬
6_30g、玄参 3-6g。本发明的药物重量配比优选为金银花12_24g、菊花3_6g、桔梗3_6g、夏枯草
I.5-3g、麦冬 9-18g、玄参 I. 5-3g。本发明“银菊散结颗粒剂”通过如下方法步骤制备
按重量配比称取金银花、菊花、桔梗、夏枯草、麦冬、玄参；加水提取两次，第一次加 8-12倍量水提取1-2小时，第二次加6-8倍量水提取I小时，合并药液，滤过，滤液浓缩至相对密度为I. 10 I. 15 (60°C)，加乙醇使含醇量达到70%，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为I. 15 I. 20 (60°C)的清膏，加入糊精适量，制成颗粒，即得;
以上的药物重量配比为成人一天的服用剂量，在生产时可按照相应的比例增大或减少，如大规模生产可以以千克或以吨为单位，重量可以增大或减少，但各组份之间的生药重量配比比例不变。本发明功能主治为清热养阴、散结消瘿。单用本发明治疗桥本氏病对于改善患者临床症状和抗体转阴，显示出较好的效果。。本发明另一个目的是提供一种“银菊散结颗粒剂”的质量标准检测方法，是这样实现的
处方金银花600g、菊花100g、桔梗100g、夏枯草50g、麦冬300g、玄参50g ；
制法以上六味，加水提取两次，第一次加12倍量水提取I. 5小时，第二次加10倍量水提取I小时，合并药液，滤过，滤液浓缩至相对密度为I. 10 I. 15(60°C)，加乙醇使含醇量达到70%，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为I. 15 I. 20(60°C) 的清膏，加入糊精适量，制成颗粒，共制成lOOOg，分装成每袋装10g，即得；
性状本品为黄色至棕色颗粒；味苦；
鉴别(I)取银菊散结颗粒剂20g，加水50ml，超声处理30分钟使溶解，用稀盐酸调节 PH值至2 3，离心，取上清液用乙醚振摇提取3次，每次25ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加无水乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取夏枯草对照药材0. 5g，加水25ml，煎煮30 分钟，放冷，滤过，自“用稀盐酸调节PH值”起，同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010 年版一部附录VI B,薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液10 μ 1，供试品溶液10 20 μ I分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇冰醋酸水=7 2 0.5 0.4的溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取银菊散结颗粒剂lg，加甲醇10 ml,超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照品溶液各2 5μ 1， 分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(3)取银菊散结颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml洗涤I次，弃去氨液，继用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，弃去水液，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取玄参对照药材2g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=5 1 0. I的溶液为展开剂， 预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸试液，105°C加热至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点；
检查应符合《中国药典》2010年版一部附录I C颗粒剂项下有关的各项规定；
金银花含量测定照中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填冲剂；乙腈O. 4%磷酸 =12 88的溶剂为流动相，检测波长为327nm处，理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每 Iml含60 μ g溶液；
供试品溶液制备取银菊散结颗粒剂，研细，取约O. 5g，精密称定，置50ml棕色量瓶中， 加50%甲醇40ml，超声处理30分钟，放冷，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每袋含金银花以绿原酸计，不得少于35mg ；
功能主治清热养阴、散结消肿。用于治疗桥本氏甲状腺炎；
用法用量口服，一日I 2次，一次I 2袋。本发明上述的一种“银菊散结颗粒剂”的质量标准检测方法，是用薄层色谱法鉴别银菊散结颗粒剂中的夏枯草或金银花和菊花或玄参。本发明上述的一种“银菊散结颗粒剂”的质量标准检测方法，银菊散结颗粒剂中夏枯草的鉴别是取银菊散结颗粒剂20g，加水50ml，超声处理30分钟使溶解，用稀盐酸调节PH值至2 3，离心，取上清液用乙醚振摇提取3次，每次25ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加无水乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取夏枯草对照药材O. 5g，加水25ml，煎煮30 分钟，放冷，滤过，自“用稀盐酸调节PH值”起，同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010 年版一部附录VI B,薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液10 μ 1，供试品溶液10 20 μ I分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇冰醋酸水=7 2 0.5 0.4的溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明上述的一种“银菊散结颗粒剂”的质量标准检测方法，银菊散结颗粒剂中金银花和菊花的鉴别是取银菊散结颗粒剂lg，加甲醇10 ml,超声处理20分钟，滤过， 滤液作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照品溶液各2 5μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干， 置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的突光斑点。本发明上述的一种“银菊散结颗粒剂”的质量标准检测方法，银菊散结颗粒剂中玄参的鉴别是取银菊散结颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残洛加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml洗涤I次，弃去氨液，继用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml,弃去水液，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取玄参对照药材2g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=5 1 0. I的溶液为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸试液，105°C加热至斑点清晰； 供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明上述的一种“银菊散结颗粒剂”的质量标准检测方法，银菊散结颗粒剂中金银花的含量测定是照中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填冲剂；乙腈O. 4%磷酸 =12 88的溶剂为流动相，检测波长为327nm处，理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每 Iml含60 μ g溶液；
供试品溶液制备取银菊散结颗粒剂，研细，取约O. 5g，精密称定，置50ml棕色量瓶中， 加50%甲醇40ml，超声处理30分钟，放冷，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每袋含金银花以绿原酸计，不得少于35mg。上述的“银菊散结颗粒剂”的制备方法，工艺简单合理，能较多的保留药物有效成分，生产成本低。质量标准检测方法，使“银菊散结颗粒剂”在生产和使用中有效的保证产品质量，进而保证药品疗效。本发明上述的“银菊散结颗粒剂”颗粒剂的质量标准检测方法，在处方不变，提取工艺条件又能保证其药物治疗肺结核的基本物质不变的情况下，本发明“银菊散结颗粒剂” 的质量标准检测方法用于其它剂型的检验同样适用。如改为片剂，性状项改为本品为浅棕至深棕红色的片，检查项改为应符合《中国药典》2005年版一部片剂(附录I D)项下有关的各项规定。其它质量标准检测方法不变。如改为胶囊剂，性状改为本品内容物为浅棕至深棕红色的颗粒和粉末，检查项改为应符合《中国药典》2005年版一部胶囊(附录I G)项下有关的各项规定，其它质量标准检测方法改为取本品内容物即可。为了更好的理解本发明，以下通过试验例进一步阐述本发明的有益效果。下面试验旨在进一步说明本发明的作用，而非本发明的限制。试验例一、本发明“银菊散结颗粒剂”工艺验证中试放大12倍处方量生产3批样品试验结果
水提液浓缩液，出膏率分别为50. 5%,49. 8%、51%，绿原酸提取率58%、58%、57% ;加乙醇至含醇量70%醇沉24小时，吸取上清液，减压回收乙醇浓缩至相对密度为1. 20(60°C )清膏， 出膏率22. 8%,22. 1%、22· 5%，绿原酸提取率分别为41%、42%、41% ;加入糊精分别为8. I kg、 8.1 kg、8. lkg，制成颗粒分别为11. 7 kgU1.8 kg、11. 8kg，应出颗粒12kg，平均收率98%，绿原酸提取率分别为37%、36%、36%。制剂成型试验辅料与药粉比例为2 :1制得的颗粒较好。在放大生产试验中以糊精作辅料，糊精与药粉比例为2:1。结果表明按照中试设备生产量连续生产3批样品，进一步验证各相关数据。结果证实工艺可行，按《中国药典》2005年版颗粒剂项下有关规定及所定质量标准检验均符合规定。同时验证了本质量标准合理可行，该工艺条件适于工业化生产。工业生产规模试验水提液浓缩至相对密度I. 12 (600C )得110kg，出膏率50%，绿原酸提取率57% ;加乙醇至含醇量70%醇沉24小时，吸取上清液，减压回收乙醇浓缩至相对密度为I. 20 (60°C)得42kg清膏，出膏率21. 8%，绿原酸提取率42% ;加入糊精41kg，制成颗粒61kg，应出颗粒64kg，收率95%，绿原酸提取率37%。试验结果表明，该工艺条件可以用于工业化生产。试验例二、本发明“银菊散结颗粒剂”质量标准测定方法研究 (I)夏枯草的薄层鉴别试验
供试品溶液制备方法取银菊散结颗粒剂20g相当于I. 5g夏枯草药材量，加水50ml， 超声处理30分钟使溶解，用稀盐酸调节PH值至2 3，离心，取上清液用乙醚振摇提取3 次，每次25ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加无水乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液。阴性样品溶液制备取不含夏枯草的其他药材制备阴性样品同法制成夏枯草阴性对照溶液。对照品溶液制备取夏枯草对照药材O. 5g,加水25ml,煎煮30分钟,放冷,滤过，自 “用稀盐酸调节PH值”起，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取对照药材溶液 10 μ 1，供试品溶液10 20 μ I分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷一甲醇一冰醋酸一水(7 : 2 : 0.5 : 0.4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品与对照药材色谱主斑点相应的位置上，无相同颜色的斑点，故该方法可用于夏枯草鉴别。(2)金银花和菊花的薄层鉴别试验
供试品溶液制备方法取银菊散结颗粒剂Ig,相当于金银花O. 6g、菊花O. 15g药材量，研细，加甲醇10 ml,超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。阴性样品溶液制备取不含金银花、菊花的其他药材制备阴性样品同法制成金银花、菊花阴性对照溶液。对照品溶液制备取绿原酸对照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作为对照品溶液，
照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B，同现行2010年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液与对照品溶液各2 5μ1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性样品与对照品溶液色谱主斑点相应的位置上，无相同颜色的斑点，故该方法可用于金银花和菊花的鉴别。(3)玄参的鉴别
供试品溶液制备方法取银菊散结颗粒剂20g，相当于I. 5g玄参药材量，加甲醇50ml， 超声处理30分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱(100 200目，5g,内径I I. 5cm)上， 用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取4 次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml洗涤I次，弃去氨液，继用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，弃去水液，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。阴性样品溶液制备取不含玄参的其他药材制备阴性样品同法制成玄参阴性对照溶液。对照品溶液制备取玄参对照药材2g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B,同现行2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水 (5 1 0. I)为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸试液，105°C加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品与对照药材色谱主斑点相应的位置上，无相同颜色的斑点，故该方法可用于夏枯草鉴别。检查应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录I C，同 2010年版一部附录1C)。试验如下。I. I砷盐检查取银菊散结颗粒剂研细，称取lg，精密称定，加氢氧化钙Ig,混合，加少量水，搅匀，干燥后先用小火烧灼使炭化，再在500 600°C炽灼使完全灰化，放冷，加水4ml，使溶解，再加盐酸5ml与水适量使成28ml，作为供试品溶液。依法检查，不得过百万分之二。I. 2重金属检查取银菊散结颗粒剂研细，称取lg，精密称定，置已炽灼至恒重的坩埚中，缓缓炽灼至完全炭化，放冷至室温，加硫酸Iml使湿润，低温加热至硫酸除尽后， 加硝酸O. 5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在500-60(TC炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液 (PH3. 5) 2ml，微热溶解后，移至纳氏比色管中，加水稀释成25ml (乙管);另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液(PH3. 5) 2ml，加水稀释成15ml，微热溶解后， 移至纳氏比色管中，用移液管加标准铅溶液1ml，再加水稀释成25ml (甲管)，依法检查不得过百万分之十。3批样品重金属、砷盐试验结果如下。表I 3批样品重金属、砷盐试验结果
权利要求
1.一种治疗桥本氏病的银菊散结颗粒剂的制备方法，其特征在于药物重量配比为金银花9-30g、菊花3-9g、桔梗3-9g、夏枯草3-6g、麦冬6_30g、玄参3_6g ；通过如下方法步骤制备按重量配比称取金银花、菊花、桔梗、夏枯草、麦冬、玄参；加水提取两次，第一次加8-12倍量水提取1-2小时，第二次加6-8倍量水提取I小时，合并药液，滤过，滤液浓缩至相对密度为I. 10 I. 15 (60°C)，加乙醇使含醇量达到70%，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为I. 15 I. 20 (60°C)的清膏，加入糊精适量，制成颗粒，即得。
2.一种疗桥本氏病的银菊散结颗粒剂的质量标准检测方法，其特征在于处方金银花600g、菊花100g、桔梗100g、夏枯草50g、麦冬300g、玄参50g ；制法以上六味，加水提取两次，第一次加12倍量水提取I. 5小时，第二次加10倍量水提取I小时，合并药液，滤过，滤液浓缩至相对密度为I. 10 I. 15(60°C)，加乙醇使含醇量达到70%，搅匀，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为I. 15 I. 20(60°C ) 的清膏，加入糊精适量，制成颗粒，共制成lOOOg，分装成每袋装10g，即得；性状本品为黄色至棕色颗粒；味苦；鉴别(1)取银菊散结颗粒剂20g，加水50ml，超声处理30分钟使溶解，用稀盐酸调节 PH值至2 3，离心，取上清液用乙醚振摇提取3次，每次25ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加无水乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取夏枯草对照药材0. 5g，加水25ml，煎煮30 分钟，放冷，滤过，自“用稀盐酸调节PH值”起，同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010 年版一部附录VI B,薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液10 μ 1，供试品溶液10 20 μ I分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇冰醋酸水=7 2 0.5 0.4的溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点；.(2)取银菊散结颗粒剂lg，加甲醇10 ml,超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加甲醇制成每Iml含0. Img的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照品溶液各2 5μ 1， 分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；.(3)取银菊散结颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml洗涤I次，弃去氨液，继用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，弃去水液，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取玄参对照药材2g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各 10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=5 1 0. I的溶液为展开剂， 预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸试液，105°C加热至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查应符合《中国药典》2010年版一部附录I C颗粒剂项下有关的各项规定；金银花含量测定照中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填冲剂；乙腈0.4%磷酸=12 88的溶剂为流动相，检测波长为327nm处，理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每 Iml含60 μ g溶液；供试品溶液制备取银菊散结颗粒剂，研细，取约O. 5g，精密称定，置50ml棕色量瓶中， 加50%甲醇40ml，超声处理30分钟，放冷，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每袋含金银花以绿原酸计，不得少于35mg ；功能主治清热养阴、散结消肿；用于治疗桥本氏甲状腺炎；用法用量口服，一日 I 2次，一次I 2袋。
3.根据权利要求2所述的一种疗桥本氏病的银菊散结颗粒剂的质量标准检测方法，其特征在于用薄层色谱法鉴别银菊散结颗粒剂中的夏枯草或金银花和菊花或玄参。
4.根据权利要求2所述的一种疗桥本氏病的银菊散结颗粒剂的质量标准检测方法，其特征在于夏枯草的鉴别是取银菊散结颗粒剂20g，加水50ml，超声处理30分钟使溶解， 用稀盐酸调节PH值至2 3，离心，取上清液用乙醚振摇提取3次，每次25ml，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加无水乙醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取夏枯草对照药材O. 5g， 加水25ml，煎煮30分钟，放冷，滤过，自“用稀盐酸调节PH值”起，同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VI B,薄层色谱法试验，吸取对照药材溶液10 μ 1， 供试品溶液10 20μ I分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇冰醋酸水 =7 2 O. 5 O. 4的溶剂为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑
5.根据权利要求2所述的一种疗桥本氏病的银菊散结颗粒剂的质量标准检测方法，其特征在于金银花和菊花的鉴别是取银菊散结颗粒剂lg，加甲醇10 ml,超声处理20分钟， 滤过，滤液作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品溶液与对照品溶液各2 5μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出， 晾干，置波长为365nm的紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光斑点。
6.根据权利要求2所述的一种疗桥本氏病的银菊散结颗粒剂的质量标准检测方法，其特征在于玄参的鉴别是取银菊散结颗粒剂20g，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加于中性氧化铝柱上，用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液30ml洗涤I次，弃去氨液， 继用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次20ml，弃去水液，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇 2ml使溶解，作为供试品溶液；另取玄参对照药材2g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过， 滤液同法制成对照药材溶液；照《中国药典》2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=5 1 0. I 的溶液为展开剂，预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸试液，105°C加热至斑点清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱主斑点相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.根据权利要求2所述的一种疗桥本氏病的银菊散结颗粒剂的质量标准检测方法，其特征在于金银花的含量测定是照中国药典》2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填冲剂；乙腈O. 4%磷酸 =12 88的溶剂为流动相，检测波长为327nm处，理论板数按绿原酸峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每 Iml含60 μ g溶液；供试品溶液制备取银菊散结颗粒剂，研细，取约O. 5g，精密称定，置50ml棕色量瓶中， 加50%甲醇40ml，超声处理30分钟，放冷，用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每袋含金银花以绿原酸计，不得少于35mg。
全文摘要
本发明公开了一种治疗桥本氏病的“银菊散结颗粒剂”的制备方法，按重量配比称取金银花、菊花、桔梗、夏枯草、麦冬、玄参，加水提取两次，合并药液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15(60℃)，加乙醇沉淀，浓缩，加入糊精制成颗粒，工艺简单合理，能较多的保留药物有效成分，生产成本低；本发明质量标准检测方法，是用薄层色谱法鉴别银菊散结颗粒剂中的夏枯草或金银花和菊花或玄参。用高效液相色谱法测定金银花含量；使“银菊散结颗粒剂”在生产和使用中有效的保证产品质量，进而保证药品疗效。
文档编号G01N30/02GK102600354SQ20121009888
公开日2012年7月25日 申请日期2012年4月6日 优先权日2012年4月6日
发明者冯立娟, 张为胜, 张晶, 张梅雪, 李诗标 申请人:济南康众医药科技开发有限公司