专利名称：顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法
技术领域：
本发明属于生物原料检测技术领域，特别是涉及一种顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法。
背景技术：
药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生广中，以及在制剂制备过程中未能完全除去的有机溶剂。有机溶剂对人体有害，故在《中华人民共和国药典》2010年版、二部附
录Λ Π P对其限度有一定的要求，但未对测定方法做具体规定。 在《抗生素》1980年03期沈蕴青《盐酸四环素原料药残留溶媒限度检查测定方法-气相色谱法》一文中提到以气相色谱对盐酸四环素中残留有机溶剂丙酮、丁醇进行了检测，该方法采用直接进样法，即将盐酸四环素配制成一定浓度的溶液，吸取该溶液注入气相色谱系统，盐酸四环素和残留有机溶剂丙酮、丁醇一同被注入气相色谱系统，由于盐酸四环素在气相色谱仪进样口产生分解，一方面会污染色谱柱，造成色谱柱分离效果下降，降低柱寿命，另一方面，这些分解物中的部分物质被检测器检测到，对丙酮、丁醇的分析造成干扰。
发明内容
本发明的目的就在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种避免色谱柱污染，保证色谱柱的分离效果，延长色谱柱寿命，无干扰，检测效果准确性高的顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法。为实现上述发明目的所采取的技术方案为
一种顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法，其特征是将盐酸四环素配制成溶液后放置在顶空瓶中，加热使挥发性有机溶剂从溶液中挥发出来，达到平衡后，取顶空瓶内上部气体注入到气相色谱仪中进行分离测定。上述溶液在顶空瓶中的加热温度为75°C 85°C ;加热时间25min 30min，定量环温度105°C 110°C，传输管温度120°C 125°C ;定量环体积1ml。上述气相色谱仪的色谱条件为
色谱柱聚乙二醇开口毛细管柱；柱温120 130 °C;载气氮气；流速3 ml/min ;进样口温度:200°C;检测器=FID ;检测器温度:250 °C ;氢气流量30 ml/ min ;空气流量:400ml/ min。本发明的方法与沈蕴青《盐酸四环素原料药残留溶媒限度检查测定方法-气相色谱法》提到的溶液直接进样法相比较，具有以下优点①因为是取顶空瓶上部的气相注入气相色谱仪分析，不会因盐酸四环素及其分解物对色谱柱造成污染，可以延长色谱柱寿命一倍以上；②溶液直接进样法，因为盐酸四环素被注入气相色谱系统，经高温加热分解，再被检测到，分解物的峰有时会与残留溶剂丙酮或丁醇峰重叠，检测造成干扰，影响检测结果。而本发明采用顶空气相色谱法，盐酸四环素分解物不会进入到气相色谱系统中，不会对盐酸四环素残留溶剂的检测带来干扰，检测结果准确。③溶液直接进样法一般进样体积约为2uL,进样体积小，当残留物少到几十ppm时，因受干扰，无法检出，或重现性差。而本发明采用顶空气相色谱法，进样体积为1ml。因进样体积大，使残留溶剂被检测出的能力大大提高；同时因进样体积大，残留溶剂在气相色谱系统的响应值也提高，检测结果的重现性也提高。综上所述，本发明顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法可避免气相色谱柱前端进样口残留固体盐酸四环素，不会对色谱柱造成污染，从而延长色谱柱寿命，而且干扰因素较少，测定结果准确，由于进样量大，检出限高。
具体实施例方式I色谱条件
色谱柱聚乙二醇开口毛细管柱；柱温120 130°C ;载气氮气；流速3 ml/min ;进样口温度2000C ;检测器=FID ;检测器温度2500C ;氢气流量30 ml/ min ;空气流量:400ml/ min。2顶空条件
顶空瓶加热温度为75°C 85°C;加热时间25min 30min，定量环温度105°C 110°C，传输管温度120°C 125°C ;定量环体积1ml。3溶液制备
(I)正丁醇贮备液精密吸取正丁醇lml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，使完全溶解并用水稀释至刻度，摇匀。(2)丙酮贮备液精密吸取丙酮1ml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，使完全溶解并用水稀释至刻度，摇匀。(3)戊醇贮备液精密吸取戊醇lml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。(4)内标溶液精密吸取戊醇贮备液2ml，置IOml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。(5)对照溶液精密吸取上述正丁醇、丙酮、戊醇贮备液各2 ml置10 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。(6)供试品溶液精密称取盐酸四环素约0.3 0.58置20 ml顶空瓶中，加内标溶液2ml溶解，摇匀。4结果计算取对照溶液和供试品溶液分别测定，按内标法进行结果计算。实施例I、
I色谱条件
色谱柱聚乙二醇开口毛细管柱；柱温125°c ;载气氮气；流速3 ml/min ;进样口温度2000C ;检测器=FID ;检测器温度2500C ;氢气流量30 ml/ min ;空气流量:400 ml/ min。2顶空条件
顶空瓶加热温度80°C ;顶空加热时间25min ;定量环温度105°C ;传输管温度125°C ；定量环体积1ml。3溶液制备(I)正丁醇贮备液精密吸取正丁醇lml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，使完全溶解并用 水稀释至刻度，摇匀。(2)丙酮贮备液精密吸取丙酮1ml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，使完全溶解并用水稀释至刻度，摇匀。(3)戊醇贮备液精密吸取戊醇lml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。(4)内标溶液精密吸取戊醇贮备液2ml，置IOml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。(5)对照溶液精密吸取上述正丁醇、丙酮、戊醇贮备液各2 ml置10 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。(6)供试品溶液精密称取盐酸四环素0.4025g置20 ml顶空瓶中，加内标溶液2ml溶解，摇匀。供试品批号120403-61，供试品来源宁夏启元药业有限公司 测定结果与计算
对照溶液色谱图中，丙酮峰面积为6473，丁醇峰面积为4958，戊醇峰面积为7135。供试品溶液色谱图中，丙酮未检出，丁醇峰面积为1809，戊醇峰面积为4889。丙酮残留量未检出
丁結味! 》曰 1809/4889 200 X X^. _ 。
丁醇残留里=-~———xlO = 2645ppm
4958/7135 0.4025实施例2
I色谱条件
色谱柱聚乙二醇开口毛细管柱；柱温125°C ;载气氮气；流速3 ml/min ;进样口温度2000C ;检测器=FID ;检测器温度2500C ;氢气流量30 ml/ min ;空气流量:400 ml/min。2顶空条件
顶空瓶加热温度80°C ;顶空加热时间25min ;定量环温度105°C ;传输管温度125°C ；定量环体积1ml。3溶液制备
(I)正丁醇贮备液精密吸取正丁醇lml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，使完全溶解并用水稀释至刻度，摇匀。(2)丙酮贮备液精密吸取丙酮1ml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，使完全溶解并用水稀释至刻度，摇匀。(3)戊醇贮备液精密吸取戊醇lml，置预先盛有少量水的200 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。(4)内标溶液精密吸取戊醇贮备液2ml，置IOml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。(5)对照溶液精密吸取上述正丁醇、丙酮、戊醇贮备液各2 ml置10 ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
(6)供试品溶液精密称取盐酸四环素O. 3218 g置20 ml顶空瓶中，加内标溶液2ml溶解，摇匀。供试品批号120405-61，供试品来源宁夏启元药业有限公司 测定结果与计算
对照溶液色谱图中，丙酮峰面积为6440，丁醇峰面积为4983，戊醇峰面积为7139。供试品溶液色谱图中，丙酮未检出，丁醇峰面积为573，戊醇峰面积为5456。丙酮残留量未检出
573 I 2
丁醇残留量=IPX^^-二xlO6 = 935界珊。
0.3213
7139
权利要求
1.一种顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法，其特征是将盐酸四环素配制成溶液后放置在顶空瓶中，加热使挥发性有机溶剂从溶液中挥发出来，达到平衡后，取顶空瓶内上部气体注入到气相色谱仪中进行分离测定。
2.按照权利要求I所述的顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法，其特征是上述溶液在顶空瓶中的加热温度为75°C 85°C;加热时间25min 30min，定量环温度105°C 110°C，传输管温度120°C 125°C ;定量环体积1ml。
3.按照权利要求I所述的顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法，其特征在于上述气相色谱仪的色谱条件为 色谱柱聚乙二醇开口毛细管柱；柱温120 130 °C;载气氮气；流速3 ml/min ;进样口温度2000C ;检测器=FID ;检测器温度:250 V ;氢气流量30 ml/ min ;空气流量:400ml/ min。
全文摘要
本发明涉及一种顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法，该方法是将盐酸四环素配制成溶液后放置在顶空瓶中，加热使挥发性有机溶剂从溶液中挥发出来，达到平衡后，取顶空瓶内上部气体注入到气相色谱仪中进行分离测定。本发明顶空气相色谱法测定盐酸四环素原料药中残留溶剂的方法可避免气相色谱柱前端进样口残留固体盐酸四环素，不会对色谱柱造成污染，从而延长色谱柱寿命，而且干扰因素较少，测定结果准确，由于进样量大，检出限高。
文档编号G01N30/14GK102636597SQ20121011726
公开日2012年8月15日 申请日期2012年4月20日 优先权日2012年4月20日
发明者李学兵, 邹学锋 申请人:宁夏启元药业有限公司