专利名称：一种测定烟叶中202种农药残留量的方法
技术领域：
本发明属于烟草中农药残留的理化检测技术领域，具体涉及一种测定烟叶中202种农药残留量的方法。
背景技术：
世界经济一体化步伐加快，各国均在确立食品安全战略地位，并在国际贸易中对农药残留限量高筑门槛。2003年C0RESTA农用化学品咨询委员会(ACAC)发布了农用化学品指导性残留限量的基本原则与实施意见，对99种农药残留提出了指导性限量(GRLs)，2008年增加到了 118种，最近将继续增加。为提高农药残留分析效率，传统的一种方法、一种残留的检测技术逐步被淘汰(特殊农药除外)，而以多种、多类农残的高通量残留分析技 术所取代，仪器分析也从单纯的气相色谱(GC)、液相色谱(LC)发展到气相(液相)色谱-质谱联用(GC-MS、LC-MS)及气相(液相)色谱-串联质谱联用(GC-MS/MS、LC-MS/MS)甚至全二维气相色谱-飞行时间质谱(GC X GC-T0F-MS)。美国和欧洲对于烟草中农药残留量测定的方法比较完备，方法分为单残留测定和同时多残留测定方法。我国对烟草中多种农药残留分析方法作了大量的研究，并在此基础上颁布了一系列农残检测方法标准，例如GB/T13595-2004、GB-T 13596-2004、YC/T 405. 2—2011、YC/T 405. 3— 2011。目前国内的单个标准只涵盖一类农药或者化学性质相近的农药，涵盖面较窄。对烟叶样品中农药残留量进行全面检测需要GC、GC/MS、LC和LC/MS四种仪器配合检测，且前处理过程复杂，需用多种固相萃取小柱进行净化，检测效率较低。由于烟草基质比较复杂，GC和LC受检测器的限制，在定性过程中容易产生假阳性结果，因此，发明一种快速高效的多农残检测方法是非常有必要的。
发明内容
本发明目的旨在克服现有技术缺陷，提供一种用配置有程序升温进样口的气相三重四级杆质谱测定烟叶中多种农药残留量的方法。本发明通过以下技术方案来实现的本发明的一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，烟末样品经有机溶液提取，QuEChERS试剂包净化，离心后用GC-MS/MS分析测定烟叶中的农药残留量。所述的一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，气相配置有程序升温进样口，质谱检测器为三重四级杆质谱。所述的一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，包括以下具体步骤
(1)制备烟叶样品烘干、粉碎，过筛，避光低温保存；
(2)提取称取烟末样品于具盖离心试管中，加水充分浸润，静置；移取乙腈和氯唑磷、灭蚁灵内标工作液到离心管中，漩涡振荡，加入QuEChERS试剂盒I和甲苯，振荡，离心；
(3)净化移取样品提取液上清液于离心管中，加入QuEChERS试剂盒2，涡旋振荡，离心，吸取上清液经O. 22 m有机相滤膜过滤后进行GC-MS/MS分析。
所述的一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，(2)提取中所用的QuEChERS试剂盒I由4 g无水硫酸镁、I g氯化钠、I g柠檬酸钠和O. 5 g柠檬酸氢二钠组成；(3)净化中所用的QuEChERS试剂盒2由500mg无水硫酸镁和150mg N-丙基乙二胺键合固相吸附剂组成。所述的一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，仪器参数为气相色谱带PTV功能的不分流进样，Surge压力150kPa，2min，进样口初始温度70°C，进样后以40C /sec快速升至280°C ;毛细管柱为TR-PesticideII [ (50%苯基)-甲基聚硅氧烷，30mX0. 25mmX0. 25 m+5mX0. 25 m Guard]，流速Hel. 2 mL/min ;程序升温:90°C 保持5min，25°C /min升至180°C，保持15min，5°C /min升至280°C，保持4. 5分钟，后运行温度 320°C保持5min ;GC/MS传输线温度270°C ;串联质谱离子温度250°C，发射电流50 μ A，EI离子化模式，封闭式EI源，分析模式为timed-SRM，扫描宽度0. 002m/z，扫描周期O. 4s,峰宽Ql O. 7Da、Q3 O. 7Da，碰撞气压力I. 5mTorr，色谱过滤峰宽IOs ;液体自动进样器进样体积I μ L，PTV进样模式，进样前后驻留模式3s和2s。本发明达到的有益效果
该方法克服了现有的方法前处理复杂或要使用多种固相萃取小柱净化的缺点，提供一种有机溶液提取，QuEChERS试剂包净化，离心后用配置有程序升温进样口的三重四级杆质谱直接测定烟叶中202种农药残留量的方法，该方法干扰较少，农药品种覆盖面广，前处理简便、快捷、节省溶剂，准确、灵敏。分别在空白烟末中添加O. 5 1,0. I O. 2,0. 01 O. 05mg/kg三档浓度的混合标样，同时添加灭蚁灵、氯唑磷内标液，提取、净化后进样，计算回收率，重复3次。表I中给出7 202种农药的L0D,在O. 000 2 O. 015mg/L之间，有机氯、部分有机磷组分LOD相对较低(O. 0002 O. 002mg/L之间)，某些有机磷砜及亚砜类、部分有机氮类组分由于性质不稳定，LOD相对较高(O. 005 O. 01mg/L之间)，以上信噪比实际均达到或大于10，实际样品检测定量限LOQ在O. 002 O. 02mg/kg之间，均高于ACAC指导性残留限量(GRLs) 10倍以上，符合检测要求。如甲氟磷、除草醚是ACAC限量中最低的两种农药(分别为0.01、0. 02mg/kg)，本方法中上述两种农药的LOD分别为O. 001和O. 0008mg/kg，扣除称样量及溶剂稀释因素，最低检测浓度可低于限量低5 10倍。各农药组分回收率在67. 4% 112. 0%，平均为89. 10% ;相对标准偏差< 20%。在O. 01 2. 5mg/kg浓度范围内，线性表现良好，相关系数在O. 9800 O. 9999之间。
具体实施例方式实施例I、本发明烟叶中202种农药残留量的测定方法包括以下步骤
(1)制备烟叶样品在40°c下烘干、粉碎，过20目筛，避光低温保存；
(2)提取称取2g烟末样品于50mL具盖离心试管中，加IOmL水充分浸润，静置10min ;移取10 mL乙腈和Iug的氯唑磷、Iug灭蚁灵内标工作液到离心管中,镟润振荡2 min,加入QuEChERS试剂盒I (由4 g无水硫酸镁、I g氯化钠、I g柠檬酸钠和O. 5 g柠檬酸氢二钠组成)和5mL甲苯，立即手持振荡，防止无水硫酸镁结块，以4000r/min离心10 min ;其中QuEChERS试剂盒I为购买自安捷伦公司，货号5982-5650 ；
(3)净化移取样品提取液上清液5mL于IOmL离心管中，加入QuEChERS试剂盒2(由500mg无水硫酸镁+150mg N-丙基乙二胺键合固相吸附剂组成)，润旋振荡2 min,以6000r/min离心lOmin，吸取上清液经O. 22 m有机相滤膜过滤后进行GC-MS/MS分析；其中QuEChERS试剂盒2也为购买自安捷伦公司，货号5982-5056 ；
仪器参数气相色谱(GC):带PTV功能的不分流进样,Surge压力150kPa (2min),进样口初始温度70°C，进样后以4°C /sec快速升至280°C;毛细管柱为TR-PesticideII [(50%苯基)-甲基聚硅氧烷，30mX0. 25mm (内径)Χ0· 25 m+5mX0. 25 m Guard (预柱)]，流速Hel. 2 mL/min ;程序升温:90°C保持 5min, 25°C /min 升至 180°C,保持 15min, 5°C /min 升至280°C，保持4. 5分钟，后运行温度320°C保持5min ；GC/MS传输线温度270°C ；
串联质谱(MS/MS):离子源温度250°C，发射电流50 μ A，EI离子化模式，封闭式EI源，分析模式为timed-SRM (定时选择性反应监测)，扫描宽度0. 002m/z，扫描周期O. 4s,峰宽Ql 0.7Da、Q3 O. 7Da，碰撞气压力I. 5mTorr (Ar)，色谱过滤峰宽10s。液体自动进样器进样体积I μ L，PTV进样模式，进样前后驻留模式3s和2s。实施例2、标准曲线、检测限、回收率和精密度的测定将农药标样加入提取净化后的烟草基质甲苯溶液，分别配置成O. Ol 2. 5mg/L共6档浓度的系列混合工作液，以浓度一特定组分SRM离子峰面积绘制标准曲线，得到相关系数(r2);以不断降低进样浓度直至峰面积高于基线噪音3倍作为检出极限(LOD);分别在空白烟末中添加O. 5 1、0. I O. 2、
O.Ol O. 05mg/kg三档浓度的混合标样，同时添加灭蚁灵、氯唑磷内标液，提取、净化后进样，计算回收率，重复3次’表I中给出了 202种农药的检出限、相关系数、回收率等实验数据。
权利要求
1.一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，其特征在于烟末样品经有机溶液提取农药残留，在用QuEChERS试剂包净化，离心后用GC-MS/MS分析测定烟叶中的农药残留量。
2.根据权利要求I所述的一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，其特征在于气相配置有程序升温进样口，质谱检测器为三重四级杆质谱。
3.根据权利要求I所述的一种直接测定烟叶中202种农药残留量的方法，其特征在于包括以下具体步骤 (1)制备烟叶样品烘干、粉碎，过筛，避光低温保存； (2)提取称取烟末样品于具盖离心试管中，加水充分浸润，静置；移取乙腈和氯唑磷、灭蚁灵内标工作液到离心管中，漩涡振荡，加入QuEChERS试剂盒I和甲苯，振荡，离心； (3)净化移取样品提取液上清液于离心管中，加入QuEChERS试剂盒2，涡旋振荡，离心，吸取上清液经O. 22 m有机相滤膜过滤后进行GC-MS/MS分析。
4.根据权利要求3所述的一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，其特征在于(2)提取中所用的QuEChERS试剂盒I由4 g无水硫酸镁、I g氯化钠、I g柠檬酸钠和O. 5 g柠檬酸氢二钠组成；(3)净化中所用的QuEChERS试剂盒2由500mg无水硫酸镁和150mg N-丙基乙二胺键合固相吸附剂组成。
5.根据权利要求I所述的一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，其特征在于仪器参数为气相色谱带PTV功能的不分流进样,Surge压力150kPa, 2min,进样口初始温度70°C，进样后以4°C /sec快速升至280°C;毛细管柱为TR-PesticideII [(50%苯基)-甲基聚娃氧烧，30mX0. 25mm X O. 25 m+5mX O. 25 m Guard],流速Hel. 2 ml ,/mi n ;程序升温90°C保持 5min，25°C /min 升至 180°C，保持 15min，5°C /min 升至 280°C，保持 4. 5 分钟，后运行温度320°C保持5min ；GC/MS传输线温度270°C ;串联质谱离子温度250°C，发射电流50μΑ，EI离子化模式，封闭式EI源，分析模式为timed-SRM，扫描宽度0. 002m/z，扫描周期O. 4s，峰宽Ql O. 7Da、Q3 O. 7Da，碰撞气压力I. 5mTorr，色谱过滤峰宽IOs ;液体自动进样器进样体积I μ L, PTV进样模式，进样前后驻留模式3s和2s。
全文摘要
本发明公开了一种测定烟叶中202种农药残留量的方法，包括烟末样品经有机溶液提取，QuEChERS试剂包净化，离心后用配置有程序升温进样口的气相三重四级杆质谱，测定烟叶中的农药残留量，本方法具有干扰较少，农药品种覆盖面广，前处理简便、快捷、节省溶剂，准确、灵敏等优点。
文档编号G01N30/02GK102645498SQ201210160379
公开日2012年8月22日 申请日期2012年5月22日 优先权日2012年5月22日
发明者唐纲岭, 张洪非, 朱文静, 楼小华, 边照阳, 高川川 申请人:中国烟草总公司贵州省公司