专利名称：一种用于滤纸干血片的蛋白洗脱液的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种用于滤纸干血片的蛋白洗脱液。
背景技术：
新生儿疾病筛查的普及和推广使ー些危害儿童生命、导致儿童体格及智能发育障 碍的先天性遗传代谢疾病能够得以早期诊断，并且可以在新生儿临床症状未出现之前或症状不明显时就能给予及时治疗，避免或降低患儿机体各器官受到的不可逆损伤产生。目前，已有化学发光免疫检测、时间分辨荧光免疫检测、酶联免疫吸附、放射免疫分析等多项以免疫检测为基础的检测方法被应用在新生儿疾病筛查上。但由于新生儿采血的特殊性，新生儿疾病筛查都是对其足跟血滴在S&S903滤纸上形成的滤纸干血片中的标志物进行检测，因此需要将标志物重新从滤纸干血片上溶解到特定溶液中，再进行相关分析检測，比如新生儿先天性甲状腺功能减低症的筛查，需要从滤纸干血片上将促甲状腺激素(TSH)溶解出来，再进行免疫检测。目前，新生儿疾病筛查试剂盒一般用Tirs-HCl缓冲液作为滤纸干血片的蛋白洗脱液，将滤纸血片上蛋白洗脱下来以后，再进行免疫检测，不仅蛋白溶出率低，降低了免疫检测的灵敏度，而且干扰物质的存在，又降低了检测的准确性。此外，Tris-HCl洗脱滤纸干血片需要时间也较长，一般要多次洗板，増加了检测时间。因此，用于滤纸干血片的高效蛋白洗脱液已经成为了提高用于新生儿疾病筛查的免疫检测试剂的灵敏度、准确性、检测速度的关键因素。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于滤纸干血片的蛋白洗脱组合物及蛋白洗脱液。本发明所述蛋白洗脱组合物，由NP40、(2-羟丙基)-β_环糊精、(羟丙基)甲基纤维素和小牛血清組成。由所述蛋白洗脱组合物配制的蛋白高效洗脱液，包含表面活性剤、稳定剂、辅助稳定剂，所述表面活性剂为10%。-65%。的ΝΡ40，所述稳定剂为O. 1%0 _1%0的(2-羟丙基)-β-环糊精，所述辅助稳定剂为0.1%。-1%。的(羟丙基)甲基纤维素。ΝΡ40是ー种温和的非离子表面活性剤，一般由超过97%的聚_(氧代_1，2_こニ亚甲基)-α -壬基苯基-ω-羟基，少于1%的支链ニ壬基苯基聚氧こ烯醚，小于3%的聚こニ醇构成。在生物医学上，常备用在细胞裂解液中，用于破坏细胞膜。1%浓度ΝΡ40的基本可以破坏掉胞膜，并且结合特定的缓冲液就可以获得胞浆蛋白。(2-羟丙基)-β -环糊精是β -环状糊精的一种羟烷基化衍生物，其结构式如下
权利要求
1.一种蛋白洗脱组合物，由NP40、(2-羟丙基)-0-环糊精、(羟丙基)甲基纤维素和小牛血清组成。
2.一种蛋白洗脱液，包含表面活性剂、稳定剂、辅助稳定剂和缓冲液，所述表面活性剂为NP40，其工作浓度为10%。-65%。，所述稳定剂为(2-羟丙基)-0-环糊精，其工作浓度为0.1%。_1%。，所述辅助稳定剂为(羟丙基)甲基纤维素，其工作浓度为0. 1%。_1%。，所述缓冲液为小牛血清。
3.根据权利要求I所述的蛋白洗脱液，其特征在于所述表面活性剂为50%。的NP40。
4.根据权利要求I所述的蛋白洗脱液，其特征在于所述稳定剂是1%。的(2-羟丙基)-3 -环糊精。
5.根据权利要求I所述的蛋白洗脱液，其特征在于所述辅助稳定剂是指1%。的(羟丙基)甲基纤维素。
6.根据权利要求I所述的蛋白洗脱液，其特征在于还包含防腐剂。
7.根据权利要求5.所述的蛋白洗脱液，其特征在于所述防腐剂为1%。的Proclin-300。
8.权利要求2-7任一项所述蛋白洗脱液在制备新生儿疾病筛查试剂中的应用。
9.权利要求I所述蛋白洗脱组合物在制备新生儿疾病筛查试剂中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种高效蛋白洗脱液，该洗脱液包含表面活性剂、稳定剂、辅助稳定剂和缓冲液。作为优选，本发明所述蛋白洗脱液还包含防腐剂。本发明所述蛋白洗脱液能有效洗脱滤纸干血片上的蛋白，并能显著降低全血中其他物质对免疫检测的干扰，而且具有针对性强、成本低、易于配置的特点，在以蛋白为检测标志物，采用免疫检测技术的新生儿疾病筛查上具有广泛应用前景。
文档编号G01N33/531GK102680678SQ201210189829
公开日2012年9月19日 申请日期2012年6月8日 优先权日2012年6月8日
发明者刘宾, 吴晓东, 孙旭东, 张鑫, 李鹏翀, 杨晓林 申请人:北京源德生物医学工程有限公司