专利名称：一种增乳膏及其相关制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的质量检测方法，具体涉及一种增乳膏及其相关制剂的质量检测方法，属医药技术领域。
背景技术：
片仔癀牌增乳膏是由漳州片仔癀药业股份有限公司生产的纯中药制剂，具有补血活血，通络催乳的功能，用于产后缺乳。增乳膏收载于国家药品标准WS-5163(B-0163)-2002，原标准中含量测定项下用高效液相色谱法测定芍药苷的含量中的前提取方法为“取样品Sg，精密称定，加水20ml，充分搅拌使溶解，通过DlOl大孔吸附树脂(8g湿法装柱，内径15mm)，用水200ml洗脱，弃去水液，再用乙醇70ml洗脱，收集乙醇液，蒸干，残渣加甲醇15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇 匀，即得”。因芍药苷可溶于稀乙醇中，故在此方法中用水洗脱后弃去洗脱液可能导致芍药苷的流失而使芍药苷的测定结果不太准确，且此方法在操作上也过于繁琐，不便于实际应用。
发明内容
本发明目的在于提供一种增乳膏及其相关制剂的质量检测方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的。本发明质量检测方法包括如下含量测定方法，具体步骤是照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以10 20 :90 80的乙腈-O. 1%磷酸为流动相；检测波长为200 250nm ;理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每I体积份含芍药苷O. 00001 O. 001重量份的溶液，即得；供试品溶液的制备取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的1/30，精密称定，加甲醇20体积份于25体积份容量瓶中，超声处理30 60分钟(功率300W，频率50KHz )，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各O. 001-0.01体积份，注入液相色谱仪，测定，即得；增乳膏及其相关制剂以日服用剂量计含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于31. 5 mg。优选地，本发明质量检测方法包括如下含量测定方法照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为14 86的乙腈-O. 1%磷酸为流动相；检测波长为230nm;理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每I体积份含芍药苷O. 0001重量份的溶液，即得；供试品溶液的制备取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的1/30，精密称定，加甲醇20体积份于25ml容量瓶中，超声处理30分钟(功率300W，频率50KHz)，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各O. 005体积份，注入液相色谱仪，测定，即得；增乳膏及其相关制剂以日服用剂量计含白芍以芍药苷(C23H28O11)计，不得少于31. 5 mg。·本发明所述增乳膏及其相关制剂的质量检测方法还包括如下鉴别方法中的一种或几种A.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20体积份，合并正丁醇液，用5%氨水溶液洗涤2次，每次20体积份，再用饱和氯化钠溶液洗涤3次，每次20体积份，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15体积份，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加沸程60-90°C石油醚20体积份，加热回流I小时，滤过，滤渣挥干,加乙醇25体积份，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干,残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份，分别点于同一娃胶G薄层板上，以10-20 :30-50 :18-24 :8_12的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水5 10°〇以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑占.B.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30体积份，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，力口无水乙醇7体积份，乙醚3体积份，超声处理10分钟，取上层液，蒸干，残渣加乙醇I体积份溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇20体积份，加热回流O. 5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1-3 :1的沸程60-90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点；C.取含量测定项下供试品溶液15体积份，蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每I体积份含O. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各O. 004体积份,分别点于同一娃胶G薄层板上，以30-50 :3-8 :5-15 :0. 1-0. 2的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
D.取鉴别B项下供试品溶液，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每I体积份含O. 001重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液O. 01体积份，对照品溶液O. 001体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-11 :1-3 :1-3 :2-4的正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。优选地，本发明所述增乳膏及其相关制剂的质量检测方法还包括如下鉴别方法中的一种或几种A.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20体积份，合并正丁醇液，用5%氨水溶液洗涤2次，每次20体积份，再用饱和氯化钠溶液洗涤3次，每次20体积份，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15体积份，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为 供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加沸程60-90°C石油醚20体积份，加热回流I小时，滤过，滤渣挥干,加乙醇25体积份，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干,残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以15 :40 :22 :10的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水5 10 1以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 1加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30体积份，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，力口无水乙醇7体积份，乙醚3体积份，超声处理10分钟，取上层液，蒸干，残渣加乙醇I体积份溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇20体积份，加热回流O. 5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2 :1的60-90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点；C.取含量测定项下供试品溶液15体积份，蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每I体积份含O. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各O. 004体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40 5 10 :0. 2的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；D.取鉴别B项下供试品溶液，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每I体积份含O. 001重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液O. 01体积份，对照品溶液O. 001体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8 :2 :2 :3的正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。所述重量份与体积份的单位对应关系为克/毫升。所述取对照品适量按中国药典规定的常规取样量而定。所述增乳膏及其相关制剂是由如下原料药和工艺制成王不留行100-160重量份、通草100-160重量份、熟地黄130-190重量份、当归50-90重量份、白芍90-130重量份、川芎40-69重量份、益母草100-160重量份、天花粉100-160重量份；以上八味，取熟地黄用80%乙醇作溶剂，取当归、川芎用70%乙醇作溶剂，浸溃过夜后强制循环2-4小时，滤过，合并二种醇提液，回收乙醇，浓缩至相对密度为I. 15^1. 30 (9(Tl00°C)，备用；通草加水浸泡1-3小时，煎煮1-3小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草煎煮1-2小时，滤过，滤液备用；天花粉用80°C热水温浸1-3小时，滤过，滤液与上述水提滤液合并，浓缩至相对密度为I. 08 I. 23 (90-100°C);合并醇提浓缩液与水提浓缩液，加入常规辅料，按照常规工艺制成膏剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。 所述增乳膏及其相关制剂优选由如下原料药和工艺制成王不留行133重量份、通草133重量份、熟地黄167重量份、当归67重量份、白芍111重量份、川芎50重量份、益母草133重量份、天花粉133重量份；以上八味，取熟地黄用80%乙醇作溶剂，取当归、川弯用70%乙醇作溶剂，浸溃过夜后强制循环3小时，滤过，合并二种醇提液，回收乙醇，浓缩至相对密度为I. 15^1. 30 (9(Tl00°C)，备用；通草加水浸泡2小时，煎煮2小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草煎煮I. 5小时，滤过，滤液备用；天花粉用80°C热水温浸2小时，滤过，滤液与上述水提滤液合并，浓缩至相对密度为1.08 1.23 (90-100°C);合并醇提浓缩液与水提浓缩液，加入常规辅料，按照常规工艺制成膏剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。本发明增乳膏的日服用量剂量为90g，一次30g，一日3次。在保证日服用生药量相同的情况下，增乳膏相关制剂的日服用剂量可依据增乳膏日服用剂量计算得出。本发明质量检测方法与现行标准相比，含量测定项下供试品采用甲醇超声提取的方法，此方法既简便且芍药苷的提取完全，使芍药苷的测定结果更准确，方法学试验表明精密度和重现性良好，方法可行，同时简化了操作步骤，便于实际应用。
图I芍药苷对照品色谱2增乳膏供试液色谱3增乳膏阴性对照试液色谱4苟药苷标准曲线图下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例高效液相色谱法测定增乳膏(按实施例I制备)中芍药苷含量的方法学考察I、仪器与试药Agilent-1200高效液相色谱仪包括真空脫气机，四元梯度泵，自动进样器，紫外检测器，Agilent工作站；超纯水器(Sartorius);超声波发生器(Elma 820/H)。芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号110736-200731)，甲醇为色谱纯，乙腈为色谱纯，水为超纯水，磷酸为分析纯。
2、方法与结果2. I色谱条件色谱柱Ultimate XB-C18 柱，(5 μ m, 4. 6 X 250mm Welch Materials, Inc.);流动相乙腈-O. 1%磷酸(14 :86);检测波长230nm ;柱温20°C ;流速0. 8ml/min ；进样量10μ I在此色谱条件下，芍药中的有效成分芍药苷能与其他杂质峰分离较好，对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液的色谱图，见图1-3。2. 2系统试用性试验按前述方法，在以下试验条件下，对样品和对照峰的理论塌板数，分离度等参数进行了测试，见表I。表I系统试用性测定结果
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.* | ιιπI h4iyj-* 2.3提取方法的选择2. 3. I提取溶剂的选择实验分别选择用不同极性的溶剂对批号为0807005的样品进行提取。分别是〈1>选用水洗脱样品过101大孔树脂，再用乙醇洗脱后，收集乙醇洗脱液，蒸干，再用甲醇溶解提取；〈2>选用稀乙醇超声提取；〈3>选用乙醇超声提取；〈4>选用甲醇超声提取。结果表明用甲醇提取样品较完全，见表2。表2不同溶剂提取芍药苷含量的结果
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甲聲纖觀MMmO,2. 3. 2提取时间的选择实验采用甲醇分别用不同的时间超声提取，分别是30分钟，45分钟，60分钟。结果表明用甲醇超声提取30分钟就能将芍药苷提取完全，方法简便，易以操作，见表3。表3不同提取时间的测定结果
权利要求
1.一种增乳膏及其相关制剂的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下含量测定方法: 照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以10 20 90 80的乙腈-O. 1%磷酸为流动相；检测波长为200 250nm ;理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000 ;对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每I体积份含芍药苷O. 00001 O. 001重量份的溶液，即得； 供试品溶液的制备取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的1/30，精密称定，加甲醇20体积份于25体积份容量瓶中，超声处理30 60分钟，功率300W，频率50KHz，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各O. 001-0. 01体积份，注入液相色谱仪，测定，即得； 增乳膏及其相关制剂以日服用剂量计含白芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于31. 5 mg ； 所述增乳膏及其相关制剂是由如下原料药和工艺制成王不留行100-160重量份、通草100-160重量份、熟地黄130-190重量份、当归50-90重量份、白芍90-130重量份、川芎40-69重量份、益母草100-160重量份、天花粉100-160重量份；以上八味，取熟地黄用80%乙醇作溶剂，取当归、川芎用70%乙醇作溶剂，浸溃过夜后强制循环2-4小时，滤过，合并二种醇提液，回收乙醇，浓缩至9(Tl00°C相对密度为I. 15^1. 30，备用；通草加水浸泡1_3小时，煎煮1-3小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草煎煮1-2小时，滤过，滤液备用；天花粉用80°C热水温浸1-3小时，滤过，滤液与上述水提滤液合并，浓缩至90-100°C相对密度为I. 08^1. 23 ;合并醇提浓缩液与水提浓缩液，加入常规辅料，按照常规工艺制成膏剂、片齐U、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。
2.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征在于该方法为 照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验为用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为14 86的乙腈-O. 1%磷酸为流动相；检测波长为230nm ;理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每I体积份含芍药苷O.0001重量份的溶液，即得； 供试品溶液的制备取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的1/30，精密称定，加甲醇20体积份于25ml容量瓶中，超声处理30分钟，功率300W，频率50KHz，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各O. 005重量份，注入液相色谱仪，测定，即得； 增乳膏及其相关制剂以日服用剂量计含白芍以芍药苷C23H28O11计，不得少于31. 5 mg。
3.如权利要求I或2所述的质量检测方法，其特征在于该方法中所述增乳膏及其相关制剂由如下原料药和工艺制成 王不留行133重量份、通草133重量份、熟地黄167重量份、当归67重量份、白芍111重量份、川芎50重量份、益母草133重量份、天花粉133重量份；以上八味，取熟地黄用80%乙醇作溶剂，取当归、川芎用70%乙醇作溶剂，浸溃过夜后强制循环3小时，滤过，合并二种醇提液，回收乙醇，浓缩至9(Tl00°C相对密度为I. 15 I. 30，备用；通草加水浸泡2小时，煎煮2小时，滤过，滤液加入王不留行、白芍、益母草煎煮I. 5小时，滤过，滤液备用；天花粉用80°C热水温浸2小时，滤过，滤液与上述水提滤液合并，浓缩至90-100°C相对密度为I. 08^1. 23 ;合并醇提浓缩液与水提浓缩液，加入常规辅料，按照常规工艺制成膏剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。
4.如权利要求I或2所述的质量检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别中的一种或几种 A.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20体积份，合并正丁醇液，用5%氨水溶液洗涤2次，每次20体积份，再用饱和氯化钠溶液洗涤3次，每次20体积份，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15体积份，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加沸程60-90°C石油醚20体积份，加热回流I小 时,滤过,滤渣挥干,加乙醇25体积份，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干,残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法 试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份,分别点于同一娃胶G薄层板上，以10-20 30-50 18-24 8-12的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-7K 5^10 V以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； B.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30体积份，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7体积份，乙醚3体积份，超声处理10分钟，取上层液，蒸干，残渣加乙醇I体积份溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇20体积份，加热回流O.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1-3 1的沸程60-90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点； C.取含量测定项下供试品溶液15体积份，蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每I体积份含O. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 004体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30-50 :3-8 :5-15 :0. 1-0. 2的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； D.取鉴别B项下供试品溶液，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每I体积份含0.001重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液O. 01体积份,对照品溶液O. 001体积份,分别点于同一娃胶G薄层板上，以5-11 :1-3 1-3 :2-4的正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5.如权利要求3所述的质量检测方法，其特征在于该方法还包括如下鉴别中的一种或几种 A.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20体积份，合并正丁醇液，用5%氨水溶液洗涤2次，每次20体积份，再用饱和氯化钠溶液洗涤3次，每次20体积份，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15体积份，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加沸程60-90°C石油醚20体积份，加热回流I小时,滤过,滤渣挥干,加乙醇25体积份，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干,残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份,分别点于同一娃胶G薄层板上，以10-20 30-50 18-24 8-12的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水5 10 V以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；· B.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再·搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30体积份，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7体积份，乙醚3体积份，超声处理10分钟，取上层液，蒸干，残渣加乙醇I体积份溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇20体积份，加热回流O.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1-3 :1的沸程60-90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点； C.取含量测定项下供试品溶液15体积份，蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每I体积份含O. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 004体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30-50 :3-8 :5-15 :0. 1-0. 2的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； D.取鉴别B项下供试品溶液，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每I体积份含0.001重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液O. 01体积份,对照品溶液O. 001体积份,分别点于同一娃胶G薄层板上，以5-11 :1-3 1-3 :2-4的正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.如权利要求4所述的质量检测方法，其特征在于鉴别为如下的一种或几种 A.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20体积份，合并正丁醇液，用5%氨水溶液洗涤2次，每次20体积份，再用饱和氯化钠溶液洗涤3次，每次20体积份，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15体积份，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加石油醚(60-90°C) 20体积份，加热回流I小时,滤过,滤渣挥干,加乙醇25体积份，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干,残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份,分别点于同一娃胶G薄层板上，以15 40 22 10的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-7K 5^10 V以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； B.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30体积份，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7体积份，乙醚3体积份，超声处理10分钟，取上层液，蒸干，残渣加乙醇I体积份溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇20体积份，加热回流O.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2 :1的石油醚(60-90°C)-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同的黄色斑点； C.取含量测定项下供试品溶液15体积份，蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每I体积份含2重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 004体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40 5 10 :0. 2的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； D.取鉴别B项下供试品溶液，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每I体积份含I重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液O. 01体积份，对照品溶液O. 001体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8 :2 :2 :3的正丁醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色 清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.如权利要求5所述的质量检测方法，其特征在于鉴别为如下的一种或几种 A.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液蒸干，残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20体积份，合并正丁醇液，用5%氨水溶液洗涤2次，每次20体积份，再用饱和氯化钠溶液洗涤3次，每次20体积份，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇15体积份，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取王不留行对照药材5重量份，加沸程60-90°C石油醚20体积份，加热回流I小时,滤过,滤渣挥干,加乙醇25体积份，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸干,残渣加饱和氯化钠溶液20体积份使溶解并转移至分液漏斗中，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份,分别点于同一娃胶G薄层板上，以15 40 22 10的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水5 10 V以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.取增乳膏及其相关制剂日服用剂量的2/3，加无水乙醇70体积份，边加边搅拌，再搅拌10分钟，静置，倾取上层液，加乙醚30体积份，静置过夜，倾取上层液，蒸至近干，加无水乙醇7体积份，乙醚3体积份，超声处理10分钟，取上层液，蒸干，残渣加乙醇I体积份溶解，作为供试品溶液；另取熟地黄对照药材5重量份，切片，加乙醇20体积份，加热回流.O.5小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2 :1的沸程60-90°C石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点； C.取含量测定项下供试品溶液15体积份，蒸干，残渣加甲醇I体积份使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每I体积份含O. 002重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各O. 004体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以40 5 10 :0. 2的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂,展开,取出，晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； D.取鉴别B项下供试品溶液，作为供试品溶液；另取瓜氨酸对照品，加稀乙醇制成每I体积份含0.001重量份的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液.O.01体积份，对照品溶液O. 001体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8 :2 :2 3的正丁 醇-无水乙醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
全文摘要
本发明公开了一种增乳膏及其相关制剂的质量检测方法，包括含量测定方法和/或鉴别方法。含量测定方法照高效液相色谱法测定，以10～2090～80的乙腈-0.1%磷酸为流动相；供试品采用甲醇超声提取的方法，既简便且芍药苷的提取完全，与现行标准相比，芍药苷的测定结果更准确，方法学试验表明精密度和重现性良好，方法可行，同时简化了操作步骤，便于实际应用。所述增乳膏及其相关制剂是由如下原料药制成王不留行100-160重量份、通草100-160重量份、熟地黄130-190重量份、当归50-90重量份、白芍90-130重量份、川芎40-69重量份、益母草100-160重量份、天花粉100-160重量份。
文档编号G01N30/90GK102928524SQ201210285019
公开日2013年2月13日 申请日期2012年8月10日 优先权日2012年8月10日
发明者潘杰, 黄进明, 洪绯, 于娟, 吴丽璇 申请人:漳州片仔癀药业股份有限公司