专利名称：一种水中痕量非甾体抗炎药的检测方法
技术领域：
本发明属于环境保护和水处理技术领域，涉及一种测定实际环境水体中痕量非甾体抗炎药的方法。
背景技术：
水环境中药物残留问题已引起国内外广泛关注，成为当前环境领域的研究热点。药物的大量使用及滥用，使得该类物质及其活性组分被持续不断地输入到水体环境中，药物的特性(旋光性、半挥发性、极性及高毒性等点)和水体环境自身存在的演变规律决定了这些物质将在水体环境中进行持续不断地长距离迁移扩散，并形成普遍性累积，其归趋的不确定性给人类健康形成了不可预测的潜在风险。近年来，我国关于水体中药物的污染研究主要集中在抗生素方面，而对另一大类 的非处方药(如非留体抗炎药(NSAIDs))的相关研究较少涉及。NSAIDs类药物主要包括阿司匹林、布洛芬、萘普生、双氯酚酸、酮洛芬、苯扎贝特等，该类药物具有抗炎、抗风湿、止痛、退热和抗凝血等作用，在临床上广泛用于骨关节炎、多种发热和各种疼痛症状的缓解。目前，我国非留体抗炎药在风湿及类风湿性关节炎用药中一直占据主导地位，其用量远远高于其它类药物。未被完全吸收、利用的这些药物及其代谢物将通过尿液、粪便排泄等途径进入城市污水处理厂。而研究表明，污水处理厂现有处理技术不能有效去除该类药物，导致这些亲水性药物，源源不断输入环境水体中并形成普遍性累积，能够长期作用于水生态系统，对水环境产生潜在威胁，同时造成水体污染，进而直接或间接影响饮用水质量，危害人体健康。为此，建立环境水体中非留体抗炎药的分析方法，对污水处理系统中该类药物的控制和生态风险评价，具有重要意义。目前，国内在非留体抗炎药生产过程中的质控分析、食品中残留分析方面常有报道；但因环境水体中非留体抗炎药浓度低、分析难度高，研究报道甚少。因此，研究建立一种适用于分析复杂水样中痕量非留体抗炎药的检测方法十分迫切。
发明内容
针对目前水样中非留体抗炎药分析方法缺乏的现状，本发明的目的在于提供一种适合不同水样(污水、地表水或饮用水)中痕量非留体抗炎药的快速、灵敏、准确的分析检测方法，以实现复杂水样中痕量非留体抗炎药的萃取、净化和测定。本发明的技术方案如下
(I)水样预处理
将水样通过O. 7 μ m的玻璃纤维滤膜过滤后,用2 mol/L盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至4左右，得到预处理后的水样。(2)固相萃取
①将固相萃取柱(C18)依次用5 mL甲醇和3 mL去离子水(pH〈4)活化后，得到活化后的固相萃取柱；②将一定体积的预处理水样(污水200mL;地表水或饮用水500 mL)以5 10 mL/min的速度通过活化后的固相萃取柱后，用:Γ5 mL含5%甲醇的水溶液淋洗固相萃取柱，净化去除杂质，废弃淋洗液；
③将净化后的固相萃取柱真空抽干15 20min后，用3XImL的甲醇溶液洗脱，控制流速为O. 5"! mL/min,收集洗脱液；
④将收集的洗脱液在室温氮气流下吹至近干，然后用含有O.1%乙酸的甲醇溶液定容至O. 5 mL，用O. 22 μ m的有机相针孔滤膜过滤后，得到待测样品。(3)高效液相色谱串联质谱检测
采用高效液相色谱-串联质谱检测系统对样品进行测定。①色谱条件
色谱柱Agilent Eclipse XDB C18 反相柱((150 mm X 2· I mm, 5 μ m);流动相 Α:甲醇，B:含O. 1%乙酸的去离子水溶液；梯度洗脱程序为75 % A保持5 min,然后在5min内将A线性增加至90 %并保持5 min,随后在5 min内降低A至75 %，保持5 min。流速300 μ L/min;进样体积10 μ L;柱温30°C。②质谱条件
离子源电喷雾负离子化(ESI)源；检测模式负离子模式检测；离子喷射电压-4500V ;温度450°C;扫描方式多重反应监测(MRM);毛细管电压3000V。气帘气体N2压力20psi ;碰撞气体N2压力Medium。所述的步骤(3)中仪器测定值为本测定方法通过浓缩得到的水样中非留体抗炎药的浓度，水样中非留体抗炎药的实际浓度为仪器测定值除以富集倍数(见公式I所示)。采用外标法进行定量。
权利要求
1.一种水中痕量非留体抗炎药的检测方法，其特征具体步骤如下(1)水样预处理将水样通过O. 7 μ m的玻璃纤维滤膜过滤后，调节溶液pH值至3. 8-4. 2，得到预处理后的水样；(2)固相萃取①将固相萃取柱C18依次用5mL甲醇和3 mL pH〈4的去离子水活化后,得到活化后的固相萃取柱；②将步骤(I)所得预处理后的水样以5 10mL/min的速度通过活化后的固相萃取柱后，用3 5 mL含5%甲醇的水溶液淋洗固相萃取柱，净化去除杂质，废弃淋洗液；其中污水200 mL;地表水或饮用水500 mL ；③将净化后的固相萃取柱抽真空脱水15 20min后，用3XImL含O. 1%乙酸的甲醇溶液洗脱，控制流速为O. 5"! mL/min,收集洗脱液；④将收集的洗脱液在室温氮气流下吹至近干，然后用甲醇溶液定容至O.5 mL，用O. 22μ m的有机相针孔滤膜过滤后，得到待测样品；(3)高效液相色谱串联质谱检测采用高效液相色谱-串联质谱检测系统对样品中非留体抗炎药进行测定，通过浓缩得到水样中的非留体抗炎药，水样中非留体抗炎药的实际浓度为仪器测定值除以富集倍数，见公式I，采用外标法进行定量； 其中，Csi为水样中某非甾体抗炎药的实际浓度；Ci为某非留体抗炎药的仪器测定值；N为富集倍数，污水样品为400，地表水或饮用水样品为1000 ；色谱条件色谱柱Agilent Eclipse XDB C18 反相柱,尺寸为 150 mm X 2.1 mm, 5μηι;流动相A :甲醇，B:含O. 1%乙酸的去离子水溶液；梯度洗脱程序为75 % A保持5 min,然后在5min内将A线性增加至90 %并保持5 min,随后在5 min内降低A至75 %,保持5 min ;流速300 yL/min;进样体积10yL;柱温30°C ;质谱条件离子源电喷雾负离子化源；检测模式负离子模式检测；离子喷射电压-4500V ;温度450°C ;扫描方式多重反应检测；毛细管电压3000V，气帘气体N2压力20psi ;碰撞气体 N2 压力Medium。
2.根据权利要求1所述的一种水中痕量非留体抗炎药的检测方法，其特征在于所述的非甾体抗炎药包括酮洛芬、萘普生、双氯芬酸或布洛芬中一种以上。
3.根据权利要求1所述的一种水中痕量非留体抗炎药的检测方法，其特征在于步骤(I)中采用2 mol/L盐酸或氢氧化钠调节溶液的pH值。
全文摘要
本发明涉及一种水样中痕量非甾体抗炎药的检测方法。该方法将水样过滤，得到预处理后的水样；固相萃取柱预先用甲醇和去离子水活化后，将预处理后的水样通过活化后的固相萃取柱；再以含5%甲醇的水溶液净化洗去杂质；将柱子抽真空15~20min完全脱水后，用甲醇溶液洗脱目标物；然后用高效液相色谱串联质谱进行定性和定量分析。本发明萃取溶剂用量小，可用于大体积水样中痕量目标药物的高效富集(富集倍数可达1000倍)，分析速度快，检测限低至5ng/L，准确度和灵敏度高，是一种适用于污水、地表水和饮用水等不同水样中痕量非甾体抗炎药的快速、灵敏、准确的分析方法。
文档编号G01N30/02GK102998388SQ20121048417
公开日2013年3月27日 申请日期2012年11月26日 优先权日2012年11月26日
发明者段艳平, 陈玲, 温智皓, 孟祥周, 张吉营, 赵梦 申请人:同济大学