专利名称：一种多菌灵快速检测卡的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种多菌灵快速检测卡，是一种检测多菌灵的检测器具，属于多菌灵检测技术领域。
背景技术：
多菌灵又名棉萎灵、苯并咪44号。多菌灵是一种广谱性杀菌剂，对多种作物由真菌(如半知菌、多子囊菌)引起的病害有防治效果。目前，多菌灵残留检测主要是运用高效液相色谱法及液质联用等进行定性和定量的分析。这些方法对实验仪器设备要求高，操作繁琐，对操作人员的专业知识要求高，费时费力。因此建立一种准确可靠又快速方便的检测食品中多菌灵的分析方法是非常必要的。本实用新型拟发明一种基于小分子物质多菌灵偶联蛋白质后而具有抗原性的免疫学检测方法，采取免疫学竞争法的原理，结合胶体金(或乳胶颗粒)标记技术和免疫层析法设计的一种快速检测试剂，可快速特异地检测大米、小麦、黄瓜、苹果、梨等蔬果样品中的多菌灵。根据检测卡样品检测线(T)和质控线(C)的有无显色来判定样品中的多菌灵含量。反应是利用多菌灵蛋白质偶联物抗原性而建立的一种检测方法，具有特异性强的优点，可避免其它检测方法的假阳性导致的误检问题。同时检测卡操作简单快速，无需特殊的仪器设备，适合现场操作。由于样本量需要少、简便快速，适用于大量样本的筛查。结果准确，灵敏度高，准确率大。
发明内容本实用新型的目的在于提供一种能检测多菌灵的检测器具，直接应用免疫学的方法检测大米、小麦、黄瓜、苹果、梨等蔬果样品中多菌灵的含量，克服现有色谱法检测的操作繁琐等缺点，建立基于免疫学特异性的检测方法。本实用新型的技术方案:一种多菌灵快速检测卡，其为在长条扁平薄壳状的检测卡外壳I中设置测试条2，检测卡外壳表面有检测窗孔3和加样孔4 ;测试条2是由支承背板5上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫8、胶体金(或乳胶颗粒)膜7、硝酸纤维素膜6、和吸水膜9所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，支承背板一端叠置粘贴吸水膜9，另一端叠置粘贴样品垫8，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金(或乳胶颗粒)膜7 ;胶体金(或乳胶颗粒)膜为含抗多菌灵抗体胶体金(或乳胶颗粒)标记的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是:含多菌灵蛋白质偶联物的检测带10，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带11，测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。本实用新型的有益效果:本实用新型的优点是能检测大米、小麦、黄瓜、苹果、梨等蔬果样品中含有的多菌灵，易于制备且节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。
图1多菌灵快速检测卡外壳及测试条在外壳内的安置图。1、外壳，2、测试条，3、检测窗孔，4、加样孔，5、支承背板。图2检测试条的硝酸玻璃纤维膜上显示印迹示意图。6、硝酸纤维素膜，10、检测带，11、质控带。图3多菌灵快速检测卡的检测试条结构示意图。5、支承背板，6、硝酸纤维素膜，7、胶体金(或乳胶颗粒)膜，8、样品垫，9、吸水膜。
具体实施方式
本实用新型结合具体实施例参见附图进一步说明如下:实施例1一种多菌灵快速检测卡，它是在检测卡外壳I中设置测试条2，检测卡外壳I的结构及测试条2的设置参见附图1，检测卡外壳I为长条扁平薄壳状外壳，长70_，宽20_，厚5mm,薄壳壁厚Imm,由工程塑料制成。检测卡外壳I由壳盖与壳座两半联接构成，在检测卡外壳I壳盖上有检测窗孔3和加样孔4。测试条2放置在检测卡外壳I的壳座内。测试条2是多层结构的窄条薄片，片长约60mm,片宽约4mm,厚度约2.5mm。测试条2是多层结构:底层是支承背板5,为聚氯乙烯塑料薄片，厚约0.5mm,长60mm,宽4mm ;支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，硝酸纤维素膜厚0.5mm,长20_25mm，宽4mm。硝酸纤维素膜6上有二条间隔开的横向显示印迹带，参见附图2，二条显示印迹带中，一条是检测带10，含多菌灵蛋白质偶联物；另一条是质控带11，含抗兔抗体或抗鼠抗体。支承背板5—端部上叠置粘贴吸水膜9，支承背板5另一端部上叠置粘贴样品垫8，吸水膜9内端与样品垫8内端各自分别与硝酸纤维素膜6 —端搭接，在样品垫8与硝酸纤维素膜6的搭接部，两者之问夹置粘贴一段胶体金(或乳胶颗粒)膜7，胶体金(或乳胶颗粒)膜7是含抗多菌灵抗体胶体金(或乳胶颗粒)标记物的玻璃纤维膜。胶体金(或乳胶颗粒)膜7厚0.5-0.8mm,长5臟，宽4臟。样品塾8厚0.5-0.8mm’长2Ctam,宽4mm。吸水膜9厚0.5-0.8mm’长16_2Ctam,宽4mm。胶体金(或乳胶颗粒)膜7、样品垫8及吸水膜9与硝酸纤维素膜搭接长度为l_2mm。吸水膜9材料是吸水纸，样品垫8材料是吸水玻璃纤维膜。本实用新型多菌灵检测卡用于检测大米、小麦、黄瓜、苹果、梨等蔬果样品中的多茵灵的检测。实施例2样品的处理方法如下:称取50.0g切碎、混匀的样品，加50ml甲醇振摇0.5h，用布氏漏斗抽滤，容器和滤器用甲醇洗涤两次，每次15_20ml，抽干后，滤液移入烧杯中，抽滤瓶用约IOmL水洗涤，洗液并入滤液内，在水浴上用空气流吹去部分甲醇后，移入分液漏斗中，加30mL氯化钠溶液(100g/L)，用石油醚振摇提取二次，每次25mL，弃去石油醚，加盐酸酸化至pH为1_2 (用pH试纸)，用二氯甲烷提取两次，每次25mL，合并二氯甲烷提取液，用25mL水洗涤一次，分出二氯甲烷层，水洗涤液合并入水层，留作多菌灵测定用。使用多菌灵快速检测卡进行检测时，先将待检测的样品液从加样孔4中滴注入多菌灵快速检测卡的样品垫8上，由于虹吸作用原理，带动待检测的样品液及胶体金(或乳胶颗粒)膜7所含的抗多菌灵抗体胶体金(或乳胶颗粒)标记物一起向硝酸纤维素膜6扩散，5-10分钟内观察结果。检测卡的主要反应是免疫学的抗原和抗体反应，在硝酸纤维素膜上迁移的胶体金(或乳胶颗粒)标记的抗体，在测试带上分别与含多菌灵蛋白质偶联物，以及质控带抗兔抗体或抗鼠抗体反应，形成棕红色条带。若样品中有待检多菌灵存在，当样品加入后即与抗体发生反应，而不会与检测带所含的多菌灵蛋白质偶联物反应，从而不显色。主要反应的结果有以下3种情况:1、当检测带10和质控带11同时显现棕红色印迹带，表示检测结果为阴性，说明被检测样品中多菌灵含量未超标。2、当检测带10不显示颜色，只有质控带11显现棕红色印迹，检测结果为阳性，说明被检测样品中多菌灵含量超标。3、当检测带10和质控带12均不显色，则表明检测试条已失效。
权利要求1.一种多菌灵快速检测卡，其特征在于:在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(I)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔⑷；测试条(2)是由支承背板(5)上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫(8)、胶体金或乳胶颗粒膜(7)、硝酸纤维素膜￠)、和吸水膜(9)所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜￠)，支承背板一端叠置粘贴吸水膜(9)，另一端叠置粘贴样品垫(8)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金或乳胶颗粒膜(7)；胶体金或乳胶颗粒膜为含抗多菌灵抗体胶体金或乳胶颗粒标记的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是:含多菌灵蛋白质偶联物的检测带(10)，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带(11)，测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗 孔。
专利摘要一种多菌灵快速检测卡，属于多菌灵检测技术领域。本实用新型多菌灵快速检测卡外壳内有测试条，由支承背板上依次粘贴样品垫、胶体金(或乳胶颗粒)膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成；胶体金(或乳胶颗粒)膜为含抗多菌灵抗体胶体金(或乳胶颗粒)标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜横向上有两条检测带，一条为含多菌灵蛋白质偶联物的检测带，另一条为含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本实用新型优点是应用免疫学的方法直接检测大米、小麦、黄瓜、苹果、梨等蔬果样品的多菌灵残留量。本实用新型多菌灵快速检测卡易于制备，使用方便快速，结果准确。
文档编号G01N33/558GK203037655SQ20122038345
公开日2013年7月3日 申请日期2012年7月27日 优先权日2012年7月27日
发明者周坚, 吴文晔, 向方 申请人:长沙安迪生物科技有限公司