含有溶血磷脂酶抑制剂的血液收集装置制造方法

含有溶血磷脂酶抑制剂的血液收集装置制造方法
【专利摘要】公开了用于收集和稳定全血或其成分的收集装置，其包括第一端和第二端，以及至少一个限定存储器的内壁，其中存储器含有包括溶血磷酯酶（LysoPLA）抑制剂的稳定剂。还公开了制备和使用该装置的方法。
【专利说明】含有溶血磷脂酶抑制剂的血液收集装置
[0001]相关申请的交叉参考
[0002]本申请要求2011年3月4日提交的美国临时专利申请N0.61/449，337的提交日权益，在此按引用将其公开内容引入本文中作为参考。
[0003]发明背景
[0004]糖尿病是失调代谢的综合症，通常是由于遗传和环境因素的结合引起的，导致异常的高血糖水平(高血糖症)。血糖水平通过体内的多种化学物质和激素的复杂相互作用来控制，包括在胰腺的β细胞中制得的激素胰岛素。糖尿病指的是由于体内缺乏胰岛素分泌或胰岛素作用导致高血糖水平的一组疾病。
[0005]由于减少的胰岛素产生(I型)或对其作用的抵抗(2型和妊娠性)，产生了糖尿病。两种情况都导致高血糖症，其很大程度上引起糖尿病的急性信号，即过量的尿液产生，导致补偿性口渴和增加的流体摄入，视力模糊，无法解释的体重减轻，嗜睡和能量代谢的改变。
[0006]通过注射器、胰岛素泵或胰岛素笔的注射来传送胰岛素，这是I型糖尿病的基础治疗。2型糖尿病通过饮食处理、锻炼、药物和胰岛素补充来控制。所有形式的糖尿病都已经是可治疗的，因为胰岛素在医学上是可获得的，但仍然存在不能治愈的问题。
[0007]根据世界卫生组织在2000年的报告，全世界至少有171百万人或2.8%的人群患有糖尿病。然而，其发病率快速递增，并且估计到2030年，这一数字将几乎翻倍。糖尿病在全世界发生，但在更发达的国家中更为常见(尤其是2型)。然而，预计最大的发病率增加发生在亚洲和非洲，其中大部分病人将很可能在2030年之前被发现。
[0008]已经报道了胰高血糖素-样肽(GLP-1)、胃抑制肽(GIP)、胰高血糖素和饥饿素(ghrelin)作为代谢疾病(如，糖尿病)的肽生物标记物。体内的GLP-1的主要来源发现在肠道中。通常，循环中正常的GLP-1血液浓度在3-85皮摩尔范围内。GLP-1具有几个生理学特性，使其成为加强观察的潜在糖尿病治疗的主题。Gautier等，Diabetes Met.31:233-42(2005)。已知GLP-1提高胰腺的胰岛素分泌，降低胰腺的胰高血糖素分泌，增加β细胞质量和胰岛素基因表达，抑制胃中的酸分泌和胃排空，以及通过增加饱腹感降低食物摄入。Baggio 等，J.Gastroenterol.132:2131-57 (2007)。然而，一旦在循环中，已经报道了 由于由包括二肽酰肽酶(DPP) -1V的蛋白酶引起的蛋白水解的分解作用，GLP-1呈现出约1.5-5分钟的短生物半衰期(Hui 等，Eur.J.Endocrinol.146:863-9 (2002))。
[0009]GIP 的活性形式是由序列 YAEGTFISDYSIAMDKIHQQDFVNWLLAQKGK KNDKHNITGQ 表示的42个氨基酸的多肽(“GIP(1_42)”)。GIP(1_42)通过K细胞合成，K细胞是在胃肠道的十二指肠和空肠的粘膜中发现的。认为GIP(1_42)通过涉及胰腺β细胞上的GIP和7跨膜GIP(1_42)之间的相互作用的机理诱导胰岛素分泌。血浆中正常的GIP(1_42)禁食浓度为约6-12pmol/L，而正常的非禁食浓度为约80-300pmol/L。已经报道了 GIP(1_42)在循环中呈现出约5分钟的半衰期。
[0010]胰高血糖素，29个氨基酸的肽，涉及碳水化合物代谢。通过胰腺产生，当血液中的葡萄糖水平低时(低血糖症)，释放。其结合肝细胞(肝实质细胞)上的受体，引起肝将存储的糖原转化成葡萄糖并释放，然后将葡萄糖释放至血流中。随着这些存储耗尽，然后糖原刺激肝脏中的其他葡萄糖的合成。因此，胰高血糖素的作用与胰岛素的作用是相对的，其命令体内的细胞从血液中获取葡萄糖。胰高血糖素还通过称为脂解作用的过程调节葡萄糖的生产速率。通常，循环中正常的胰高血糖素血液浓度为11-17皮摩尔。一旦在循环中，胰高血糖素具有约8-18分钟的半衰期。
[0011]饥饿素是主要通过衬在人胃基底的P/D1细胞和刺激食欲的胰腺的ε细胞产生的激素。通常，正常的血液浓度也是皮摩尔范围的。饥饿素是具有序列nh2-gssflspehqrvqqrKESKKPPAKLQPR-C00H的28个氨基酸的肽。这种肽的生物活性形式之一，称为酰化饥饿素，在Ser3上含有η-辛酰基(B卩，-CH3 (CH2) 6C00_)。这种肽发挥出内分泌作用，如刺激脑垂体释放生长激素(GH)，以及各种生理作用，如由于食欲刺激作用和增加的食物摄入，诱导肥胖(脂肪组织增加)和体重增加，以及刺激胃酸分泌和运动。Kojima等，Trends Endocrinol.Metab.12:118-122 (2001) ;Kojima 等，Physiol.Rev.85:495-532 (2005)。因此，除了糖尿病，酰化饥饿素是已知的相关病症的代谢生物标记物，所述病症如节食引起的体重减轻和禁食。另一种形式的饥饿素肽称为脱酰基饥饿素，其是代谢上无活性的形式，具有其自身的功能，包括调节细胞增殖(Baldanzi 等，J.Cell Biol.159:1029-37 (2002) ;Ariyasu 等，Endocrinol.2005:355-64 (2005))和脂肪生成(Muccioli 等，Eur.J.Pharmacol.498:27-35(2004))。正常的饥饿素(包括活性和无活性形式)血浆浓度在约300至约700pg/ml的范围内(或约0.08至约0.19nM或约0.09至约0.19fmol/y I )，并且随时间波动。饥饿素的主要循环形式是脱酸基饥饿素[Hosoda 等,Biochem.Biophys.Res.Comm.279:909-13 (2000)],并且因此这个含量的大部分不是更准确的代谢生物标记物的形式。一旦在循环中，饥饿素具有约30分钟的半衰期。
[0012]例如，Yi等，J.Proteome Res.6 (5): 1768-819 (2007)，报道了在样品收集和操作的第一分钟内发生了由内在的蛋白酶引起的血清和血浆蛋白的蛋白水解的分解作用(其表明是快速的离体蛋白水解的分解作用)。在一篇随后的出版物中，Yi等，J.ProteomeRes.7(12):5112-8 (2008)，报道了尽管由于蛋白组学技术变得越来越强大和越来越广泛利用，血液流体中疾病标记物的发现持续加快，但将这些发现转变成临床实用，成功的特别少，使得对这种转变的障碍的理解产生了很大兴趣。除了 GLP-1、GIP、胰高血糖素和饥饿素(并且特别是其生物活性形式)在血浆中的短半衰期和相当小的浓度以外，由于预分析的可变性，引起了复杂性，尤其是在血液收集和早期样品操作过程中。Yi (2008)还报道了在一些肽生物标记物的情况中，蛋白水解的分解作用在几秒钟内发生。
[0013]发明概述
[0014]饥饿素含有肽主链和含有8-碳酯基的侧链，其分别对人血浆中存在的内源性蛋白酶和酯酶敏感。如工作实施例中所示， 申请人:已经发现了通过包含溶血磷脂酶(LysoPLA)抑制剂(与蛋白酶或脂酶的抑制剂相对)，能更有效地稳定所收集的血液或流体成分(例如，血清或血浆)样本中的饥饿素。实际上， 申请人:的数据表明在体外，另外存在的脂酶抑制剂减弱或降低了饥饿素的稳定性。除了饥饿素的侧链是“酯”基的事实以外，这些发现是令人惊讶的并且是出人预料的，尤其是考虑到在胃和肠中检测到LysoPLA活性，但在血浆中未检测到的报道。因此，为了进行可靠的临床测试，如生物标记(如，饥饿素)的测量，本发明提供了血液及其成分相对较长时间的储存稳定性。
[0015]因此，本发明的第一个方面涉及用于收集和稳定全血或其成分的收集装置，其包括第一端和第二端以及至少一个限定存储器的内壁，其中存储器含有包括溶血磷酯酶(LysoPLA)抑制剂的稳定剂。在一些实施方案中，稳定剂还包括通常存在于血液中并分解代谢疾病诊断标记物的另一种酶的至少一种抑制剂。这些酶包括酯酶和蛋白酶。因此，在其他实施方案中，血液收集装置还可以包括酯酶抑制剂，如丁基胆碱酯酶(BChE)或乙酰基胆碱酯酶(AChE)抑制剂，和/或蛋白酶的抑制剂(例如，丝氨酸蛋白酶抑制剂、外肽酶抑制剂、二肽酰肽酶抑制剂，及其两种或多种的组合)。
[0016]还提供了制造和使用用于收集和存储全血或其成分的装置的方法。
[0017]本发明的再一个方面涉及一种用于诊断疾病或监控患病(如，代谢疾病(例如，糖尿病))个体治疗的方法，包括测量随着时间(或至少一个约定的时间或时间间隔)在使用本发明的血液收集装置从病人收集的血液样品或其成分中的一种或多种疾病标记物的存在或含量，包括生物(代谢)活性的饥饿素。在一些实施方案中，该方法还包括测量至少一种选自胰高血糖素、GIP、饥饿素和GLP-1 (其包括GLP-1-(7-36) NH2和GLP-1_(7_37))，及其两种或多种组合的其他代谢疾病标记物。
[0018]本发明的再一个方面涉及用于监控已经给予前药的个体中含有脂族酯侧基(例如，酰基基团)的前药的血液水平的方法，其包括使用本发明的血液收集装置从病人收集血样，和测量样品或其成分中的前药和/或活性代谢物的存在或含量。可以测量前药和前药的活性代谢物的存在或含量。可以超过一次，如以预定的时间间隔，进行前药和/或代谢物的血液水平的测量。
[0019]附图简述
[0020]图1是本发明的 典型血液收集装置的透视图。
[0021]图2是展示出四个不同血液收集管中30hr内的酰基-饥饿素稳定性比较的图，所述四个管子含有:1) LysoPLA抑制剂甲基花生四烯酸氟代膦酸酯(MAFP)、EDTA、酯酶抑制剂、他克林和蛋白酶抑制剂 L-苏-异亮氨酰噻唑烧(L-threo-1soleucyl thiazolidide)、贝他定和亮肽素(本发明的稳定剂“ISA”，图中用▲表示)；2)另一种本发明的稳定剂，其包括抗凝剂EDTA和MAFP(在图中用χ表示);3)EDTA以及酯酶抑制剂和蛋白酶抑制剂(比较稳定剂“CSA”，在图中用?表示);和4)单独的EDTA (图中用 表示)，接着用lpg/uL酰基-饥饿素强化(spiking)。
[0022]图3是显示出从禁食人患者收集的并且存储在强化(?)和未强化( ) EDTA管以及含有本发明的代表性稳定剂(包括MAFP作为LysoPLA抑制剂)的收集管(强化(▲)和未强化(χ ))中的血液样品中随着时间的饥饿素稳定性图。
[0023]发明详述
[0024]本发明的收集装置用于收集和稳定全血或其成分，如红细胞浓缩物、血小板浓缩物、白细胞浓缩物和血液流体成分，包括血浆和血清。
[0025]宽泛地，本发明的血液样品收集装置可以涵盖包括管的任何收集装置，所述管如试管和离心管；闭合系统血液收集装置，如收集袋；注射器，尤其是预填充注射器；导管；微量滴定管和其他多孔平板；矩阵；管道系统；实验室容器，如烧瓶、旋转烧瓶、滚瓶、小瓶、显微镜载玻片、显微镜载玻片组件、盖玻片、膜以及多孔基质和组件；移液管和移液管尖；组织和其他生物样品收集容器；和适用于容纳生物样品的任何其他容器，以及涉及转移样品的容器和元件。几种这样的装置的实例和说明公开于共有的Stevens等的U.S.专利7，309，468 中。
[0026]图1，U.S.专利7，309，468中也有说明，显示了本发明中有用的典型血液收集装置10，其包括限定了内室或存储器14的容器12。在所示的实施方案中，容器12是具有侧壁
16、封闭底端18和开口上端20的中空管。任选，在容器室14内提供了分离构件13。分离构件13用于帮助分离血液样品的成分，例如，通过离心来分离。设定容器12的大小，用于收集合适体积的血液。在需要无菌产品的情况中，用于覆盖开口端20以闭合容器的关闭部件22是必需的。在一些实施方案中，将管子构造成适用于螺帽。然而，在其中排空管子的实施方案中，如在其中存储器含有BChE抑制剂但不含有蛋白酶抑制剂的情况中，通常使用密封连接的弹性塞子来含有所需存储时间段过程中的真空。优选，关闭部件22形成能够有效封闭容器12并将生物样品保留在室14内的封口。关闭部件22可以是各种形式中的一种，包括但不限于，橡胶关闭部件、HEM0GUARD?关闭部件、金属封口、金属镶边的橡胶封口以及不同聚合物和设计的封口。保护性护罩24可以盖在关闭部件22上。
[0027]容器12可以由适用于实验室容器的任何材料制得，包括，例如，塑料(例如，聚烯烃、聚酰胺、聚酯、有机硅、聚氨酯、环氧树脂、丙烯酸树脂、聚丙烯酸酯、聚酯、聚砜、聚甲基丙烯酰胺、PEEK、聚酰亚胺和含氟聚合物)和玻璃产品，包括石英玻璃。优选，容器12是透明的。适用于容器12的透明热塑性材料的实例包括聚碳酸酯、聚乙烯、聚丙烯和聚乙二醇对苯二甲酸酯。塑料材料可以是不透氧材料或可以含有不透氧或半渗透层。或者，容器12可以由透水透气的塑料材料制得。
[0028]选择室14中的压力，以将约定体积的生物样品吸入室14中。优选，关闭部件22由能够维持大气压和低于大气的压力之间的内压差的弹性材料制得。如本领域所知的，关闭部件22使得通过针26或其他套管可以刺穿，以将生物样品引入容器12中。优选，关闭部件22是可再次密封的。用于关闭部件22的合适材料包括，例如，硅酮橡胶、天然橡胶、丁苯橡胶、乙烯-丙烯共聚物和聚氯丁烯。
[0029]容器12的合适实例包括单壁和多层管。更特定的合适容器12的实例公开于U.S.专利 5，860，937 中。
[0030]容器12还可以含有如凝胶这样的分离器、机械分离器或其他类型的分离构件(例如，滤纸等)。分离器用于血浆制备，尤其是用于从人或动物全血分离出血浆。凝胶理想地是触变聚合凝胶制剂。凝胶可以是均聚物或共聚物，并且可以包括基于硅酮的凝胶，如，例如，聚硅氧烷，或基于有机烃的凝胶，如，例如，聚丙烯酸、聚酯、聚烯烃、氧化的顺聚丁二烯、聚丁烯、环氧化大豆油和氯代烃的混合物、二酸和丙二醇的共聚物、氢化环戊二烯以及α -烯烃与二烷基马来酸盐的共聚物。可以用于本发明中的机械分离器的实例描述于U.S.专利6，516，953 ;6，406，671 ;6，409，528 ;和 6，497，325 中。
[0031]容器12还适用于从全血样品的较重相中离心分离出淋巴细胞和单核细胞。在这样的实施方案中，装置还可以含有液体密度梯度介质和用于防止离心前液体密度梯度介质与血样混合的部件。合适的淋巴细胞/单核细胞收集管的实例公开于U.S.专利5，053，134中。
[0032]除了图1中所示的实施方案以外，适用于本发明的其他可购得的血液收集管包括以下全部由 Becton, Dickinson and Company, Franklin Lakes, N.J.销售的产品，所有
注册和商标属于Becton, Dickinson and Company: VACUTAINER?血液管(例如，目录编号 367650-1、367661、6405、6385、6564、367653、367665、367658、367669、6450-8、6535-37和 367662) ； VACUTAINER? K2EDTA 管(例如，目录编号 367841-2,367856 和 367861)；
VACUTAINER? PST 管(例如，目录编号 367793-4、6698、6595 和 6672); VACUTAINER?CPT管(例如，目录编号362753和362760-1) ； VACUTAINER? SST管(例如，目录编号367782-89,6509-17 和 6590-92)；和 VACUTAINER? ACD 管(例如，目录编号 367756、364012和4816),以及具有BD Microgard?关闭部件的非排空BD Microtainer?管(例如，365987、365965 和 365974)，或常规BD Microtainer?管(例如，365956、365957、365958、365959、365971和365973)。许多商业血液收集管具有标准体积，通常为250微升至并且包括约10.0ml，在一些情况中，高达16ml。典型的体积包括250、400和500微升，以及 2.0ml >3.5ml、4.0ml >5.0ml、8.0ml、8.5ml 和 10.0ml。
[0033]在其他实施方案中，装置可以包括整合在测试筒内的存储器，存储器能够容纳2至200微升体积范围的全血，更优选为50-150微升。这样的筒例如以商品名1-STAT Pointof Care System 由 Abbott Laboratories (Abbott Park, Illinois)销售，并且与能够与筒接口的手持分析仪一起使用。本发明可以使用的这样的筒和手持分析仪的实例各自包括
1-STAT CHEM8+筒和 1-STAT? I 手持分析仪。例如，在 U.S.专利 5，096，669、5，112，455、5，821，399,5, 628，961,7, 419，821,6, 750，053 和 US D337, 164 中教导了这样的装置。
[0034]溶血磷脂酶(LysoPLA)是水解溶血磷脂(LysoPL)并且特异性地在羧酸酯键水解的酶，其是磷脂代谢中去污剂-样中间体，并且在许多生理和病理过程中起着重要作用。溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)，是细胞膜的正常组分，并且认为其作为脂质信使，传导从膜受体开始的信号，是LysoPLA的内源性底物。人LysoPLA的氨基酸和相应核酸序列是本领域已知的。参见，例如，U.S.专利 5，858，756 ;6，004，792 和 7，294，496。根据 U.S.专利 7，294，496中呈现的一点证据，LysoPLA mRNA广泛分布于许多组织中，心脏、胎盘和骨骼肌是最大量的组织，接着是肝脏、胰腺、肾脏、脑和肺，在另一点证据中(其包含来自更多组织的信使)，观察到相似的模式，尽管一些组织的相对强度有变化，因为胎盘和睾丸是hLysoPLA的最大量来源，接着是肾上腺和唾液腺、肝脏、心脏、骨骼肌和气管、结肠。还报道了溶血磷脂酶以多种异构形式出现。
[0035]适用于本发明中的LysoPLA抑制剂的代表性实例包括乙基辛基氟磷酸酯、异丙基十二烷基氟磷酸酯、η-十二烷基-苯并二氧杂磷杂苯2-氧化物、棕榈酰肉碱、溴烯醇内酯、棕榈酰三氟甲基酮和甲基花生四烯酰氟磷酸酯(MAFP)。其他抑制剂可以使用本领域已知的试验方法来鉴定。参见，例如，U.S.专利7，294，496。
[0036]LysoPLA抑制剂以有效量存在于收集装直中，以稳定生物样品中可能存在的各种内源性蛋白(例如，饥饿素)，以及对于生物活性需要脂族酯基的其他蛋白质和肽。因此，除了饥饿素(饥饿素是代谢疾病(如，糖尿病)的标记物)以外，收集装置提供了其他神经肽的稳定。LysoPLA抑制剂通过抑制脂族酯基的分裂来起作用。待包括在血液收集装置中的LysoPLA抑制剂的含量的测定取决于几个因素，包括效力、水中的溶解度、血液收集装置的体积以及非特异性相互作用的性质和程度(例如，由于血液中其他蛋白的存在，如血清白蛋白)。因此，对于本发明的目的，根据浓度范围(从其可以容易地计算出抑制剂的实际含量)来方便地表示LysoPLA抑制剂的含量(和可能存在的其他稳定剂的含量)。LysoPLA抑制剂的浓度通常为约0.1 μ M至约10mM，并且在一些实施方案中，约IOuM至约ImM，并且在一些实施方案中，约IOOum至约ImM (即，10，000，OOOnM)。也考虑了这些范围内的所有子范围。结合本文中公开的所有浓度值使用的术语“约”指的是50%的可变性(加/减值)。
[0037]尽管不打算被理论束缚，但本发明的发明人认为LysoPLA抑制剂可以提供双重益处，因为在保护脂族酯基被LysoPLA分裂中，通常在血液中发现的内在蛋白酶在空间上被阻碍了肽的氨基酸链降解。根据如分析物的性质、试验形式和工作流(即，分析前所收集的血液样品的操作和存储)这些因素，本发明的血液收集装置可以提供几小时乃至一天或数天的生化标记物(如，饥饿素)的稳定性，长于不含LysoPLA抑制剂的相似装置。
[0038]在一些实施方案中，本发明的血液收集容器可以包括至少一种其他稳定剂，如酯酶的抑制剂，例如，羧基酯酶，如丁基胆碱酯酶和乙酰基胆碱酯酶。这些稳定剂可以给对于生物活性需要脂族酯基的蛋白和肽提供对抗离体降解的额外保护。因此，除了饥饿素(其是代谢疾病(如糖尿病)的标记物)以外，酯酶抑制剂可以提供增强的其他神经肽的稳定。然而，在一些实施方案中，稳定剂(和作为整体的装置)不包括酯酶抑制剂。
[0039]丁基胆碱酯酶(BChE) (E.C.3.1.1.8)，也称为血清或血浆胆碱酯酶，认为在身体代谢可可碱和其他药物(如，琥珀酰胆碱和阿司匹林)的能力中起着作用。参见，Lockridge,“Genetic Variants of Human Serum Butylcholinesterase influence the metabolismof the muscle relaxant succinylcholine (人血清丁基胆碱酯酶的遗传变体影响肌肉松弛剂琥拍酰胆碱的代谢)”，见，Kalow (编辑)Pharmacogenetics of Drug Metabolism (药物代谢的药物遗传学)New York:Pergamon Press, Inc, pp.15-50。BChE 通常以约 5mg/l(或约5U/ml)的含量存在于人血浆中。本发明中有用的BChE抑制剂具有不高于约0.5 μ M(500nM)Ki的Ki值，或在其他实施方案中，不高于约0.05 μ M (50ηΜ)的Ki，或在其他实施方案中，不高于约0.010 μ M (IOnM)的Ki (并且包括其中的所有子范围)。Ki是动力学变量(与物理特性相对，如分子量、熔点和沸点等)并且因此，可以接收相对宽的变化，尤其是取决于用于测定该数值的方法。 因此，本文中结合Ki值使用的术语“约”指的是50%的可变性(即，加/减值)。
[0040]本发明中有用的BChE抑制剂是化合物9-氨基-1，2，3，4_四氢吖啶，也称为他克林(及其衍生物)。参见，U.S.专利4，816，456。他克林是FDA批准用于阿尔茨海默病治疗的中心作用的胆碱酯酶抑制剂。其由Sciele Pharma以商品名COGNEX销售。U.S.专利4，754，050中教导了适用于本发明中的他克林衍生物的代表性实例，如以下通式所示:
[0041]
【权利要求】
1.一种用于收集和稳定全血或其成分的收集装置，其包括第一端和第二端，以及至少一个限定存储器的内壁，其中存储器含有包括溶血磷酯酶(LysoPLA)抑制剂的稳定剂。
2.权利要求1的装置，其是管子。
3.权利要求2的装置，其中管子进一步包括通过针可以刺穿以将血液提供给存储器的关闭部件。
4.权利要求3的装置，其中管子是至少部分排空的管子。
5.权利要求4的装置，其中管子是无菌的。
6.权利要求1-5任一项的装置，其中内壁包括塑料或玻璃。
7.权利要求2-5任一项的装置，其中存储器包括分离元件。
8.权利要求1-7任一项的装置，其中LysoPLA抑制剂是甲基花生四烯酸氟代膦酸酯(MAFP)0
9.权利要求1-7任一项的装置，其中LysoPLA抑制剂选自溴烯醇内酯、乙基辛基氟磷酸酯、异丙基十二烧基氟磷酸酯、η-十二烧基-苯并二氧杂磷杂苯2-氧化物、溴烯醇内酯、棕榈酰三氟甲基酮和棕榈酰肉碱。
10.权利要求1-7任一项的装置，其中稳定剂进一步包含丁基胆碱酯酶(BChE)抑制剂、乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂，或其组合。
11.权利要求10的装置，其中BChE抑制剂是他克林，或其衍生物。
12.权利要求1-11任一项的装置，其中稳定剂进一步包含蛋白酶抑制剂。
13.权利要求12的装置，其中蛋白酶抑制剂是丝氨酸蛋白酶的抑制剂、内肽酶的抑制齐U、外肽酶的抑制剂、二肽酰肽酶的抑制剂，或其两种或多种的组合。
14.权利要求1-13任一项的装置，其中稳定剂是冻干的。
15.权利要求1-14任一项的装置，进一步包含抗凝剂。
16.权利要求15的装置，其中抗凝剂是EDTA或其盐，或肝素。
17.权利要求16的装置，其中将抗凝剂涂覆或喷干在内壁的至少一部分上。
18.权利要求1-17任一项的装置，其中稳定剂不包括酯酶抑制剂。
19.一种用于收集和稳定全血或其成分的方法，包括将来自病人的血液收集至权利要求1-18任一项的装置中。
20.权利要求19的方法，其中血液或其成分获自糖尿病病人并且成分是饥饿素、胰高血糖素、GIP(1_42)、GLP-1- (7-36) NH2, GLP-1- (7-37)，及其两种或多种的组合。
21.权利要求19或20的方法，其中血液成分是血浆。
22.一种用于诊断代谢疾病或监控患有代谢疾病的病人的治疗的方法，包括在至少一个预定时间测量血液样品或其成分中饥饿素的存在或含量，其中将来自病人的血液收集至权利要求1-18任一项的血液收集装置中，其中测量的含量高于对照表示代谢疾病的存在，或治疗的功效。
23.一种用于检测血液或其成分中前药和/或其活性代谢物的存在或含量的方法，包括检测来自已经给药前药的病人的血液样品或其流体成分中带有脂族酯基的前药的存在或测量含量，其中将血液或其流体成分收集至权利要求1-18任一项的血液收集装置中，并且将检测的存在或测量的含量与对照相比。
【文档编号】G01N33/50GK103477224SQ201280015593
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2012年3月2日 优先权日:2011年3月4日
【发明者】D·克拉夫特, P·阿普特 申请人:贝克顿·迪金森公司