专利名称：一种辣椒制品中辣椒素含量快速比色测定方法
技术领域：
本发明属于食品分析检测技术领域，具体涉及一种辣椒制品中辣椒素含量快速比色测定方法。
背景技术：
随着大众日常消费辣椒制品量的不断增大，以及人们对不同辣度辣椒制品需求的变化，产品的辣度成为消费者选择辣椒制品的主要参考因素。所以，准确快速方便检测辣椒制品的辣度对于辣椒制品的生产和消费具有重要的意义和应用前景。辣椒制品辣度主要是由辣椒素含量决定的，通过测定辣椒素含量可以基本判断产品的辣度。目前国家标准中用于辣椒素含量检测的方法主要是高效液相色谱法，此法准确度高，但是成本高，耗时长，仪器设备投入大，对场地和操作人员要求苛刻，不方便，不能满足现场快速检测辣椒制品中辣椒素含量的需求。因此，在实际生产和生活中，急需建立一种操作简便易学、反应快速、测定较 准确、价格便宜、对环境和人员要求不高的辣度测定方法。到目前为止，国内外尚无相关的研究报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种辣椒制品中辣椒素含量快速比色测定方法，建立一种简便、快速、半定量的辣椒素检测方法。本发明所述的一种辣椒制品中辣椒素含量快速比色测定方法，通过以下步骤实现
(1)制备碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液分别配制浓度为O.lmol/L的碳酸钠溶液和1.Omol/L的磷钥酸-磷钨酸溶液，将碳酸钠溶液与磷钥酸-磷钨酸溶液按体积比30:1混合，即得碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液，浓度为1. Omol/L的磷钥酸-磷钨酸溶液的配制方法为称取IOOg钨酸钠和20g磷钥酸，加入60mL体积比浓度为85%的磷酸和700mL蒸懼水，煮沸2h,冷却后过滤,用蒸懼水定容至IOOOmL ；
(2)制作标准比色板采用浓度梯度0,0.02,0. 05,0. 08,0. 10,0. 20，0. 40，0. 60，0. 80，1. 00,2. 00mg/mL的辣椒素甲醇溶液，分别与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比I 3混合显色，根据反应后的颜色及对应的辣椒素浓度制作标准比色板；
(3)样品处理对于含有蛋白质的辣椒制品，首先将体积比浓度为65-75%的乙醇溶液与称取的含有蛋白质的辣椒制品，按50 mL lg的比例混合，在超声功率为80-120 ，温度45-55°C条件下处理35-45min以去除蛋白质,处理后反应物分层，分离去掉蛋白质后的辣椒制品，用甲醇与四氢呋喃1:1体积比混合液萃取其中的辣椒素10-20min，过滤后残渣再重复萃取一次，合并滤液并按每10_20g样品定容至IOOmL的比例定容，得待测辣椒素溶液；对于不含有蛋白质的辣椒制品，直接称取辣椒制品，用甲醇与四氢呋喃1:1体积比混合液萃取其中的辣椒素10_20min,过滤后残洛再重复萃取一次,合并滤液并按每5_10g样品定容至IOOmL的比例定容，得待测辣椒素溶液；
(4)将待测辣椒素溶液与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比1:3混合显色，通过对比标准比色板，得出辣椒素浓度。
上述方法步骤(2 )辣椒素甲醇溶液与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比1:3混合显色后，可利用测色仪测定显色后的L*、a*、b*值，记录对应的辣椒素浓度，将其带入Photoshop软件中制作出对应的颜色,从而制成标准比色板,步骤(4)相应用测色仪测定颜色，根据Λ L*和Λ b*值的变化得出辣椒素浓度。步骤(3 )所述不含有蛋白质的辣椒制品包括辣椒油树脂、辣椒素晶体以及辣椒油。本发明测定待测辣椒素溶液中辣椒素含量的范围是O. 02-2. 00 mg/mL，其中最低检出浓度为O. 02 mg/mL。加标对照试验中，本发明与高效液相色谱法所测结果的相对误差均在23%以下，最高为22. 84%，平均相对误差为11. 37%，RSD为18. 28%。实际应用中，测定一次需要用时50min，本发明测定辣椒素含量的相对误差在30%以内，其最大值为29. 82%，可以作为辣椒素含量的半定量测定。对于辣椒素含量超过2mg/mL的待测辣椒素溶液则需先按一定比例稀释，再进行测定。对于辣度的判断结果则与高效液相色谱法的判断结果完全一致。
本发明的优点是本发明方法简便易学、反应快速，测定一次只需要用时50min，测定较准确、价格便宜，对环境和人员要求不高，可以克服高效液相色谱法成本高、耗时长(3-4h)、仪器设备投入大、对场地和操作人员要求苛刻、不方便、不能满足现场快速测定辣椒制品中辣椒素含量的不足。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步描述。分别配制浓度为O. lmol/L的碳酸钠溶液和1. Omol/L的磷钥酸-磷钨酸溶液，将碳酸钠溶液与磷钥酸-磷钨酸溶液按体积比30:1混合，即得碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液，浓度为1. 0mol/L的磷钥酸-磷钨酸溶液的配制方法为称取IOOg钨酸钠和20g磷钥酸，加入60mL体积比浓度为85%的磷酸和700mL蒸馏水，煮沸2h，冷却后过滤，用蒸馏水定容至 IOOOmL ；
按发明内容所述方法制作标准比色板，0，0. 02,0. 05,0. 08,0. 10,0. 20,0. 40,0. 60，
0. 80，1. 00，2. 00mg/mL浓度梯度辣椒素甲醇溶液与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比1: 3混合显色后，用测色仪测定显色后的L*、a*、b*值，记录对应的辣椒素浓度，将其带入Photoshop软件中制作出对应的颜色,从而制成标准比色板。实施例1 :不含有蛋白质辣椒制品中辣椒素含量的测定。称取辣椒油树脂、辣椒素晶体以及辣椒油各10g，分别进行如下操作于IOOmL高型烧杯中，加入甲醇与四氢呋喃1:1体积比混合液40mL萃取辣椒素lOmin，过滤后残渣再重复萃取一次(IOmin)，合并滤液并定容至IOOmL,再与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比1: 3混合显色，通过对比标准比色板，进行颜色的感官评定，并测定色差仪数据AL*和Ab*值的变化得出结果。每个样品重复测定6次，计算平均值，与高效液相色谱法准确测定的辣椒制品中辣椒素进行比较得出辣椒油树脂、辣椒素晶体以及辣椒油中辣椒素含量测定相对误差分别为 4. 45%,5. 37% 和 14. 19%。本发明方法的精密度试验取辣椒素浓度为0.06mg/mL的辣椒素甲醇溶液，用本发明方法重复测定6次，通过与标准比色板的颜色对照，辣椒素含量分别为0. 05mg/mL, O. 05mg/mL, 0. 08mg/mL, 0. 08mg/mL, 0. 08mg/mL, 0. 05mg/mL,计算出其相对标准偏差RSD=O. 015。对于辣椒油树脂、辣椒素晶体以及辣椒油这类不含有蛋白质干扰的辣椒制品，本发明方法可以用作辣椒素含量的快速、半定量测定，其相对误差在15%以内，精密度RSD为O. 015。实施例2 :含有蛋白质辣椒制品中辣椒素含量的测定。将13种不同辣度含有蛋白质的辣椒制品各称取20g，分别进行如下操作首先 与1000 mL体积比浓度为70%的乙醇溶液混合，在超声功率为100w，温度50°C条件下处理40min以去除蛋白质，辣椒制品中蛋白质的去除率达到92. 00%，处理后反应物分层，分离去掉蛋白质后的辣椒制品，于IOOmL高型烧杯中，加入甲醇与四氢呋喃1:1体积比混合液40mL萃取辣椒素20min,过滤后残洛再重复萃取一次(20min),合并滤液并定容至IOOmL,再与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比1: 3混合显色，通过对比标准比色板，进行颜色的感官评定，并测定色差仪数据△!>和Ab*值的变化得出结果；根据测得的辣椒素含量，采用斯科维尔指数(Scoville Heat Units, SHU)法对辣椒制品的辣度进行评价。每个样品重复测定6次，计算平均值，与高效液相色谱法准确测定的辣椒制品中辣椒素进行比较，具体结果如表I所示
表I含有蛋白质辣椒制品中辣椒素含量的测定结果
权利要求
1.一种辣椒制品中辣椒素含量快速比色测定方法，其特征在于通过以下步骤实现 (1)制备碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液分别配制浓度为O.lmol/L的碳酸钠溶液和1. Omol/L的磷钥酸-磷钨酸溶液，将碳酸钠溶液与磷钥酸-磷钨酸溶液按体积比30:1混合，即得碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液，浓度为1. Omol/L的磷钥酸-磷钨酸溶液的配制方法为称取IOOg钨酸钠和20g磷钥酸，加入60mL体积比浓度为85%的磷酸和700mL蒸懼水，煮沸2h,冷却后过滤,用蒸懼水定容至IOOOmL ； (2)制作标准比色板采用浓度梯度0，0.02，0. 05，0. 08，0. 10，0. 20，0. 40，0. 60，0.80，1. 00,2. 00mg/mL的辣椒素甲醇溶液，分别与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比I 3混合显色，根据反应后的颜色及对应的辣椒素浓度制作标准比色板； (3)样品处理对于含有蛋白质的辣椒制品，首先将体积比浓度为65-75%的乙醇溶液与称取的含有蛋白质的辣椒制品，按50 mL lg的比例混合，在超声功率为80-120 ，温度45-55°C条件下处理35-45min以去除蛋白质,处理后反应物分层，分离去掉蛋白质后的辣椒制品，用甲醇与四氢呋喃1:1体积比混合液萃取其中的辣椒素10-20min，过滤后残渣再重复萃取一次，合并滤液并按每10_20g样品定容至IOOmL的比例定容，得待测辣椒素溶液；对于不含有蛋白质的辣椒制品，直接称取辣椒制品，用甲醇与四氢呋喃1:1体积比混合液萃取其中的辣椒素10_20min,过滤后残洛再重复萃取一次,合并滤液并按每5_10g样品定容至IOOmL的比例定容，得待测辣椒素溶液； (4)将待测辣椒素溶液与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比1:3混合显色，通过对比标准比色板，得出辣椒素浓度。
2.根据权利要求1所述的一种辣椒制品中辣椒素含量快速比色测定方法，其特征在于步骤(2)辣椒素甲醇溶液与碳酸钠-磷钨酸-磷钥酸显色液按体积比1: 3混合显色后，利用测色仪测定显色后的L*、a*、b*值,记录对应的辣椒素浓度,将其带入Photoshop软件中制作出对应的颜色，从而制成标准比色板，步骤(4)相应用测色仪测定颜色，根据AL*和Ab*值的变化得出辣椒素浓度。
3.根据权利要求1或2所述的一种辣椒制品中辣椒素含量快速比色测定方法，其特征在于步骤(3)所述不含有蛋白质的辣椒制品是指辣椒油树脂、辣椒素晶体或辣椒油。
全文摘要
一种辣椒制品中辣椒素含量快速比色测定方法，首先制备碳酸钠-磷钨酸-磷钼酸显色液，然后将不同浓度梯度辣椒素甲醇溶液与之混合显色，制作标准比色板，最后将待测辣椒素溶液与碳酸钠-磷钨酸-磷钼酸显色液混合显色，通过对比标准比色板，得出辣椒素浓度，测定待测辣椒素溶液中辣椒素含量的范围是0.02-2.00mg/mL。本发明方法简便易学、反应快速，测定一次只需要用时50min，测定较准确、价格便宜，对环境和人员要求不高，可以克服高效液相色谱法成本高、耗时长(3-4h)、仪器设备投入大、对场地和操作人员要求苛刻、不方便、不能满足现场快速测定辣椒制品中辣椒素含量的不足。
文档编号G01N21/29GK103018242SQ201310001798
公开日2013年4月3日 申请日期2013年1月5日 优先权日2013年1月5日
发明者阚建全, 宋家芯, 张甫生, 郑炯, 刘雄, 李帅 申请人:西南大学