专利名称：快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法
技术领域：
本发明涉及作物淀粉分析技术领域，尤其是一种快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法。
背景技术：
氣嗓\_Sorghum bicolor (L.) Moench]是世界上最古老的谷类作物之一,属禾本科(Gramineae)高粱族(Andropogoneae')高粱属isorghum、。高粱除作为粮食、饲料和能源作物外，也是酿酒工业的主要原料之一。高粱有粳性和糯性之分，不同高粱品种的直链淀粉、支链淀粉及总淀粉含量变异幅度较大，其籽粒淀粉含量及其直链淀粉和支链淀粉的比率与酿酒品质、产量有重要关系。同时，直链、支链淀粉的含量和比例也影响煮饭特性及食味，优良的酿酒型和食用品种选育在粮食生产及酿酒产业上均有重要意义。因此，选择一种快速、准确的淀粉测定方法十分必要。传统的淀粉含量测定方法有费林试剂滴定法，但其操作繁琐，不易掌握。Rose等对酸水解淀粉的方法和六种比色法测定糖的方法进行比较研究，认为酸解法结合蒽酮比色法是比较理想的方法；翁忠 岚对酸水解法进行改进，发明了 DNS比色法来测定酿酒高粱中的淀粉含量，并认为具有准确性高、实用性强的特点。然而，上述方法只能测定总淀粉含量，而不能将直链淀粉与支链淀粉的测定区分开来，而且测定过程中需要浓酸和有毒试剂，存在安全隐患。目前最常用的淀粉含量测定方法是旋光法测定粗淀粉含量，结合碘染色法(GB7648-87)测定直链淀粉含量，用两者之差间接得到支链淀粉含量，该方法需要配制不同的反应体系，工作量较大。范明顺等采用双波长分光光度法对高粱直链淀粉和支链淀粉含量测定方法进行了探讨，但两种淀粉在可见光范围内的吸收曲线随着浓度梯度的不同而变化，这就使得参比波长和测定波长处的吸光度不相等，造成较大偏差，并且作图法查找参比波长和测定波长也会产生较大误差。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法，它测定高粱籽粒中直链淀粉、支链淀粉和总淀粉的含量，而且准确度高，操作方便快捷，并且安全环保，以克服现有技术的不足。本发明是这样实现的:快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法，将直链淀粉和支链淀粉标准品溶液进行波长扫描，分别找出直链淀粉和支链淀粉标准品溶液的吸收峰波长；根据Lambert-Beer定律，通过绘制标准曲线的方式得到两种淀粉组分在吸收峰位置的摩尔吸光系数，联立方程组求解两种淀粉浓度的计算公式，用于快速批量测定；具体步骤如下:
(1)配制终浓度为0.001 (λ I mg/mL碘-淀粉显色反应体系，调节pH 3.0 5.0，显色10 30 min,以双光束可见-紫外分光光度计进行可见光范围内的波长扫描，根据两种淀粉溶液的吸收曲线，找出它们的吸收峰波长λ ! (500 560 nm)、λ 2 (580 700 nm)；
(2)按步骤(I)配置显色反应体系的方式，分别配制终浓度为O 0.04 mg/L的直链淀粉溶液的显色反应体系与终浓度为O 0.1 mg/L的支链淀粉溶液的显色反应体系，在波长入P λ 2处测定吸光度，以浓度C为横坐标，吸光度J为纵坐标绘制标准曲线，其斜率即为摩尔吸光系数kal、ka2、kbl、kb2,根据Lambert-Beer定律,联立二元一次方程组,求解得两种淀粉的C与J之间的计算公式为:
权利要求
1.种快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:将直链淀粉和支链淀粉标准品溶液进行波长扫描，分别找出直链淀粉和支链淀粉标准品溶液的吸收峰波长；根据Lambert-Beer定律，通过绘制标准曲线的方式得到两种淀粉组分在吸收峰位置的摩尔吸光系数，联立方程组求解两种淀粉浓度的计算公式，用于快速批量测定；具体步骤如下: (1)配制终浓度为0.001 (λ I mg/mL碘-淀粉显色反应体系，调节pH 3.0 5.0，显色10 30 min,以双光束可见-紫外分光光度计进行可见光范围内的波长扫描，根据两种淀粉溶液的吸收曲线，找出它们的吸收峰波长λ ! (500 560 nm)、λ 2 (580 700 nm)； (2)按步骤(I)配置显色反应体系的方式，分别配制终浓度为O 0.04 mg/L的直链淀粉溶液的显色反应体系与终浓度为O 0.1 mg/L的支链淀粉溶液的显色反应体系，在波长入P λ 2处测定吸光度，以浓度C为横坐标，吸光度J为纵坐标绘制标准曲线，其斜率即为摩尔吸光系数kal、ka2、kbl、kb2,根据Lambert-Beer定律,联立二元一次方程组,求解得两种淀粉的C与J之间的计算公式为:
2.据权利要求1所述的快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:所述的步骤(I)中，反应体系的pH为3.5 4.0，显色时间15 25 min，吸收峰波长λ 1=530 nm,λ 2=622 nm。
3.据权利要求1所述的快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:所述的步骤⑵中，摩尔吸光系数 kal=15.5770，ka2=30.1570，kbl=3.4924，kb2=2.0369，两种淀粉的 C 与J之间的关系式为:
4.据权利要求1所述的快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:所述的步骤(3)中，磨碎的高粱粉过60目筛，称取质量为90 110 mg高粱粉，高粱分散液浓度为0.9 1.1 mg/mL,取分散液体积为25 30 mL,加入的石油醚体积为10 15 mL,脱脂2次。
5.据权利要求1所述的快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:所述的步骤(4)中，取脱脂分散液的体积为5 mL，直链淀粉含量(％) =CiAi X 100%，支链淀粉含量=CjtM X 100%,总淀粉含量(％)=直链淀粉含量(％) +支链淀粉含量(％)，其中(1、分别为直链淀粉和支链淀粉的 测定浓度(mg/mL)，m为样品质量(g)。
全文摘要
本发明公开了一种快速测定高粱籽粒淀粉含量的方法，将直链淀粉和支链淀粉标准品溶液进行波长扫描，分别找出直链淀粉和支链淀粉标准品溶液的吸收峰波长；根据Lambert-Beer定律，通过绘制标准曲线的方式得到两种淀粉组分在吸收峰位置的摩尔吸光系数，联立方程组求解两种淀粉浓度的计算公式，用于快速批量测定。本发明采用比色法可同时测定直链淀粉、支链淀粉和总淀粉的含量，而且准确度高，方便快捷。解决了传统的淀粉测定方法每次只能测定直链淀粉含量或者总淀粉含量，而不能同时测定直链淀粉和支链淀粉含量问题；而且本发明建立的方法不使用浓硫酸、浓盐酸和有毒试剂，使之更加绿色环保、安全性高，成本低廉，使用效果理想。
文档编号G01N21/33GK103091273SQ201310029030
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月25日 优先权日2013年1月25日
发明者张明生, 李祥栋, 王洋 申请人:贵州大学