专利名称：单硝酸异山梨酯注射液中1,2-丙二醇的鉴别和含量测定方法
技术领域：
本发明属于药物分析领域，具体涉及单硝酸异山梨酯注射液中1，2-丙二醇的鉴别和含量测定方法。
背景技术：
单硝酸异山梨酯适应于冠心病的长期治疗；心绞痛的预防；心肌梗死后持续心绞痛的治疗；与洋地黄和/或利尿剂联合应用，治疗慢性充血性心力衰竭；冠心病的长期治疗和预防心绞痛发作，也适用于心肌梗死后的治疗。静脉注射后约9分钟内分布到总体液中，分布容积为0.6 0.7L/kg。单硝酸异山梨酯的蛋白结合率〈5%，平均清除半衰期为4 5小时。单硝酸异山梨酯注射液中主要辅料有丙二醇(约20%)，丙二醇是一种广泛应用于注射用药物制剂中的药用辅料，丙二醇能够在胃肠道迅速吸收，也能在受损皮肤处局部吸收，其在肝中代谢成乳酸和丙酮酸，也可在尿中以原型排除。丙二醇大量摄取会引起中枢神经系统的不良反应。尤其是对新生儿和儿童，其兴奋效应约为乙醇的三分之一，含35 %丙二醇的处方能致溶血。另外，2006年我国曾发生使用二甘醇代替丙二醇用于药品生产而导致严重医疗事故的“齐二药事件”。为杜绝此类事件的再次发生，对于注射液中添加丙二醇作助溶剂的，为了安全起见，增加了对丙二醇的含量控制，本发明的发明人欲提供一种采用气相色谱法对注射液中丙二醇进行鉴别以及进行含量测定。
发明内容
本发明所解决的技术问题是提供一种单硝酸异山梨酯注射液中1，2-丙二醇的鉴别方法及含量测定方法，本发明鉴别方法及含量测定方法具有方法灵敏，可靠，重复性好，结果准确的优点。本发明方法是为了检测单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇，具体为1，2_丙二醇，其分子式为C3H8O2。本发明鉴别方法采用气相色谱法进行检测，检测条件如下:①实验材料的处理:(I)供试品溶液的制备:精密量取待测单硝酸异山梨酯注射液1ml，加无水乙醇定容至单硝酸异山梨酯注射液的10-50倍体积量(优选50倍体积量)，摇匀，作为供试品溶液；(2)对照品溶液的制备:精密称取丙二醇对照品约lOOmg，加无水乙醇溶解并稀释制成l-4mg/ml (优选4mg/ml)的溶液,摇勻，作为对照品溶液。②将处理好的实验材料用GC-FID进行分析: GC的色谱柱采用PEG-20M ；进样口温度为200°C 250°C，优选为220°C ；载气:N2,载气流速25cm/s 35cm/s,优选为30cm/s ；
进样方式采用不分流进样。程序升温，柱温初始为110°C 130°C，保持I 5min，以5 15°C /min升温至200 220°C，保持I 5min。作为优选，柱温初始为120°C，保持lmin，以10°C /min升温至 200°C，保持 lmin。FID检测器温度为200°C 300°C，优选为250°C，氢气流量:30-50ml/min，优选为40ml/min ;空气流量:300-500ml/min,优选为 400ml/min ;尾吹流量为 20ml/min 40ml/min,优选为 25ml/min。作为优选，所述PEG-20M色谱柱的规格为30mX0.53mmX I μ m ;作为优选，所述进样方式为直接进样，进样量为Ι.Ομ I。本发明鉴别方法的优点是:操作简便；测定结果准确可靠；专属性更强；主峰保留时间约5分钟，检测时间较短。在上述鉴别方法的基础上，本发明还可以利用上述检测条件用于测定单硝酸异山梨酯注射液中丙二醇的含量。可快速、简便、准确的确定单硝酸异山梨酯注射液中丙二醇的含量，实现控制产品质量的目的。通过控制关键检测参数实现简便，迅速、精确检测的目的，本发明方法操作简便；测定结果准确可靠；专属性更强；丙二醇色谱峰保留时间在5分钟左右，检测时间较短；为检测丙二醇、控制产品质量安全提供了一种全新的选择。
图1丙二醇对照品溶液气相图谱。图2缺丙二醇的单硝酸异山梨酯注射液的气相图谱。图3单硝酸异山梨酯注射液中丙二醇的气相图谱。图4丙二醇线性图。
具体实施例方式以下通过对本发明具体实施方式
的描述说明，进一步说明本方面的特征和优点。本发明提供的单硝酸异山梨酯注射液中丙二醇的的鉴别和含量测定方法，即用气相色谱法-氢离子火焰检测器对单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇进行分析。气相色谱仪的原理是以气体作为流动相，当样品进入气化室后，被流动相带入色谱柱内，样品中各组分在流动相和固定相之间进行反复多次的分配，由于样品中各组分的性质不同，在色谱柱中两相间的分配系数和吸附系数不同，在流动相带动下各组分在柱子中的运行速度也不同，经过一定的柱长后，各组分在柱子末端分离开，然后接在柱子后的检测器将组分按顺序检测出来。FID的工作原理是以氢气在空气中燃烧为能源，载气携带被分析组分和可燃气氢气从喷嘴进入检测器，助燃气空气从四周导入。被分析组分在氢气-空气火焰中被解离成正负离子，在极化电压形成的电场中，正负离子向各自相反的电极移动，形成的离子流被收集极吸收，微弱的离子流经过高阻放大可以获得可测量的电信号，产生的电流与燃烧的样品量成正比，因此可以根据信号的大型对有机化合物进行定量分析。其主要特点是对几乎所有挥发性的有机化合物均有响应，而且灵敏度高、积留小、线性范围宽、死体积小、响应快，可以和毛细管柱直接联用。
经试验考察确定本发明鉴别方法和含量测定方法的色谱条件如下:①实验材料的处理:(I)供试品溶液的制备:精密量取待测单硝酸异山梨酯注射液1ml，加无水乙醇定容至单硝酸异山梨酯注射液的10-50倍体积量(优选50倍体积量)，摇匀，作为供试品溶液；(2)对照品溶液的制备:精密称取丙二醇对照品约lOOmg，加无水乙醇溶解并稀释制成l-4mg/ml (优选4mg/ml)的溶液,摇勻，作为对照品溶液。②将处理好的实验材料用GC-FID进行分析:GC的色谱柱采用PEG-20M ；进样口温度为200°C 250°C，优选为220°C ；载气:N2,载气流速25cm/s 35cm/s,优选为30cm/s ；进样方式采用不分流进样。程序升温，柱温初始为110°C 130°C，保持I 5min，以5 15°C /min升温至200 220°C，保持I 5min。作为优选，柱温初始为120°C，保持lmin，以10°C /min升温至 200°C，保持 lmin。FID检测器温度为200°C 300°C，优选为250°C ;氢气流量:30-50ml/min，优选为40ml/min ;空气流量:300-500ml/min,优选为 400ml/min ;尾吹流量为 20ml/min 40ml/min,优选为 25ml/min。作为优选，所述PEG-20M色谱柱的规格为30mX0.53mmX I μ m ;作为优选，所述进样方式为直接进样，进样量为Ι.Ομ I。丙二醇对照品:批号:0001450481，规格:250ml/ 瓶，ACS reagent,来源:Sigma-Aldricho以下为验证本发明鉴别方法和含量测定方法的测定效果的实验以证明其有益效果。以下验证试验中均采用优选的测定条件进行检测。1、系统适用性对照溶液的制备:精密称取丙二醇56.71mg,置25ml量瓶中，以无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置IOml量瓶中，以无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。丙二醇空白溶液的制备:精密量取自制的缺丙二醇的单硝酸异山梨酯注射液样液lml，置50ml量瓶中，以无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。取对照溶液和丙二醇空白溶液各I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图。对照溶液的图谱1，丙二醇的保留时间为5.041min，理论塔板数为6773。丙二醇空白溶液的图谱见图2，在丙二醇保留时间处没有峰干扰。发明人还对添加了丙二醇的单硝酸异山梨酯注射液进行检测，结果见图3，保留时间5.071min时出现了丙二醇特征峰。可见本条件检测单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇含量专属性较好。2、线性试验对照贮备液的制备:精密称取丙二醇对照品500.09mg,置25ml量瓶中，以无水乙
醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。分别精密量取对照贮备液lml、2ml、3ml、4ml，置IOml量瓶中，以无水乙醇稀释至刻度，摇匀；另精密量取对照贮备液4ml，置25ml量瓶中，以无水乙醇稀释至刻度，摇匀。作为线性试验供试品溶液。取I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图。结果见表I。
表I丙二醇线性试验结果
权利要求
1.单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的鉴别方法，其特征在于:采用气相色谱法进行检测，检测条件如下: ①实验材料的处理: (1)供试品溶液的制备:精密量取待测单硝酸异山梨酯注射液1ml，加无水乙醇定容至单硝酸异山梨酯注射液的10-50倍体积量，摇匀，作为供试品溶液； (2)对照品溶液的制备:精密称取丙二醇对照品约lOOmg，加无水乙醇溶解并稀释制成l-4mg/ml的溶液，摇匀，作为对照品溶液； ②将处理好的实验材料采用GC-FID进行分析: GC的色谱柱采用PEG-20M ； 进样口温度为200°C 250°C ； 载气:N2,载气流速25cm/s 35cm/s ； 进样方式采用不分流进样； 程序升温，柱温初始为110°C 130°C，保持I 5min，以5 15°C /min升温至200 220°C，保持 I 5min ； FID检测器温度为200°C 300°C，氢气流量:30-50ml/min，空气流量:300-500ml/min，尾吹流量为20ml/min 40ml/min ； 进样方式为直接进样，进样量为1.0 μ I。
2.根据权利要求1所述的单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的鉴别方法，其特征在于:所述②采用GC-FID进行分析时:所述进样口温度为220°C ;载气=N2，载气流速30cm/s ；程序升温，柱温初始为120°C，保持lmin，以10°C /min升温至200°C，保持lmin。
3.根据权利要求1所述的单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的鉴别方法，其特征在于:FID检测器温度为250°C;氢气流量:40ml/min，空气流量:400ml/min，尾吹流量为25ml/min。
4.根据权利要求1所述的单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的鉴别方法，其特征在于:所述(I)供试品溶液的制备中:加无水乙醇定容至单硝酸异山梨酯注射液的50倍体积量。
5.根据权利要求1所述的单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的鉴别方法，其特征在于:所述(2)对照品溶液的制备中:加无水乙醇溶解并稀释制成4mg/ml的溶液。
6.单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的含量测定方法，其特征在于:采用气相色谱法进行检测，检测条件如下: ①实验材料的处理: (1)供试品溶液的制备:精密量取待测单硝酸异山梨酯注射液1ml，加无水乙醇定容至单硝酸异山梨酯注射液的10-50倍体积量，摇匀，作为供试品溶液； (2)对照品溶液的制备:精密称取丙二醇对照品约lOOmg，加无水乙醇溶解并稀释制成l-4mg/ml的溶液，摇匀，作为对照品溶液； ②将处理好的实验材料采用GC-FID进行分析: GC的色谱柱采用PEG-20M ； 进样口温度为200°C 250°C ； 载气:N2,载气流速25cm/s 35cm/s ；进样方式采用不分流进样； 程序升温，柱温初始为110°c 130°C，保持I 5min，以5 15°C /min升温至200 220°C，保持 I 5min ； FID检测器温度为200°C 300°C，氢气流量:30-50ml/min，空气流量:300-500ml/min，尾吹流量为20ml/min 40ml/min ； 进样方式为直接进样，进样量为1.0 μ I。
7.根据权利要求6所述的单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的含量测定方法，其特征在于:所述②采用GC-FID进行分析时:所述进样口温度为220°C ;载气=N2，载气流速30cm/s ;程序升温，柱温初始为 120°C，保持lmin，以10°C /min升温至200°C，保持lmin。
8.根据权利要求6所述的单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的含量测定方法，其特征在于:FID检测器温度为250°C ;氢气流量:40ml/min，空气流量:400ml/min，尾吹流量为25ml/min。
9.根据权利要求6所述的单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的含量测定方法，其特征在于:所述(I)供试品溶液的制备中:加无水乙醇定容至单硝酸异山梨酯注射液的50倍体积量。
10.根据权利要求6所述的单硝酸异山梨酯注射液中的丙二醇的含量测定方法，其特征在于:所述(2)对照品溶液的制备中:加无水乙醇溶解并稀释制成4mg/ml的溶液。
全文摘要
本发明属于药物分析领域，具体涉及单硝酸异山梨酯注射液中1,2-丙二醇的鉴别和含量测定方法。本发明的目的为提供一种操作简便、迅速、专属性强的鉴别方法和精确的含量测定方法，采用气相色谱检测采用下述检测条件测定以键合交联聚乙二醇为固定液的毛细管色谱柱；载气为N2，控制流速、柱温；采用氢火焰离子化检测器，控制温度、氢气流量、空气流量、尾吹流量，即通过控制关键检测参数实现简便，迅速、精确检测的目的，本发明方法操作简便；测定结果准确可靠；专属性更强；丙二醇色谱峰保留时间在5分钟左右，检测时间较短；为检测丙二醇、控制产品质量安全提供了一种全新的选择。
文档编号G01N30/88GK103149314SQ201310048109
公开日2013年6月12日 申请日期2013年2月6日 优先权日2013年2月6日
发明者孙毅, 田阿娟, 夏玉立 申请人:成都百裕科技制药有限公司