专利名称：一种高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及一种植物中淀粉含量的检测方法，具体涉及一种高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法。
背景技术：
我国种植高粱历史已有数千年，在中国的分布极广。中国的白酒酿造史也十分悠长，高粱作为酿酒的主要原料之一，其淀粉含量及其直链淀粉和支链淀粉的比率与酿酒品质和产量有重要关系，支链淀粉含量较高的品种，在发酵过程中易达到柔熟、玄清、收汗等工艺标准，淀粉利用率高，被视为酿酒的优质原料。因此在原料采购以及作物育种时需要探索一种快速简便的测定方法对两组分进行含量测定。目前测定淀粉的方法主要包括旋光法、比色法、碘亲和力测定法和近红外法。其中对两种组分同时检测的方法应用最广的是双波长法，该方法已用于小麦、板栗、玉米、木薯、马铃薯中淀粉含量的测定，然而该方法涉及四个波长，包括两个测定波长和通过作图确定的两个参比波长，因此检测方法繁琐，且双波长的假设容易带来误差，从而降低检测精度。
发明内容
针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的是:提供一种方法简单，检测精度高的高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:一种高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法，包括如下步骤:S1:制备支链淀粉回归方程和直链淀粉回归方程，该步骤包括:Sll:取支链淀粉纯品和直链淀粉纯品分别置于容器中，分别向两个容器中加入乙醇溶液进行分散处理，处理后加入氢氧化钠溶液混匀，封住容器口，沸水浴中搅拌使直链淀粉纯品和支链淀粉纯品完全溶解，然后使用蒸馏水定容即得支链淀粉初配溶液和直链淀粉初配溶液；S12:制备支链淀粉回归方程，取多份步骤Sll中配置的支链淀粉初配溶液，调节该多份支链淀粉初配溶液的PH值至3 4，再加碘试剂，并用蒸馏水定容，最终得到支链淀粉浓度为40 90ug/mL的支链淀粉标准溶液系列，静置，以碘为空白，进行紫外扫描得到支链淀粉标准溶液系列中浓度不同的各份支链淀粉标准溶液对400 SOOnm波长紫外线的吸光度，然后以浓度不同的各份支链淀粉标准溶液的浓度为横坐标，以其吸光度为纵坐标制得支链淀粉标准曲线，根据支链淀粉标准曲线得到支链淀粉回归方程；S13:制备直链淀粉回归方程，取多份步骤Sll中配置的直链淀粉初配溶液，调节该多份直链淀粉初配溶液的PH值至3 4，再加碘试剂，并用蒸馏水定容，最终得到直链淀粉浓度为6 26ug/mL的直链淀粉标准溶液系列，静置，以碘为空白，进行紫外扫描，得到直链淀粉标准溶液系列中浓度不同的各份直链淀粉标准溶液对400 800nm波长紫外线的吸光度，然后以浓度不同的各份直链淀粉标准溶液的浓度为横坐标，以其吸光度为纵坐标制得直链淀粉标准曲线，根据直链淀粉标准曲线得到直链淀粉回归方程；S2:计算支链淀粉的吸收比α和直链淀粉的吸收比β:将波长λ I作为支链淀粉的测定波长，波长λ 2作为直链淀粉的测定波长，λ I和λ 2为400 800nm的范围内，然后分别测定支链淀粉标准溶液系列和直链淀粉标准溶液系列中浓度不同的各份标准溶液在λ 及λ2处的吸光度，根据式(I)和(2)分别计算Cij和，然后再对得到的多个利用统计学求平均值得到支链淀粉的吸收比α，对得到的
多个1^利用统计学求平均值得到直链淀粉的吸收比β:
权利要求
1.一种高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法，其特征在于，包括如下步骤: S1:制备支链淀粉回归方程和直链淀粉回归方程，该步骤包括: 511:取支链淀粉纯品和直链淀粉纯品分别置于容器中，分别向两个容器中加入乙醇溶液进行分散处理，处理后加入氢氧化钠溶液混匀，封住容器口，沸水浴中搅拌使直链淀粉纯品和支链淀粉纯品完全溶解，然后使用蒸馏水定容即得支链淀粉初配溶液和直链淀粉初配溶液； 512:制备支链淀粉回归方程，取多份步骤Sll中配置的支链淀粉初配溶液，调节该多份支链淀粉初配溶液的PH值至3 4，再加碘试剂，并用蒸馏水定容，最终得到支链淀粉浓度为40 90ug/mL的支链淀粉标准溶液系列，静置，以碘为空白，进行紫外扫描得到支链淀粉标准溶液系列中浓度不同 的各份支链淀粉标准溶液对400 SOOnm波长紫外线的吸光度，然后以浓度不同的各份支链淀粉标准溶液的浓度为横坐标，以其吸光度为纵坐标制得支链淀粉标准曲线，根据支链淀粉标准曲线得到支链淀粉回归方程； 513:制备直链淀粉回归方程，取多份步骤Sll中配置的直链淀粉初配溶液，调节该多份直链淀粉初配溶液的PH值至3 4，再加碘试剂，并用蒸馏水定容，最终得到直链淀粉浓度为6 26ug/mL的直链淀粉标准溶液系列，静置，以碘为空白，进行紫外扫描，得到直链淀粉标准溶液系列中浓度不同的各份直链淀粉标准溶液对400 800nm波长紫外线的吸光度，然后以浓度不同的各份直链淀粉标准溶液的浓度为横坐标，以其吸光度为纵坐标制得直链淀粉标准曲线，根据直链淀粉标准曲线得到直链淀粉回归方程； 52:计算支链淀粉的吸收比α和直链淀粉的吸收比β:将波长λ I作为支链淀粉的测定波长，波长λ 2作为直链淀粉的测定波长，λ I和λ 2为400 800nm的范围内，然后分别测定支链淀粉标准溶液系列和直链淀粉标准溶液系列中浓度不同的各份标准溶液在λ I及λ 2处的吸光度，根据式(I)和(2)分别计算％和，然后再对得到的多个％利用统计学求平均值得到支链淀粉的吸收比α，对得到的多个1^利用统计学求平均值得到直链淀粉的吸收比β:
2.如权利要求1所述的高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法，其特征在于，所述支链淀粉的测定波长λ I为450 600nm，直链淀粉的测定波长λ 2为550 700nm。
3.如权利要求2所述的高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法，其特征在于，所述支链淀粉的测定波长λ I为540nm，直链淀粉的测定波长λ 2为640nm。
4.如权利要求1所述的高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法，其特征在于，所述支链淀粉标准溶液和直链淀粉标准溶液的PH均为3.5。
全文摘要
本发明涉及一种高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法，该方法包括三个步骤，第一制备支链淀粉回归方程和直链淀粉回归方程，第二计算支链淀粉的吸收比α和直链淀粉的吸收比β，第三样品测定，在该步骤中，通过给定公式计算支链淀粉和直链淀粉在测定波长的吸光度，然后再将相应的将吸收比和吸光度带入相应的回归方程中即得支链淀粉和直链淀粉的浓度。本发明提供的测定方法仅需两个波长，排除了双波长的零假设带来的误差，与双波长相比该方法的原理、计算方法更简单，且最终计算得到的直链淀粉和支链淀粉含量的精确度高。
文档编号G01N21/33GK103163128SQ20131007998
公开日2013年6月19日 申请日期2013年3月13日 优先权日2013年3月13日
发明者霍丹群, 蒋兰, 侯长军, 王洪彬 申请人:重庆大学