专利名称：一种小儿健脾药物的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种用于小儿健脾的中药药物，特别是涉及该药物的质量控制方法。
背景技术：
小儿参术健脾丸系儿科类用药，用于小儿脾胃虚弱，消化不良，面黄肌瘦，精神不振。小儿参术健脾丸现执行标准收录于卫生部药品标准中药成方制剂第五册中。在该质量标准中制定了以下内容。取本品，置显微镜下观察:不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化；菌丝无色或淡棕色，直径4-6 μ m。联结乳管直径12-15 μ m，含细小颗粒状物。果皮石细胞单个散在或少数成群，淡紫红色、红色或黄棕色，类圆形或多角形。种皮栅状细胞长80-150 μ m。纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。检查，应符合丸剂项下有关各项规定。上述质量标准存在着比较严重的缺陷:首先，该标准对于主要药物未进行有效成分含量的定量测定；其次，50%以上的组成药物均未进行化学鉴别。中药制剂质量稳定、可控和具有生产可重复性是药物具有药理和临床结果可重复性的前提保证，中药质量能否得到控制以及中药质量标准是否科学化，是影响中药产业化的重要制约因素。质量可控性是药品评价的重要指标，质量标准则是药品质量可控性的具体体现。
发明内容
本发明的目的是提供一种上述小儿健脾药物的质量控制方法，以确保生产的药品
质量稳定可控。本发明提供的小儿健脾药物的质量控制方法适合于由以下原料药制备而成的药物:党参、土炒白术、蜜炙甘草、麸炒芡实、土炒白扁豆、麸炒山药、土炒莲子肉、陈皮、清炒山楂、麸炒六神曲、清炒麦芽、茯苓、土炒薏苡仁。所述质量控制方法包括鉴别方法和含量测定方法。其中，所述鉴别方法包括如下鉴别:
1)取所述药物IOg,加娃藻土5g,研勻，加乙醚40ml,超声处理15分钟,滤过,弃去乙醚液，药渣加乙酸乙酯40ml，超声处理15分钟，滤过，药渣备用，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取山楂对照药材lg，同法制备对照药材溶液；另取熊果酸对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 μ I，对照药材溶液5 μ I，对照品溶液2 μ I，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯:乙酸乙酯:甲酸=20:4:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点；
2)取I)中乙酸乙酯提取后的残渣，挥去乙酸乙酯，加甲醇30ml，加热回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次15ml，正丁醇液回收至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材lg，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 μ 1，对照药材溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:丙酮:甲酸=8:1:0.1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 所述含量测定方法包括橙皮苷含量的测定。本发明具体以下述高效液相色谱法测定所述橙皮苷的含量:
1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇:水=40:60为流动相；检测波长283nm ;理论板数按橙皮苷计算不低于3000 ；
2)对照品溶液的制备:取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含50yg的对照品溶液；
3)供试品溶液的制备:取所述药物，研细，混勻，取0.8g,精密称定,加娃藻土 0.4g,研匀，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，功率200W、频率40kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
4)分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定即得。本发明建立了小儿健脾药物的质量控制方法，所建立的方法中，药材的鉴别方法成熟可行，专属性强，阴性无干扰，含量测定方法操作容易，精密度高，重现性好，使用本发明的质量控制方法能够精确、稳定地控制小儿参术健脾丸的药物质量，以适应药物的工业化稳定生产。
具体实施例方式实施例1:山楂的薄层鉴别。取小儿参术健脾丸IOg,加娃藻土 5g,研勻,加乙醚40ml,超声处理15分钟,滤过，药渣加乙酸乙酯40ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；同法制备阴性样品溶液；另取山楂对照药材1.0g,同法制备对照药材溶液；另取熊果酸对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取阴性样品溶液10 μ 1，供试品溶液10 μ 1，对照药材溶液5 μ 1，对照品溶液2 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20:4:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰，置日光下检视。结果，供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的紫红色斑点，在阴性样品色谱相应的位置上，没有斑点，说明阴性无干扰，专属性强。实施例2:甘草的薄层鉴别。取小儿参术健脾丸IOg,加娃藻土 5g,研勻,加乙醚40ml,超声处理15分钟,滤过，药渣加乙酸乙酯40ml，超声处理15分钟，滤过，药渣加甲醇30ml，加热回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；同法制备阴性样品溶液；另取甘草对照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10 μ 1，对照药材溶液6 μ 1，阴性样品溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸(8:1:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，有三处对应，由上到下分别显相同的蓝色、黄绿色、绿色荧光斑点，阴性无干扰，专属性强。实施例3:橙皮苷含量的测定。小儿参术健脾丸由党参、白术、甘草、芡实、白扁豆、山药、莲子肉、陈皮等13味中药组成，原标准无含量测定项。为了更好的控制制剂质量并实现工艺流程的监控，选定陈皮中的橙皮苷作为含量测定指标。1、仪器与试药。Waters2695-2487高效液相谱仪、色谱工作站(美国Waters公司)；橙皮苷对照品(批号0721-200010，中国药品生物制品检定所)；甲醇:色谱纯(天津四友精细化学品有限公司)；水:纯净水；硅藻土及其它试剂均为分析纯。小儿参术健脾丸。2、色谱条件。色谱柱:YMC_PackODS-A (4.6mmX 250mm);流动相:甲醇-水(40:60);流速:1.0ml/min ;检测波长:283nm ;柱温:35°C。理论板数按橙皮苷计算不低于3000。3、对照品溶液的制备。`取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含50μ g的对照品溶液。4、供试品溶液的制备。取小儿参术健脾丸研细，混匀，取0.8g，精密称定，加硅藻土 0.4g，研匀，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率200W、频率40kHz) 30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。5、橙皮苷含量的测定。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。6、阴性样品试验。按小儿参术健脾丸制剂处方比例，模拟工艺制法制备去掉陈皮的阴性对照样品。精密称取阴性对照样品3g，按供试品溶液制备方法制得阴性供试品溶液。在色谱条件下，分别记录橙皮苷对照品、供试品及阴性对照品的色谱图，图谱结果表明:在与橙皮苷保留时间的相对应处，阴性对照品色谱图中无色谱峰出现，即在确定的测定条件下，制剂处方中其他药味对橙皮苷的测定无干扰，方法专属性强。7、线性关系的考察。取橙皮苷对照品储备液(量瓶密封、冷冻保存，浓度0.1002mg/ml)，放至室温，检查溶液是否减失，摇匀，滤过。精密吸取对照品溶液2、4、6、10、15、2(^1，每次平行进样两次，测定峰面积，以平均峰面积积分值为纵坐标，橙皮苷对照品进样量为横坐标计算回归方程，得回归方程为y=1815.7x-14240, r=0.99995，表明橙皮苷在200.4_2004ng范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系，见表I。
权利要求
1.一种小儿健脾药物的质量控制方法，所述小儿健脾药物是由以下原料药制备而成的药物:党参、土炒白术、蜜炙甘草、麸炒芡实、土炒白扁豆、麸炒山药、土炒莲子肉、陈皮、清炒山楂、麸炒六神曲、清炒麦芽、茯苓、土炒薏苡仁，其特征在于所述质量控制方法中的鉴别方法包括如下鉴别: 1)取所述药物IOg,加娃藻土5g,研勻，加乙醚40ml,超声处理15分钟，滤过,弃去乙醚液，药渣加乙酸乙酯40ml，超声处理15分钟，滤过，药渣备用，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取山楂对照药材lg，同法制备对照药材溶液；另取熊果酸对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液 ομ 1，对照药材溶液5μ 1，对照品溶液2μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯:乙酸乙酯:甲酸=20:4:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点； 2)取I)中乙酸乙酯提取后的残渣，挥去乙酸乙酯，加甲醇30ml，加热回流I小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤3次，每次15ml，正丁醇液回收至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材lg，加甲醇20ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10 μ 1，对照药材溶液5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷:丙酮:甲酸=8:1:0.1为展开剂，展开 ，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的突光斑点。
2.根据权利要求1所述的小儿健脾药物的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法中的含量测定方法是以下述高效液相色谱法测定橙皮苷的含量: 1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇:水=40:60为流动相；检测波长283nm ;理论板数按橙皮苷计算不低于3000 ； 2)对照品溶液的制备:取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含50yg的对照品溶液； 3)供试品溶液的制备:取所述药物，研细，混勻，取0.8g,精密称定,加娃藻土 0.4g,研匀，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，功率200W、频率40kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 4)分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定即得。
全文摘要
本发明公开了一种小儿健脾药物的质量控制方法，分别以薄层色谱法鉴别药物中的山楂和甘草，以液相色谱法测定药物中的橙皮苷含量。本发明建立的质量控制方法中，药材鉴别方法成熟可行，专属性强，阴性无干扰，含量测定方法操作容易，精密度高，重现性好，使用本发明的质量控制方法能够精确、稳定地控制药物的质量，以适应药物的工业化稳定生产。
文档编号G01N30/02GK103163272SQ20131011068
公开日2013年6月19日 申请日期2013年4月1日 优先权日2013年4月1日
发明者王六贵, 吕建英 申请人:山西振东开元制药有限公司