革兰染色液质控品制备方法
【专利摘要】本发明涉及生物医疗【技术领域】，特别是一种革兰染色液质控品制备方法，包含以下步骤：第一步，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌2株标准菌株分别装在2支试管中，放在冰箱中冷冻、干燥保存；第二步，从冰箱中取出该2株标准菌株，分别加入生理盐水，将该革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌溶解，制备成菌悬液；第三步，向该菌悬液中加入无菌生理盐水；然后，分别向该菌悬液中加入2株标准菌株，放在震荡器上混匀；第四步，取出该混匀后的菌悬液，稀释，然后滴在玻片上；第五步，将该玻片放在室温下自然干燥；第六步，将干燥的该玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。本发明具有节省时间、操作简单、提高了工作人员的工作效率，能够检测染色液的质量、对工作人员起到监督作用的特点。
【专利说明】革兰染色液质控品制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物医疗【技术领域】，特别涉及革兰染色液质控品制备方法。
【背景技术】
[0002]革兰染色法是细菌学中很重要的鉴别染色法，1884年由丹麦医师创立。细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液煤染后，用酒精脱色，在一定条件下，有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类:不被脱色的为革兰氏阳性菌、脱色的为革兰氏阴性菌。为观察方便，脱色后再用一种红色染料进行复染，阳性菌仍为紫色，阴性菌则被染上红色。
[0003]革兰氏染色法一般包括:初染、媒染、脱色、复染四个步骤，具体操作方法是:细菌涂片标本的制作和固定，用草酸铵结晶紫染I分钟后水洗；加碘液覆盖涂面染I分钟后水洗，并用吸水纸吸去水分；加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分；稀番红染色液或沙黄染10秒后，自来水冲洗，干燥，镜检。
[0004]革兰染色四步法效果很好，但操作比较复杂，工作人员每操作一次就要做一次细菌涂片标本，浪费时间，并且工作效率低，对染色液质量、染色时间长短、工作人员操作技术熟练程度都有很高的要求，但是目前市场没有任何一款预先制好的细菌涂片标本，供工作人员工作时直接拿来使用。
[0005]因此，生物医疗【技术领域】急需一种节省时间、操作简单、提高工作人员工作效率、能够检测染色液的质量、对工作人员起到监督作用的革兰染色液质控品制备方法。
【发明内容】
[0006]本发明的革兰染色液质控品制备方法，技术方案如下:
革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，包含以下步骤:
第一步，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌2株标准菌株分别装在2支试管中，放在冰箱中冷冻、干燥保存；
第二步，从冰箱中取出该2株标准菌株，分别加入生理盐水，将该革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌溶解，制备成菌悬液；
第三步，向该菌悬液中加入无菌生理盐水；然后，分别向该菌悬液中加入2株标准菌株，放在震荡器上混匀；
第四步，取出该混匀后的菌悬液，稀释，然后滴在玻片上；
第五步，将该玻片放在室温下自然干燥；
第六步，将干燥的该玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。
[0007]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为I种菌。
[0008]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为2种以上菌的混合物。
[0009]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阴性菌为I种菌。[0010]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阴性菌为2种以上菌的混合物。
[0011]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为球菌。
[0012]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为杆菌。
[0013]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阳性菌为球菌和杆菌的混合物。
[0014]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阴性菌为球菌或者杆菌。
[0015]如上的革兰染色液质控品制备方法，其中，该革兰氏阴性菌为球菌和杆菌的混合物。
本发明的有益效果是:
1.通过制备好的革兰染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、媒染、脱色、复染的过程，可以检测出染色液是否过期。
[0016]2.通过制备好的革兰染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、媒染、脱色、复染的过程，能够对操作人员的操作步骤、熟练程度进行监督和检验。
[0017]3.本发明操作简单、节省时间。
[0018]4.本发明提高了操作人员的工作效率，从而提高了经济效益，具有更加广泛的适用性。
【具体实施方式】
[0019]为了使本发明的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体示例，进一步阐述本发明。
[0020]本发明的具体实施步骤如下:
第一步，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌分别装在2支试管中，标为试样I和试样2，放在冰箱中冷冻、干燥保存；
第二步，从冰箱中取出试样I和试样2，分别向试样I和试样2中加入生理盐水(例如
0.5ml)，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌溶解，制备成菌悬液；
第三步，重新拿取试管，标为试样3 ;首先，向试样3中加入无菌生理盐水，可以是加入Iml ;然后，分别向试样3中加入试样I和试样2的菌悬液,例如加入0.0lml,放在震荡器上混匀；
第四步，从试样3中取出稀释后的菌悬液，例如0.1ml，滴在玻片上；
第五步，将玻片放在室温下自然干燥；
第六步，将干燥的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，例如通过三次，固定菌膜。
[0021]革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都为I种菌或2种以上菌的混合物。
[0022]革兰氏阳性菌为球菌或杆菌、球菌与杆菌的混合物。
[0023]革兰氏阴性菌为球菌或杆菌、球菌与杆菌的混合物。
[0024]如上对本发明的描述中，每种试剂或者成分的具体组分均可以变化。
[0025]下面举例2组具体实施例，对本发明进行详细说明:
实施例一:首先，采用大肠埃希菌作为革兰氏阴性菌，装在试管I里面，金黄色葡萄球菌作为革兰氏阳性菌，装在试管2里面，试管I与试管2都放在冰箱中冷冻、干燥保存?’然后，从冰箱中取出试样I和试样2,分别向试样I和试样2中加入0.6ml生理盐水,将大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌溶解，制备成菌悬液；再重新拿取试管，标为试样3，向试样3中加入2ml无菌生理盐水，进一步地，分别向试样3中加入0.02ml试样I和试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀；最后，从试样3中取出0.2ml稀释后的菌悬液,滴在玻片上,滴好的玻片放在室温下自然干燥，将干燥好的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过4次，固定菌膜。
[0026]实施例二:首先，采用脑膜炎双球菌作为革兰氏阴性菌，装在试管I里面，炭疽杆菌作为革兰氏阳性菌，装在试管2里面，试管I与试管2都放在冰箱中冷冻、干燥保存；然后，从冰箱中取出试样I和试样2,分别向试样I和试样2中加入0.4mI生理盐水,将脑膜炎双球菌和炭疽杆菌溶解，制备成菌悬液；再重新拿取试管，标为试样3，向试样3中加入0.8ml无菌生理盐水，进一步地，分别向试样3中加入0.15ml试样I和试样2的菌悬液，放在震荡器上混匀；最后，从试样3中取出0.15ml稀释后的菌悬液,滴在玻片上,滴好的玻片放在室温下自然干燥，将干燥好的玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过4次，固定菌膜。
[0027]本发明的有益效果是:
1.通过制备好的革兰染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、媒染、脱色、复染的过程，可以检测出染色液是否过期。
[0028]2.通过制备好的革兰染色液质控品与新制作的涂片同时进行初染、媒染、脱色、复染的过程，能够对操作人员的操作步骤、熟练程度进行监督和检验。
[0029]3.本发明操作简单、节省时间。
[0030]4.本发明提高了操作人员的工作效率，从而提高了经济效益，具有更加广泛的适用性。
[0031]以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。
【权利要求】
1.革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，包含以下步骤: 第一步，将革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌2株标准菌株分别装在2支试管中，放在冰箱中冷冻、干燥保存； 第二步，从冰箱中取出该2株标准菌株，分别加入生理盐水，将该革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌溶解，制备成菌悬液； 第三步，向该菌悬液中加入无菌生理盐水；然后，分别向该菌悬液中加入2株标准菌株，放在震荡器上混匀； 第四步，取出该混匀后的菌悬液，稀释，然后滴在玻片上； 第五步，将该玻片放在室温下自然干燥； 第六步，将干燥的该玻片涂面朝上，放在酒精灯火焰上来回通过，固定菌膜。
2.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为I种菌。
3.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为2种以上菌的混合物。
4.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阴性菌为I种菌。
5.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阴性菌为2种以上菌的混合物。
6.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为球菌。
7.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为杆菌。
8.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阳性菌为球菌和杆菌的混合物。
9.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阴性菌为球菌或者杆菌。
10.如权利要求1所述的革兰染色液质控品制备方法，其特征在于，该革兰氏阴性菌为球菌和杆菌的混合物。
【文档编号】G01N1/30GK103471896SQ201310404178
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年9月9日 优先权日:2013年9月9日
【发明者】娄峥 申请人:上海兰卫临床检验有限公司