敌敌畏农药在蔬菜水果中残留量的气相色谱检测方法
【专利摘要】本发明建立一种检测敌敌畏农药在蔬菜、水果中残留量的气相色谱方法，其特征在于以乙腈为提取剂，提取溶液在净化、浓缩过程中，氮吹仪的水浴温度控制在45℃-50℃，氮气或空气流沿着试管壁吹至样品表面(不锈钢通气针紧贴试管壁)，待样品溶剂挥发、浓缩至0.5ml-1ml时，立即用丙酮定容，加无水硫酸钠脱水，取上清液，用气相色谱仪痕量分析。该方法的优点在于：操作简便、分析快速，结果准确，敌敌畏的添加回收率达95.2％-99.6％，变异系数在3.9％以下。
【专利说明】敌敌畏农药在蔬菜水果中残留量的气相色谱检测方法
【技术领域】
[0001]本发明建立一种检测敌敌畏农药在蔬菜、水果中残留量的气相色谱方法，属于农药残留检测【技术领域】。
【背景技术】
[0002]敌敌畏是一种高效、广谱、速效的有机磷杀虫剂，其化学名称为0，0-二甲基-0-(2，2-二氯乙烯基)磷酸酯，它具有强烈的熏蒸、胃毒和触杀作用，对咀嚼式口器和刺吸式口器害虫均有较好的防治效果。被广泛应用于棉花、果树、蔬菜和烟草的虫害防治，是施用历史悠久，施用量大、面广的农药之一。
[0003]敌敌畏挥发性大，纯品沸点74°C (在133.322Pa下)，在常温下易自行挥发，是有机磷杀虫剂中熏蒸作用最强的品种。
[0004]在应用NY/T761-2008检测蔬菜和水果中敌敌畏农药残留时，由于敌敌畏沸点低，极性较强，在样品的前处理过程中，待测成分敌敌畏损失率很高，造成检测结果准确度低，加标回收率常在50%以下，甚至更低。
[0005]本发明建立一种检测蔬菜、水果中敌敌畏残留量的气相色谱方法，准确度高，添加回收率达95.2% -99.6%0
【发明内容】
[0006]本发明有如下二方面内容:
[0007]1、样品前处理
[0008]2、气相色谱仪检测
[0009]本发明所采用的技术，包括以下内容:
[0010](I)样品的制备
[0011]取新鲜蔬菜、水果样品的可食部分，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成待检样品。
[0012](2)仪器与试剂
[0013]①仪器Agilent6890气相色谱仪，配有火焰光度检测器(FPD)，DB-608(30mX0.32mmX0.5um)毛细管色谱柱，HP_5(30mX0.32mmX0.25 u m)毛细管色谱柱，电子天平，德国IKA高速匀浆机，美国N-EVAP24水浴氮吹仪。
[0014]②试剂乙腈、氯化钠(140°C烘烤4h)、无水硫酸钠(650°C马福炉中烘6h)试剂均为分析纯，丙酮试剂为进口色谱纯。
[0015]③农药标准样品敌敌畏标准溶液购自农业部环境保护科研监测所，质量浓度为100 Ii g/ml。
[0016](3)样品前处理
[0017]①提取准确称取25.0g样品于250ml烧杯中，加入50ml乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有7g-10g氯化钠的IOOml具塞量筒中，收集滤液，盖上塞子，剧烈震荡2min,在室温下静置30min,使乙腈相和水相分层；
[0018]②净化a.从具塞量筒中吸取10.0ml乙腈溶液，放入IOml刻度试管中；b.将试管放入水浴锅中加热，水浴温度控制在45°C -50°C ；c.将氮吹仪的不锈钢通气针紧贴试管壁，氮气或空气流沿着试管壁吹至样品表面(如果水浴的温度过高、通气针吹出的气流过大，都会降低敌敌畏回收率)；d.待样品溶剂挥发、浓缩至(样品浓缩至0.5ml以下，回收率急剧下降)时，立即用丙酮定容，定容至5.0ml，再加1.0g无水硫酸钠脱水，充分摇匀，静置5min，取上清液，供气相色谱仪检测。
[0019](4)气相色谱仪检测
[0020]①色谱参数设定色谱柱:DB_608、HP_5弹性石英毛细管柱作为分离柱；载气:高纯氮气(纯度99.999% );检测器的燃气与助燃气H2150ml/min、空气110ml/min ;进样模式:恒流，流量为1.8ml/min ;进样口温度:235°C ;检测器温度:270°C ;柱升温程序:初始温度90°C，保持lmin，以35°C /min上升至270°C，保持2min ;进样方式:不分流；进样量I yl。
[0021]②定性和定量方法以敌敌畏标准溶液的保留时间来定性(用双柱确认)，以样品峰面积与标准溶液峰面积比较来定量。
[0022](5)方法验证
[0023]①线性和范围分别配制浓度为0.05,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,5.0mg/kg的敌敌畏系列标准溶液，按上述色谱条件下依次进样，以色谱峰面积(y)对标准溶液浓度(x，mg/kg)绘制标准曲线，其相关系数为0.9992。
[0024]②准确度、精密度以添加回收率来衡量方法的准确度，以变异系数(CV)来表示方法的精密度。在空白蔬菜水果样品中添加敌敌畏标准溶液，添加浓度为0.05,0.1、1.0、
5.0mg/kg,同时设置6个重复，再按前述的样品前处理方法及色谱条件进行添加回收率试验，在4个添加水平上，敌敌畏的平均添加回收率为95.2% -99.6%，变异系数在3.9%以下。
[0025]③检出限体现了方法的灵敏度。用敌敌畏标准溶液逐级稀释添加，按上述前处理方法和仪器条件进行检测，以3倍噪声计算，测得最低检出浓度为0.01mg/kg。
[0026]本发明利用相似相溶原理，以乙腈为提取剂，提取溶液在净化、浓缩过程中，氮吹仪的水浴温度控制在45°C -50°C，氮气或空气流沿着试管壁吹至样品表面(不锈钢通气针紧贴试管壁)，待样品溶剂挥发、浓缩至0.5ml-lml时，立即用丙酮定容，加无水硫酸钠脱水，取上清液，用气相色谱仪痕量分析。该方法的优点在于:操作简便、分析快速，结果准确，敌敌畏的添加回收率达95.2% -99.6%，变异系数在3.9%以下。
【具体实施方式】
[0027]方式1:青菜中敌敌畏残留量的检测
[0028](I)青菜样品前处理
[0029]①提取准确称取25.0g样品于250ml烧杯中，加入50ml乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有7g-10g氯化钠的IOOml具塞量筒中，收集滤液，盖上塞子，剧烈震荡2min,在室温下静置30min,使乙腈相和水相分层；
[0030]②净化a.从具塞量简中吸取10.0ml乙腈溶液，放入IOml刻度试管中；b.将试管放入水浴锅中加热，水浴温度控制在50°C;c.将氮吹仪的不锈钢通气针紧贴试管壁，氮气或空气流沿着试管壁吹至样品表面；d.待样品溶剂挥发、浓缩至0.6ml时，立即用丙酮定容，定容至5.0ml，再加1.0g无水硫酸钠脱水，充分摇匀，静置5min，取上清液，供气相色谱仪检测。
[0031](2)气相色谱仪检测
[0032]①色谱参数设定色谱柱:DB_608、HP_5弹性石英毛细管柱作为分离柱；载气:高纯氮气(纯度99.999% );检测器的燃气与助燃气H2150ml/min、空气110ml/min ;进样模式:恒流，流量为1.8ml/min ;进样口温度:235°C ;检测器温度:270°C ;柱升温程序:初始温度90°C，保持lmin，以35°C /min上升至270°C，保持2min ;进样方式:不分流；进样量I yl。
[0033]②定性和定量方法以敌敌畏标准溶液的保留时间来定性(用双柱确认)，以样品峰面积与标准溶液峰面积比较来定量。
[0034](3)方法 的准确度和精密度
[0035]取空白青菜样品进行敌敌畏添加回收率实验，添加浓度为0.05mg/kg、0.1mg/kg、1.0mg/kg、5.0mg/kg4个水平，各处理重复6次。结果:敌敌畏的平均回收率为95.3% -99.5% (见表I)，变异系数为2.8% -3.9%，完全达到了残留农药的检测要求。
[0036]表I青菜中敌敌畏不同浓度的添加回收率
【权利要求】
1.一种检测敌敌畏农药在蔬菜、水果中残留量的气相色谱方法，其特征在于包括下述步骤: ①提取准确称取25.0g样品于250ml烧杯中，加入50ml乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有7g-10g氯化钠的IOOml具塞量筒中，收集滤液，盖上塞子，剧烈震荡2min,在室温下静置30min,使乙腈相和水相分层； ②净化a.从具塞量筒中吸取10.0ml乙腈溶液，放入IOml刻度试管中；b.将试管放入水浴锅中加热，水浴温度控制在45°C -50°C；c.将氮吹仪的不锈钢通气针紧贴试管壁，氮气或空气流沿着试管壁吹至样品表面；d.待样品溶剂挥发、浓缩至0.5ml-lml时，立即用丙酮定容，定容至5.0ml,再加1.0g无水硫酸钠脱水,充分摇勻,静置5min,取上清液,供气相色谱仪检测； ③色谱参数设定色谱柱:DB-608、HP-5弹性石英毛细管柱作为分离柱；载气:高纯氮气(纯度99.999% );检测器的燃气与助燃气H2150ml/min、空气110ml/min ;进样模式:恒流，流量为1.8ml/min ;进样口温度:235°C;检测器温度:270°C;柱升温程序:初始温度90°C，保持Imin,以35°C /min上升至270°C,保持2min ;进样方式:不分流；进样量Iyl; ④定性和定量方法以敌敌畏标准溶液的保留时间来定性(用双柱确认)，以样品峰面积与标准溶液峰面积比较来定量。
2.根据权利要求1所述的一种检测敌敌畏农药在蔬菜、水果中残留量的气相色谱方法，其特征在于用乙腈作为提取剂。
3.根据权利要求1所述的一种检测敌敌畏农药在蔬菜、水果中残留量的气相色谱方法，其特征在于样品净化、浓缩过程中，氮吹仪的水浴温度控制在45°C _50°C。
4.根据权利要求1所述的一种检测敌敌畏农药在蔬菜、水果中残留量的气相色谱方法，其特征在于样品净化、浓缩过程中，氮吹仪的不锈钢通气针紧贴试管壁，氮气或空气流沿着试管壁吹至样品表面。
5.根据权利要求1所述的一种检测敌敌畏农药在蔬菜、水果中残留量的气相色谱方法，其特征在于样品浓缩至0.5ml-lml时，立即用丙酮定容，加无水硫酸钠脱水。
6.根据权利要求1所述的一种检测敌敌畏农药在蔬菜、水果中残留量的气相色谱方法，其特征在于检测设备为Agilent6890气相色谱仪(配有火焰光度检测器)。
【文档编号】G01N30/06GK103439437SQ201310405422
【公开日】2013年12月11日 申请日期:2013年8月30日 优先权日:2013年8月30日
【发明者】邬金飞 申请人:邬金飞