益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法
【专利摘要】本发明公开了益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，以五味子醇甲对照品为对照，以甲醇∶水=65～75∶35～25为流动相，采用高效液相色谱法测定益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量。本发明采用高效液相色谱法测定益心舒中药制剂中五味子醇甲含量的方法专属性强、精密度高、重复性好、回收率高、稳定性高、测量结果准确，达到了有效控制药物质量的目的，确保了产品质量的稳定以及临床用药的安全、有效。
【专利说明】 益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，属于中药【技术领域】。
【背景技术】
[0002]益心舒中药制剂具有益气复脉、活血化瘀、养阴生津的功效，常用于气阴两虚、心悸脉结代、胸闷不舒、胸痛及冠心病心绞痛等症状。益心舒中药制剂的处方由人参、麦冬、五味子、黄苗、丹参、川弯、山楂组成。
[0003]益心舒中药制剂中所包含的五味子醇甲为五味子的主要成分之一，五味子醇甲可以对四氯化碳所致的肝脏损伤起到保护作用；可以显著抑制激活的N9小胶质细胞的NO释放；可以降低因化学物质引起的血清转氨酶升高现象；能显著降低大剂量扑热息痛肝中毒所引起的死亡率，并防止肝内谷胱甘肽的耗竭，增强肝微粒体代谢扑热息痛的速度，血中扑热息痛含量下降。另外，五味子醇甲对中枢神经系统不但有安定作用，而且还有抗惊厥作用。因此，对益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量进行测定显得尤为重要，是衡量药品有效性的一个关键指标。
[0004]《中草药第36卷增刊2005年》公开了一种《HPLC法测定更年安片中五味子醇甲》的方法，《辽宁中医杂志2005年第32卷第8期》公开了一种《HPLC法测定五味子颗粒中五味子醇甲的含量》的方法，《中国实验方剂学杂志2011年5月第17卷第10期》公开了一种《HPLC同时测定五味子中六种木脂素类成分》的方法，但是由于其测定对象分别为更年安片、五味子颗粒和五味子药材，因而并不适用于测定益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量。申请号为200910102648.9、名称为《益心舒中药制剂中五味子的质量控制方法》的专利申请公开了一种测定益心舒中药制剂中五味子醇甲的方法，但是该测定方法不够严谨，并没有进行全面的方法学考察，而且该测定方法中的仪器精密度较差，供试品的稳定性也不够好，因而并不能作为一套严格可靠的质量检测标准。如果没有严格的质量标准，得到的产品不能确保其质量，结果必将影响该药物的临床疗效；所以为提高益心舒中药制剂的治疗作用，确保用药的安全、有效及产品质量的稳定，制定一个严格可靠的质量标准成为保证药品质量的基本要求。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于，提供一种益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，它可以有效解决现有技术中存在的问题，实现对益心舒中药制剂中五味子醇甲成分的含量进行快速、准确、高重现性、高回收率的测定。
[0006]本发明中所述的益心舒中药制剂由人参200g，麦冬200g，五味子133g，黄芪200g，丹参267g，川芎133g和山楂200g制备而成。具体的制备方法为:称取上述重量的人参，粉碎成细粉，备用；称取上述重量的五味子和丹参，用85%乙醇回流提取两次，第一次3小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓缩为80°C的相对密度为1.25?1.30的浸膏；其余四味药材加水煎煮两次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩为80°C的相对密度为1.10~1.15的浸膏；加入一倍量的85%乙醇，混匀，静置，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至适量，与上述的五味子和丹参的提取物合并同时加入上述的人参细粉，混匀，干燥，加入适量辅料，按照常规方法制备成相应的益心舒中药制剂。
[0007]为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案:益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，以五味子醇甲对照品为对照，以甲醇:水=65~75: 35~25为流动相，采用高效液相色谱法测定益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量。
[0008]具体的，以五味子醇甲对照品为对照，以甲醇:水=65~75: 35~25为流动相，采用高效液相色谱法在200~300nm波长处测定益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量。
[0009]更具体的，所述的含量测定方法包括以下步骤:
[0010](I)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水=65~75: 35~25为流动相；流速0.5~1.5mL ?min^1 ;检测波长200~300nm ;柱温28~34°C ;理论板数以五味子醇甲峰计算应不低于2000 ；
[0011](2)对照品溶液的制备:取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每ImL含五味子醇甲0.3mg的溶液，即得；
[0012](3)供试品溶液的制备:取益心舒中药制剂或其内容物，混匀，取lg，精密称定，置于25mL的容量瓶中，加甲醇20mL，超声处理15~30min ;取出，放凉，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0013](4)测定法:分别 精密吸取对照品溶液与供试品溶液各IOy L，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
[0014]优选的，所述检测波长为250nm。
[0015]前述的流动相为甲醇:水=65: 35。
[0016]前述的流速为1.0mL ? min-lo
[0017]前述的柱温为30°C。
[0018]前述含量测定方法中，所述的对照品溶液的制备为:取五味子醇甲对照品3mg，精密称定，置于IOmL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.3mg/mL的溶液，过
0.22um的微孔滤膜，取续滤液，即得。
[0019]前述含量测定方法中，所述的供试品溶液的制备方法为:取益心舒制剂或其内容物混匀；取lg，精密称定，置于25mL容量瓶中，加甲醇20mL，超声处理30min ;取出，放凉，加甲醇至刻度，摇匀，过0.22um的微孔滤膜，取续滤液，即得。
[0020]采用本发明所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，每克益心舒中药制剂中所含的五味子以五味子醇甲(C24H32O7)计，不得少于0.75mg。
[0021]为确保本发明含量测定方法的科学、合理、可行，发明人进行了一系列的试验研究和考察。
[0022]一、仪器与试药(见表1)
[0023]表1
[0024]
【权利要求】
1.益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于:以五味子醇甲对照品为对照，以甲醇:水=65?75: 35?25为流动相，采用高效液相色谱法测定益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量。
2.根据权利要求1所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于，以五味子醇甲对照品为对照，以甲醇:水=65?75: 35?25为流动相，采用高效液相色谱法在200?300nm波长处测定益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量。
3.根据权利要求2所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于，具体的含量测定方法为: (1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水=65?75: 35?25为流动相；流速0.5?1.5mL.mirT1 ;检测波长200?300nm ;柱温28?34°C ;理论板数以五味子醇甲峰计算应不低于2000 ； (2)对照品溶液的制备:取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每ImL含五味子醇甲0.3mg的溶液，即得； (3)供试品溶液的制备:取益心舒中药制剂或其内容物，混匀，取lg，精密称定，置于25mL的容量瓶中，加甲醇20mL，超声处理15?30min ;取出，放凉，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得； (4)测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ L，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
4.根据权利要求2或3所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于，所述检测波长为250nm。
5.根据权利要求1?3任一所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于，所述的流动相为甲醇:水=65: 35。
6.根据权利要求3所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于，所述的流速为1.0mL.mirT1。
7.根据权利要求3所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于，所述的柱温为30°C。
8.根据权利要求3所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于，所述的对照品溶液的制备为:取五味子醇甲对照品3mg，精密称定，置于IOmL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.3mg/mL的溶液,过0.22 μ m的微孔滤膜,取续滤液，即得。
9.根据权利要求3所述的益心舒中药制剂中五味子醇甲的含量测定方法，其特征在于，所述的供试品溶液的制备方法为:取益心舒制剂或其内容物混匀；取lg，精密称定，置于25mL容量瓶中，加甲醇20mL，超声处理30min ;取出，放凉，加甲醇至刻度，摇勻，过.0.22 μ m的微孔滤膜，取续滤液，即得。
【文档编号】G01N30/02GK103592387SQ201310562724
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年11月12日 优先权日:2013年11月12日
【发明者】张观福 申请人:贵州信邦制药股份有限公司