一种苏木素染色液及其含苏木素染色液的he染色液的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种苏木素染色液，包括如下组分：苏木素、铝盐、氧化剂、苯扎氯铵、醇、弱酸、水。本发明还提供了所述苏木素染色液的制备方法、含苏木素染色液的HE染色液及其染色方法。本发明的苏木素染色液对切片进行染色时，背景清晰、层次分明、染色效果好、易于读片，且不易褪色，便于长期存放。
【专利说明】一种苏木素染色液及其含苏木素染色液的HE染色液
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种体外诊断试剂，具体涉及一种苏木素染色液及其制备方法，以及含苏木素染色液的HE染色液以及其染色方法。
【背景技术】
[0002]苏木素伊红染色方法，简称HE染色法，是组织学、胚胎学、病理学中使用最为广泛的技术方法。HE染色是将组织切片或细胞涂片等分别浸入苏木素染色液和伊红染色液中，经过适当的时间和处理，使组织、细胞及其他成分染上不同深浅的颜色，产生不同的折射率，从而便于光学显微镜下进行观察和研究。
[0003]苏木素是一种碱性染料，由洋苏木中提取，被氧化后生成苏木因，同媒染剂共同使用，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色。苏木素的分子式为C16H14O6，结构
式如下:
[0004]
【权利要求】
1.一种苏木素染色液，其特征在于，每100ml所述苏木素染色液中包括如下组分: 苏木素0.3-lg ;铝盐0.5-10g ;氧化剂0.025-2.26 ;苯扎氯铵0.05-lg ;醇5_60ml ;弱酸0.03-6.3g ;余量为水。
2.根据权利要求1所述的苏木素染色液，其特征在于， 所述氧化剂与所述苏木素的质量比小于或等于2.3 ； 所述醇占所述苏木素染色液的20%-60% (V/V)时，所述铝盐的重量应小于或等于IOX(1.2-v) g ;所述V为所述醇占所述苏木素染色液的体积百分比。
3.根据权利要求1或2所述的苏木素染色液，其特征在于， 所述氧化剂为红色氧化汞、碘酸钠、高锰酸钾、高碘酸钾、次氯酸钠、次氯酸钙、过氧化氢中的一种或多种的混合物； 所述弱酸为柠檬酸、水杨酸、冰乙酸中的一种或多种的混合物； 所述醇为乙醇、甲醇、乙二醇、异丙醇、丙二醇、丙三醇中的一种或多种混合物； 所述铝盐为硫酸铝钾、硫酸铝铵、硫酸铝、硝酸铝、氯化铝中的一种或多种的混合物； 所述水为去离子水或蒸馏水中的一种。
4.根据权利要求1-3任一所述的苏木素染色液，其特征在于， 每100ml所述苏木素染色液中包括如下组分: 苏木素Ig ;硫酸招3.6g` ;碘酸钠0.1g ;苯扎氯铵0.1g ;乙醇IOml ;冰乙酸2.1g ;余量为水。
5.根据权利要求1-4任一所述的苏木素染色液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤， a.按选定的比例取醇、苏木素，将所述苏木素加入醇中，加热溶解，得到苏木素醇溶液，备用; b.按选定的比例取水、铝盐，使所述铝盐完全溶解于水中，加入步骤a中得到的所述苏木素醇溶液，得到混合液； c.按选定的比例取氧化剂、苯扎氯铵、弱酸，将所述氧化剂搅拌加入步骤b中得到的所述混合液中，加热溶液变深紫色后，冷却，加入所述苯扎氯铵、弱酸，混合均匀，过滤，即得苏木素染色液。
6.一种HE染色液，包含权利要求1-4任一项所述的苏木素染色液。
7.权利要求6所述的HE染色液，其特征在于，还包括伊红染色液。
8.权利要求7所述的HE染色液，其特征在于，所述伊红染色液，按重量比计算，至少包括以下组分: 伊红0.1_2%，余量为水、乙醇中的一种或两者的混合溶液。
9.根据权利要求6-8任意一项所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)切片预处理:取待染色石蜡切片按常规方式脱蜡、水化； 2)苏木素伊红染色:将步骤I)中得到的经预处理后切片置于所述苏木素染色液中染色3-10min ;取出后水洗，分化，水洗，返蓝后，再水洗；取所述伊红染色液对切片染色； 3)切片脱水、透明、封片:将步骤2)得到的染色后的切片采用常规方式脱水，透明处理，封片，即可。
10.根据权利要求9所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步骤I)为:取石蜡切片置于二甲苯中脱蜡2-3次，每次5-10min ;将上述石蜡切片依次置于无水乙醇中2_3次、每次3-5min，体积分数为90%_95%的乙醇中1_2次、每次l_3min，体积分数为60%_80%的乙醇中l-3min,再水洗l_5min。
11.根据权利要求10所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步骤I)为:取石蜡切片置于二甲苯中脱蜡3次，每次5min ;将上述石蜡切片依次置于无水乙醇中2次、每次3min,体积分数为95%的乙醇中2次、每次3min，体积分数为70%的乙醇中3min，再用蒸馏水水洗5min。
12.根据权利要求9-11任一所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步骤2)为:将步骤I)中得到的经预处理后切片置于所述苏木素染色液中染色3-10min ;取出后水洗l-20min,用0.1%_1%盐酸乙醇分化l_60s后,水洗l_5min,用0.2%氨水或饱和碳酸锂水溶液返蓝30s-60s后，水洗l_5min ;取所述伊红染色液对切片染色。
13.根据权利要求12所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步骤2)为:将步骤I)中得到的经预处理后切片置于所述苏木素染色液中染色5min ;取出后水洗5min，用0.25%盐酸乙醇分化30s后，水洗5min，用1.36%的碳酸锂水溶液中返蓝30s后，水洗5min ；取所述伊红染色液对切片染色。
14.根据权利要求9-13任一所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步骤3)为:将步骤2)得到的染色后的切片分别用体积分数为60-80%的乙醇脱水10-30S，体积分数为95%的乙醇脱水2-3次、每次l_5min，无水乙醇脱水2_3次，每次l_5min ;再置于二甲苯中透明2-3次，每次2-5min ;封片，即可。
15.根据权利要求14所述的HE染色液的染色方法，其特征在于，所述步骤3)为:将步骤2)得到的染色后的切片分别用体积分数为80%的乙醇脱水30s，体积分数为95%的乙醇脱水2次、每次3min，无水乙醇脱水2次，每次3min ;再置于二甲苯中透明2次，每次5min ；封片，即可。``
【文档编号】G01N1/30GK103694732SQ201310750204
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月31日 优先权日:2013年12月31日
【发明者】邹霈, 吴军, 吴昊, 谢敏浩, 王洪勇, 刘娅灵 申请人:江苏省原子医学研究所