一种苯菌酮残留量的测定方法
【专利摘要】本发明公开了一种苯菌酮残留量的测定方法，用乙腈或1%乙酸乙腈均质提取样品中残留的苯菌酮，提取液经乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）和十八烷基硅烷键合相（C18）基质分散净化后，液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测，采用空白基质溶液稀释标准建立校正的标准曲线，外标法定量。本方法平均回收率为80.2%～94.9%，平均相对标准偏差（RSD）为4.0%～6.8%，检出限低于0.10μg/kg，具有操作简便、快速、灵敏度高、重复性好、定性定量准确的优点。能满足欧盟、美国、韩国、日本等国家对相应产品安全检测的技术要求，为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展提供有力的技术支撑。
【专利说明】一种苯菌酮残留量的测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种苯菌酮残留量的测定方法，更具体地说是采用高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)定性定量测定蔬菜、水果和小麦等谷类作物中残留的苯菌酮含量的方法，属于农药残留量的测定【技术领域】。
【背景技术】 [0002]白粉病俗称白毛病，是一种广泛发生的世界性病害，病原菌主要通过气流传播，具有潜育期段、再侵染频繁、流行性强、抗性发展快等特点，对我国蔬菜(如茄子、西红柿等)、水果(如葡萄、柑橘等)和粮谷作物(如小麦、大麦等)为害严重，每年对蔬菜、水果和谷类作物等农业生产造成重大的经济损失。
[0003]在白粉病综合治理体系中通常使用抗病品种和高效药剂。白粉病病原菌对人类的挑战就是其具有很强的发展危险的抗药基因型的能力，而使原有防治措施无效。白粉病有很多特性可以快速适应环境，如世代期短，潜在的性重组，可以在空中传播等。因此，寻找新型有效的杀菌剂来对抗白粉病具有重要意义。
[0004]苯菌丽(metrafenone,CAS220899-03-6),化学名称为(3_ 漠 _6_ 甲氧基-2-甲基苯基)-(2，3，4-三甲氧基-6-甲基苯基)甲酮，是由巴斯夫公司开发的一种新颖的二苯酮类新型杀菌剂，是植物化学保护领域中一种全新的活性成分，商品名称为Flexity，结构式为:
【权利要求】
1.一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)提取 称取粉碎样品于具塞离心管中，加入乙腈或1%乙酸乙腈均质或振荡超声提取后，加入无水硫酸镁、氯化钠或乙酸钠，剧烈涡旋Irnin后离心。 (2)净化 移取样品提取液上清液于离心管中，加入基质分散固相萃取剂，涡旋振荡，离心，吸取上清液过0.22 μ m有机相滤膜。 (3)标准工作溶液的配制 将空白样品按上述步骤(I )、( 2 )处理，用该空白样品基质溶液在0.5~IOO μ g/L范围内，配制至少5个浓度的苯菌酮系列浓度标准工作液。 (4)液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定 将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行LC-MS/MS测定，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；在相同条件下将步骤(2)中净化后的样品液注入LC-MS/MS进行测定，测得样品液中苯菌酮的色谱峰面积，代入标准曲线，得到样品液中苯菌酮含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品中苯菌酮残留量；若上机溶液中苯菌酮残留量超过线性范围上限，需用提取溶剂将上机溶液浓度稀释至线性范围之内。
2.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(1)中样品若为脱水果蔬，需降低称样量，脱水果蔬和谷类作物提取前均须加适量水充分浸润。
3.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(1)中采用乙腈提取时加入氯化钠盐析，采用1%乙酸乙腈提取时加入乙酸钠盐析；含水量较少的样品盐析时需加入一定量的水；样品若为谷类作物，提取后需将提取液置于_18°C冰箱中冷冻20min以上,离心后分取1.5~2mL提取液于2.0mL离心管中，以不低于12000r/min的速度冷冻离心lOmin。
4.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(2)中基质分散固相萃取剂由无水硫酸镁、C18和PSA组成，每体积提取液中无水硫酸镁、C18和PSA加入量分别为150mg、50mg和25mg。
5.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(4)中液相色谱的流动相为A:含5mmol/L乙酸铵的水溶液，流动相B:乙腈。
6.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(4)中液相色谱使用梯度洗脱的方法，梯度洗脱的程序为:
7.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(4)中液相色谱的色谱柱填料为C18。
8.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(4)中质谱检测使用电喷雾质谱检测，电喷雾电压为+3500至+4500V，雾化气压力为275.9kPa，干燥气为氮气，干燥气温度为350°C，干燥气流速为10.0L/min。
9.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(4)中质谱检测使用多反应监测(MRM)扫描模式，苯菌酮的母离子为408.9~409.3，子离子分别为208.7 ~209.1 和 226.6 ~227.0。
10.根据权利要求1所述的一种苯菌酮残留量的测定方法，其特征在于，步骤(4)中检测样液和基质标准工作溶液时，若样液中农药色谱峰保留时间与标准溶液中相应农药保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且离子丰度比与标准溶液的离子丰度比相一致，则可判断样液中存在这种农药；若上述两个条件不能同时满足，则判断不含该种农药。
【文档编号】G01N30/02GK103776934SQ201410053103
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2014年2月17日 优先权日:2014年2月17日
【发明者】崔淑华, 张晓梅, 郭庆龙, 王兴华, 秦良勇, 刘润珠 申请人:崔淑华