茶叶中13种农药残留的自然基体标准样品及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种茶叶中含13种农药残留的自然基体标准样品及其制备方法。将肟菌酯、啶酰菌胺、嘧霉胺、甲霜灵、联苯菊酯、硫丹、三唑酮、烯唑醇、氟环唑、哒螨灵、莠灭净、敌草胺、乙草胺喷施于供试茶树或供试区土壤中，采集茶叶制成自然基体标准样品。该茶叶自然基体标准样品制备方法科学合理，可操作性强，制备得到的样品均匀性好、稳定性好、易于保存、使用方便；取样量及提取、净化方法与日常分析样品相同，不同时间、不同环境温度与不同检测人员所得到的检测数据可靠准确，宜于在检测工作中作为质量控制手段使用，具有很高的应用与推广价值。
【专利说明】茶叶中13种农药残留的自然基体标准样品及其制备
【技术领域】
[0001]本发明属于分析化学领域，具体涉及一种茶叶中13种农药残留自然污染标准样本的制备方法。
【背景技术】
[0002]茶叶是我国的优势产业，茶叶中农药残留问题一直是人们关心的重点问题。近年来，有关茶叶中农药残留的检测方法不断被开发，对保障茶叶安全、促进茶叶贸易起了关键作用。
[0003]在农药残留检测技术研究中，精准的残留检测方法离不开对检测结果的质量控制，由于以空白基体添加的方式进行质控不能真实地重现药物经过自然代谢后在生物体内的提取效率，无法准确反映方法的准确性，得到的检测结果就不足以令人信服。因此，为保证检测结果的准确性，在农药残留分析中使用基于实际污染制备的基体标准物质非常重要。欧盟对农药残留分析方法与结果表达的指南SANCO 12571-2013中指出了采用实物标准进行过程控制的重要性；IS017025在“5.4检测和校准方法及方法确认”中提到“如可行，实验室应使用有证标准物质评估方法偏差。使用的有证标准物质应尽可能与样品基体一致”。不仅如此，基体标准物质还可用于证明检测工作与所要求的标准操作程序相符或参加能力验证中、校准仪器、解决分析中遇到的问题以及保证结果的准确。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种茶叶中含13种农药残留的自然基体标准样品及其制备方法，制备方法科学合理，可操作性强，制备得到的样品可作为实物标样在日常检测工作中用于建立分析方法，确定实验准确度、精密度，应用广泛，样品质量好。
[0005]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:
一种茶叶中含13种农药残留的自然基体标准样品的制备方法，包括以下步骤:
1)供试农药的选择:根据农药的稳定性、代表性、实用性，筛选获得13种农药；
2)对供试茶树施药:取肟菌酯、50wt%啶酰菌胺、40wt%嘧霉胺混合、喷施于供试茶树上，然后取35wt%甲霜灵、联苯菊酯、35的％硫丹混合、喷施于供试茶树上，再取25wt%三唑酮、5wt%烯唑醇、氟环唑混合、喷施于土壤中，将哒螨灵喷施于土壤中，最后取莠灭净、敌草胺、乙草胺混合、喷施于土壤中；肟菌酯的用量为15克/亩、50wt%啶酰菌胺的用量为30克/亩、40wt%嘧霉胺的用量为60mL/亩、35wt%甲霜灵的用量为40克/亩、联苯菊酯的用量为40mL/亩、35wt%硫丹的用量为40克/亩、25wt%三唑酮的用量为20克/亩、5wt%烯唑醇的用量为40mL/亩、氟环唑的用量为30mL/亩，莠灭净的用量为130克/亩。具体方法为:
①供试茶树共2.2亩:其中0.2亩为空白试验区、与供试区间隔15米，2亩为供试区、均分为10个区域，供试茶树在试验前25天内不施肥、施药；
②对供试区的茶树施药，施药方法为:取肟菌酯30g、50wt%啶酰菌胺60g、40wt%嘧霉胺120ml混合、喷施于供试区茶树上，然后取35wt%甲霜灵80g、联苯菊酯801111、35被％硫丹80g混合、喷施于供试区茶树上，再取25wt%三唑酮40g、5wt%烯唑醇80ml、氟环唑60ml混合、喷施于供试区土壤中，随后取哒螨灵15g喷施于供试区土壤中，最后取莠灭净260g、敌草胺200g、乙草胺200g混合、喷施于供试区土壤中；施药后，农药在茶叶中自然代谢，其中硫丹的残留标识物为α-硫丹、β-硫丹和硫丹硫酸酯，其余12种农药残留标识物均为药物本身；空白试验区的茶树未施药；
3)样品采集:空白样品于施药前I天采集；自然污染样品于分别于施药第1、2、3、5、7、10、15、20、25、30天后采集，每次采集选择一个区域、每个区域不重复采样；
4)空白样品与自然污染样品的制备:分别取施药前于空白试验区采集的茶叶鲜叶，以及于供试区施药第1、2、3、5、7、10、15、20、25、30天后采集的茶叶鲜叶，经230-250 °C杀青3分钟后揉捻I小时，110 °C干燥4小时后制得成品；
5)采用液相色谱-串联质谱和气相色谱-质谱法对样品进行检测；经检测，施药第15天后，农药在茶叶中的降解趋于稳定；因此采集施药第15天后的茶叶鲜叶制成成品；
6)将于施药第15天后采集的茶叶鲜叶制得的成品研磨成粉状，充分混匀后过100目分样筛，真空独立包装，每个独立包装5 g，置于室温保存。
[0006]根据如上所述的制备方法制得的茶叶中含13种农药残留的自然基体标准样品，样品中卩密霉胺的浓度为9.22 mg/kg、乙草胺为1.45 mg/kg、莠灭净为1.48 mg/kg、甲霜灵为36.5 mg/kg、三唑酮为10.1 mg/kg、敌草胺为2.45 mg/kg、烯唑醇为4.45 mg/kg、肟菌酯为6.43 mg/kg、联苯菊酯为3.87 mg/kg、氟环唑为13.2 mg/kg、唳酰菌胺为31.1 mg/kg、咕螨灵为 1.12 mg/kg。
[0007]所述的自然基体标准样品中硫丹的残留标识物为α -硫丹、β -硫丹和硫丹硫酸酯之和，其浓度为2.075 mg/kg，其中α -硫丹为0.764 mg/kg、β -硫丹为1.26 mg/kg、硫丹硫酸酯为0.051 mg/kg。
[0008]本发明的有益效果在于:
本发明公开的茶叶中含13种农药残留的自然基体标准样品，已作为质量控制标准样品用于茶叶中农药残留检测时的过程质量控制与方法验证。结果证明该样品均匀性好、稳定性好、易于保存、使用方便；取样量及提取、净化方法与日常分析样品相同，不同时间、不同环境温度与不同检测人员所得到的检测数据可靠准确，宜于在检测工作中作为质量控制手段使用，具有很高的应用与推广价值。
【专利附图】
【附图说明】
[0009]图1为茶叶中13种农药残留降解曲线图，其中A为嘧霉胺、B为莠灭净、C为甲霜灵、D为氯环唑、E为啶酰菌胺、F为敌草胺、G为三唑酮、H为乙草胺、I为烯唑醇、K为肟菌酯、L为联苯菊酯、M为咕螨灵、N为硫丹(以α-硫丹、β -硫丹和硫丹硫酸酯之和计)。
【具体实施方式】
[0010]本发明用下列实施例来进一步说明本发明，但本发明的保护范围并不限于下列实施例。
[0011]实施例1
供试化合物的选择在寻找可以作为基体标准物质特性量的化合物时，考虑的主要因素包括:
(1)稳定性:相当一部分农药在自然条件下易分解，难以准确赋值和贮存，不适合作为基体标准物质特性量；
(2)代表性:农药按功能分包括了杀虫剂、除草剂、杀菌剂、杀螨剂等，分属于有机氮、有机卤素、有机磷、拟除虫菊酯类，选择特性量时尽可能涵盖不同功能的农药品种。此外，化合物的极性也是一个考虑因素。
[0012](3)实用性:重点考虑茶叶生长过程中较常使用的农药、茶叶贸易中经常被要求检测的农药，并且已在我国登记注册，在本地市场可购得商品农药的化合物。
[0013]综上，获得表1中所列出的13种农药。
[0014]表1筛查获得的13种农药
【权利要求】
1.一种茶叶中含13种农药残留的茶叶自然基体标准样品的制备方法，其特征在于:包括以下步骤: O对供试茶树施药:取肟菌酯、50wt%啶酰菌胺、40wt%嘧霉胺混合、喷施于供试茶树上，然后取35wt%甲霜灵、联苯菊酯、35被％硫丹混合、喷施于供试茶树上，再取25wt%三唑酮、5wt%烯唑醇、氟环唑混合、喷施于供试区土壤中，将哒螨灵喷施于供试区土壤中，最后取莠灭净、敌草胺、乙草胺混合、喷施于供试区土壤中； 2)样品采集与制备:采集施药第15天后的茶叶鲜叶，经230-250 °C杀青3分钟后揉捻I小时，110 °C干燥4小时后制得成品；将所制成的茶叶成品研磨成粉状，充分混匀后过100目分样筛，真空独立包装、装袋，每袋为5g，灭菌，置于室温保存。
2.根据权利要求1所述的茶叶中含13种农药残留的茶叶自然基体标准样品的制备方法，其特征在于:步骤I)中肟菌酯的用量为15克/亩、50wt%啶酰菌胺的用量为30克/亩、40wt%嘧霉胺的用量为60mL/亩、35wt%甲霜灵的用量为40克/亩、联苯菊酯的用量为40mL/亩、35wt%硫丹的用量为40克/亩、25wt%三唑酮的用量为20克/亩、5wt%烯唑醇的用量为40mL/亩、氟环唑的用量为30mL/亩，莠灭净的用量为130克/亩。
3.根据权利要求1所述的制备方法制得的茶叶中含13种农药残留的自然基体标准样品，其特征在于:所述的自然基体标准样品中卩密霉胺的浓度为9.22 mg/kg、乙早胺为1.45mg/kg、莠灭净为1.48 mg/kg、甲霜灵为36.5 mg/kg、三唑酮为10.1 mg/kg、敌草胺为2.45mg/kg、烯唑醇为4.45 mg/kg、厢菌酯为6.43 mg/kg、联苯菊酯为3.87 mg/kg、氟环唑为13.2mg/kg、唳酰菌胺为31.1 mg/kg、咕螨灵为1.12 mg/kg。
4.根据权利要求1所述的制备方法制得的茶叶中含13种农药残留的自然基体标准样品，其特征在于:所述的自然基体标准样品中硫丹的残留标识物为α-硫丹、β-硫丹和硫丹硫酸酯之和，其浓度为2.075 mg/kg，其中α -硫丹为0.764 mg/kg、β -硫丹为1.26 mg/kg、硫丹硫酸酯为0.051 mg/kg。
【文档编号】G01N1/28GK103808545SQ201410060555
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2014年2月24日 优先权日:2014年2月24日
【发明者】杨方 申请人:福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心