一种测定青蒿琥酯片含量的高效液相色谱法
【专利摘要】本发明涉及一种药物的含量检测领域，具体涉及一种检测青蒿琥酯片含量的高效液相色谱法，并采用外标法测定青蒿琥酯片的含量。本发明色谱条件为：C18（4.6×250mm，5μm），流动相为甲醇和水混合组成的体积比为7:3，乙酸调流动相PH为4，使用紫外检测器，检测波长为210nm。本发明测定方法中流动相对色谱柱无伤害，辅料对其含量测定无干扰，测定准确性高，分析简便等特点。测定青蒿琥酯片线性范围为0.5μg/ml~100μg/ml，线性相关系r=0.9998，精密度的RDS=0.87%，稳定性的RDS=0.3%。
【专利说明】一种测定青蒿琥酯片含量的高效液相色谱法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种药物含量测定方法，具体涉及一种测定青蒿琥酯片含量的高效液相色谱方法。
【背景技术】
[0002]青蒿琥酯片，通用名青蒿琥酯(结构式见附图1)，分子式是C19H28O8，颜色为白色片，抗疟药。青蒿琥醋片是青蒿素的衍生物，其对鼠疟原虫红内期超微结构的影响，主要是疟原虫膜系结构的改变，该药首先作用于食物泡膜、表膜、线粒体、其次是核膜、内质网，此外对核内染色质也有一定的影响。该药是作用于食物泡膜，从而阻断了营养摄取的最早阶段，使疟原虫较快出现氨基酸饥饿，迅速形成自噬泡，并不断排出虫体外，使疟原虫损失大量胞浆而死亡。并且青蒿琥酯片对疟原虫无性体有较强的杀灭作用，能迅速控制疟疾发作，治疗间日疟、恶性平均原虫转阴时间快于氯喹。据世界卫生组织最新报告，疟疾是除艾滋病以外世界上明显呈升趋势的传染病，它是亚热带和热带地区的一种传播性疾病，危害着二十亿人口的健康，恶性疟疾每年造成4亿多人感染和300万人死亡，在非洲已成为危害人类健康和生命的杀手。目前公开报道:夏铮铮(HPLC法测定青蒿琥酯及其片剂的含量，夏铮铮，范琦，张小宋，药物分析杂质，2006年05期)报道，利用HPLC法，色谱柱为PlatinumAlhech C_(18)柱(250 mmX4.6 mm，5 μ m)，流动相为乙腈-水(45: 55，用稀醋酸调 PH为4.5)，外标法测定。据中国药典2005年版收载品种，采用酸碱滴定法测定青蒿琥酯片含量，测定时易受酸性杂质和辅料的干扰，准确性较差。据中国药典2010年版收载品种，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾1.36g，加水IOOOml使溶解，用磷酸调PH值为3.0)=42:58为流动相，此测定流动相对色谱柱伤害大。本发明提供的测定方法，流动相对色谱柱无伤害，辅料对其含量测定无干扰，测定准确性高，分析简便等特点，对于准确测定青蒿琥酯片剂及注射液的含量具有重要的应用价值。
【发明内容】
[0003]针对现有的检测方法，本发明的目的在于提供一种操作方法方便，流动相对色谱柱无伤害，辅料对其含量测定无干扰，测定准确性高，分析简便的青蒿琥酯片含量测定。为了达到上述目的，本发明采用如下方案:
本发明的一个具体的实施例中，本发明采用高效液相色谱法测定青蒿琥酯片的含量，即采用外标法测定青蒿琥酯片的含量。
[0004]本发明另一个具体的实施例中，本发明典型但不限制的选用液相色谱仪为:美国 Agilent进行检测，紫外检测器。
[0005]本发明又一个具体的实施例中，本发明典型但不限制的所选色谱柱:C18(4.6x250mm, 5 μ m),检测波长为 210nm。
[0006]本发明再一个具体的实施例中，所述的流动相为甲醇和水混合组成的体积比为7-6:3-4，乙酸调流动相PH为4，体积优选7:3。[0007]本发明进一个具体的实施例中，所述的进样量为5-40 μ I,优选20 μ I。
本发明还一个具体的实施例中，所述流动相流速为0.5-1.2mg/ml,优选1.0 mg/ml。
【专利附图】
【附图说明】
[0008]图1:青蒿琥酯片结构式。
[0009]图2:青蒿琥酯标准品液相色谱图。
[0010]图3:青蒿琥酯片液相色谱图。
[0011]图4:青蒿琥酯标准溶液线性关系。
[0012]图5:青蒿琥酯标准溶液工作曲线。
【具体实施方式】
[0013]色谱条件:
采用Agilent-1260高效液相色谱仪,用C18色谱柱C18 (4.6x250mm, 5 μ m)；
柱温:25°C。
[0014]检测器:紫外检测器，检测波长210nm。
[0015]流动相溶液:甲醇和水混合组成的体积比为7:3，乙酸调流动相PH为4。
[0016]根据含量计算公式:青蒿琥酯片含量(％)=(A1XC2)/(A2XC1)
其中Al为待测样品峰面积
A2为标准品峰面积 Cl待测样品浓度(mg/ml)
C2标准品浓度(mg/ml)
带入数据即可得到青蒿琥酯片的含量。
[0017]实施例1:
精密称取IOmg青蒿琥酯标准品，置IOml容量瓶中，加甲醇适量，振荡使青蒿琥酯溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用注射器吸取Iml经0.2 μ m微孔滤头过滤后，贴上标签放入液相色谱仪中，按本发明确定的方法，如下所述的色谱条件下进行测定并记录色谱峰面积，色谱图见图2 ;其中，色谱柱:C18 (4.6X 250mm, 5 μ m);流动相为甲醇和水混合组成的体积比为7:3，乙酸调流动相PH为4 ;色谱温度:25°C ;进样量:20μ I ;流速:1.0ml/min ;检测器为紫外检测器；检测波长:210nm。
[0018]实施例2:
取本品20片，精密测定，研细，精密称取适量(约相当于青蒿琥酯50mg)，置50ml容量瓶中，加甲醇适量，振荡使青蒿琥酯溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用注射器吸取Iml经
0.2 μ m微孔滤头过滤后，贴上标签放入液相色谱仪中，按本发明确定的方法，如下所述的色谱条件下进行测定并记录色谱峰面积，其色谱图见图3 ；
将实施例中标准溶液与待测样品所得峰面积值带入上述公式计算，计算结果如表1:
表I青蒿琥酯片含量测定结果如下表
【权利要求】
1.本发明旨在采用高效液相色谱法(HPLC)测定青蒿琥酯片的含量，选用高效液相色谱仪为美国Agilent，所述的液相色谱柱为C18，流动相为甲醇和水混合组成的体积比为.7:3，乙酸调流动相PH为4，紫外检测器。
2.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，高效液相色谱法采用外标法进行青蒿琥酯片的含量测定。
3.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，所述色谱柱为:C18(4.6X250mm,5 μ m),以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。
4.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，所述流动相为甲醇和水混合组成的体积比为7-6:3-4，乙酸调流动相PH为4，体积优选7:3。
5.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，检测波长为210nm，柱温为25°C，流速为.1.0ml/min,进样体积为20 μ I。
【文档编号】G01N30/62GK103884805SQ201410116114
【公开日】2014年6月25日 申请日期:2014年3月27日 优先权日:2014年3月27日
【发明者】张梅, 彭学东, 赵金召, 祁法娟 申请人:张家港威胜生物医药有限公司