一种金线莲苷定量分析检测方法
【专利摘要】本发明公开了一种金线莲苷定量分析检测方法，本发明的方法运用HPLC-ESI/MS分析，通过对比样品液和标准液的保留时间在6.20分钟、质量数为265的提取离子流色谱峰的积分面积，计算得出待测样品中的金线莲苷的浓度，该方法重复性好、准确率高。
【专利说明】一种金线莲苷定量分析检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种金线莲苷定量分析检测方法。
【背景技术】
[0002]金线莲苷(Kinsenoside)是兰科(Orchidaceae)开唇兰属植物金线莲Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.中的高含量活性成分(J Nat Med, 2008,62,
132)，其结构式如下:
[0003]
【权利要求】
1.一种金线莲苷定量分析检测方法，其特征在于:包括如下步骤: (1)用金线莲苷纯品配制已知浓度的金线莲苷标准液； (2)制备金线莲苷粗提物，将金线莲苷粗提物置于索氏提取器中，依次用石油醚、乙醚和氯仿分别进行回流提取2?3小时，残余物加水溶解过滤去除杂质，并经适当稀释，即得金线莲苷待测样品液； (3)将金线莲苷标准液进行HPLC-ESI/MS分析，再积分计算得到该标准液的保留时间在6.20分钟、质量数为265的提取离子流色谱峰的积分面积，即标准面积Al ； (4)将金线莲苷待测样品液进行同样条件的HPLC-ESI/MS分析，再积分计算得到该待测样品也保留时间在6.20分钟、质量数为265的提取离子流色谱峰的积分面积，即样品面积A2 ； (5)将标准面积Al和样品面积A2进行比较，得出金线莲苷待测样品液中金线莲苷的含量，计算公式如下:金线莲苷待测样品液中金线莲苷的含量=金线莲苷标准液中金线莲苷的含量XA2/A1 ； (6)根据金线莲苷待测样品液中金线莲苷的含量计算得出待测的新鲜金线莲植物中的金线莲苷的含量。
2.如权利要求1所述的一种金线莲苷定量分析检测方法，其特征在于:所述金线莲苷粗提物的制备方法为:以水、甲醇或乙醇萃取新鲜的金线莲植物或植物产品，再浓缩得到所述金线莲苷粗提物。
3.如权利要求2所述的一种金线莲苷定量分析检测方法，其特征在于:所述金线莲苷粗提物的制备方法为:以甲醇在40°C的温度下超声提取，再真空浓缩，即得所述金线莲苷粗提物。
4.如权利要求1所述的一种金线莲苷定量分析检测方法，其特征在于:所述金线莲苷标准液和所述金线莲苷待测样品液均需经0.22 μ m的微孔滤膜过滤。
5.如权利要求1所述的一种金线莲苷定量分析检测方法，其特征在于:所述步骤(3)和步骤(4)中的HPLC-ESI/MS分析使用填料粒径小于等于5 μ m的ODS或BDS柱，柱温25°C，使用85%的甲醇做流动相，220nm紫外检测。ESI/MS分析使用离子源温度300°C，干燥气体流速为8L/min，雾化气体压力为25psi。
【文档编号】G01N30/02GK103983711SQ201410215663
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2014年5月21日 优先权日:2014年5月21日
【发明者】刘青, 刘珍伶 申请人:华侨大学