一种烟草废料中多酚类物质的提取方法
【专利摘要】本发明公开了一种烟草废料中多酚类物质的提取方法。该方法利用有机溶剂超声萃取烟草废料中的多酚类物质，在萃取液中加入非离子表面活性剂和辅助萃取剂涡旋、离心。以绿原酸作为标准品，紫外分光光度法检测烟草废料中提取出来的多酚的含量。与现有多酚物质的提取方法相比，该方法萃取条件温和，所用有机溶剂量大幅减少，提取剂对环境友好、提取成本低等特点。
【专利说明】一种烟草废料中多酚类物质的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明属于分析化学前处理与预富集【技术领域】，涉及一种烟草废料中多酚类物质的提取及测定方法。
【背景技术】
[0002]我国的烟草产量占世界产量的45%，烟草工业每年都有大量的烟末、霉变烟草等富含纤维素的物料被弃置，既浪费资源又污染环境。烟草废弃物通过微生物转化处理是其综合利用途径之一，但烟草中所含的绿原酸等多酚类物质及烟碱等对很多微生物有抑制作用，因此有必要将其提取提出来，而且绿原酸等多酚类物质本身具有重要的应用价值，浸提残渣可用微生物转化处理为有机肥基质。绿原酸等多酚类物质在植物中普遍存在，传统工艺大多是从金银花、杜仲叶中提取，从废弃烟草中提取多酚类物质是必要的。
[0003]目前，烟草中多酚物质的提取方法主要有，有机溶剂浸提法、超声波提取、微波提取等方法。本发明采用的浊点萃取方法是利用非离子表面活性剂在水溶液中与辅助萃取剂混溶改变了相互的极性，使其对多酚类物质有着更好的亲和力，萃取效果增强；而且它有着在常温下或较低的温度就可操作、对环境友好、成本低等优点，适用于低含量多酚类物质的提取。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于针对现在浊点萃取方法存在的不足，提供了一种新型的提取烟草废料中多酚类物质的方法，对于多酚物质提取具有指导意义。
[0005]本发明的目的是通过以下方案来实现的:
[0006]一种烟草废料中多酚类物质的提取方法包括以下步骤:
[0007](I)取一定质量的烟草废料置于一定体积的有机溶剂中,在一定温度下超声提取，过滤，滤液待用；
[0008](2)取上述样品溶液，加入一定量的去离子水和非离子表面活性剂和辅助萃取剂，涡旋，离心，得到表面活性剂相及水相；多酚类物质被提取到表面活性剂相；
[0009](3)用紫外分光光度法测定表面活性剂相中多酚类物质的含量。
[0010]本发明中所述的取烟草废料与有机溶剂的重量体积比为1:5-15，有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮之一种，其浓度为30% -100%。
[0011]本发明中所述的非离子表面活性剂包括聚氧乙烯脂肪醇Genapol X-080、脂肪醇聚氧乙烯醚AE0-9之一种，用量为每5mL水溶液加0.1?0.5mL ;助萃剂包括正己醇、正辛醇、异辛醇、正戊醇之一种，用量为每5mL水溶液加0.1?0.5mL。
[0012]本发明中所述的提取温度为40-50°C，超声时间为10-30min，涡旋时间为l_3min，离心速度为3000-6000r/min,离心时间为3_15min。
[0013]本发明以绿原酸作为标准品，紫外分光光度法检测烟草废料中提取出来的多酚的含量，测定波长为540nm。
[0014]相对于现有技术，本发明具有以下显著优点:
[0015]1.非离子表面活性剂在水溶液中与辅助萃取剂混溶改变了相互的极性，使其对多酚类物质有着更好的亲和力，萃取效果明显增强。
[0016]2.所采用的非离子表面活性剂浊点低，在常温或稍加热条件下就可以进行萃取，操作条件温和。
[0017]3.与现有多酚物质的提取方法相比，提取中所用有机溶剂量大幅减少，提取剂对环境友好、提取成本低等特点。
【具体实施方式】
[0018]下面结合实施例对本发明作进一步地说明，但本发明的保护范围并不限于此。
[0019]多酚物质检测方法:
[0020](I)工作曲线的制作:分别取浓度为10mg/mL的多酚标准溶液于1mL的刻度离心管中，用去离子水配制成浓度分别为l、2、4、6、8、10mg/mL的多酚标准溶液，以绿原酸作为标准品用紫外分光光度法检测，波长为540nm，得到线性回归方程y = 0.01435χ-0.008，相关系数 R2 = 0.9960。
[0021](2)样品多酚含量测定:取处理好的样品溶液，测定其吸光度，根据(I)中工作曲线计算样品中多酚物质含量。
[0022]实施例1
[0023]利用本发明提取烟草废料中的多酚物质并测定其含量，实施过程包括如下步骤:
[0024](I)样品的预处理:
[0025]取废料烟末1g加入95%乙醇溶液90mL，50°C下放入超声中提取15min，过滤，将滤液放入样品瓶中备用。
[0026](2)样品提取:
[0027]取步骤⑴中样品溶液2mL于1mL刻度离心管中，加入3mL去离子水，加入
0.5mT,AF,0~9和0.3mL正己醇于离心管中，润旋2min, 3000r/min离心15min,目标物被萃取于离心管上层。
[0028](3)按上述多酚物质检测方法用紫外分光光度法进行检测，计算出多酚类物质的量为 2.13mg/mL。
[0029]实施例2
[0030]利用本发明提取烟草废料中的多酚物质并测定其含量，实施过程包括如下步骤:
[0031](I)样品预处理:
[0032]取废料烟末1g加入75%甲醇150mL溶液，45°C下放入超声中提取20min，过滤，将滤液放入样品瓶中备用。
[0033](2)样品提取:
[0034]取步骤(I)中样品溶液2mL于1mL刻度离心管中，加入3mL去离子水，取
0.2mLAE0-9和0.2mL正辛醇于离心管中，润旋3min, 4000r/min离心lOmin,目标物被萃取于离心管上层。
[0035](3)按上述多酚物质检测方法用紫外分光光度法进行检测，计算出多酚类物质的量为 5.65mg/mL。
[0036]实施例3
[0037]利用本发明提取烟草废料中的多酚物质并测定其含量，实施过程包括如下步骤:
[0038](I)样品预处理:
[0039]取废料烟末1g加入50mL丙酮，50°C下放入超声中提取lOmin，过滤，将滤液放入样品瓶中备用。
[0040](2)样品测定:
[0041]取步骤(I)中样品溶液2mL于1mL刻度离心管中，加入3mL去离子水，力口
0.5mLX-080和0.1mL正戍醇于离心管中，润旋lmin, 5000r/min离心6min,目标物被萃取于离心管上层。
[0042](3)按上述多酚物质检测方法用紫外分光光度法进行检测，计算出多酚类物质的量为 3.78mg/mL。
[0043]实施例4
[0044]利用本发明提取烟草废料中的多酚物质并测定其含量，实施过程包括如下步骤:
[0045](I)样品预处理:
[0046]取废料烟末1g加入30%丙酮水溶液90mL，40°C下放入超声中提取30min，过滤，将滤液放入样品瓶中备用。
[0047](2)样品测定:
[0048]取步骤(I)中样品溶液5mL于1mL刻度离心管中，加0.lmLX-080和0.3mL异辛醇于离心管中，涡旋2min，6000r/min离心3min，目标物被萃取于离心管上层。
[0049](3)按上述多酚物质检测方法用紫外分光光度法进行检测，计算出多酚类物质的量为 3.56mg/mL。
【权利要求】
1.一种烟草废料中多酚类物质的提取方法，其特征在于包括以下步骤: (1)取一定质量的烟草废料置于一定体积的有机溶剂中，超声提取，过滤，滤液待用； (2)取上述样品溶液，加入一定量的去离子水和非离子表面活性剂和辅助萃取剂，涡旋，离心，得到表面活性剂相及水相；多酚类物质被提取到表面活性剂相； (3)用紫外分光光度法测定表面活性剂相中多酚类物质的含量。
2.根据权利要求1所述的烟草废料中多酚类物质的提取方法，其特征在于:步骤(I)中所述的烟草废料与有机溶剂的重量体积比为1:5-15，有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮之一种，其浓度为30% -100%。
3.根据权利要求1所述的烟草废料中多酚类物质的提取方法，其特征在于:步骤(I)中所述的提取温度为40-50°C，超声时间为10-30min。
4.根据权利要求1所述的烟草废料中多酚类物质的提取方法，其特征在于:步骤(2)中所述的非离子表面活性剂包括聚氧乙烯脂肪醇Genapol X-080、脂肪醇聚氧乙烯醚AE0-9之一种，用量为每5mL水溶液加0.1?0.5mL。
5.根据权利要求1所述的烟草废料中多酚类物质的提取方法，其特征在于:步骤(2)中所述辅助萃取剂包括正己醇、正辛醇、异辛醇、正戊醇之一种，用量为每5mL水溶液加0.1 ?0.5mL0
6.根据权利要求1所述的烟草废料中多酚类物质的提取方法，其特征在于:步骤(2)中所述润旋时间为l-3min,离心速度为3000-6000r/min,离心时间为3_15min。
7.根据权利要求1所述的烟草废料中多酚类物质的提取方法，其特征在于:步骤(3)中所述多酚类物质的含量，是以绿原酸作为标准品紫外分光光度法检测烟草废料中提取出来的多酚的含量，测定波长为540nm。
【文档编号】G01N1/28GK104048866SQ201410289090
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年6月24日 优先权日:2014年6月24日
【发明者】李小兰, 孟冬玲, 孟丽芬, 黄善松, 范忠, 吴晶晶, 周晓, 徐雪芹, 黄世杰, 周艳枚 申请人:广西中烟工业有限责任公司