用于检测呋喃妥因代谢物的免疫抗原和包被抗原的制备方法
【专利摘要】本发明公开一种用于检测呋喃妥因代谢物的免疫抗原和包被抗原的制备，其特征在于：米用活泼硫酯法，将呋喃妥因代谢物半抗原与载体蛋白进行偶联，制备呋喃妥因代谢物免疫抗原和包被抗原；所述呋喃妥因代谢物半抗原通过缩醛法为呋喃妥因代谢物引入间隔臂制备而成。本发明通过优化偶联技术路线，以达到结构优化，提高抗体质量，从而进一步增加呋喃妥因代谢物免疫胶体金快速检测的灵敏度和特异性的免疫抗原和包被抗原。
【专利说明】用于检测映喃妥因代谢物的免疫抗原和包被抗原的制备
【技术领域】
[0001] 本发明涉及动物源性食品中呋喃妥因代谢物检测【技术领域】，尤其是指用于检测呋 喃妥因代谢物的免疫抗原和包被抗原的制备。
【背景技术】
[0002] 呋喃妥因（Nitrofurantoin)，是硝基呋喃类广谱抗生素中的一种。该类药物的基 本结构为一个呋喃环，位于第五个碳原子连接有一个硝基，具有较强的抗菌作用。呋喃妥因 价格便宜，疗效确切，在畜禽及水产养殖上应用非常广泛。呋喃妥因在生物体内代谢速率 很快，在很短时间内即代谢完全，研究证明呋喃妥因在动物体内可代谢为1-氨基乙内酰脲 (AHDhAHD可与体内细胞膜蛋白形成结合态，延缓了药物在体内的消除速度，因而可在体内 残留数周之久，甚至进入食物链中，在自然环境中长期残留。近年来研究表明呋喃妥因及其 代谢物具有相当大的毒性和副作用，能诱导有机体基因突变、畸胎、癌症，因而引起了人们 的高度重视。
[0003] 呋喃妥因及其代谢物的毒副作用导致各国禁止此类药物在治疗和饲料中使用。欧 盟、美国、中国等国家均将呋喃妥因列为禁用药。尽管我国政府和相关组织对该类药物的残 留给予了高度重视，但其在动物源性食品中的残留仍时有发生。
[0004] 国内外已经发表有关硝基呋喃类抗生素残留检测方法的文献中，早期的文献报道 多数是检测原药化合物。但研究表明原药半衰期通常只有几小时，而其代谢产物则长达数 周仍能在动物组织中残留。因此各国已开始关注其代谢物的检出。目前，对呋喃妥因代谢 物的检测方法有色谱分析法、免疫检测法（酶联免疫分析方法）。色谱分析法（高效液相色 谱法、液相色谱-质谱联用法）样品前处理复杂，费用高；免疫分析法具有快速、灵敏度高、 高通量的特点。其中免疫分析方法有酶联免疫法、胶体金免疫层析技术等。酶联免疫分析 法操作相对繁琐，对操作人员的专业知识要求较高，相比之下，胶体金免疫层析技术基于肉 眼水平的检测，不需任何仪器设备和试剂，比酶联免疫法省略了加显色剂和终止液的步骤， 更简化的操作，体积小，易携带，几分钟就可用肉眼观察到颜色鲜明的实验结果，并可保存 实验结果。
[0005] 现有胶体金免疫层析技术在呋喃妥因代谢物检测的灵敏度和特异性还是存在缺 陷，因而，有必要在现有技术上，从优化免疫抗原、包被抗原的结构及偶联技术角度出发，提 高抗体的特异性、亲和力，从而增加呋喃妥因代谢物免疫胶体金快速检测的灵敏度和特异 性。
【发明内容】
[0006] 本发明要解决的技术问题是提供一种通过优化偶联技术路线，以达到结构优化， 提高抗体质量，从而进一步增加呋喃妥因代谢物免疫胶体金快速检测的灵敏度和特异性的 免疫抗原和包被抗原。
[0007] 为解决上述技术问题所采用的技术方案：一种用于检测呋喃妥因代谢物的免疫抗 原和包被抗原的制备，其特征在于：采用活泼硫酯法，将呋喃妥因代谢物半抗原与载体蛋白 进行偶联，制备呋喃妥因代谢物免疫抗原和包被抗原；所述呋喃妥因代谢物半抗原通过缩 醛法为呋喃妥因代谢物引入间隔臂制备而成，具有式（I)所示结构，
[0008]
【权利要求】
1. 一种用于检测呋喃妥因代谢物的免疫抗原和包被抗原的制备，其特征在于：采用活 泼硫酯法，将呋喃妥因代谢物半抗原与载体蛋白进行偶联，制备呋喃妥因代谢物免疫抗原 和包被抗原；所述呋喃妥因代谢物半抗原通过缩醛法为呋喃妥因代谢物引入间隔臂制备而 成，具有式（I)所示结构，
(I ) 所述呋喃妥因代谢物免疫抗原和包被抗原，具有式（II)所示结构，
(II)
2. 根据权利要求1所述的用于检测呋喃妥因代谢物的免疫抗原和包被抗原的制备，其 特征在于：所述载体蛋白是指常规的可作为免疫载体使用的可溶性蛋白质。
3. 根据权利要求1所述的用于检测呋喃妥因代谢物的免疫抗原和包被抗原的制备，其 特征在于：所述载体蛋白为牛血清白蛋白和/或卵清蛋白和/或血蓝蛋白和/或人血清蛋 白。
【文档编号】G01N33/577GK104215765SQ201410464964
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2014年9月13日 优先权日:2014年9月13日
【发明者】潘嘉慧, 田峻, 沈国权, 赵亮亮, 杨辉, 朱海云 申请人:佛山市质量计量监督检测中心