酮苯丙氨酸钙中杂质含量的检测方法
【专利摘要】本发明提供了一种酮苯丙氨酸钙原料药中杂质的检测方法，属于药物化学【技术领域】。本发明所述杂质为苯乙酸，即为酮苯丙氨酸钙合成过程中的副产物，也为氧化降解产物，提供了该化合物的杂质检测方法，检测方法适用于酮苯丙氨酸钙原料药的杂质控制。杂质含量测定方法灵敏度高、重现性好，可更加准确的控制产品质量。
【专利说明】酮苯丙氨酸钙中杂质含量的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物化学【技术领域】，涉及一种酮苯丙氨酸钙原料药的杂质含量的测定 方法。
【背景技术】
[0002] 复方α -酮酸片为复方制剂，含有4种α -酮酸、1种α -羟酸和5种人体必需氨 基酸，其中酮酸和羟酸以钙盐形式存在。德国Fresenius公司以开同为商品名，1996年首次 在德国上市，临床上用于慢性肾衰患者的营养，延缓肾衰进展，纠正代谢紊乱的药物。
[0003] 酮苯丙氨酸I丐（Calcium phenylpyruvate，简称KTP)，是复方α -酮酸片的主要原 料之一，其化学名称为2-氧代-3苯基丙酸钙，结构如式I所示，具有降低血氨、纠正氨基酸 不平衡、改善慢性肾衰等效果。
[0004]
【权利要求】
1. 一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，具体步骤为： 称取酮苯丙氨酸钙原料药适量，加水超声溶解，用水稀释成酮苯丙氨酸钙浓度为 Img ? ml/1的供试品溶液； 称取苯乙酸对照品适量，加水超声溶解，用水稀释成苯乙酸浓度为20 y g ? ml/1的对照 品溶液； 按照以下色谱条件对供试品溶液进行分析，按外标法以峰面积计算苯乙酸含量； 色谱条件为： (1)色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱； ⑵流动相：磷酸调节至pH 3. 3的20mmol ? I71磷酸二氢钾：乙腈=85:15v/v为流动 相等度洗脱； (3)流速：ImL ? mirT1 ; ⑷检测波长：2〇5nm ; (5) 柱温：30°C ; (6) 进样量：10uL。
2. 根据权利要求1所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，其 特征在于，其中所述十八烷基硅烷键合硅胶柱的型号为Agilent XDB C18色谱柱。
3. 根据权利要求1所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，其 特征在于，其中所述的苯乙酸，在酮苯丙氨酸钙原料药中含量不得超过0. 2%。
4. 根据权利要求1所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法，其 特征在于，其中所述的苯乙酸对照品的制备方法为 ： ⑴制备方法：取酮苯丙氨酸钙原料药，加入〇. 5 %的H2O2，室温放置2h，加适量水，超 声溶解，采用液相色谱分离制备该苯乙酸杂质；收集30-35min含有目标物的洗脱液，合并， 60°C减压浓缩至一定量，冷冻干燥3d，进一步除去甲酸铵，得白色片状固体，重结晶，得苯乙 酸对照品； ⑵色谱条件为：用YMC-Pack ODS-A色谱柱，以甲酸调pH至4. 0的IOmmol ? I71甲酸 铵溶液：乙腈=85:15V/V为流动相等度洗脱，流速为IOmL ? mirT1，检测波长205nm，柱温为 30°C，进样量为2mL。
5. 根据权利要求1所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测方法， 其特征在于，以峰面积Y对质量浓度X作图，线性方程Y = 37. 237X-5. 11，相关系数r为 0? 9995,苯乙酸在0? 65?5. 82 ii g ? ml/1的范围内。
6. 根据权利要求1至5任一所述的一种酮苯丙氨酸钙原料药中苯乙酸杂质含量的检测 方法，其特征在于，所述的酮苯丙氨酸钙原料药是由乙内酰脲和苯甲醛反应制得。
【文档编号】G01N30/89GK104316641SQ201410557834
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年10月20日 优先权日:2014年10月20日
【发明者】夏玮, 潘晨, 张文清, 徐志珍, 付迪 申请人:华东理工大学