专利名称:由二乙炔材料构成的比色传感器的制作方法
发明领域本发明涉及利用聚二乙炔组装体中可观察到的光谱变化来检测分析物的技术。更具体而言，本发明涉及一种包括聚二乙炔组装体的比色传感器和利用该传感器检测分析物的方法。
发明背景二乙炔通常是无色的，并且经加热或光化学辐射可发生加成聚合。当聚合时，这些化合物发生对比色变化，变成蓝或紫色。当受外部刺激时，如加热、物理压力，或者溶剂或相反电荷离子变化时，聚二乙炔因平面骨架构象的变形表现出进一步的颜色变化。公知的是随着温度升高，或由于共轭骨架中构象变化而pH发生变化，聚二乙炔组装体颜色从蓝变到红色，这公开于下面文献中，Mino等人，Langmuir，Vol.8，p.594，1992；Chance等人，Journal of Chemistry andPhysics，Vol.71，206，1979；Shibutag，Thin Solid Films，Vol.179，p.433，1989；Kaneko等人，Thin Solid Films，Vol.210，548，1992；及美国专利5,672,465。利用这类化合物作为生物生色指示剂是公知的，公开于美国专利5,622,872和公开号WO 02/00920中。
聚二乙炔用于检测分析物的建议应用公开于美国专利6,395,561B1；6,306,598B1；6,277,652；6,183,722；6,080,423和公开WO 01/71317中。特别地，已尝试构造带有受体的生物传感器，其中受体特别地可与聚二乙炔膜中的致病细菌、病毒、毒素等反应，当受体与其特定分析物(致病细菌、病毒、毒素等)反应时，发生颜色变化(蓝变化到红色)。这种方法要求受体和分析物的结合结构是公知的，并且受体是可识别的。合成受体和聚二乙炔膜是复杂和困难的。
当与分析物结合时，聚二乙炔膜表现出不充分的颜色变化，这就需要促进结构变化或增强分析设备以观察颜色变化的其他物质。
发明概述持续需要利用二乙炔制备更精确的传感装置，其更适于特定应用，不复杂，且更适于非技术人员在更多种环境中的应用。特别需要能够方便运输、对于特定应用能够单独使用然后弃掉的装置。
本发明提供一种比色传感器，其用于通过因分析物与聚二乙炔组装体的特定结合而发生光谱变化(颜色变化可用裸眼或色度计观察)来检测分析物的存在。聚二乙炔组装体以简单但高度敏感的方式指示分析物的存在。
本发明提供一种比色传感器，其包括受体及聚合反应产物，该聚合反应产物包括至少一种下式的化合物 其中R1是C1-C20烷基，
或
R2是 或
R3，R8，R13，R21，R24，R31和R33独立地是烷基；R4，R5，R7，R14，R16，R19，R20，R22，R25和R32独立地是亚烷基；R6，R15，R18和R26独立地是亚烷基，亚烯基，或亚芳基；R9是亚烷基或-NR34-；R10，R12，R27和R29独立地是亚烷基或亚烷基-亚芳基；R11和R28独立地是炔基；R17是酯活化基团；R23是亚芳基；R30是亚烷基或-NR36-；R34和R36独立地是H或C1-C4烷基；p是1-5；及n是1-20；及其中R1和R2不相同。
本发明也提供易于从溶液中制备并沉积在基底上的聚二乙炔组装体及其用途。
本发明也提供一种装置和方法，用于检测小分子、致病和非致病有机体、毒素、膜受体和片段、挥发性有机化合物、酶和酶基底、抗体、抗原、蛋白、肽、核酸和肽核酸。
本发明也提供一种可简单使用、价廉的测试盒，其可靠性在广范围的环境条件下且当分析物与多种其他材料混合时相对稳定。
本发明也提供一种使用比色传感器通过使该比色传感器与分析物接触并观察颜色变化来检测分析物的方法。
本发明也提供通过使比色传感器与对分析物和受体具有亲合力的探针接触并观察到没有颜色变化来间接检测分析物的方法。
上面本发明的概述不意图用于说明本发明每个公开的实施方案或各种实施方式。下面的详细说明更特别地阐明了这些实施方案。
附图简要说明
图1示意性地表明本发明的比色传感器。
图2示意性地表明本发明的比色传感器阵列。
图3示意性地表明用于传感器与分析物接触的比色传感器。
图4示意性地表明用于传感器与分析物接触的可折叠的比色传感器。
图5示意性地表明本发明具有一种类型分析物传输方式的比色传感器。
图6示意性地表明本发明具有一种类型分析物传输方式的比色传感器阵列。
图7是表明涂覆和干燥的聚二乙炔薄膜颜色作为基底接触角的函数的相图。
图8是表明涂覆和干燥的聚二乙炔薄膜颜色作为基底表面张力的函数的相图。
详细说明本发明提供一种比色传感器包括二乙炔材料及使用该传感器检测分析物的方法。可以通过讨论下面的实施例理解本发明的各方面，尽管本发明不限于此。
对于下面所定义的术语，除了在权利要求
书和说明书中有不同的定义，应使用下面这些定义本文中，术语″烷基″指具有特定碳原子数的直链或支链或环状单价烃基。烷基包括具有1～20个碳原子的烷基。本文中″烷基″实例包括但不限于甲基，乙基，正-丙基，正-丁基，正-戊基，异丁基和异丙基等。应该理解，当是环状部分时，在所述烷基中必须存在至少三个碳原子。这种环状部分包括环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基。
本文中，术语″亚烷基″指具有特定碳原子数的直链或支链或环状二价烃基。亚烷基包括具有1～14个碳原子的亚烷基。本文中″亚烷基″实例包括但不限于亚甲基，亚乙基，亚丙基，亚丁基等。应该理解，当是环状部分时，在所述亚烷基中必须存在至少三个碳原子。这种环状部分包括亚环丙基，亚环丁基，亚环戊基，亚环己基和亚环庚基。
本文中，术语″亚烯基″指具有特定碳原子数和一个或多个碳-碳双键的直链或支链或环状二价烃基。亚烯基包括具有2～8个碳原子的亚烯基。本文中″亚烯基″实例包括但不限于1，2-亚乙烯基，1，3-亚丙烯基等。
本文中，术语″亚芳基″指二价不饱和芳香羧基，可具有一个单环如亚苯基或多个稠合环如萘或蒽。亚芳基包括具有6～13个碳原子的亚芳基。本文中″亚芳基″实例包括但不限于1，2-亚苯基，1，3-亚苯基，1，4-亚苯基，1，8-亚萘基等。
本文中，术语″亚烷基-亚芳基″指与上述的亚芳基部分结合的上述亚烷基部分。本文中″亚烷基-亚芳基″实例包括但不限于-CH2-亚苯基，-CH2CH2-亚苯基，及-CH2CH2CH2-亚苯基。
本文中，术语″炔基″指具有2～30个碳原子和至少一个碳-碳三键的直链或支链或环状单价烃基。本文中″炔基″包括但不限于乙炔基，丙炔基和丁炔基。
本文中，术语″分析物″指能够通过本发明传感器检测的任何材料。这种材料包括但不限于检测小分子、致病和非致病有机体、毒素、膜受体和片段、挥发性有机化合物、酶和酶基底、抗体、抗原、蛋白、肽、核酸和肽核酸。
本文中，术语″细菌″指被认为是细菌的各种形式微生物，包括球菌，杆菌，螺旋菌，sheroplasts，原生质等。
本文中，术语″受体″指对于相关分析物具有结合力的任何分子。受体包括但不限于天然受体，如表面膜蛋白，酶，血凝素，抗体，重组蛋白等；合成蛋白；核酸；c-配糖；碳水化合物；神经节苷脂；及螯合剂。
本文中，术语″组装″或″自组装″指在聚合前二乙炔分子的任何自排序。J.Israelachvili，Intermolecular and Surface Forces(2ndEd.)，Academic Press，New York(1992)，pp.321-427。
本文中，术语″自组装单层″(SAMs)指通过自发自排序形成在给定基底上的任何有序超薄有机薄膜。A.Ulman，An Introduction to UltrathinOrganic Films，Academic Press，New York(1991)，pp.237-301。
本文中，术语″转导物″指能够将分子水平的识别行为转化成可观察信号的材料。
本文中所有的数值被认为可通过术语″约″来改变。端点的数值范围包括此范围内的所有数值(例如1～5包括1，1.5，2，2.75，3，3.80，4和5)。
本发明提供一种用于检测分析物的比色传感器，其包括新的聚二乙炔组装体及受体。该聚二乙炔组装体是下式的聚合化合物 其中R1是C1-C20烷基，
或
R2是
或
R3，R8，R13，R21，R24，R31和R33独立地是烷基；R4，R5，R7，R14，R16，R19，R20，R22，R25和R32独立地是亚烷基；R6，R15，R18和R26独立地是亚烷基，亚烯基，或亚芳基；R9是亚烷基或-NR34-；R10，R12，R27和R29独立地是亚烷基或亚烷基-亚芳基；R11和R28独立地是炔基；R17是酯活化基团；R23是亚芳基；R30是亚烷基或-NR36-；R34和R36独立地是H或C1-C4烷基；p是1-5；及n是1-20；及其中R1和R2不相同。
当R1是烷基时的R1实例包括C1-C20烷基，C6-C18烷基和C12-C16烷基。当R1是烷基时的R1其他实例包括十二烷基和十六烷基。
R3实例包括C1-C20烷基和C6-C18烷基。R3其他实例包括十一烷基和十五烷基。
R4实例包括C1-C14亚烷基和C1-C4亚烷基。R4其他实例包括亚甲基(-CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)和亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)。
R5实例包括C1-C14亚烷基和C1-C3亚烷基。R5其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)和亚丙基(-CH2CH2CH2-)。
当R6是亚烷基时的R6实例包括C1-C14亚烷基和C1-C3亚烷基。当R6是亚烷基时的R6其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)和亚丙基(-CH2CH2CH2-)。当R6是亚烯基时的R6实例包括C2-C8亚烯基和C2-C4亚烯基。当R6是亚烯基时的R6其他实例包括亚乙烯基(-C＝C-)。当R6是亚芳基时的R6实例包括C6-C13亚芳基和亚苯基。当R6是亚芳基时的R6其他实例是1，2-亚苯基。
R7实例包括C1-C14亚烷基和C2-C9亚烷基。R7其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，亚戊基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚庚基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚辛基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)和亚壬基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)。
R8实例包括C1-C16烷基和C1-C8烷基。R8其他实例包括丁基，戊基和己基。
R9独立地是亚烷基或-NR34-，其中R34是H或C1-C4烷基。
当R9是亚烷基时R9实例包括C1-C14亚烷基和C1-C3亚烷基，如亚甲基(-CH2-)。当R9是-NR34-时R9实例包括-NH-，-N(CH2CH3)-，和-N(CH3)-。
当R10是亚烷基时R10实例包括C1-C14亚烷基和C1-C8亚烷基。当R10是亚烷基时R10其他实例包括亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，-C(CH3)2-，和-CH((CH2)1-4CH3)-。当R10是亚烷基-亚芳基时R10实例包括(C1-C14亚烷基)-亚芳基和(C1-C14亚烷基)-亚苯基。当R10是亚烷基-亚芳基时R10其他实例包括-CH2-亚苯基。
R11实例包括C2-C30炔基和C20-C25炔基。R11其他实例包括具有至少两个碳-碳三键(-C≡C-)的C2-C30炔基和具有至少两个碳-碳三键的C20-C25炔基。R11的其他实例包括具有至少两个碳-碳三键的C22炔基，具有至少两个碳-碳三键的C24炔基。R11的其他实例包括-(CH2)8-C≡C-C≡C-(CH2)9CH3和-(CH2)8-C≡C-C≡C-(CH2)11CH3。
当R12是亚烷基时R12实例包括C1-C14亚烷基和C1-C8亚烷基。当R12是亚烷基时R12其他实例包括亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，-C(CH3)2-，和-CH((CH2)1-4CH3)-。当R12是亚烷基-亚芳基时R12实例包括(C1-C14亚烷基)-亚芳基和(C1-C14亚烷基)-亚苯基。当R12是亚烷基-亚芳基时R12其他实例包括-CH2-亚苯基。
R13实例包括C1-C4烷基，如甲基。
R14实例包括C1-C4亚烷基，如亚乙基(-CH2CH2-)。
当R15是亚烷基时R15实例包括C1-C14亚烷基和C1-C3亚烷基。当R15是亚烷基时R15其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)和亚丙基(-CH2CH2CH2-)。当R15是亚烯基时R15实例包括C2-C8亚烯基和C2-C4亚烯基。当R15是亚烯基时R15其他实例包括亚乙烯基(-C＝C-)。当R15是亚芳基时R15实例包括C6-C13亚芳基和亚苯基。当R15是亚芳基时R15其他实例是1，4-亚苯基。
R16实例包括C1-C14亚烷基和C2-C9亚烷基。R16其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，亚戊基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚庚基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚辛基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)和亚壬基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)。
R17实例包括将邻近酯基活化成酰基的基团。这种酯活化基团例如包括五氟苯酚，五氯苯酚，2，4，6-三氯苯酚，3-硝基苯酚，N-羟基琥珀酰亚胺，N-羟基邻苯二甲酰亚胺，及公开于M.Bodanszky，″Principlesof Peptide Synthesis，″(Springer-Verlag 1984)中的那些。R17的其他实例是2，5-二氧-1-吡咯烷基。
当R18是亚烷基时R18实例包括C1-C14亚烷基和C1-C3亚烷基。当R18是亚烷基时R18其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)和亚丙基(-CH2CH2CH2-)。当R18是亚烯基时R18实例包括C2-C8亚烯基和C2-C4亚烯基。当R18是亚烯基时R18其他实例包括亚乙烯基(-C＝C-)。当R18是亚芳基时R18实例包括C6-C13亚芳基和亚苯基。当R18是亚芳基时R18其他实例是1，2-亚苯基。
R19实例包括C1-C14亚烷基和C2-C9亚烷基。R19其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，亚戊基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚庚基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚辛基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)和亚壬基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)。
R20实例包括C1-C14亚烷基，C1-C9亚烷基和C1-C4亚烷基。R20其他实例包括亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，亚戊基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚庚基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚辛基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)和亚壬基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)。
当R21是烷基时R21实例包括C1-C20烷基，C6-C18烷基和C10-C17烷基。当R21是烷基时R21其他实例包括癸基，十一烷基，十三烷基，十四烷基，十五烷基，十七烷基。
R22实例包括C1-C14亚烷基和C2-C9亚烷基。R22其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)和亚丁基。
R23实例包括C6-C13亚芳基和亚苯基。当R23是亚芳基时R23其他实例是1，4-亚苯基。
R24实例包括C1-C20烷基和C6-C18烷基。R24其他实例包括甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基和十二烷基。
R25实例包括C1-C14亚烷基和C2-C9亚烷基。R25其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，亚戊基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚庚基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)，亚辛基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)和亚壬基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)。
当R26是亚烷基时R26实例包括C1-C14亚烷基和C1-C3亚烷基。当R26是亚烷基时R26其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)和亚丙基(-CH2CH2CH2-)。当R26是亚烯基时R26实例包括C2-C8亚烯基和C2-C4亚烯基。当R26是亚烯基时R26其他实例包括亚乙烯基(-C＝C-)。当R26是亚芳基时R26实例包括C6-C13亚芳基和亚苯基。当R26是亚芳基时R26其他实例是1，2-亚苯基。
当R27是亚烷基时R27实例包括C1-C14亚烷基和C1-C8亚烷基。当R27是亚烷基时R27其他实例包括亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，-C(CH3)2-，和-CH((CH2)1-4CH3)-。当R27是亚烷基-亚芳基时R27实例包括(C1-C14亚烷基)-亚芳基和(C1-C14亚烷基)-亚苯基。当R27是亚烷基-亚芳基时R27其他实例包括-CH2-亚苯基。
R28实例包括C2-C30炔基和C20-C25炔基。R28其他实例包括具有至少两个碳-碳三键(-C≡C-)的C2-C30炔基和具有至少两个碳-碳三键的C20-C25炔基。R28的其他实例包括具有至少两个碳-碳三键的C22炔基，具有至少两个碳-碳三键的C24炔基。R28的其他实例包括-(CH2)8-C≡C-C≡C-(CH2)9CH3和-(CH2)8-C≡C-C≡C-(CH2)11CH3。
当R29是亚烷基时R29实例包括C1-C14亚烷基和C1-C8亚烷基。当R29是亚烷基时R29其他实例包括亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，-C(CH3)2-，和-CH((CH2)1-4CH3)-。当R29是亚烷基-亚芳基时R29实例包括(C1-C14亚烷基)-亚芳基和(C1-C14亚烷基)-亚苯基。当R29是亚烷基-亚芳基时R29其他实例包括-CH2-亚苯基。
R30独立地是亚烷基或-NR36-，其中R36是H或C1-C4烷基。
当R30是亚烷基时R30实例包括C1-C14亚烷基和C1-C3亚烷基，如亚甲基(-CH2-)。当R30是-NR36-时R30实例包括-NH-，-N(CH2CH3)-，和-N(CH3)-。
R31实例包括C1-C16烷基和C1-C8烷基。R31其他实例包括丁基，戊基和己基。
R32实例包括C1-C14亚烷基和C2-C9亚烷基。R32其他实例包括亚乙基(-CH2CH2-)，亚丙基(-CH2CH2CH2-)，亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)，亚戊基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)和亚己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)。
R33实例包括C1-C20烷基，C6-C18烷基和C10-C16烷基。R33其他实例包括十二烷基，十四烷基，十六烷基和十八烷基。
本发明化合物也包括其中p可以是1或2及n可以是1-20、3-17、6-14或9-11的那些。
本发明包括本文所述的化合物，包括异构体，如结构异构体和几何异构体，盐，溶剂化物，多晶型物等。
制备二乙炔化合物式XXIII的二乙炔可用方案1来制备，其中n通常是1～4，m通常是10～14。
方案1式XXIII化合物可通过在适合溶剂如DMF中使式XXII化合物与适合氧化剂反应来制备。适合氧化剂例如包括Jones试剂和重铬酸吡啶盐。上述反应通常进行1小时～48小时，通常8小时，温度0℃～40℃，通常0℃～25℃。
式XXII化合物可通过使适合酰基氯与式XXI化合物反应来制备。适合酰基氯包括可提供所需产物的任何酰基氯，如月桂酰氯，1-十二烷酰氯，1-十四烷酰氯，1-十六烷酰氯和1-十八烷酰氯。适合溶剂例如包括醚，四氢呋喃，二氯甲烷和氯仿。上述反应通常在碱如三烷基胺或吡啶碱存在下进行1小时～24小时，通常3小时，温度0℃～40℃，通常0℃～25℃。
式XXI化合物可从商业上购得(例如其中n是1-4)，或者可通过方案1的化合物XIX和XX从式XVIII化合物制备，这例如公开于Abrams，Suzanne R.；Shaw，Angela C.″Triple-bond isomerizations2-to9-decyn-l-ol，″Org.Synth.(1988)，66，127-31和Brandsma，L.″Preparative Acetylenic Chemistry，″(Elsevier Pub.Co.New York，1971)中。
本文所述二乙炔化合物也可通过式XXII化合物在适合溶剂如甲苯存在下与酸酐如琥珀酸酐、戊二酸酐或邻苯二甲酸酐反应来制备。上述反应通常进行1小时～24小时，通常15小时，温度50℃～125℃，通常100℃～125℃。
本文所述二乙炔化合物在溶液中可自组装形成有序组装体，其可使用任何光活化辐射聚合，例如电磁光谱在UV或可见光范围内的电磁辐射。二乙炔化合物的聚合生成聚合反应产物，其颜色在可见光谱内为小于570nm，570nm～600nm，或大于600nm，这取代决于其构象及所接触的外部因素。通常，本文所述的二乙炔化合物聚合生成包括聚二乙炔骨架的亚稳定的蓝色相聚合物网络。这些亚稳定的蓝色相聚合物网络因外部因素发生从蓝到桔红色的颜色变化，如加热，溶剂变化或带相反电荷，或者如果需要时物理压力。
本文所述的二乙炔化合物的某些聚合产物能够表现出可逆的颜色变化和/或三态颜色变化。例如，聚合后生成的蓝-相聚合物经加热、溶剂变化或带相反电荷、或者物理压力颜色可变到桔红态。这种桔红聚合物网络经进一步加热、溶剂变化或带相反电荷、或者物理压力颜色可变到桔黄态。此外，本文所述的聚合物网络以可逆方式在这些桔红态和桔黄态之间循环。
本文所述的二乙炔化合物及其聚合产物具有经物理压力发生可见颜色变化的能力，这使它们成为制备用于检测分析物的传感装置的理想候选物。从所述的二乙炔化合物形成的聚二乙炔组装体可在生物传感应用中用作转导物。
对于给定传感应用而言，二乙炔分子的结构需求通常具有应用特异性。对于进一步分子修饰而言，各种特征如链全长、溶解度、极化度、结晶度及官能团的存在共同决定二乙炔分子用作有用的传感材料的能力。例如，在生物检测水性介质中的分析物的情况下，二乙炔化合物的结构应该能够在水中形成稳定的分散体，能够有效地聚合成带色材料，能够使适宜的受体与分析物结合，并能够通过颜色变化转导结合相互作用。这些能力取决于二乙炔化合物的结构特征。
本发明的二乙炔化合物具有上述能力，并且能够容易有效地聚合成发生所需颜色变化的聚二乙炔组装体。此外，二乙炔化合物允许含有大大过量的未聚合材料，如下述的受体，而仍形成稳定的聚合溶液。
所述的二乙炔化合物可以快速高产率的方式来合成，包括高产量合成方法。在二乙炔化合物骨架中可存在官能团，如杂原子，这提供了容易形成精细结构的可能，从而可满足特定传感应用的需求。通过将二乙炔加到适合溶剂如水中，声波处理混合物，然后用通常波长为254nm的紫外光辐射溶液，二乙炔化合物可聚合成所需的含有网络的聚二乙炔骨架。经聚合，溶液颜色变化到蓝紫色。
包括聚二乙炔组装体的比色传感器本发明包括所述二乙炔化合物的比色传感器在溶液中或涂覆在基底上可以用作比色检测分子识别行为的基础。这种分子识别装置可通过在聚合之前或之后将受体加到二乙炔单体系统中来制备。经聚合或其后，受体有效地结合到聚合物网络中，从而受体与分析物的相互作用扰乱共轭的烯-炔聚合物骨架引起可见的颜色变化。
在一个实施方案中，受体物理混合并分散在聚二乙炔组装体中。在一个可选择的实施方案中，受体与聚二乙炔组装体共价结合。有用的受体实例包括但不限于表面膜蛋白，酶，血凝素，抗体，重组蛋白等；合成蛋白；核酸；c-配糖；碳水化合物；神经节苷脂；及螯合剂。在一个实施方案中，受体是磷脂。在一个可选择的实施方案中，受体是通过公知方法加到二乙炔组装体中的甘油，如公开于Alcaraz，Marie-Lyne；Peng，Ling；Klotz，Phillipe；Goeldner，Maurice，J.Org.Chem.1996，61，192-201中。
从所述二乙炔化合物形成的本发明比色传感器适于在实验室外各种要求成本效益、稳定、精确、一致和快速诊断的应用中。应用包括医疗点测试，家庭测试诊断，空气或水生病原体和VOC的军用和工业用检测，及食物处理。
在一个实施方案中，比色传感器可用于检测生物流体中的革兰氏阴性菌，以诊断传染的存在。例如，在尿中存在革兰氏阴性菌是尿感染的指示。包括本发明聚二乙炔组装体的比色传感器可以通过溶液中或基底上的涂层的颜色变化指示尿或其他生物流体中革兰氏阴性菌的存在。
在某些实施方案中，本发明的比色传感器可与其他公知诊断方法配合使用，以对细菌或其他分析物的存在提供多次检测。例如，在检测尿样品时，按美国专利4,299,917所述用比色测试检测白细胞(白血球或WBC)酯酶活性，这可指示脓尿(尿中的脓汁)，并且解释为传染存在的指示。基于本发明的聚二乙炔组装体，组合对白细胞(整体或溶解形式的)测试及对革兰氏阴性菌测试的传感器不仅可用于推断传染的存在，而且可推断传染是由革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌所引起的。在这种组合传感器上，在传感器聚二乙炔部分观察到对革兰氏阴性菌检测的负性结果及对传感器白细胞部分的正性结果可以解释为存在革兰氏阳性菌传染。相反，对革兰氏阴性菌检测的正性结果表明是革兰氏阴性菌传染。用于检测白细胞的其他可能方法可使用荧光分析以直接分析这些细胞的存在，如Peyman，Khoobehi B..″Fluorescent labelingof blood cells for evaluation of retinal and choroidal circulation，″Ophthaalmic Surg.Lasers(Feb.1999)，30(2)140-5中所述的；或检测从活化的白细胞释放的过氧化物，如Mohanty，J.G.，Jaffe，Jonathan S.，Schulman，Edward S.，Raible，Donald G.″A highly sensitive fluorescentmicro-assay of H2O2release from activated human leukocytes using adihydroxyphenoxazine derivative，″J.Immunological Methods(1997)，202，133-141中所述的。
目前尿样品分析中的快速(即小于15分钟)诊断能力限于使用白细胞测试与硝酸盐测试组合的细菌检测，如美国专利5,434,235中所公开的硝酸盐测试。硝酸盐测试以能够检测作为细菌代谢副产物的硝酸盐的比色分析为基础。由于这种测试不能直接检测细菌的存在，而且并不是所有细菌都产生硝酸盐，因而一些细菌不能被检测，所以这种测试严重受限。
为快速诊断革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌，本发明的比色传感器和白细胞测试可涂覆在同一基底上，以按上述检测存在或不存在革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。这样可使为得到尿样品培养物结果需要等待16-24小时，以在抗生素处理开始之前识别这类细菌。在得到培养物结果之前用抗生素治疗的那些情况下，可以基于传感器测试结果，将抗生素以这类细菌为目标。
在一个可选择的实施方案中，本发明的比色传感器可与创伤敷料结合使用，以检测传染的存在。传感器可直接与敷料结合成一层，或间接与创伤接触。在使用时，传感器也可插入敷料中。可选择地，可以设计一种敷料结构，其中创伤分泌液可通过如美国专利US 6,420,622B1所述的微流体通道从创伤导向一部分敷料，而不与放置传感器的创伤处接触。在通过分析从创伤药签提取的分析物来分析创伤传染时，传感器也可单独用于诊断。
可以得到包括聚二乙炔组装体的传感器，而不需要在将其转移到适合支撑物上之前，通过常规LB(Langmuir-Blodgett)方法形成薄膜。可选择地，聚二乙炔组装体可利用A.Ulman，An Introduction toUltrathin Organic Films，Academic Press，New York(1991)，pp.101-219中所述的公知LB方法形成在基底上。
本发明在可弃粘合产物中提供生物传感能力。这种传感器是自给的，不需要额外仪器来传输测量结果。可选择地，可以与其他分析仪器一起使用以进一步增强灵敏度，如具有在检测分析物之后显现出荧光″红″相的荧光。当需要检测特定分析物的存在极限时，传感器用于提供快速筛选装置，即小于30分钟，优选小于15分钟。此外，本发明的传感器是可弃的，并且相对便宜。
在本发明一个实施方案中，比色传感器包括在溶液中复合到聚二乙炔组装体中的受体形成的转导物。溶液可置于简单的小瓶系统中，分析物可直接加到含有对相关分析物具有转导特异性的溶液的小瓶中。可选择地，比色传感器可包括多个置于试剂盒中的小瓶，每个小瓶含有转导物，包括聚二乙炔组装体与针对不同分析物特别加入的受体。对于分析物不能直接加到聚二乙炔转导物的那些应用而言，可以使用两部分小瓶系统。小瓶的一个分隔间可以含有用于制备分析物样品的试剂，并且与含有从聚二乙炔组装体形成的转导物的第二个分隔间物理分离。一旦完成样品制备，那么移除分离两个分隔间的物理障碍物，以使分析物与转导物混合而进行检测。
在本发明另一个实施方案中，如图1所示，比色传感器是带状或标签状形式的快速指示器。图1表示用压敏粘合剂20和涂覆的带子或标签10和涂覆在基底40上的转导物30。压敏粘合剂20可将带子或标签10固定到表面上，以直接检测分析物。压敏粘合剂20与含有聚二乙炔组装体的转导物30分离，以可能使不利影响最小化。在图1中，压敏粘合剂20包围位于带子或标签10中心的转导物30。在一个可选择的实施方案中(图未示)，压敏粘合剂和转导物结合在一起。
可选择地，在带子或标签10的侧面上，带子或标签10包括不含有压敏粘合剂20的窗口。窗口可以位于转导物30的中心，以允许使用者观察颜色变化，而不用从含有分析物的表面上除去带子或标签10。
在图2中，带子或标签110表示为由多个转导物112、113、114、115和116构成的阵列111。转导物112、113、114、115和116中的每一个可从相同或不同的聚二乙炔组装体形成，而每个聚二乙炔组装体包括相同或不同的受体。通过改变转导物112、113、114、115和116，阵列111可被设计成检测各种浓度水平的不同分析物。可选择地，转导物112、113、114、115中的任一个可用可选择的诊断测试来代替，如白细胞测试。
在图3所示的另一个实施方案中，带子或标签100包括可折叠基底101，压敏粘合剂102置于可折叠基底101的一侧，转导物103置于可折叠基底101另一侧并朝向压敏粘合剂102。含有目标分析物的表面可与压敏粘合剂102接触以收集样品。一旦收集到含有分析物的样品，那么可折叠基底101将被折叠，以使压敏粘合剂102接触转导物103，如图4所示。可选择地，可折叠基底101可以允许穿孔，以允许将可折叠基底101分成两个或多个部分，其中一个部分含有压敏粘合剂102，而另一个部分含有转导物103。可折叠基底101的可折叠特征和/或穿孔允许使用者防止转导物接触样品表面，而对于需要那种功能的应用而言，样品表面含有分析物。
可选择地，图3中的可折叠基底101也可包括图2所示和上述的多个转导物。此外，可折叠基底101可以在转导物103相对侧包括透明窗口，以在可折叠基底101被折叠而使转导物103与压敏粘合剂102接触后观察任何颜色变化。
可选择的实施方案表明在图5和图6中，这些允许通过如美国专利6,375,871和6,451,191所述的微流体元件将流体样品输送到转导物。在图5中，带子或标签301包括用于将分析物输送到转导物303的微流体元件302。在一种应用中，压敏粘合剂可以供应在转导物303相对侧的带子或标签301上，以允许带子或标签粘附在表面上，实现保存或固持作用，如粘附到壁或容器上。
在图6中，微流体元件401设在带子或标签402上。微流体元件401将分析物输送到含有相同或不同转导物的多个孔403、404、405和406中。多个孔403、404、405和406中的每一个中的转导物可从相同或不同的聚二乙炔组装体形成，每个聚二乙炔组装体包括相同或不同的受体。通过改变转导物，多个孔403、404、405和406可被设计成检测各种浓度水平的多种分析物。
对于那些需要制备分析物样品的应用而言，试剂盒可以包括用于保存试剂并在与涂覆在二维基底上的比色传感器接触之前混合分析物的小瓶。在一个实施方案中，试剂盒可以包括用于保存试剂及制备分析物的小瓶，其盖子系统包括涂覆在基底上的本发明转导物。
本发明也提供分析分析物的方法，其包括使上述比色传感器与含有分析物的溶液样品或表面接触，及利用吸收测量或利用裸眼视觉观察以检测比色传感器中的颜色变化。
在一个可选择的实施方案中，本发明提供通过选择对结合进聚二乙炔组装体中的受体和分析物具有亲合力的探针间接检测分析物的方法。选择的探针对分析物具有竞争性的亲合力。当存在相关分析物时，探针与分析物结合，而不与聚二乙炔骨架上的受体结合，因此没有颜色变化。如果没有分析物，那么探针与结合在聚二乙炔骨架上的受体结合，从而产生从蓝到红色的颜色变化。探针可以在分析物与转导物接触后接触转导物，或者在混合物接触转导物之前与分析物混合。
探针可与溶液中或涂覆在基底上的转导物接触。探针可以是对目标分析物和受体具有亲合力的任何分子。可能用于本发明中的探针包括膜中断肽，如丙甲菌素，蛙皮素，短杆菌肽，硫酸多粘菌素B和蜂毒素。
使用间接检测方法，基于所用探针浓度，提供低水平检测的高灵敏度是可能的。为进行检测，探针浓度可被选择成相应于检测所需的浓度水平。对于特定应用中所需的灵敏度而言，使用探针的间接检测方法允许在探针类型和浓度周围设计系统。这使得转导物可通用于多种相关分析物。例如，通过根据探针对分析物的亲合力改变与转导物接触的探针，单个转导物(聚二乙炔/受体组合)可用于检测多个分析物。
基底特性本发明的基底其特征在于使用milli-Q(Millipore)水和二碘甲烷(Aldrich)探针液体进行接触角测量。为进行接触角测量，从Rame-Hart得到的测角器被用于测量在基底上形成的一滴探针液体形成的接触角。尽管这滴液体覆盖大面积的基底，但是液体和表面的相互作用仅探查表面最外面的1-5埃。因此，接触角分析提供了表征表面力能学的精确和灵敏技术，这公开于A.Ulman，An Introduction to UltrathinOrganic Films，Academic Press，New York(1991)，pp.48-58中。
用于本发明中的涂层基底可以被认为包括两大类。第一类包括高平坦基底，如在原子级平坦硅(111)晶片或浮法玻璃上的蒸发金，其是裸露的，并可以用自组装单层(SAMs)修饰而按系统方式改变其表面能。第二类表面包括具有高网纹形状的表面，其包括多种不同类材料，从纸质基底到聚合油墨吸收涂层，再到结构聚合物薄膜，微孔薄膜，及膜材料。这些基底的共有特性是大表面粗糙度和/或多孔性。在这些高网纹形状的表面中，接触角的测量及从这些接触角测量对极性和分散表面力能学的检测不能被认为是其真正热力学能量的平衡特征。在本发明中，接触角表明可用于为进行比较分类这些基底的″有效″或″实际″表面能量。
表1总结了用聚二乙炔组装体涂覆的基底，其用作本发明的比色传感器。用于改变基底的SAM与使用的基底一起列出。用水和二碘甲烷测量基底接触角，通过几何平均方法计算表面能量的分散和极性组成，如在S.Wu；Polymer Interface and Adhesion；Marcel Dekker，New York(1982)中所示的。最后栏列出干PDA涂层的颜色。
表1
图6和图7表明基于干燥涂层的比色观察和涂覆的基底的接触角分析得到的相图。图6表明涂覆的基底生成颜色作为水的前进接触角及二碘甲烷的前进接触角的函数的相图。图7表明涂覆的基底生成颜色作为基底表面能的极性组成及表面能的分散组成的函数的相图，这通过几何平均方法从水和二碘甲烷的前进接触角计算出，公开于S.Wu；Polymer Interface and Adhesion；Marcel Dekker，New York(1982)。聚二乙炔涂层保持在其原始蓝色的表面由各图中填充的圆表示。圆所代表的表面是经过干燥″蓝″相转化成红色相的表面。最后，三角点代表其上干燥涂层表明蓝色相和红色相混合物的表面。
分配到各基底上的表1中的数值与图6和图7中的符号相应。
在本发明经干燥保持聚二乙炔组装体的原始″蓝″相的一个实施方案中，如图6所示，涂覆的基底对于二碘甲烷而言，其前进接触角低于50°。这种条件相应于以图7中表面能大于40dynes/cm的分散组分为特征的基底。对于需要保持原始″蓝″相的应用而言，形状和表面能对于基底上的转导物特性具有有效的影响，如在检测和保存时的颜色对比。
在一个可选择的实施方案中，具有这些性能并且对于水而言前进接触角小于90°的基底可生成包括如图6所示的蓝色相和红色相的混合物。该条件相应于图7中分散表面能组分小于40dynes/cm但是极性表面能组分大于至少10dynes/cm的表面。
实施例本发明不应该被认为限于下面所述的特定实施例，而是应该理解成包括在所附权利要求
中所述的本发明所有方面。本领域所属技术人员在阅读本说明书之后，各种修改、等价过程及多种结构是显然的。在说明书的实施例和其余部分中，除非别有所指，所有的份数、百分数、比例等都按摩尔计。没有列出供应商的溶剂和试剂都是购于AldrichChemical；Milwaukee，WI。水利用U-V Milli-Q水纯化器来纯化，电阻为18.2兆欧/cm。(Millipore，Bedford MA)
对于那些进行探针声波处理的二乙炔混合物而言，在一定范围能量和时间内检测引起二乙炔单体成功自组装的设置，通过将原始二乙炔溶液分进几个小瓶中来制备样品。尽管在下面实施例中，在能量设置为5时进行1分钟的探针声波处理，但是本领域所属技术人员应该知道，在经验范围内适当地调节能量和时间可以产生同样的结果。
通过蓝色的百分数变化按下面方程式测定比色响应(CR)，CR＝[(PB原始-PB样品/PB原始)×100，其中PB＝样品中的蓝色，使用AdobePhotoshop，版本5，图像软件。
略语表
实施例1制备HO(O)C(CH2)3C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)10CH3步骤1制备HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)10CH3在玻璃反应容器中，混合600毫克5，7-十二烷基二炔-1，12-二醇(HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4OH)，0.275毫升吡啶和10毫升THF。向溶液中加入676毫克月桂酰氯，生成的混合物搅拌15小时。然后混合物用乙醚稀释，用0.1N HCl和盐水洗涤。分离有机层，用MgSO4干燥，过滤，除去溶剂，得到白色固体。固体用硅胶纯化(乙酸乙酯在己烷中，按体积计梯度从25％～50％)，得到570毫克HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)10CH3，白色固体。
步骤2制备HO(O)C(CH2)3C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)10CH3在玻璃反应容器中，将步骤1制得的377毫克HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)10CH3溶解在3毫升DMF中，加入1.32克PDC。搅拌生成的混合物8小时，然后用水和乙醚处理。合并醚层，用MgSO4干燥，过滤，除去溶剂，得到白色固体。固体用硅胶纯化，用按体积计25/74/1的乙酸乙酯/己烷/甲酸洗脱，得到0.21克HO(O)C(CH2)3C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)10CH3，白色固体。
实施例2-5制备HO(O)C(CH2)a-1C≡C-C≡C(CH2)aO(O)C(CH2)bCH3步骤1中使用表2中所示的二醇和酰基氯进行实施例1所述的相同过程，得到通式结构为HO(O)C(CH2)a-1C≡C-C≡C(CH2)aO(O)C(CH2)bCH3的化合物(a和b按表2中所定义的)。
表2
实施例6制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)12CH3步骤1制备HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)12CH3在玻璃反应容器中，混合4.99克5，7-十二烷基二炔-1，12-二醇(HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4OH)，2.2克吡啶和50毫升THF。向溶液中加入6.34克肉豆寇醇氯化物，生成的混合物搅拌15小时。然后混合物用乙醚稀释，用0.1N HCl和盐水洗涤。分离有机层，用MgSO4干燥，过滤，除去溶剂，得到白色固体。固体用硅胶纯化(乙酸乙酯在二氯甲烷中占15体积％到100％乙酸乙酯的梯度)，得到5.0克HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)12CH3，白色固体。
步骤2制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)12CH3在可密封试管中，混合步骤1中制得的1.41克HO(CH2)3C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)12CH3，0.435克琥珀酸酐，13毫升甲苯和0.106克DMAP，并密封该试管。混合物加热至105℃达14.5小时，反应冷却至室温，加入0.15毫升水，再次密封试管，再加热至105℃达30分钟。然后混合物用乙醚稀释，用0.1N HCl和盐水洗涤。分离有机层，用MgSO4干燥，过滤，除去溶剂，得到白色固体。固体用硅胶纯化，用按体积计10/89/1的乙酸乙酯/二氯甲烷/甲酸洗脱，得到1.70克HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)12CH3，白色固体。
实施例7-17制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)aC≡C-C≡C(CH2)aO(O)C(CH2)bCH3步骤1中使用表3中所示的二醇和酰基氯进行实施例6所述的相同过程，得到通式结构为HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)aC≡C-C≡C(CH2)aO(O)C(CH2)bCH3的化合物(a和b按表3中所定义的)。
表3
实施例18制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)5C≡C-C≡C(CH2)5O(O)C(CH2)10CH3步骤1制备HO(CH2)5C≡C-C≡C(CH2)5OH通过KAPA-催化异构化根据Miller，J.G.；Oehlschlager，A.C.J.Org.Chem.1984，49，2332-2338制备的HOCH2C≡C(CH2)3CH3或HO(CH2)2C≡C(CH2)2CH3(可从GFS Chemicals；Powell，OH得到)来制备HO(CH2)5C≡CH。通过在玻璃反应容器中将6.95克HO(CH2)5C≡CH溶解在吡啶/甲醇(2.0mL/6.2mL)中，并加入307克CuCl，然后在氧存在下搅拌，直至所有原料消耗完，由此来进行HO(CH2)5C≡CH的氧化偶联。反应混合物用乙醚和4N HCl处理，结合的有机层用MgSO4干燥，过滤，浓缩。用1/1己烷/叔丁基甲基醚重结晶残渣，得到5.35克HO(CH2)5C≡C-C≡C(CH2)5OH。
步骤2制备HO(CH2)5C≡C-C≡C(CH2)5O(O)C(CH2)10CH3进行实施例6步骤1的相同过程，除了代替5，7-十二烷基二炔-1，12-二醇，而使用上面步骤1中制备的二醇。
步骤3制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)5C≡C-C≡C(CH2)5O(O)C(CH2)10CH3
进行实施例6步骤2中所述的相同过程。
实施例19-21制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)5C≡C-C≡C(CH2)5O(O)C(CH2)bCH3步骤2中使用表4中所示的二醇和酰基氯进行实施例18所述的相同过程，得到通式结构为HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)5C≡C-C≡C(CH2)5O(O)C(CH2)bCH3的化合物(b按表4中所定义的)。
表4
实施例22-25制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)6C≡C-C≡C(CH2)6O(O)C(CH2)bCH3进行实施例18步骤1中所述的相同过程，以从1-庚炔制备二醇HO(CH2)6C≡C-C≡C(CH2)6OH。步骤2中使用表5中所示的二醇和酰基氯进行实施例18的其余步骤，得到通式结构为HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)6C≡C-C≡C(CH2)6O(O)C(CH2)bCH3的化合物(b按表5中所定义的)。
表5
实施例26-29制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)7C≡C-C≡C(CH2)7O(O)C(CH2)bCH3
进行实施例18步骤1中所述的相同过程，以从1-辛炔制备二醇HO(CH2)7C≡C-C≡C(CH2)7OH。步骤2中使用表6中所示的二醇和酰基氯进行实施例18的其余步骤，得到通式结构为HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)7C≡C-C≡C(CH2)7O(O)C(CH2)bCH3的化合物(b按表6中所定义的)。
表6
实施例29-32制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)9C≡C-C≡C(CH2)9O(O)C(CH2)bCH3进行实施例18步骤1中所述的相同过程，以从1-癸炔制备二醇HO(CH2)9C≡C-C≡C(CH2)9OH。步骤2中使用表7中所示的二醇和酰基氯进行实施例18的其余步骤，得到通式结构为HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)9C≡C-C≡C(CH2)9O(O)C(CH2)bCH3的化合物(b按表7中所定义的)。
表7
实施例33制备HO(O)C(CH2)3C(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)12CH3进行实施例6中所述的相同过程，除了步骤2中用戊二酸酐代替琥珀酸酐。
实施例34制备HO(O)CHC＝CHC(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)14CH3进行实施例6中所述的相同过程，除了步骤1中用CH3(CH2)14C(O)Cl代替CH3(CH2)12C(O)Cl，步骤2中马来酸酐代替琥珀酸酐。
实施例35制备HO(O)C(1，2-C6H4)C(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(O)C(CH2)12CH3进行实施例6中所述的相同过程，除了步骤2中用邻苯二甲酸酐代替琥珀酸酐。
实施例36制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(CH2)11CH3步骤1制备HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(CH2)11CH3在玻璃反应容器中加入，在10mL干DMF中制备120毫克氢化钠的悬浮液，加入972毫克5，7-十二烷基二炔-1，12-二醇(HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4OH)。搅拌5分钟后，加入1.31克CH3(CH2)11Br，生成的混合物搅拌15小时。然后通过加入饱和NH4Cl溶液猝灭混合物，用100毫升乙醚稀释。分离有机层，用盐水洗涤3次，用MgSO4干燥，过滤，除去溶剂，得到黄色油。油用硅胶纯化(梯度为在己烷中按体积计25％-35％的乙酸乙酯)，得到606毫克HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(CH2)11CH3，白色固体。
步骤2制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(CH2)11CH3在可密封试管中，混合步骤1中制得的181毫克HO(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(CH2)11CH3，63毫克琥珀酸酐，2毫升甲苯和15毫克DMAP，并密封该试管。混合物加热至110℃达16小时，反应冷却至室温，加入3滴水，再次密封试管，再加热至110℃达30分钟。然后混合物用乙醚稀释，用0.1N HCl和盐水洗涤。分离有机层，用MgSO4干燥，过滤，除去溶剂，得到白色固体。固体用硅胶纯化，用按体积计10/89/1的乙酸乙酯/二氯甲烷/甲酸洗脱，得到HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)4C≡C-C≡C(CH2)4O(CH2)11CH3，白色固体。
实施例37-41制备HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)aC≡C-C≡C(CH2)aO(CH2)bCH3步骤1中使用表8中所示的二醇和酰基氯进行实施例37所述的相同过程，得到通式结构为HO(O)C(CH2)2C(O)O(CH2)aC≡C-C≡C(CH2)aO(CH2)bCH3的化合物(a和b按表8中所定义的)。
表8
实施例42实施例6中制得的10.1毫克化合物样品置于玻璃容器中，并悬浮在5毫升异丙醇中。混合物加热至沸腾，加入10毫升70℃的水。煮沸生成的溶液，直到温度到达95℃，这表明几乎所有的异丙醇都沸腾掉。溶液冷却至室温，然后冷却至4℃达16小时。2毫升溶液样品接触254纳米光达10分钟，产生暗蓝色，表明发生了聚合。
实施例43检测溶液中的膜肽在玻璃容器的Tris缓冲液(2mM，pH＝8.5)中制备二乙炔单体(实施例6制备的)和DMPC(6∶4)的1.0毫摩尔浓度的样品，在BronsonModel#1510声波处理室中(可从VWR Scientific Products；WestChester，PA得到)声波处理30分钟，并放在4℃冷藏室中约16小时。然后样品通过1.2μm针筒过滤器过滤，通过在254nm UV灯(可从VWRScientific Products；West Chester，PA得到)下以3cm的距离照射样品10分钟来聚合。聚合后观察到明显的蓝紫色。
通过向样品中加入～80μL的硫酸多粘菌素B溶液(10,050单位/mL)来测定溶液的检测性能。这样产生快的比色响应，由于从蓝变化到红色，因此容易目视测定，并且在室温下1小时后，由于光谱中从640nm的峰吸收迁移至540nm的峰吸收，所以可用UV-vis光谱法定量。
实施例44检测基底上的膜肽实施例43中制备的聚合的PDA/DMPC混合物被涂覆在一片逆相C-18硅胶板上。溶液涂在板上，并允许干燥至室温，从而在测试板上生成蓝点。为测试传感器的固体状态形式，硫酸多粘菌素B(10,050单位/mL)的测试溶液(40μL)加到样品点上。这产生从蓝到粉红色的立即(＜15秒)颜色变化。仅使用milli-Q水(50μL)的对照测试没有表现出颜色变化。
实施例45检测溶液中的肽-膜相互作用称重实施例6的二乙炔单体和DMPC(6∶4)的混合物，加到小瓶中，并悬浮在Tris缓冲液(2mM，pH＝8.5)中，得到1mM浓度溶液，按实施例43制备聚合的检测溶液。
通过向样品中加入～50μL的1mM蜂毒素溶液来测定溶液的检测性能。这样产生快的比色响应，由于从蓝变化到红色，因此容易目视测定，并且在室温下1小时后，由于光谱中从640nm的峰吸收迁移至540nm的峰吸收，所以可用UV-vis光谱法定量。
实施例46检测基底上的肽-膜相互作用按实施例44的相同过程，使用实施例45聚合检测方案制备测试板。聚合溶液的几个点(每个40μL)被置于一片逆相C-18硅胶板上。溶液允许干燥至室温，从而生成蓝点。为测试基底检测肽的能力，含有15和30纳摩尔蜂毒素的两个样品分别加到测试板上的不同点上。这产生从蓝到红色的立即(＜15秒)颜色变化。滴在不同测试点上的milli-Q水的对照样品没有表现出颜色变化。
实施例47检测溶液中磷脂酶A2的界面酶催化作用按实施例45制备检测溶液。通过向每个样品中加入～50μL的75μM磷脂酶A2溶液来测定溶液的检测性能。这样产生快的比色响应，由于从蓝变化到红色，因此容易目视测定，并且在室温下1小时后，由于光谱中从640nm的峰吸收迁移至540nm的峰吸收，所以可用UV-vis光谱法定量。
实施例48使用商业上可得到的二乙炔单体试图检测基底上的肽-膜相互作用商业上可得到的10，12-二十三烷基二炔酸(从GFS Chemicals；Powell，OH得到)和DMPC的混合物(6∶4)被用来制备实施例44中的检测溶液和测试板。聚合后观察到明显的蓝紫色。经将检测溶液点在测试板上，一些溶液干燥发生颜色变化，变成红点，而其他样品干燥变成蓝点。
为测试基底上的聚合组装体肽-膜相互作用检测性能，30纳摩尔蜂毒素(商业上可从Sigma Aldrich；St.Louis，MO得到)被加到干燥成蓝色的点上。取决于溶液的制备，表现为或者没有颜色变化，或者是反映出CR小于5％的带污点外观。
实施例49使用商业上可得到的二乙炔单体试图检测2-D基底上的肽-膜相互作用重复实施例48，除了为测试基底上的聚合组装体肽-膜相互作用的检测性能，50μL硫酸多粘菌素B溶液(10,050单位/mL)被加到测试板式的每一点上。取决于溶液的制备，表现为反映出CR小于5％颜色变化的带污点外观。
实施例50间接检测基底上的E.Coli按实施例46制备测试板。
为测试E.coli的检测，硫酸多粘菌素B溶液(10,050单位/mL)被加到仅含有milli-Q水的小瓶中及含有E.coli[ATCC25922，在milli-Q水中～109细菌/mL]悬浮液的小瓶中。使两个样品静置30分钟后，通过0.45μm针筒过滤器过滤，每种洗提液40μL放在传感器混合物的干燥点上。15分钟后，除去液体，检测各板。不含E.coli而仅含多粘菌素B的样品颜色变化到红色，而含有E.coli和多粘菌素B的那些样品没有明显颜色变化。
实施例51检测基底上的生物流体中的E.coli称重实施例6中制备的二乙炔单体和DMPC的混合物(6∶4)，加到小瓶中，并悬浮在HEPES缓冲液(5mM，pH＝7.2)中，得到1mM溶液，然后使用Model XL2020探针声波处理器(商业上可从Misonix，Inc.；Farmington，NY得到)将能量设置在5，探针声波处理溶液1分钟，并放在4℃冷藏室中过夜(～16小时)。然后样品通过1.2μm针筒过滤器过滤，通过在254nm UV灯下以3cm的距离照射样品20分钟来聚合搅拌的溶液，生成可观察到的蓝色。使用注射器，聚合溶液的几个点(每个40μL)被置于一片逆相C-18硅胶板上。各点允许干燥至室温，从而生成蓝点。为测试E.coli的检测性能，硫酸多粘菌素B溶液(10,050单位/mL)被加到人尿溶液中及掺有E.coli[ATCC25922，在milli-Q水中～109细菌/mL]的人尿溶液中。使样品在37℃孵育30分钟后，样品冷却至室温，每种洗提液40μL放在PDA/DMPC溶液的干燥点上。40分钟后，除去液体，检测各板。不含E.coli而仅含多粘菌素B的样品各点有明显的颜色变化，而含有E.coli和多粘菌素B的样品颜色有较小的变化。
实施例52检测基底上的脂多糖称重实施例6中制备的二乙炔单体和DMPC的混合物(6∶4)，加到小瓶中，并悬浮在HEPES缓冲液(5mM，pH＝7.2)中，得到1mM溶液。然后按实施例43在逆相C-18硅胶板上制备测试板。为测试脂多糖的检测，1000μL硫酸多粘菌素B溶液(628单位/mL)被加到不含内毒素水的1mL溶液和不含内毒素水但掺有脂多糖(10,000单位/mL)的1mL溶液中。使样品在37℃孵育30分钟后，样品冷却至室温，每种溶液40μL放在PDA/DMPC溶液的干燥点上。60分钟后，除去液体，检测各板。不含脂多糖的样品颜色变化至红色，而含有脂多糖和多粘菌素B的溶液没有颜色变化。
实施例53使用甘油检测2-D基底上的脂多糖称重实施例6中制备的二乙炔单体和十四酸12-(4，4-二羟基-丁酰氧基)-十二烷基-5，7-二炔酯的混合物(1∶1)，加到小瓶中，并悬浮在HEPES缓冲液(5mM，pH＝7.2)中，得到1mM溶液。然后使用ModelXL2020探针声波处理器(商业上可从Misonix，Inc.；Farmington，NY得到)将能量设置在5，探针声波处理溶液1分钟，并放在4℃冷藏室中过夜(～16小时)。然后样品通过1.2μm针筒过滤器过滤，通过在254nmUV灯下以3cm的距离照射样品60秒来聚合搅拌的溶液，生成可观察到的深蓝色。使用注射器，聚合溶液的几个点(每个40μL)被置于一片逆相C-18硅胶板上。各点允许干燥至室温，从而生成蓝点。为测试脂多糖的检测，为测试脂多糖的检测，硫酸多粘菌素B溶液(5025单位/mL)被加到不含内毒素水的溶液和不含内毒素水但掺有脂多糖的溶液中。使样品在37℃孵育30分钟后，样品冷却至室温，每种溶液500μL放在PDA/DMPC溶液的干燥点上。缓慢摇动15分钟后，除去液体，检测各板。这样产生快的比色响应，在不含脂多糖时由于从蓝变化到红色，因此容易目视测定。
实施例54适于保持聚二乙炔组装体活性相的基底的特征为测试表1所示的基底的特征，以下面的方法制备表面，以进行评估。通过将金蒸发到涂铬并抛光的硅晶片上来制备金表面。生成的表面具有高度反射性，根据Nanoscope Command Reference ManualVersion 4.42；Digital Instruments；Sections 12.5和12.6，使用原子力显微镜(AFM)测得其均方根表面粗糙度小于15埃。在使用之前，利用干燥氮气流去掉金表面上的灰尘。
通过在氧化浴(商业上从Nochromix得到)中清洗过夜，然后在milli-Q水中漂洗多次，直到漂洗水能够在玻璃表面保持均匀而没有反润湿，由此制备玻璃表面。在使用之前，利用干燥氮气流去掉玻璃表面上的灰尘。
使用标准的硅晶片表面，并在使用之前，利用干燥氮气流去掉硅晶片表面上的灰尘。通过将表面浸渍在SAM浓度为1mM的溶液中来形成用SAM改性的表面。乙醇或氯仿用作溶剂。浸渍时间至少为24小时，然后用自组装中所用的纯净溶剂漂洗多次。然后在测量接触角之前，在干燥箱中干燥样品过夜。
所有使用的其他表面都是标准的。在制备和处理后，每种样品都切成几小片，其中一些用于接触角测量，另一些用PDA溶液涂覆。为涂覆基底，称重实施例6的二乙炔单体和DMPC的混合物(6∶4)，加到小瓶中，并悬浮在HEPES缓冲液(5mM，pH＝7.2)中，得到1mM溶液，然后使用Model XL2020探针声波处理器(商业上可从Misonix，Inc.；Farmington，NY得到)将能量设置在5，探针声波处理溶液1分钟，然后放在4℃冷藏室中过夜(～16小时)。然后样品通过1.2μm针筒过滤器过滤，通过在254nm UV灯下以3cm的距离照射样品20分钟来聚合搅拌的溶液，生成可观察到的蓝色。使用注射器，聚合溶液的几个点(每个40μL)被置于表1中所述的一系列基底上。溶液允许干燥至室温，记录各点生成的颜色。
在不脱离本发明范围和精神内，本领域所属技术人员显然可以对本发明做出各种修改和变化。应该理解，本发明不意图限制于所述的示例性实施方案，而这些实施方案仅是作为例子使用，本发明的范围仅由权利要求
书来限定。
权利要求
1.一种用于检测分析物的比色传感器，包括受体；及聚合组合物，包括至少一种下式的化合物 其中R1包括C1-C20烷基，
或
R2包括 或
R3，R8，R13，R21，R24，R31和R33独立地是C1-C20烷基；R4，R5，R7，R14，R16，R19，R20，R22，R25和R32独立地是C1-C14亚烷基；R6，R15，R18和R26独立地是C1-C14亚烷基，C2-C8亚烯基，或C6-C13亚芳基；R9是C1-C14亚烷基或-NR34-；R10，R12，R27和R29独立地是C1-C14亚烷基或(C1-C14亚烷基)-(C2-C8亚芳基)；R11和R28独立地是C2-C30炔基；R17是酯活化基团；R23是C6-C13亚芳基；R30是C1-C14亚烷基或-NR36-；R34和R36是C1-C4烷基；p是1-5；n是1-20；其中R1和R2不相同；其中所述受体加到所述聚合组合物中形成转导物；及其中当所述转导物与分析物接触时，其表现出颜色变化。
2.如权利要求
1所述的传感器，其中R1是十二烷基或十六烷基。
3.如权利要求
1所述的传感器，其中R3是十一烷基或十五烷基。
4.如权利要求
1所述的传感器，其中R24是甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基或十二烷基。
5.如权利要求
1所述的传感器，其中R33是十二烷基，十四烷基，十六烷基或十八烷基。
6.如权利要求
1所述的传感器，其中R4是亚甲基，亚丙基或亚丁基。
7.如权利要求
1所述的传感器，其中R5是亚乙基或亚丙基。
8.如权利要求
1所述的传感器，其中R7，R16，R19，R20和R25独立地是亚乙基，亚丙基，亚丁基，亚戊基，亚己基，亚庚基，亚辛基或亚壬基。
9.如权利要求
1所述的传感器，其中R20是亚甲基，亚丙基或亚丁基。
10.如权利要求
1所述的传感器，其中R22是亚乙基，亚丙基或亚丁基。
11.如权利要求
1所述的传感器，其中R32是亚乙基，亚丙基，亚丁基，亚戊基或亚己基。
12.如权利要求
1所述的传感器，其中R6，R15，R18和R26独立地是亚乙基，亚丙基，亚乙烯基或亚苯基。
13.如权利要求
1所述的传感器，其中R8和R31独立地是C1-C14烷基。
14.如权利要求
15所述的传感器，其中R8和R31独立地是丁基，戊基或己基。
15.如权利要求
1所述的传感器，其中R9和R30独立地是亚甲基，-NH-，-N(CH2CH3)-或-N(CH3)-。
16.如权利要求
1所述的传感器，其中R10，R12，R27和R29独立地是亚甲基，亚乙基，亚丙基，亚丁基，-C(CH3)2-，-CH((CH2)1-4CH3)-或-CH2-亚苯基。
17.如权利要求
1所述的传感器，其中R11和R28独立地是具有至少两个碳-碳三键的C2-C30炔基。
18.如权利要求
19所述的传感器，其中R11和R28独立地是-(CH2)8-C≡C-C≡C-(CH2)9CH3或-(CH2)8-C≡C-C≡C-(CH2)11CH3。
19.如权利要求
1所述的传感器，其中R13是C1-C4烷基。
20.如权利要求
1所述的传感器，其中R14是C1-C4亚烷基。
21.如权利要求
1所述的传感器，其中R17是2，5-二氧-1-吡咯烷基。
22.如权利要求
1所述的传感器，其中R23是亚苯基。
23.如权利要求
1所述的传感器，其中n是1-20，3-17，6-14或9-11。
24.如权利要求
1所述的传感器，其中p是1或2。
25.如权利要求
1所述的传感器，其中R1是 其中R7是亚乙基，亚丙基，亚丁基，亚戊基，亚己基，亚庚基，亚辛基或亚壬基，及R6是亚乙基，亚丙基，亚乙烯基或亚苯基；及其中R2是 其中R20是亚乙基，亚丙基，亚丁基，亚戊基，亚己基，亚庚基，亚辛基或亚壬基，及其中R21是十一烷基，十三烷基，十五烷基，十七烷基；及其中p是1。
26.如权利要求
25所述的传感器，其中R1是 R7是亚乙基；及R2是 R20是亚丁基，及其中R21是十三烷基；及p是1。
27.如权利要求
1所述的传感器，其中所述受体选自磷脂和甘油。
28.如权利要求
1所述的传感器，其中所述转导物分散在水溶液中。
29.如权利要求
1所述的传感器，其中所述转导物涂覆在基底上。
30.如权利要求
29所述的传感器，其中在使用二碘甲烷时所述基底接触角小于50度。
31.如权利要求
30所述的传感器，其中所述基底选自硅胶板，纸，玻璃，网纹照相用纸，光泽照相用纸和微孔薄膜。
32.如权利要求
1所述的传感器，其中所述受体通过物理混合与所述聚合组合物形成一体。
33.如权利要求
1所述的传感器，其中所述受体与所述聚合组合物共价结合。
34.一种检测分析物的方法，包括形成比色传感器，所述比色传感器包括受体和下式的聚合组合物 其中R1包括C1-C20烷基，
或
R2包括 或
R3，R8，R13，R21，R24，R31和R33独立地是C1-C20烷基；R4，R5，R7，R14，R16，R19，R20，R22，R25和R32独立地是C1-C14亚烷基；R6，R15，R18和R26独立地是C1-C14亚烷基，C2-C8亚烯基或C6-C13亚芳基；R9是C1-C14亚烷基或-NR34-；R10，R12，R27和R29独立地是C1-C14亚烷基或(C1-C14亚烷基)-(C2-C8亚芳基)；R11和R28独立地是C2-C30炔基；R17是酯活化基团；R23是C6-C13亚芳基；R30是C1-C14亚烷基或-NR36-；R34和R36是C1-C4烷基；p是1-5；n是1-20；其中R1和R2不相同；其中所述受体加到所述聚合组合物中形成能够表现出颜色变化的转导物；使所述传感器与分析物接触；及如果所述分析物存在，那么观察颜色变化。
35.如权利要求
34所述的方法，其中所述转导物分散在水溶液中。
36.如权利要求
34所述的方法，其中所述转导物涂覆在基底上。
37.如权利要求
36所述的方法，其中在使用二碘甲烷时所述基底接触角小于50度。
38.如权利要求
30所述的传感器，其中所述基底选自硅胶板，纸，玻璃，网纹照相用纸，光泽照相用纸和微孔薄膜。
39.如权利要求
34所述的传感器，其中所述受体通过物理混合与所述聚合组合物形成一体。
40.如权利要求
34所述的传感器，其中所述受体与所述聚合组合物共价结合。
41.一种检测分析物的方法，包括形成比色传感器，所述比色传感器包括受体和下式的聚合组合物 其中R1包括C1-C20烷基，
或
R2包括 或
R3，R8，R13，R21，R24，R31和R33独立地是C1-C20烷基；R4，R5，R7，R14，R16，R19，R20，R22，R25和R32独立地是C1-C14亚烷基；R6，R15，R18和R26独立地是C1-C14亚烷基，C2-C8亚烯基或C6-C13亚芳基；R9是C1-C14亚烷基或-NR34-；R10，R12，R27和R29独立地是C1-C14亚烷基或(C1-C14亚烷基)-(C2-C8亚芳基)；R11和R28独立地是C2-C30炔基；R17是酯活化基团；R23是C6-C13亚芳基；R30是C1-C14亚烷基或-NR36-；R34和R36是C1-C4烷基；p是1-5；n是1-20；其中R1和R2不相同；及其中所述受体加到所述聚合组合物中形成能够表现出颜色变化的转导物；使所述传感器与分析物接触；使所述转导物与对所述分析物和所述受体具有亲合力的探针接触；及如果所述分析物存在，那么观察没有颜色变化。
42.如权利要求
41所述的方法，其中在接触所述转导物之前，所述探针和分析物混合形成混合物。
43.如权利要求
41所述的方法，其中所述转导物分散在水溶液中。
44.如权利要求
41所述的方法，其中所述转导物涂覆在基底上。
45.如权利要求
44所述的方法，其中在使用二碘甲烷时所述基底接触角小于50度。
46.如权利要求
45所述的方法，其中所述基底选自硅胶板，纸，玻璃，网纹照相用纸，光泽照相用纸和微孔薄膜。
47.如权利要求
41所述的方法，其中所述受体通过物理混合与所述聚合组合物形成一体。
48.如权利要求
41所述的方法，其中所述受体与所述聚合组合物共价结合。
49.如权利要求
41所述的方法，其中所述探针包括膜中断肽。
50.如权利要求
49所述的方法，其中所述探针选自丙甲菌素，蛙皮素，短杆菌肽，硫酸多粘菌素B和蜂毒素。
51.如权利要求
41所述的方法，其中所述分析物选自革兰氏阴性菌和内毒素。
52.一种用于检测分析物存在的可弃试剂盒，包括一种或多种转导物，包括受体和下式的聚合组合物 其中R1包括C1-C20烷基，
或
R2包括 或
R3，R8，R13，R21，R24，R31和R33独立地是C1-C20烷基；R4，R5，R7，R14，R16，R19，R20，R22，R25和R32独立地是C1-C14亚烷基；R6，R15，R18和R26独立地是C1-C14亚烷基，C2-C8亚烯基或C6-C13亚芳基；R9是C1-C14亚烷基或-NR34-；R10，R12，R27和R29独立地是C1-C14亚烷基或(C1-C14亚烷基)-(C2-C8亚芳基)；R11和R28独立地是C2-C30炔基；R17是酯活化基团；R23是C6-C13亚芳基；R30是C1-C14亚烷基或-NR36-；R34和R36是C1-C4烷基；p是1-5；n是1-20；其中R1和R2不相同；及其中所述受体加到所述聚合组合物中形成能够表现出颜色变化的转导物；及用于使所述转导物与分析物接触的装置。
53.如权利要求
52所述的试剂盒，还包括对所述受体和一种或多种分析物具有亲合力的一种或多种探针；其中所述探针与所述转导物物理分离，直到所述试剂盒被使用时。
54.如权利要求
52所述的试剂盒，其中一种或多种转导物分散在水溶液中。
55.如权利要求
52所述的试剂盒，其中一种或多种转导物涂覆在基底上形成阵列。
56.如权利要求
55所述的方法，其中在使用二碘甲烷时所述基底接触角小于50度。
57.如权利要求
56所述的传感器，其中所述基底选自硅胶板，纸，玻璃，网纹照相用纸，光泽照相用纸和微孔薄膜。
58.如权利要求
52所述的试剂盒，其中所述受体通过物理混合与所述聚合组合物形成一体。
59.如权利要求
52所述的试剂盒，其中所述受体与所述聚合组合物共价结合。
60.一种检测体液中细菌存在的方法，包括使如权利要求
1所述的传感器与体液接触的步骤。
61.如权利要求
60所述的方法，其中所述体液选自尿，粘液，创伤分泌液和血液。
62.如权利要求
1所述的比色传感器，还包括用于检测白细胞的诊断测试。
63.一种检测体液中细菌存在的方法，包括使如权利要求
62所述的传感器与体液接触的步骤。
64.如权利要求
63所述的方法，其中所述体液选自尿，粘液，创伤分泌液和血液。
65.一种医用制品，包括创伤敷料和如权利要求
1所述的比色传感器。
66.如权利要求
65所述的医用制品，其中所述比色传感器通过流体控制系统与所述创伤层连接。
67.如权利要求
66所述的医用制品，其中所述流体控制系统是微流体系统。
68.一种检测细菌存在的方法，所述方法包括在创伤敷料中插入如权利要求
1所述的比色传感器的步骤。
专利摘要
本发明公开了比色传感器，其包括混合在聚二乙炔组装体内的受体，以形成当与分析物接触时能够表现颜色变化的转导物。本发明也公开了使用比色传感器和试剂盒比色检测分析物的方法。
文档编号C12Q1/04GKCN1820198SQ200380107097
公开日2006年8月16日 申请日期2003年12月19日
发明者里安·B·普林斯, 戴维·S·海斯, 安哥拉·K·迪洛, 兰德尔·P·布朗, G·马可·博马里托, 约翰·L·巴蒂斯特 申请人:3M创新有限公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan