专利名称：多用途血液稀释剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于血液细胞粒子计数和测定体积的多用途血液稀释剂。
对患者进行血样分析化验是普通医学诊断，确定病症的主要手段之一。在进行血样分析时需添加一定的血液稀释剂，它必须包括适当的电解质成分，而且相对于血细胞溶液必须是渗透压平衡的。为抑制微生物的生长，还要加防腐剂，而防腐剂的引入又可能导致血细胞体积的变化，为平衡或补偿防腐剂对血细胞体积变化的影响，还需加入活化剂。因血液的pH值一般在7.4左右，所以还要求所用的血液稀释剂的pH值与血细胞溶液的pH值是平衡的。欧洲专利81107792.4和8311316.0公开的多用途血液稀释剂，其共同特征是以钠和钾的氯化物为电介质，一氢和二氢钾、钠磷酸盐为pH缓冲剂，乙二氨四乙酸二钠(EDTANa2)控制二价正离子，不同之处是后者是以2-苯氧基乙醇作为防腐剂，以聚氧乙烯-聚氧丙烯乙二醇作表面活化剂。前者是以苯基乙醇作防腐剂，氯化锂作红细胞体积稳定剂。现有技术不足之处除了配方成分较复杂外，均未解决抗凝问题，实际使用的血液稀释剂在室温下储放一定时间后会出现血细胞的凝集现象，造成本底计数偏高，影响血细胞计数和测定的精确性，甚至无法使用。除外，前者因引入氯化锂作红细胞体积稳定剂，并引入较多的无机盐，易对测量系统的金属零部件产生腐蚀产物，无机盐结晶，造成导管和计数孔的堵塞，后者还因2-苯基乙醇的洗涤作用产生气泡影响血小板的计数。目前国内市售的是日本ERMAIN生产的PC601型血小板、红血球计数仪配套使用的稀释剂，其配方未见公开，而且价格贵，抗凝效果差，抗腐能力低，用到后期甚至无法使用，造成浪费。
本发明的目的在于提供一种配方成分较简单、抗凝效果好，抗腐能力强、使用效果好的多用途血液稀释剂。
本发明是这样实现的一种相对于血细胞溶液是等渗的，pH值与血细胞平衡的多用途血液稀释剂包括氯化钠6.30～8.55g/l，枸橼酸钠1.39～4.17g/l，枸橼酸钾0.41～1.23g/l，庆大霉素4000～10000u/l(1u＝1μg)，上述组分用蒸馏水稀释。
本发明中氯化钠、枸橼酸钾、钠组成渗透压平衡的电解溶液，枸橼酸钾和钠，置换血液凝集系统的钙离子，K+、Na+离子能稳定血细胞形态，所以枸橼酸钾和钠既起抗凝作用，又起稳定血细胞体积作用。庆大霉素是广谱的抗菌素，具有较强的杀菌作用，除防腐效果好外，还不影响红细胞体积稳定性。由于采用了尽量少的无机盐类成分，pH值在中性，本质上同人体血液的pH值平衡，因此对测量系统的金属零部件腐蚀性小，减轻了腐蚀产生的生成，对导管、计数孔的堵塞有了明显的改善。
现结合实施例对本发明做进一步详细描述本发明优先选择的组分含量是氯化钠(AR)8.10g/l，枸橼酸钠(AR)2.98g/l，枸橼酸钾(AR)0.82g/l，庆大霉素6000u/l(u为国际单位，1u＝1μg)，用新鲜双蒸馏水稀释至1000ml。配制本发明的多用途血液稀释剂不需要特殊的工艺程序，各成分可以任意顺序加入，充分溶解，但需经G4细菌漏斗过滤，再用0.3μ和0.4μ滤膜加压过滤后贮放于包装容器中。使用时，测量系统的管道、容器、包装容器等必须使用新鲜双蒸馏水清洗干净。
本发明所提供的多用途血液稀释剂可用于测定各种血细胞计数的相应仪器，例如PC601，PC604等，自动连续处理患者血样，可以测量红细胞计数(RBC)、红细胞压积(HCT)、血红蛋白(HGB)、血小板计数、白细胞计数(WBC)，经计算还可以测定平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白浓度(MCHC)和平均红细胞血红蛋白(MCH)。
(1)本底计数实验血液细胞计数仪器本身对稀释要求本底计数最好为零，最高不应＞3。使用本发明用于PC601仪器，测得本底计数和仪器要求的标准值如下表所示
注实测稀释剂本底计数是20次计数的平均值。由上表可见，本发明的多用途血液稀释剂中的本底计数均符合仪器本身对血液稀释剂要求的标准值。
(2)使用仪器配用的稀释剂(ERMA)与本发明稀释剂测定血小板计数的对比如下表所示
注X为12次计数的平均值，SD为标准偏差。二种稀释剂中血小板的计数结果相当接近。
(3)抗凝效果对比实验
本发明的抗凝效果优于仪器配用的血液稀释剂。
(4)稳定性实验采集血样用两种稀释剂处理后即时测定和放置24小时后测定血小板计数，结果如下
其中X1、X2为20次计数的平均值。
采集血样分别在二种试剂中稀释，分别都进行即时测量和室温下放置24小时后测量，观察二者中血细胞均沉于管底，无肉眼所见溶血现象。重新搅匀后进行血小板计数，发现它比即时计数高(即X2＞X1)，但是本发明的稀释剂X2/X1比ERMA试剂低0.13倍，即其稳定性优于ERMA试剂。
本发明所述的血液稀释剂经使用证明还具有明显的抑菌效果，而且对细胞形态无明显影响，测量结果准确可靠，对测量系统的导管、计数孔的堵塞情况有了明显的改善。
综上所述，本发明所提供的多用途血液稀释剂与已有技术相比，具有以下优点和效果(1)配方中选用尽量少的成分，用于相应的计数测量仪器，可测得血液细胞的各种参数;
(2)采用钾和钠的枸橼酸盐具有良好的抗凝和稳定血细胞体积的效果;
(3)庆大霉素作防腐剂不但能有效地抑制微生物生长，而且对血细胞形态无明显影响，测量结果准确可靠;
(4)使用了尽量少的无机盐类，明显地减轻了计数测量系统堵管、堵孔现象。
权利要求
1.一种相对于血细胞溶液是等渗的，pH值与血细胞平衡的含氯化钠的多用途血液稀释剂，其特征在于该稀释剂包括氯化钠6.30～8.55g/l，枸橼酸钠 1.39～4.17g/l，枸橼酸钾 0.41～1.23g/l，庆大霉素 4000～10000u/l，上述组分用蒸馏水稀释。
2.根据权利要求1所说的一种多用途血液稀释剂，其特征在于氯化钠 8.10g/l，枸橼酸钠 2.98g/l，枸橼酸钠 0.82g/l，庆大霉素 6000u/l，上述组分用蒸馏水稀释。
全文摘要
本发明是提供一种用于血细胞计数和体积测定的多用途血液稀释剂。该稀释剂是化学盐类组成稳定的电解溶液，相对于血细胞中的溶液是等渗的，pH值同血细胞的相比，本质上也是平衡的。本稀释剂用钾和钠的枸橼酸盐作为电解质、pH值缓冲剂、血液抗凝剂，用广谱抗菌素庆大霉素作防腐剂。用于相应的粒子计数测定仪器，可以进行血细胞各种参数的测定，并且有良好的抗凝和抑菌效果。
文档编号G01N33/49GK1072020SQ9110988
公开日1993年5月12日 申请日期1991年10月28日 优先权日1991年10月28日
发明者华金发 申请人:国营八二一厂