一种丹参注射液的质量控制方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及分析化学领域，尤其是一种丹参注射液的质量控制方法。
【背景技术】
[0002] 中药丹参为双子叶植物唇形科（Ubiatae)鼠尾草属植物丹参（Salvia miltiorrhiza Bge.)的干燥根及根茎，具有活血通经、除烦清屯、、凉血消肿等功效。现代医 学与临床实验表明，丹参在屯、血管方面有扩张冠状动脉、增加冠状动脉血流量、减慢屯、率、 改善屯、肌缺氧、改善急性症状和屯、电图提示的缺血性改变、抑制血小板凝集、抑制血小板的 释放反应、降低血粘度、降低血脂、对抗红细胞聚集、减轻动脉粥样硬化、可抑制纤维蛋白原 转变成纤维蛋白、改善微循环、中枢镇静及抗菌消炎等作用，可用于治疗冠屯、病之屯、绞痛、 胸闷、屯、惇、屯、肌梗塞、屯、肌炎等症，用于抗血栓形成和抗凝。
[0003] 丹参的主要的活性成分为脂溶性丹参酬（二祗酿）和水溶性丹参酪酸类化 合物。迄今为止，从丹参里分离得到了走十余个丹参酬类化合物和=十多个丹参酪 酸类化合物，包括丹参酬IIA(Tanshinone IIA)、丹参酬UTanshinone I)，隐丹参酬 (ciTptotanshinone)、二氨丹参酬 1(15, 16-dihy化otanshinone I)、丹参素、原儿茶醒、丹 酪酸A、丹酪酸B(Salvianolic acid B)、丹酪酸C、迷迭香酸等。
[0004] 丹参注射液是丹参经加工制成的灭菌水溶液。收载于中药部颁标准第20卷，书页 号；Z20-34,标准编号；WS3-B-3766-98。标准规定制法为；取丹参1500g，加水煎煮S次，第 一次2小时，第二、S次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至750ml。加己醇沉淀 二次，第一次使含醇量为75%，第二次使含醇量为85%，每次均冷藏放置后滤过，滤液回收 己醇，并浓缩至约250ml，加注射用水至400ml，混匀，冷藏放置，滤过，用10%氨氧化钢溶 液调节抑值至6.8,煮沸半小时，滤过，加注射用水至1000ml,灌封，灭菌，即得。该产品为 栋色至栋红色的澄明液体。抑值在5. 0~7. 0之间。每1ml含原儿茶醒佑7&〇3)不得少于 0.2mg。主要功能活血化疲，通脉养屯、。用于冠屯、病胸闷，屯、绞痛。肌内注射和静脉注射均 可。丹参注射液在制备的过程中，经过了加热、灭菌酸碱处理等一系列过程，其化学组成和 含量不可避免地发生了变化，并且不同批次和不同生产厂家的丹参注射液中所含化学成分 的种类和含量也可能存在很大差别。因此，对丹参水溶性成分的成分进行系统地研究，最大 限度地鉴定其结构，并研究该些化合物在产品中所占的含量比例，对丹参注射液的质量控 制和作用机理研究具有重要意义。
【发明内容】
[0005] 本发明提供了一种丹参注射液的质量控制方法，用于控制丹参注射液制剂的质 量。该方法是在大批量丹参注射液指纹图谱的基础上获得对照指纹图谱，然后将待测样品 的指纹图谱与其比较，评价相似度，从而对丹参注射液的质量进行控制。
[0006] 在本发明所述的质量控制方法包括如下步骤：
[0007] (1)丹参注射液对照指纹图谱的建立
[000引丹参注射液对照品溶液的制备：
[0009] 取丹参注射液加水稀释5倍，或用PVDF亲水滤膜过滤或离屯、后加水稀释5倍，备 用；
[0010] 丹参注射液对照指纹图谱的测定：
[0011] 吸取上述对照品溶液注入液相色谱仪，使用HPLC法进行测定，得到丹参注射液对 照指纹图谱，色谱条件；色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相为己膳-0. 03%磯酸水 溶液，检测波长为270-280nm，流速为1. 0血/min,柱温为25-30°C，梯度洗脱程序如下，
[0012]
【主权项】
1. 一种丹参注射液的质量控制方法，其特征在于包括如下步骤： (1) 丹参注射液对照指纹图谱的建立 丹参注射液对照品溶液的制备： 取丹参注射液加水稀释5倍，或用PVDF亲水滤膜过滤或离心后加水稀释5倍，备用； 丹参注射液对照指纹图谱的测定： 吸取上述对照品溶液注入液相色谱仪，使用HPLC法进行测定，得到丹参注射液对照 指纹图谱，色谱条件：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相为乙腈-0. 03%磷酸水溶 液，检测波长为270-280nm，流速为1.0 mL/min，柱温为25-30°C，梯度洗脱程序如下，
(2) 丹参注射液待测产品指纹图谱的测定 取丹参注射液供试品溶液，按照上述（1)中所述的步骤和条件测定指纹图谱； (3) 将丹参注射液待测产品的指纹图谱与丹参注射液对照指纹图谱进行比较，识别相 似度，以确定产品质量是否合格。
2. -种丹参注射液的质量控制方法，其特征在于包括如下步骤： (1)丹参注射液对照指纹图谱的建立 丹参注射液对照品溶液的制备： 取丹参注射液加水稀释5倍，或用PVDF亲水滤膜过滤或离心后加水稀释5倍，备用； 丹参注射液对照指纹图谱的测定： 吸取上述对照品溶液注入液相色谱仪，使用LC-MS法进行测定，得到丹参注射液对照 指纹图谱，色谱条件：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，流动相为乙腈-0. 03%甲酸水溶 液，检测波长为270-280nm，流速为1.0 mL/min，柱温为25-30°C，梯度洗脱程序如下，
质谱参数：ESI (-)，ultra scan 50 ~1200m/z，Nebulizer 40psi，Dry gas 91/min， Dry Temp 350°C，分流模式进质谱，分流比约为1:3 ; (2) 丹参注射液待测产品指纹图谱的测定 取丹参注射液供试品溶液，按照上述（1)中所述的步骤和条件测定指纹图谱； (3) 将丹参注射液待测产品的指纹图谱与丹参注射液对照指纹图谱进行比较，识别相 似度，以确定产品质量是否合格。
3. 根据权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于所述十八烷基硅烷键合硅胶 柱为 Shiseido Capcell pak MG C18 柱或Phenomenex Luna C18 柱，并用 Shiseido MG C18 柱保护，优选 Shiseido Capcell pak MG C18 柱。
4. 根据权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于所述十八烷基硅烷键合硅胶 柱进一步用Shiseido MG C18柱保护。
5. 根据权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于所述检测波长为270nm、 280nm 或 286nm，优选 286nm。
6. 根据权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于所述柱温度为25°C或30°C， 优选30°C。
7. 根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于丹参注射液对照指纹图谱如图1 所示。
8. 根据权利要求2所述的质量控制方法，其特征在于丹参注射液对照指纹图谱如图5 所示。
9. 根据权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于，所述丹参注射液待测产品指 纹图谱与所述丹参注射液对照指纹图谱比较，二者指纹图谱相似度大于0. 900,优选0. 950 时，认为所述丹参注射液待测产品的质量合格。
【专利摘要】本发明涉及一种丹参注射液的质量控制方法。该方法采用HPLC或HPLC-MS法分别测定丹参注射液对照品和丹参注射液待测产品的指纹图谱，将二者进行比较，当二者相似度大于0.900时，认为该待测产品的质量合格。
【IPC分类】G01N30-06, G01N30-88
【公开号】CN104749308
【申请号】CN201510143556
【发明人】孔德宪, 果德安, 杨敏, 陈昕, 王秋蓉, 李一丰, 张纲
【申请人】神威药业集团有限公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2015年3月30日