一种茶叶籽蛋白氮溶解指数的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于蛋白质测定领域，具体是一种茶叶籽蛋白氮溶解指数的测定方法。
【背景技术】
[0002] 蛋白质是构成细胞和生物体结构的重要物质，具有催化、运输、传递信息的作用， 能够调节机体的生命活动，增强机体抵抗力，调节渗透压，供给热能，对生命活动起着至关 重要的作用。充足的蛋白质能够保持生命体正常的生命体征，因此，对于蛋白质含量的测定 具有重要的意义。每一种蛋白质都有其恒定的含氮量，但由于蛋白质组成及其性质的复杂 性，通常用总氮含量来表示蛋白质氮的含量，使得得到的蛋白质氮含量中也包含了非蛋白 质氮，不利于对含氮物质品质的评价，也会给不法分子以可乘之机，向食品中添加非蛋白质 氮类物质冒充蛋白质氮含量，给人民的健康带来巨大的威胁，因此，对真实蛋白质氮含量的 测定具有重要的意义。
[0003] 茶叶籽柏中蛋白质含量约为12% -15%，其氨基酸组成为15种，其中8种为人体 必需氨基酸。茶叶籽柏蛋白具有很高的经济价值，可将其作为生产蛋白饮料、冲调食品、焙 烤食品的蛋白质强化剂以及作为酱油等发酵产品的蛋白原料。因此，通过测定氮含量来确 定茶叶籽柏的水溶性蛋白含量，进行开发和利用是非常有意义的。
【发明内容】
[0004] 为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种茶叶籽蛋白氮溶解指数的测定方 法。
[0005] 为达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：
[0006] -种茶叶籽蛋白氮溶解指数的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0007] (1)水溶性蛋白质的提取：称取茶叶籽蛋白试样5g(W，精确至0.0 lg)于磨口带塞 锥形瓶中，加水200mL，摇混使均匀分散，然后在25-30°C温度下振荡2h，取出后将混合液转 移至250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀后静置l-2min，将上层清液倒入离心管中，在 每分钟转数1500转的离心机中离心10min，再将离心液用快速滤纸或玻璃纤维过滤，收集 清晰滤液于锥形烧瓶中，得到样品水溶性蛋白质测定液；
[0008] (2)定氮：吸取样品水溶性蛋白质测定液IOmL于50mL的凯氏定氮瓶中，按照标准 GB/T 5511中3. 1、3. 2、3. 3步骤进行消化、蒸馏、滴定，记下滴定样品液及空白液消耗盐酸 的数量；
[0009] (3)水溶性茶叶籽蛋白质含量计算：水溶性茶叶籽蛋白质含量（X)以质量分数计， 单位为％，按公式（Al)计算：
L0011」 式中=V1-湎足5mL样品液消耗盐酸体枳，早位为毫升（mL) ;VQ-湎足5mL空臼液 消耗盐酸体积，单位为毫升（mL) ;N-盐酸溶液的浓度，单位为摩尔/升（mol/mL) ;0. 014- 每毫克当量氮的克数；6. 25-含氮量换算成蛋白质的系数；10-吸收提取液进行消化的体 积，单位为毫升（mL) ;250-总提取液的体积，单位为毫升（mL) ;5-吸收消化液进行蒸馏的 体积，单位为毫升（mL) ;50-总消化液的体积，单位为毫升（mL) ;W-试样重量，单位为克 (g) ;M-试样水分质量分数，％ ;
[0012] (4)氮溶解指数测定结果：氮溶解指数（W)以质量分数计，单位为％，按公式（A2) 计算：
[0013] W = N1/NX100%...............(A2)
[0014] 式中：N1-该样品的水溶性蛋白质含量，单位为克每百克（g/100g)，N-该样品的 粗蛋白质含量，单位为克每百克（g/l〇〇g)。
[0015] 本发明的有益效果：
[0016] 本发明提供的方法对茶叶籽蛋白中氮的测定得到的数据变异系数较小，准确度较 高，操作简单、省时，步骤简便，处理周期较短，大大提高了检测效率。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
[0018] 实施例：
[0019] 本发明所述的一种茶叶籽蛋白氮溶解指数的测定方法，其特征在于，包括以下步 骤：
[0020] (1)水溶性蛋白质的提取：称取茶叶籽蛋白试样5g(W，精确至0.0 lg)于磨口带塞 锥形瓶中，加水200mL，摇混使均匀分散，然后在25-30°C温度下振荡2h，取出后将混合液转 移至250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀后静置l-2min，将上层清液倒入离心管中，在 每分钟转数1500转的离心机中离心10min，再将离心液用快速滤纸或玻璃纤维过滤，收集 清晰滤液于锥形烧瓶中，得到样品水溶性蛋白质测定液；
[0021] (2)定氮：吸取样品水溶性蛋白质测定液IOmL于50mL的凯氏定氮瓶中，按照标准 GB/T 5511中3. 1、3. 2、3. 3步骤进行消化、蒸馏、滴定，记下滴定样品液及空白液消耗盐酸 的数量；
[0022] (3)水溶性茶叶籽蛋白质含量计算：水溶性茶叶籽蛋白质含量（X)以质量分数计， 单位为％，按公式（Al)计算：
[0024] 式中=V1-滴定5mL样品液消耗盐酸体积，单位为毫升（mL) ;V。一滴定5mL空白液 消耗盐酸体积，单位为毫升（mL) ;N-盐酸溶液的浓度，单位为摩尔/升（mol/mL) ;0. 014- 每毫克当量氮的克数；6. 25-含氮量换算成蛋白质的系数；10-吸收提取液进行消化的体 积，单位为毫升（mL) ;250-总提取液的体积，单位为毫升（mL) ;5-吸收消化液进行蒸馏的 体积，单位为毫升（mL) ;50-总消化液的体积，单位为毫升（mL) ;W-试样重量，单位为克 (g) ;M-试样水分质量分数，％ ;
[0025] (4)氮溶解指数测定结果：氮溶解指数（W)以质量分数计，单位为％，按公式（A2) 计算：
[0026] W = N1/NX100%...............(A2)
[0027] 式中：N1-该样品的水溶性蛋白质含量，单位为克每百克（g/lOOg)，N-该样品的 粗蛋白质含量，单位为克每百克（g/l〇〇g)。
【主权项】
1. 一种茶叶籽蛋白氮溶解指数的测定方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 水溶性蛋白质的提取：称取茶叶籽蛋白试样5g(W，精确至0.Olg)于磨口带塞锥形 瓶中，加水200mL，摇混使均匀分散，然后在25-30°C温度下振荡2h，取出后将混合液转移至 250mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀后静置l-2min，将上层清液倒入离心管中，在每分 钟转数1500转的离心机中离心lOmin，再将离心液用快速滤纸或玻璃纤维过滤，收集清晰 滤液于锥形烧瓶中，得到样品水溶性蛋白质测定液； (2) 定氮：吸取样品水溶性蛋白质测定液IOmL于50mL的凯氏定氮瓶中，按照标准GB/ T5511中3. 1、3. 2、3. 3步骤进行消化、蒸馏、滴定，记下滴定样品液及空白液消耗盐酸的数 量； (3) 水溶性茶叶籽蛋白质含量计算：水溶性茶叶籽蛋白质含量（X)以质量分数计，单位 为％，按公式（Al)计算：式中=V1-滴定5mL样品液消耗盐酸体积，单位为毫升（mL) ;V。一滴定5mL空白液消耗 盐酸体积，单位为毫升（mL) ;N-盐酸溶液的浓度，单位为摩尔/升（mol/mL) ;0. 014-每毫 克当量氮的克数；6. 25-含氮量换算成蛋白质的系数；10-吸收提取液进行消化的体积， 单位为毫升（mL) ;250-总提取液的体积，单位为毫升（mL) ;5-吸收消化液进行蒸馏的体 积，单位为毫升（mL) ;50-总消化液的体积，单位为毫升（mL) ;W-试样重量，单位为克（g); M-试样水分质量分数，％; ⑷氮溶解指数测定结果：氮溶解指数（W)以质量分数计，单位为％，按公式（A2)计 算： W=N1/NX100% ...............(A2) 式中：Nl-该样品的水溶性蛋白质含量，单位为克每百克（g/100g)，N-该样品的粗蛋 白质含量，单位为克每百克（g/l〇〇g)。
【专利摘要】本发明公开了一种茶叶籽蛋白氮溶解指数的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）水溶性蛋白质的提取；（2）定氮；（3）水溶性茶叶籽蛋白质含量计算；（4）氮溶解指数测定结果。本发明提供的方法对茶叶籽蛋白中氮的测定得到的数据变异系数较小，准确度较高，操作简单、省时，步骤简便，处理周期较短，大大提高了检测效率。
【IPC分类】G01N31/16
【公开号】CN105044276
【申请号】CN201510504922
【发明人】陈伟, 魏星, 魏柱银, 陈同铸, 郝中存
【申请人】安徽省华银茶油有限公司
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年8月17日