一种嘧菌酯检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物检测领域，具体设及一种喀菌醋检测方法。
【背景技术】
[0002] 喀菌醋属于甲氧基丙締酸醋（Strobilurin)类杀菌农药，高效、广谱，对几乎所有 的真菌界（子囊菌亚口、担子菌亚口、鞭毛菌亚口和半知菌亚口）病害如白粉病、诱病、颖 枯病、网斑病、霜霉病、稻攝病等均有良好的活性。可用于茎叶喷雾、种子处理，也可进行± 壤处理，主要用于谷物、水稻、花生、葡萄、马铃馨、果树、蔬菜、咖啡、草坪等。使用剂量为 25ml-50/亩。喀菌醋不能与杀虫剂乳油，尤其是有机憐类乳油混用，也不能与有机娃类增 效剂混用，会由于渗透性和展着性过强引起药害，急性经口：> 5000mg/kg;急性经皮：> 2000mg/kg，其使用后，往往会有残留。
【发明内容】
[0003] 为解决上述问题，本发明提供了一种喀菌醋检测方法。
[0004] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
[0005] -种喀菌醋检测方法，包括如下步骤：
[0006]S1、称取样品5.OOg-20.OOg于100血的具塞离屯、管中或200血玻璃瓶中，加20血 水及50血乙腊，充分混匀，超声20min后，离屯、将上清液转移或用滤纸过滤至加有6g化C1 的具塞量筒中，剧烈振荡Imin，静置比后取25mL上清液于lOOmL烧杯中，置于加热板上 45°C氮吹近干，加入5血乙酸乙醋浸泡，盖上锡锥纸，待净化；
[0007]S2、将中性氧化侣柱依次用5mL丙酬-乙酸乙醋（体积比20 : 80)、5mL乙酸乙醋 活化，当溶剂液面达到柱吸附层表面时，立即倒入步骤S1所得样品溶液，用30mL烧杯接收 洗脱液；
[000引S3、用5血丙酬-乙酸乙醋（体积比20 : 80)洗刷烧杯后淋洗中性氧化侣柱，并 重复两次，将盛有淋洗液的烧杯放在加热板上45°C氮吹近干，用乙腊准确定容至移入 进样瓶中，待测；
[0009]S4、将步骤S3所得的样品W1. 0血/min过液相色谱柱，柱溫：35°C;进样量：20yL; 流动相：乙腊：水=60 : 40等度洗脱。
[0010] 优选的，所述液相色谱柱为岛津Inertsil/WondaSil系列Cis柱（250mmX4. 6mm， Sum)。
[0011] 本发明具有W下有益效果：
[0012] 本发明建立了乙腊提取花生植株、±壤、花生仁、花生壳中喀菌醋的前处理方法和 液相色谱仪-紫外检测器检测的仪器方法。最小检出量为0. 5ng，空白添加平均回收率为 73. 40% -106. 37 %，相对标准偏差为1. 48% -9. 41 %，最低检测浓度花生植株、±壤和花生 仁均为0. 05mg/kg，花生壳为0.Img/kg。本方法W50mL乙腊作为提取液，与已报道的丙酬 作为提取液相比用量较少，后期净化较简单；与甲醇作为提取液相比，提取、盐析后，加热板 蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率；检测所用的仪器普及率较高，方法易推广应用。方法的 重现性，准确度、精密度及检出限均可满足该农药在花生上的残留分析要求。
【附图说明】
[0013] 图1为本发明实施例中喀菌醋的标准曲线。
[0014] 图2为本发明实施例中0.Img/L喀菌醋标准溶液色谱图。
[001引图3为本发明实施例中0. 5mg/L喀菌醋标准溶液色谱图。
[0016] 图4为本发明实施例中1.Omg/L喀菌醋标准溶液色谱图。
[0017] 图5为本发明实施例中2.Omg/L喀菌醋标准溶液色谱图。
[001引图6为本发明实施例中5.Omg/L喀菌醋标准溶液色谱图。 图7为本发明实施例中表1的曲线方程，图中，y= 35018X+968. 9R2= 0. 9999。
【具体实施方式】
[0019] 为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，W下结合实施例对本发明进行进一步 详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用W解释本发明，并不用于限定本发 明。
[0020] 实施例1
[0021] 称取±壤20.OOg于100血具塞离屯、管中，加20血水及50血乙腊，充分混匀后，超 声20min，然后离屯、将上清液转移至加有6g化C1的具塞量筒中，剧烈振荡Imin，静置比后 取25血上清液于100血烧杯中，置于加热板上45°C氮吹近干，加入5血乙酸乙醋浸泡，盖上 锡锥纸，待净化。
[002引实施例2
[0023] 称取花生植株20.OOg于200mL玻璃瓶中，加20血水及50mL乙腊，充分混匀后，超 声20min，用滤纸过滤至加有6g化C1的具塞量筒中，剧烈振荡Imin，静置比后取25血上 清液于100血烧杯中，置于加热板上45°C氮吹近干，加入5血乙酸乙醋浸泡，盖上锡锥纸，待 净化。
[0024] 实施例3
[00巧]将花生仁打碎成粉，称取样品20.OOg于100血具塞离屯、管中，加20血水及40血乙 腊，充分混匀后，超声20min，然后离屯、将上清液转移至加有6g化C1的具塞量筒中，剧烈振 荡Imin，静置比后取20血上清液于100血烧杯中，置于加热板上45°C氮吹近干，加入5血 乙酸乙醋浸泡，盖上锡锥纸，待净化。
[002引实施例4
[0027]称取花生壳5.OOg于200血玻璃瓶中，加25血水及50血乙腊，充分混匀后，超声 20min，用滤纸过滤至加有6g化C1的具塞量筒中，剧烈振荡Imin，静置比后取25血上清液 于100血烧杯中，置于加热板上45°C氮吹近干，加入5血乙酸乙醋浸泡，盖上锡锥纸，待净 化。
[002引将中性氧化侣柱依次用5血丙酬-乙酸乙醋（体积比20 : 80)、5血乙酸乙醋活 化，当溶剂液面达到柱吸附层表面时，立即倒入实施例1-4所得的样品溶液，用30mL烧杯 接收洗脱液，用5mL丙酬-乙酸乙醋（体积比20 : 80)洗刷烧杯后淋洗中性氧化侣柱，并 重复两次。将盛有淋洗液的烧杯放在加热板上45°C氮吹近干，用乙腊准确定容至2mL，W1. 0血/min过岛津Ine;rtsil/WondaSil系列Cis柱（250mmX4. 6mm，5ym);柱溫：35°C;进样 量：20yL;流动相：乙腊：水=60 : 40等度洗脱。
[0029] 将lOOOmg/L的喀菌醋标准溶液用乙腊稀释配得5、2、1、0. 5、0.Img/L系列标准溶 液，W浓度（mg/L)-峰面积（A)作标准曲线，回归方程为y= 35018X+968. 9,R2= 0. 9999， 见表1和图1-图6。
[0030] 表1喀菌醋的标准曲线
[0032] 在上述色谱条件下，喀菌醋的最小检出量为0. 5ng。根据添加回收率试验，在上述 色谱条件下花生植株、±壤和花生仁中喀菌醋的最低检测浓度均为0. 05mg/kg，花生壳中喀 菌醋的最低检测浓度为0.Img/kg。在上述色谱条件下，使用岛津Inertsil/WondaSil系列 色谱柱，喀菌醋的相对保留时间为10.Omin。
[0033] 分别在花生植株、±壤、花生仁和花生壳的对照样品中添加不同浓度的喀菌醋标 样溶液，摇匀，放置化后依样品提取方法进行处理，测得本方法的添加回收率见表2、表3、 表4和表5。 表2花生植株中喀菌醋的添加回收率
表3 ±壤中喀菌醋的添加回收率 CN105116090A 说明书 4/5 页
当添加水平为0. 05、0. 2、1.Omg/kg时，测得花生植株、±壤和花生仁的平均回收率分 别为90. 33%~103. 26%、91. 87%~106. 37%、77. 79%~83. 73%，相对标准偏差分别为 2. 74%~4. 25%、1. 48%~6. 23%、5. 95%~9. 41%，当添加水平为 0. 1、0. 2、1.Omg/kg时， 测得花生壳的平均回收率为73. 40 %~101. 88%，相对标准偏差为1. 94%~5. 55%，均符 合残留分析要求。 W上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来 说，在不脱离本发明原理的前提下，还可W作出若干改进和润饰，运些改进和润饰也应视为 本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种嘧菌酯检测方法，其特征在于，包括如下步骤： 51、 称取样品5. 00g-20.0 Og于IOOmL的具塞离心管中或200mL玻璃瓶中，加20mL水及 50mL乙腈，充分混勾，超声20min后，离心将上清液转移或用滤纸过滤至加有6g NaCl的具 塞量筒中，剧烈振荡lmin，静置Ih后取25mL上清液于IOOmL烧杯中，置于加热板上45°C氮 吹近干，加入5mL乙酸乙酯浸泡，盖上锡箱纸，待净化； 52、 将中性氧化铝柱依次用5mL丙酮-乙酸乙酯（体积比20 : 80)、5mL乙酸乙酯活 化，当溶剂液面达到柱吸附层表面时，立即倒入步骤Sl所得样品溶液，用30mL烧杯接收洗 脱液； 53、 用5mL丙酮-乙酸乙酯（体积比20 : 80)洗刷烧杯后淋洗中性氧化铝柱，并重复 两次，将盛有淋洗液的烧杯放在加热板上45°C氮吹近干，用乙腈准确定容至2mL，移入进样 瓶中，待测； 54、 将步骤S3所得的样品以1.0 mL/min过液相色谱柱，柱温：35°C ;进样量：20 y L ;流 动相：乙腈：水-60 : 40等度洗脱。2. 根据权利要求1所述的一种嘧菌酯检测方法，其特征在于，所述液相色谱柱为岛津 Inertsil/WondaSil 系列 C18柱（250mmX 4. 6mm，5 y m)。
【专利摘要】本发明公开了一种嘧菌酯检测方法，将花生植株、土壤、花生仁、花生壳样品经乙腈超声提取，取部分上清液浓缩近干，经中性氧化铝柱净化，乙腈定容，液相色谱仪检测，外标法定量。本发明与已报道的丙酮作为提取液相比用量较少，后期净化较简单；与甲醇作为提取液相比，提取、盐析后，加热板蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率；检测所用的仪器普及率较高，方法易推广应用。方法的重现性，准确度、精密度及检出限均可满足该农药在花生上的残留分析要求。
【IPC分类】G01N30/88
【公开号】CN105116090
【申请号】CN201510528547
【发明人】张军锋, 吴绪金, 马婧玮, 周玲, 马欢, 刘进玺, 李通, 祁玉峰, 周娟, 李萌, 赵艳琴, 马莹, 俎建英
【申请人】河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年8月21日