一种澳洲坚果油脂脂肪酸成分分析方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及仪器分析领域，具体涉及一种澳洲坚果油脂脂肪酸成分的分析。
【背景技术】
[0002]澳洲坚果(拉丁学名:Macadamia ternifolia F.Muell.)别名:昆士兰栗、澳洲胡桃、夏威夷果、昆士兰果。澳洲坚果营养丰富，含油量70%?79%，尤其以富含不饱和脂肪酸为特点，以油酸和棕榈酸为主，光壳种澳洲坚果种仁的不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比值为6.2。一般认为，不饱和脂肪酸含量越高的澳洲坚果果仁，其品质就越好。植物果仁脂肪酸成分会因为产地的不同而有细微的差别，通过果仁脂肪酸成分的分析，可以得出果仁的产地，这为地理标志农产品的鉴别提供有力地支持，也用于鉴定果仁品质的好坏。
[0003]王文林等人【澳洲坚果脂肪酸成分分析热带农业工程第37卷第I期】公开了一种澳洲坚果油脂脂肪酸成分分析方法:采用氢氧化钠甲醇溶液对澳洲坚果油脂进行酯交换反应，用乙酸乙酯萃取得到含有脂肪酸的萃取液，用GC-MS仪器分析萃取液，得出油脂脂肪酸成分。该方法基本上能够把坚果油脂脂肪酸的成分种类分析出来，但存在酯交换反应不完全的缺点，导致一些难以发生酯交换反应的脂肪酸的含量分析结果偏低，这些细微的分析误差，可能无法用于鉴别农产品的地理标志。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种误差小、分析结果较精确的澳洲坚果脂肪酸成分分析方法。
[0005]本发明的技术方案是:
用脂肪提取仪萃取出澳洲坚果果仁中的油脂，取油脂10yL放进1mL容量瓶中，容量瓶中加入ImL石油醚/苯(1:1，V/V)，加入ImL0.4moL/L氢氧化钾-甲醇溶液，摇匀，然后将容量瓶放入50°C恒温水浴中静置15min，取出，放置自然冷却至室温；冷却至室温的容量瓶中加入4mL乙酸乙酯，用蒸馏水定容，摇匀，静置，上层液即为含有脂肪酸的萃取液；萃取液用GC-MS仪器分析。色谱条件是:HP-5MS毛细管柱(30mX0.25mm)，载气高纯氦气(99.999%)，流速1.0mL/min，分流比:40:1，进样量:1 yL，进样口温度280°C，程序升温:起始温度180°C，5°C /min升至220°C，5°C /min升至250°C，保持2min ;质谱条件:电子轰击离子源(EI);离子源温度230°C;接口温度250°C，电子能量70 eV ;扫描质量范围35?550amuo
[0006]本发明的优点:
1.本发明的分析方法用氢氧化钾甲醇溶液代替氢氧化钠甲醇溶液作为酯交换反应的催化剂，酯交换反应速率得到提高，同等反应条件下，油脂中脂肪酸的酯交换更完全，对脂肪酸成分的分析结果就更准确。
[0007]2.本发明的分析方法酯交换反应是在高温下进行，酯交换反应更快，反应更完全，更彻底，因此脂肪酸成分的分析结果就更准确。
【具体实施方式】
[0008]下面通过具体实施例进一步说明本发明，以使本发明的优点和特征更易于被理解，应该理解的是，本发明的实施例仅仅是用于本发明，而不是对本发明的限制。
实施例
[0009]澳洲坚果取自南亚热带作物研究所，自然晒干后，果仁经脂肪测定仪(上海纤检仪器有限公司，型号SZC-C)提取坚果油；分析所用的试剂:石油醚、苯、氢氧化钾、甲醇和乙酸乙酯均为分析纯。
[0010]取油脂100 μ L放入1mL容量瓶中，容量瓶中加入ImL石油醚/苯(1: 1，V/V)，加入ImL0.4moL/L的氢氧化钾-甲醇溶液，摇匀，然后将容量瓶放入50°C恒温水浴中静置15min (澳洲坚果油脂为脂肪酸甘油酯，经过酯交换反应后，生成脂肪酸甲酯)，取出，放置自然冷却至室温；冷却至室温的容量瓶中加入4mL乙酸乙酯，用蒸馏水定容，摇匀，静置(脂肪酸甲酯溶于乙酸乙酯，不溶于水，由于水的密度比乙酸乙酯大，且乙酸乙酯微溶于水，因此溶液很快分为两层)，上层液即为含有脂肪酸的萃取液；
萃取液用GC-MS仪器分析(Agilent6890-5975气相色谱-质谱联用仪)。色谱条件是:HP-5MS毛细管柱(30mX0.25mm)，载气高纯氦气(99.999%)，流速1.0mL/min,分流比:40:1，进样量:1 μ L，进样口温度280°C，程序升温:起始温度180°C，5°C /min升至220°C，5°C /min升至250°C，保持2min ;质谱条件:电子轰击离子源(EI);离子源温度230°C ;接口温度250°C，电子能量70 eV ;扫描质量范围35?550 amu。
【主权项】
1.一种澳洲坚果油脂脂肪酸成分分析方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)澳洲坚果油脂用氢氧化钾-甲醇溶液进行酯交换反应，反应生成脂肪酸甲酯； (2)用乙酸乙酯萃取脂肪酸甲酯，获得含有脂肪酸的萃取液； (3)含有脂肪酸的萃取液用GC-MS仪器分析，得出脂肪酸的各种成分。2.根据权利要求1所述的澳洲坚果油脂脂肪酸成分分析方法，其特征在于，所述的酯交换反应，方法是:10mL容量瓶中放入油脂100yL，加入ImL石油醚/苯(1: 1，V/V)，加入ImL0.4moL/L的氢氧化钾-甲醇溶液，摇匀，然后将容量瓶放入50 °C恒温水浴中静置15min，取出，放置自然冷却至室温。3.根据权利要求1所述的澳洲坚果油脂脂肪酸成分分析方法，其特征在于，所述的乙酸乙酯萃取脂肪酸甲酯的方法是:冷却至室温的容量瓶中加入4mL乙酸乙酯，用蒸馏水定容，摇匀，静置，上层液即为含有脂肪酸的萃取液。4.根据权利要求1所述的澳洲坚果油脂脂肪酸成分分析方法，其特征在于，所述的萃取液用GC-MS仪器分析的色谱条件是:HP-5MS毛细管柱(30mX0.25mm)，载气高纯氦气(99.999%)，流速1.0mL/min，分流比:40:1，进样量:1 yL，进样口温度280°C，程序升温:起始温度180°C，5°C /min升至220°C，5°C /min升至250°C，保持2min ;质谱条件:电子轰击离子源(EI);离子源温度230°C;接口温度250°C，电子能量70 eV ;扫描质量范围35?550amuo
【专利摘要】本发明提供了一种澳洲坚果油脂脂肪酸成分分析方法，其包括以下步骤：澳洲坚果油脂用氢氧化钾甲醇溶液进行酯交换反应，反应生成脂肪酸甲酯；用乙酸乙酯萃取脂肪酸甲酯，获得含有脂肪酸的萃取液；含有脂肪酸的萃取液用GC-MS仪器分析，得出脂肪酸的各种成分。
【IPC分类】G01N30/06, G01N30/88
【公开号】CN105181864
【申请号】CN201510467654
【发明人】王文林, 陈海生, 赵静, 覃振师, 郑树芳, 赵大宣, 邱文武, 韦持章, 陆祖正, 黄锡云, 汤秀华, 肖海艳, 许 鹏, 谭秋锦, 宋海云
【申请人】广西南亚热带农业科学研究所
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年8月4日