超高效液相色谱法测定理肺丸中盐酸麻黄碱的方法
【专利摘要】本发明提供了一种超高效液相色谱法测定理肺丸中盐酸麻黄碱的方法，旨在提供一种重现性好，提取完全、检测结果准确可靠的理肺丸中盐酸麻黄碱的测定方法；该方法为准确称取样品2g，加硅藻土2g，研磨均匀，置索氏提取器中，加浓氨试液3mL、乙醇10mL与10mL乙醚，在50℃，310W提取20min，放冷，将乙醚提取液移至蒸发皿中，滤纸和容器用少量乙醚洗涤，洗液并入蒸发皿中，挥干，残渣用体积比1:1000的盐酸和甲醇溶液溶解，转移至10mL容量瓶中，加体积比1:1000的盐酸和甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进行超高效液相分析；线性考查；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
超高效液相色谱法测定理肺丸中盐酸麻黄碱的方法
技术领域
[0001] 本发明公开了一种盐酸麻黄碱的方法的测定方法，具体地说，是采用超高效液相 色谱法测定理肺丸中盐酸麻黄碱的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 理肺丸是由紫苏叶、前胡、桔梗、苦杏仁、麻黄、甘草、陈皮、半夏等十一味中药材组 方制成的丸剂，味微甜、略苦，具有解表散寒，宣肺止嗽的功能，用于风寒束表、肺气不宣的 感冒咳嗽，症见发热、恶寒、鼻塞流涕、头痛、无汗、肢体酸痛。其中麻黄具有发汗散寒、宣肺 平喘、利水消肿的作用，用于风寒感冒、胸闷喘咳、风水浮肿，其主要有效成分为盐酸麻黄 碱。《中国药典》2015年版一部规定理肺丸中含量测定的成分为盐酸麻黄碱。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种重现性好，提取完全、检测结果准确可靠的理肺丸中盐 酸麻黄碱的测定方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是这样的：
[0005] -种超高效液相色谱法测定理肺丸中盐酸麻黄碱的方法，其特征在于，准确称取 样品2g，加娃藻土2g，研磨均勾，置索氏提取器中，加浓氨试液3mL、乙醇10mL与10mL乙醚，在 50°C，310W提取20min，放冷，将乙醚提取液移至蒸发皿中，滤纸和容器用少量乙醚洗涤，洗 液并入蒸发皿中，挥干，残渣用体积比1:1 〇〇〇的盐酸和甲醇溶液溶解，转移至1 OmL容量瓶 中，加体积比1:1000的盐酸和甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进行超高效液相分析；
[0006] 色谱条件如下：
[0007] 所述的分析柱ACE Excel 2 C18-PFP，流速0.5ml · min-S柱温35°C，检测波长 210nm，进样量为lyL ;流动相A为乙腈，流动相B为0.1 %磷酸溶液；梯度洗脱程序：0~ 3.511^11，2%厶、98%8;3.5~411^11，2%~90%厶、98%~10%8 ;4~711^11，90%厶、10%8;在2% A、98%B 下平衡 2min。
[0008] 进一步的，上述的快速溶剂萃取-超高效液相色谱法测定理肺丸中盐酸麻黄碱的 方法，所述的超高效液相色谱仪为Agilent 1290超高效液相色谱仪。
[0009] 与现有技术相比，本发明提供的检测方法，重现性好，提取完全、结果准确可靠的 理肺丸中盐酸麻黄碱的方法。
【附图说明】
[0010] 图1是标准品液相色谱图；
[0011] 图2理肺丸中盐酸麻黄碱高效液相色谱图。
【具体实施方式】
[0012] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0013] 本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶 质为固定的均为质量浓度。
[0014] 实施例1
[0015] 1仪器与试剂
[0016] ASE350ASE仪（美国Thermo Fisher公司）；Agilent 1290超高效液相色谱仪，DAD检 测器，二元梯度栗，自动进样器(美国Agilent公司）；XA205DU电子天平(瑞士梅特勒公司）； 3K15高速离心机(德国Sigma) ;ClassicUVF超纯水器(英国ELGA)。
[0017] 盐酸麻黄碱标准品（中国食品药品检定研究院，批号171241 -201007);乙腈(色谱 纯，德国Merck公司），其余试剂均为分析纯；
[0018] 2实验部分
[0019] 2.1样品来源
[0020] 理肺丸（大蜜丸，由广西梧州三鹤药业有限公司生产，批号140201、140803、 140850、150901、150702)。
[0021] 2.2标准溶液配制
[0022] 标准储备液:精密称定盐酸麻黄碱对照品19.77mg，用盐酸甲醇溶液（1 - 1000)定 容至50mL容量瓶中，制成0.3942g · L-1的标准储备液。
[0023] 2.3色谱条件
[0024] 分析柱ACE Excel 2 C18-PFP(2.1mmX75mm，2ym)，流速0.5ml · min-S柱温35Γ， 检测波长210nm，进样量为lyL。流动相A为乙腈，流动相B为0.1 %磷酸溶液;梯度洗脱程序:0 ~3.511^11，2%厶、98%8;3.5~411^11，2%~90%厶、98%~10%8;4~711^11，90%厶、10%8 ;在 2%A、98%B 下平衡 2min。
[0025] 2.4实验方法
[0026] 准确称取样品2g，加硅藻土2g，研磨均匀。置索氏提取器中，加浓氨试液3mL、乙醇 10mL与乙醚适量，置水浴上加热回流至提取液无色，放冷，将乙醚提取液移至蒸发皿中，滤 纸和容器用少量乙醚洗涤，洗液并入蒸发皿中，挥干，残渣用盐酸甲醇溶液（1 - 1000)溶 解，转移至10mL容量瓶中，加盐酸甲醇溶液（1 - 1000)至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进行超 高效液相分析。
[0027] 3结果与讨论
[0028] 3.1液相色谱条件的选择
[0029]《中国药典》一部中使用0.02mol · L-1磷酸二氢钾(含0.2%三乙胺，磷酸调节PH至 2.7)作为水相流动相，考虑到使用缓冲盐以及调节流动相酸度的不便，尝试用0.1 %磷酸作 为水相流动相，分别米用Phenomenex synergi Polar-RP 80A(4.6mmX 250mm，4ym)、 Agilent Z0RBAX SB C18(4.6mmX250mm，5ym)、Thermo Accucore C18(2.1mmX50mm，2.6y m)、ACE Excel 2 C18-PFP(2.1mmX75mm，2ym)进行实验，发现ACE Excel 2 C18-PFP(2.1mm Χ75_，2μπι)分离效果最好、色谱峰形理想，故选用ACE Excel 2 C18-PFP(2.1_X75mm，2y m)为分析柱，结果见图1。
[0030] 3.2方法学考察
[0031] 3.5.1线性关系精密吸取0.3942g · I/1的标准储备液lmL，用盐酸甲醇溶液（1 - 1000)定容至25mL容量瓶中，制成0.0158g · L-1的标准溶液。进样量分别为0.2，0.4，0.6， 0.8，1，1.2yL，平行测定2次，以峰面积(Y)对质量浓度mg(X)进行线性回归，在0.00315~ 0.0189g · L-1线性范围内，线性方程为:Y = 4184.2X+0.3465，线性相关系数R2 = 0.9998。
[0032] 3.2.2方法重复性和回收率考察:准确称取理肺丸(批号：150702) lg共6份，再准确 称取理肺丸(批号：150702)0.5g共6份，精确加入盐酸麻黄碱标准溶液0.3mL(含盐酸麻黄碱 0.11826mg)，按2.5.1方法进行提取及检测。结果如表1，重复性RSD为3.0%，加标回收率范 围为92%~102%，由于加标方式为将对照液加入装有样品的小烧杯中，混匀并且硅藻土充 分分散后再装入萃取池中，整个转移过程可能对加入量有一定的损失。
[0033] 表1重复性和回收率测定
【主权项】
1. 一种超高效液相色谱法测定理肺丸中盐酸麻黄碱的方法，其特征在于，准确称取样 品2g，加娃藻土2g，研磨均勾，置索氏提取器中，加浓氨试液3mL、乙醇10mL与10mL乙醚，在50 °C，310W提取20min，放冷，将乙醚提取液移至蒸发皿中，滤纸和容器用少量乙醚洗涤，洗液 并入蒸发皿中，挥干，残渣用体积比1:1 〇〇〇的盐酸和甲醇溶液溶解，转移至10mL容量瓶中， 加体积比1:1000的盐酸和甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进行超高效液相分析； 色谱条件如下： 所述的分析柱ACE Excel 2C18-PFP，流速0.5ml ·π?η-S柱温35°C，检测波长210nm，进 样量为lyL;流动相A为乙腈，流动相B为0.1 %磷酸溶液;梯度洗脱程序:0~3.5min，2 %A、 98%8;3.5~411^11，2%~90%厶、98%~10%8;4~711^11，90%厶、10%8 ;在2%厶、98%8下平衡 2min〇2. 根据权利要求1所述的超高效液相色谱法测定理肺丸中盐酸麻黄碱的方法，其特征 在于，所述的超高效液相色谱仪为Agilentl290超高效液相色谱仪。
【文档编号】G01N30/02GK105866278SQ201610247685
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年4月20日
【发明人】陈学松, 刘慧妍, 陈翠玲
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所