麻杏止咳糖浆的检测方法
【专利摘要】本发明提供一种麻杏止咳糖浆的检测方法，涉及中药成方制剂的检测方法，以解决目前麻杏止咳糖浆的生产过程中部分厂商少投或者不投相应药材，致使药品的疗效明显下降，影响药品的安全有效，严重损害患者的利益，该检测方法包括麻黄根素和麻黄新碱A的薄层鉴别、苦杏仁的薄层鉴别、甘草的薄层鉴别以及盐酸麻黄碱的含量测定，可有效检测麻杏止咳糖浆的成分和含量，使该药品更加安全、更加有效，从而保证了该糖浆制剂的临床疗效，维护患者的利益。
【专利说明】
麻杏止咳糖浆的检测方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种中药成方制剂的检测方法，特别涉及一种麻杏止咳糖浆成分鉴别和成分含量测定的方法。
【背景技术】
[0002]麻杏止咳糖浆是《卫生部药品标准》中药成方制剂第二十册收载的品种，标准编号为WS3—B—4010—98，处方为麻黄、苦杏仁、石膏、甘草(炙)，是纯中药制成的糖浆剂，它具有镇咳，祛痰，平喘的作用，临床上用于急、慢性支气管炎及喘息等疾病，麻杏止咳糖浆是目前市场上用于治疗急、慢性支气管炎及喘息的常用药品，但是原标准中除了用盐酸麻黄碱作对照对麻黄进行了定性鉴别外，没有对其中的其它任何药材或成分进行定性定量的检测，既没有质量指标，也没有这些质量指标的鉴别和检测方法，不法厂商在生产药品时不严格按照处方的剂量配料，肆意减少原料甚至不添加原料，致使药品的疗效明显下降，影响药品的安全有效，严重损害患者的利益。
[0003]另一方面，处方中用到麻黄，是方中的君药，列在第一位，用量在药材中是最大的，起解表发汗的作用，但是，麻黄植物的地上部分(麻黄)与其地下部分(麻黄根)的作用完全不同，麻黄有发汗作用，而麻黄根有止汗作用，《本草纲目》有记载:麻黄发汗之气，驶不能御，而根节止汗，效如影响，《现代中药志》记载:麻黄、麻黄根虽出同株，但因药用部分不同，所含化学成分不同，因而性味、功效、药理、临床运用各异，《中国药典》也注明了麻黄发汗、麻黄根止汗，麻黄的主要成分麻黄碱引起收缩压和舒张压上升，脉压增大，而麻黄根的主要成份麻黄根素等物质具有降压作用，使脉压降低，但目前市场上麻黄是紧缺且受控制药材，人们在采收时往往连根拔起，并没有将麻黄植物的地上部份与其地下部分完全分开，使制成的药品疗效下降甚至不治病反而致病，所以控制麻黄根，不让其混入麻黄中，对保证麻杏止咳糖浆的疗效是十分必要的。
[0004]处方中用到苦杏仁，其含有的苦杏仁苷，有镇咳、平喘作用，主要原理是苦杏仁苷能被苦杏仁本身所含的苦杏仁酶水解，或者被人体肠道微生物酶水解，产生微量的氢氰酸与苯甲醛，对呼吸中枢有抑制作用，达到镇咳、平喘的目的，如果药品生产过程控制不好，其镇咳、平喘的成分早就已经产生并且挥发，那么就无法起到镇咳、平喘的作用，如果苦杏仁苷在前期没有水解而过多在人体肠道内被微生物酶水解，产生的氢氰酸与苯甲醛过多，就对人体有害，所以不好控制，有的厂家为了安全可能大大降低苦杏仁的使用量甚至不使用，致使药品没有疗效，因此加强对苦杏仁的检测十分重要，但是苦杏仁成分复杂，虽然《中国药典》有苦杏仁的鉴别方法，但是检测效果并不理想，且只是用苦杏仁苷对照品鉴别，成分单一，这种方法用到成分更加复杂的中药成方制剂中，易受影响就更不容易实现，《中国药典》中提到用石油醚萃取是因为苦杏仁中含有大量的脂肪油，但中成药中并不含有大量的脂肪油，所以选择石油醚萃取并不是太合理，另外，其处理方法太繁琐且最后的展开效果也不好，对于鉴别麻杏止咳糖浆中的苦杏仁成分并不准确，所以另寻更好的方法来检测苦杏仁成分迫在眉梢。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种麻杏止咳糖浆的检测方法，以解决目前麻杏止咳糖浆的生产中部分厂商少投或不投相应药材，有效检测麻杏止咳糖浆的成分和含量，使该药品更加安全、更加有效，从而保证了该糖浆制剂的临床疗效，维护了患者的利益。
[0006]麻杏止咳糖浆的处方:麻黄120g、苦杏仁80g、石膏240g、甘草(炙)60g。
[0007]制法:以上四味，苦杏仁压榨去油；其余三味，加水煮沸后加入苦杏仁，煎煮二次，第一次4小时，第二次3小时，合并煎液，滤过，静置，取上清液浓缩至420ml，加蔗糖625g，煮沸，滤过，再加苯甲酸1.15g(用乙醇100 ml溶解)，调整总量至1000ml，搅匀，滤过，即得。
本发明提供的麻杏止咳糖浆的检测方法，包括成分鉴别及含量测定，其中，成分鉴别是对麻杏止咳糖浆中麻黄根素和麻黄新碱A的薄层鉴别、苦杏仁的薄层鉴别、甘草的薄层鉴另IJ;含量测定是对麻杏止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量测定。
[0008]该检测方法具体包括:
(I)麻黄根素和麻黄新碱A的成分鉴别:
取本品1ml，用按体积比计的石油醚:甲醇=2?4:0.5?1.5混合液振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，残渣加甲醇Iml使其溶解，作为供试品溶液，另取麻黄根素对照品和麻黄新喊A对照品，加甲醇制成每I m I含麻黄根素对照品和麻黄新喊A对照品各I mg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:甲醇:氨水=8?12:2?4:0.5?1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1 %硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得显相同颜色的斑点。
[0009](2)苦杏仁的成分鉴别:
取本品1ml，加水1ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取苦杏仁对照药材lg，研细，加石油醚20 ml，超声处理10分钟，弃去石油醚，残渣加水30 ml，煮沸10分钟，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:乙酸乙酯=2?4:0.5?1.5为展开剂，展开，取出，瞭干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；
(3)甘草的成分鉴别
取本品20ml，加水稀释至40ml，离心，取上清液，通过已处理好的DlOl型大孔吸附树脂柱，用水洗脱至洗脱液无色，弃去水液，再用80%乙醇10ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取甘草对照药材lg，加乙醇20ml，加热回流20分钟，滤过，取滤液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5?10μ1，分别点于同一以1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比计乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=13?18:
0.5?1.5:0.5?1.5:1?3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的主斑点；
(4)盐酸麻黄碱的含量测定:
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
以体积比计乙腈:0.1%磷酸溶液=8?12:85?93为流动相；
检测波长为207nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000;
取盐酸麻黄碱对照品1mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，精密量取本品10ml，置10ml量瓶中，加甲醇60ml，超声处理20分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液Iml，置1ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得本样品中盐酸麻黄碱的含量；
本品每Iml含麻黄以盐酸麻黄碱计应不得少于0.5mg。
[0010]其中，步骤(I)中的石油醚与甲醇的混合液按体积比计优选石油醚:甲醇=3:1;
步骤(I)中的展开剂以体积比计优选甲苯:甲醇:氨水=10:3:1;
步骤(2)中的展开剂以体积比计优选甲苯:乙酸乙酯=3:1;
步骤(3)中的大孔吸附树脂柱的内径优选15mm，高优选12cm;
步骤(3)中的展开剂以体积比计优选乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=15:1:1:2;
步骤(4)中的流动相以体积比计优选乙腈:0.1%磷酸溶液=10: 89。
[0011]本发明的有益效果:
麻杏止咳糖浆通过本发明中麻黄根素和麻黄新碱A的薄层鉴别、苦杏仁的薄层鉴别、甘草的薄层鉴别、盐酸麻黄碱的含量测定，有了明确的成分控制措施和含量指标，有效地控制麻杏止咳糖浆的成分和含量，能够保证药品中应该有的东西和防止混入不应该有的东西，本方法科学合理、切实可行，处方中的麻黄、苦杏仁、甘草等主要成份都得到了有效的成分监测，不应该混入的麻黄根也能够得到控制，使该药品更加安全、更加有效，从而保证了该颗粒制剂的临床疗效，维护了患者的利益。
【具体实施方式】
[0012]实施例1
【处方】麻黄120g苦杏仁80g石膏240g甘草(炙)60g
【制法】以上四味，苦杏仁压榨去油，其余三味，加水煮沸后加入苦杏仁，煎煮二次，第一次4小时，第二次3小时，合并煎液，滤过，静置，取上清液浓缩至420ml，加蔗糖625g，煮沸，滤过，再加苯甲酸1.15g(用乙醇100 ml溶解)，调整总量至1000ml，搅匀，滤过，即得。
[0013]【性状】本品为棕色粘稠的液体;味甜。
[0014]【鉴别】(I)盐酸麻黄碱的成分鉴别:
取本品1ml，加浓氨试液Iml，用按体积比计的乙醚:乙醇=8: 2混合液提取2次，每次10ml，合并提取液，用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，用甲醇制成每Iml含5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的正丁醇:冰醋酸:水=8: 2: I为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮的丙酮溶液，于105 °C烘约1分钟；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)麻黄根素和麻黄新碱A的成分鉴别:
取本品10ml，用按体积比计的石油醚:甲醇=3:1混合液振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，残渣加甲醇Iml使其溶解，作为供试品溶液，另取麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品，加甲醇制成每Iml含麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品各Img的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:甲醇:氨水=10:3:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的斑点；
(3)苦杏仁的成分鉴别:
取本品1ml，加水1ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取苦杏仁对照药材lg，研细，加石油醚20 ml，超声处理10分钟，弃去石油醚，残渣加水30 ml，煮沸10分钟，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计的甲苯:乙酸乙酯=3:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)甘草的成分鉴别
取本品20ml，加水稀释至40ml，离心，取上清液，通过已处理好的DlOl型大孔吸附树脂柱(内径15mm，高12cm )，用水洗脱至洗脱液无色，弃去水液，再用80%乙醇I OOml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取甘草对照药材Ig，加乙醇20ml，加热回流20分钟，滤过，取滤液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5?10μ1，分别点于同一以1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比计的乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=15:1:1: 2为展开剂，展开，取出，瞭干，喷以1 %硫酸乙醇溶液，105 °C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
[0015]【检查】相对密度不低于1.235。
[0016]【含量测定】盐酸麻黄碱的含量测定:
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
以体积比计乙腈:0.1%磷酸溶液=10: 89为流动相； 检测波长为207nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000;
取盐酸麻黄碱对照品1mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，精密量取本品10ml，置10ml量瓶中，加甲醇60ml，超声处理20分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液Iml，置1ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得本样品中盐酸麻黄碱的含量；
本品每Iml含麻黄以盐酸麻黄碱计为0.72mg。
[0017]【功能与主治】镇咳，祛痰，平喘。用于急、慢性支气管炎及喘息等。
[0018]【用法与用量】口服，一次15ml,—日3次。
[0019]【贮藏】密封，置阴凉处。
[0020]【贮藏】密闭，防潮。
[0021]实施例2
除成分鉴别和含量测定方法不同之外，其余方法均与实施例1相同。
[0022]【鉴别】(I)盐酸麻黄碱的成分鉴别:
取本品1ml，加浓氨试液Iml，用按体积比计的乙醚:乙醇=8: 2混合液提取2次，每次10ml，合并提取液，用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，用甲醇制成每Iml含5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的正丁醇:冰醋酸:水=8: 2: I为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮的丙酮溶液，于105 °C烘约1分钟；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)麻黄根素和麻黄新碱A的成分鉴别:
取本品10ml，用按体积比计的石油醚:甲醇=2:0.5混合液振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，残渣加甲醇Iml使其溶解，作为供试品溶液，另取麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品，加甲醇制成每Iml含麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品各Img的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:甲醇:氨水=8: 2:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1 %硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的斑点；
(3)苦杏仁的成分鉴别:
取本品1ml，加水1ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取苦杏仁对照药材lg，研细，加石油醚20 ml，超声处理10分钟，弃去石油醚，残渣加水30 ml，煮沸10分钟，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:乙酸乙酯=2:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (3)甘草的成分鉴别
取本品20ml，加水稀释至40ml，离心，取上清液，通过已处理好的DlOl型大孔吸附树脂柱(内径15mm，高12cm )，用水洗脱至洗脱液无色，弃去水液，再用80%乙醇I OOml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取甘草对照药材Ig，加乙醇20ml，加热回流20分钟，滤过，取滤液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5?10μ1，分别点于同一以1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比计乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=13:0.5:0.5:1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10 %硫酸乙醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
【含量测定】盐酸麻黄碱的含量测定:
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
以体积比计乙腈:0.1%磷酸溶液=8: 85为流动相；
检测波长为207nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000;
取盐酸麻黄碱对照品1mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，精密量取本品10ml，置10ml量瓶中，加甲醇60ml，超声处理20分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液Iml，置1ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得本样品中盐酸麻黄碱的含量。
[0023]本品每Iml含麻黄以盐酸麻黄碱计为0.57mg。
[0024]实施例3
除成分鉴别和含量测定方法不同之外，其余方法均与实施例1相同。
[0025]【鉴别】(I)盐酸麻黄碱的成分鉴别:
取本品1ml，加浓氨试液Iml，用按体积比计的乙醚:乙醇=8: 2混合液提取2次，每次10ml，合并提取液，用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，用甲醇制成每Iml含5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以按体积比计的正丁醇:冰醋酸:水=8: 2: I为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.5%茚三酮的丙酮溶液，于105 °C烘约1分钟；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)麻黄根素和麻黄新碱A的成分鉴别:
取本品1ml，用按体积比计的石油醚:甲醇=4:1.5混合液振摇提取2次，每次1ml，合并提取液，水浴蒸干，残渣加甲醇Iml使其溶解，作为供试品溶液，另取麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品，加甲醇制成每Iml含麻黄根素对照品和麻黄新碱A对照品各Img的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:甲醇:氨水=12:4:1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1 %硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，不显相同颜色的斑点；
(3)苦杏仁的成分鉴别:
取本品1ml，加水1ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取苦杏仁对照药材lg，研细，加石油醚20 ml，超声处理10分钟，弃去石油醚，残渣加水30 ml，煮沸10分钟，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:乙酸乙酯=4:1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)甘草的成分鉴别
取本品20ml，加水稀释至40ml，离心，取上清液，通过已处理好的DlOl型大孔吸附树脂柱，用水洗脱至洗脱液无色，弃去水液，再用80%乙醇10ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取甘草对照药材lg，加乙醇20ml，加热回流20分钟，滤过，取滤液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5?10μ1，分别点于同一以1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比计乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=18:1.5:1.5: 3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1 %硫酸乙醇溶液，105 °C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
【含量测定】盐酸麻黄碱的含量测定:
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
以体积比计乙腈:0.1%磷酸溶液=12:93为流动相；
检测波长为207nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000;
取盐酸麻黄碱对照品1mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，精密量取本品10ml，置10ml量瓶中，加甲醇60ml，超声处理20分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液Iml，置1ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得本样品中盐酸麻黄碱的含量；
本品每Iml含麻黄以盐酸麻黄碱计为0.61mg。
【主权项】
1.一种麻杏止咳糖浆的检测方法，其特征在于:所述检测方法包括麻黄根素和麻黄新碱A的成分鉴别、苦杏仁的成分鉴别、甘草的成分鉴别、盐酸麻黄碱的含量测定； 其中: (1)麻黄根素和麻黄新碱A的成分鉴别: 取本品1ml，用按体积比计的石油醚:甲醇=2?4: 0.5?1.5混合液振摇提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，残渣加甲醇Iml使其溶解，作为供试品溶液，另取麻黄根素对照品和麻黄新喊A对照品，加甲醇制成每I m I含麻黄根素对照品和麻黄新喊A对照品各I mg的混合溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:甲醇:氨水=8?12:2?4:0.5?1.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1 %硫酸乙醇溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰； (2)苦杏仁的成分鉴别: 取本品1ml，加水1ml，摇匀，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为供试品溶液，另取苦杏仁对照药材lg，研细，加石油醚20 ml，超声处理10分钟，弃去石油醚，残渣加水30 ml，煮沸10分钟，滤过，滤液用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比计甲苯:乙酸乙酯=2?4:0.5?1.5为展开剂，展开，取出，瞭干，喷以磷钼酸硫酸溶液，在105 °C加热至斑点显色清晰； (3)甘草的成分鉴别 取本品20ml，加水稀释至40ml，离心，取上清液，通过已处理好的DlOl型大孔吸附树脂柱，用水洗脱至洗脱液无色，弃去水液，再用80%乙醇10ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为供试品溶液，另取甘草对照药材lg，加乙醇20ml，加热回流20分钟，滤过，取滤液，蒸干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次15ml，弃去水液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作为对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各5?10μ1，分别点于同一以1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以体积比计乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=13?18:0.5?1.5:0.5?1.5:1?3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰； (4)盐酸麻黄碱的含量测定: 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 以体积比计乙腈:0.1%磷酸溶液=8?12:85?93为流动相； 检测波长为207nm，理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000; 取盐酸麻黄碱对照品1mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，精密量取本品10ml，置10ml量瓶中，加甲醇60ml，超声处理20分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液Iml，置1ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ1，注入液相色谱仪，测定，即得本样品中盐酸麻黄碱的含量。2.根据权利要求1所述的麻杏止咳糖浆的检测方法，其特征在于:步骤(I)所述的石油醚与甲醇的混合液为按体积比计石油醚:甲醇=3:1。3.根据权利要求1所述的麻杏止咳糖浆的检测方法，其特征在于:步骤(I)所述的展开剂为以体积比计甲苯:甲醇:氨水=10:3:1。4.根据权利要求1所述的麻杏止咳糖浆的检测方法，其特征在于:步骤(2)所述的展开剂为以体积比计甲苯:乙酸乙酯=3:1。5.根据权利要求1所述的麻杏止咳糖浆的检测方法，其特征在于:步骤(3)所述的大孔吸附树脂柱的内径为15臟，高为1201106.根据权利要求1所述的麻杏止咳糖浆的检测方法，其特征在于:步骤(3)所述的展开剂为以体积比计乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=15:1:1: 2。7.根据权利要求1所述的麻杏止咳糖浆的检测方法，其特征在于:步骤(4)所述的流动相为以体积比计乙腈:0.1%磷酸溶液=10:89。
【文档编号】A61K9/00GK105911211SQ201610347363
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年5月24日
【发明人】钟茂团, 何德中, 温国梁, 古莉, 任红, 黎黎
【申请人】四川逢春制药有限公司