一种人参叶中人参皂苷的萃取方法
【专利摘要】本发明公开了一种人参叶中人参皂苷的萃取方法，包括以下步骤：步骤1：将0.2重量份人参叶粉碎后与1重量份石英砂混合均匀；步骤2：将混合物加入到铺设有硅藻土的萃取池中，然后继续加入硅藻土直至达到萃取池池口，盖上萃取池的盖子，采用ASE萃取法进行萃取；萃取条件为：萃取溶剂为体积比为1：1的乙醇和甲醇的混合物，萃取温度100℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数1次；静态萃取的压力为1500psi；吹扫时间为60s；步骤3：将萃取液稀释后加入到离心管中净化，然后过滤后得到滤液，所述的离心管中加有石墨碳SPE柱。本发明提供了一种人参叶中人参皂苷的萃取方法，该方法检测精度高，萃取简单，萃取效果要高于药典的方法。
【专利说明】
一种人参叶中人参皂苷的萃取方法
技术领域
[0001] 本发明涉及实验室检测领域，特别是一种人参叶中人参皂苷的萃取方法。
【背景技术】
[0002] 2015年药典记载：取本品粉末约0.2g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷 30ml，加热回流1小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇30ml，加热回流3小时， 提取液低温蒸干，加水l〇ml使溶解，加石油醚(30~60 °C )提取2次，每次10ml，弃去醚液，水 液通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱长为15cm)，以水50ml洗脱，弃去水液。再用 20 %乙醇50ml洗脱，弃去20 %乙醇洗脱液，继用80 %乙醇80ml洗脱，收集洗脱液70ml，蒸干， 残渣加甲醇溶解，转移至l〇ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。LC测试的 条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-〇. 05 %磷酸溶液(20:80)为流动相;检 测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于1500。
[0003] 在大孔吸附树脂柱分离人参皂苷的过程中，分离效率受到大孔吸附树脂柱的活 性、洗脱效率等因素的影响，在测试的过程中，测试重复性差。
[0004] 为了改进这一问题，我们开发出了一种采用甲醇作为萃取剂的ASE快速萃取人参 皂苷的方法，该方法能快速的提取人参皂苷，且提取精度也较高。
[0005] 但是，在测试过程中，我们发现采用甲醇萃取时萃取精度不稳定。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种人参叶中人参皂苷的萃取方法，该方法检测精度高，萃 取简单，萃取效果要高于药典的方法。
[0007] 本发明提供的技术方案为:一种人参叶中人参皂苷的萃取方法，包括以下步骤：
[0008] 步骤1:将0.2重量份人参叶粉碎后与1重量份石英砂混合均匀；
[0009] 步骤2:将混合物加入到铺设有硅藻土的萃取池中，然后继续加入硅藻土直至达到 萃取池池口，盖上萃取池的盖子，采用ASE萃取法进行萃取；
[0010] 萃取条件为:萃取溶剂为体积比为1:1的乙醇和甲醇的混合物，萃取温度100°C;静 态萃取时间5min;冲洗体积100%;静态循环次数1次;静态萃取的压力为150(^ 81;吹扫时间 为 60s;
[0011] 步骤3:将萃取液稀释后加入到离心管中净化，然后过滤后得到滤液，所述的离心 管中加有石墨碳SPE柱。
[0012] 在上述的人参叶中人参阜苷的萃取方法中，所述的萃取池的体积为10ml。
[0013]在上述的人参叶中人参皂苷的萃取方法中，所述的ASE萃取法采用的是ASE350快 速溶剂萃取仪。
[0014] 本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：
[0015] 本发明的萃取精度高，萃取简单，萃取效果相比于药典要高。
[0016] 同时，本发明的萃取溶剂的萃取效果要优于采用甲醇作为萃取溶剂的萃取效果。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制。
[0018] 实施例1:
[0019] 将人参叶样品经粉碎机粉碎，过三号筛，约0.2g，精密称定，与lg石英砂混合均匀， 待用，移入到预先放好过滤膜的ASE 10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池 口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移至蒸发皿中蒸干后用甲醇 溶解并定容至10mL容量瓶，吸取lml样品液加入装有100mg石墨碳SPE柱的2ml离心管进行净 化，溶液过0.22微米滤膜后进入HPLC测定。
[0020] 萃取条件(见表1)为：
[0021] 表1
[0023] 分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：
[0024] a)仪器：Thermo 双三元液相（U-3000)
[0025] b)色谱柱：Thermo Syncronis C18 1 ? 7um 50 X 2 ? 1mm，即碳 18色谱柱的直径 2.1mm，长度 50mm，粒径 1
[0026] 幻柱温：仙！：
[0027] d)流速:0.3mL/min
[0028] e)流动相：乙腈-水梯度洗脱（lmin乙腈:水的体积比为60:40; l-3min乙腈:水的体 积比为70:30; 3-8min乙腈:水的体积比为80:20，在本实施例中的体积比均为20°C的条件下 的体积比）
[0029] f)检测波长：203nm [0030] 对比例1
[0031]将人参叶样品经粉碎机粉碎，过三号筛，约0.2g，精密称定，与lg硅藻土混合均匀， 待用，移入到预先放好过滤膜的ASE 10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池 口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移至蒸发皿中蒸干后用甲醇 溶解并定容至lOmL容量瓶，吸取lml样品液加入装有lOOmgGCB的2ml离心管进行净化，溶液 过0.22微米滤膜后进入HPLC测定。
[0032]萃取条件(见表2)为：
[0033]表 2
[0035] 分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：
[0036] a)仪器：Thermo 双三元液相（U-3000)
[0037] b)色谱柱：Thermo Syncronis C18;1.7lim 50X2.1 mm
[0038] 幻柱温：仙！：
[0039] d)流速:0.3mL/min
[0040] e)流动相：乙腈-水梯度洗脱（lmin乙腈:水的体积比为60:40; l-3min乙腈:水的体 积比为70:30; 3-8min乙腈:水的体积比为80:20)
[0041 ] f)检测波长：203nm
[0042] 1.2实施例1的萃取方法的精确度测试
[0043]米用实施例1、对比例1的ASE萃取方法和药典的萃取方法对人参叶进彳丁萃取，人参 叶为 3批，批号分别为15071601，120303,1407221;
[0044]实施例1的ASE萃取方法对同一批次的人参叶采用相同规格的设备平行测试两次， 分别为ASE1和ASE2表示。
[0045]具体测试结果见下表3;
[0046]表 3
[0048]以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任 何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种人参叶中人参皂苷的萃取方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1:将0.2重量份人参叶粉碎后与1重量份石英砂混合均勾； 步骤2:将混合物加入到铺设有硅藻土的萃取池中，然后继续加入硅藻土直至达到萃取 池池口，盖上萃取池的盖子，采用ASE萃取法进行萃取； 萃取条件为:萃取溶剂为体积比为1:1的乙醇和甲醇的混合物，萃取温度l〇〇°C;静态萃 取时间5min;冲洗体积100% ;静态循环次数1次;静态萃取的压力为1500psi ;吹扫时间为 60s ； 步骤3:将萃取液稀释后加入到离心管中净化，然后过滤后得到滤液，所述的离心管中 加有石墨碳SPE柱。2. 根据权利要求1所述的人参叶中人参皂苷的萃取方法，其特征在于，所述的萃取池的 体积为l〇ml。3. 根据权利要求1所述的人参叶中人参皂苷的萃取方法，其特征在于，所述的ASE萃取 法采用的是ASE350快速溶剂萃取仪。
【文档编号】G01N30/06GK105929088SQ201610254597
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月22日
【发明人】陈学松, 廖强, 韦日伟, 陈佳丽, 王 华, 姚泳成
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所