气相色谱法测定清艾条中桉油精含量的方法
【专利摘要】本发明提供了一种气相色谱法测定清艾条中桉油精含量的方法，旨在提供一种操作简便，结果准确可靠的桉油精含量的方法，该方法依次包括下述步骤：分别精密称取桉油精9.55mg置25ml量瓶中加无水乙醇使溶解，并稀释至刻度，作为对照品储备液，精密吸取上述对照品储备液1ml置10ml量瓶中加无水乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液；精密称取本品2g，置锥形瓶中，加精密无水乙醇20ml，称定重量，超声提取20分钟，放置至室温，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜孔径过，即得；3)阴性对照溶液的制备；4)专属性测定；5)精密度测定；6)线性关系考察；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
气相色谱法测定清艾条中按油精含量的方法
技术领域
[0001] 本发明提供一种按油精含量的测定方法，具体地说，是一种气相色谱法测定清艾 条中按油精含量的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 清艾条有理气血，逐寒湿，溫经止痛功效。用于屯、腹冷痛，泄泻转筋，骨节酸痛，四 肢麻木，腰酸疼痛等症。收载于中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十屯册，标 准中收载了按油精的薄层色谱鉴别，但无含量测定，经查阅文献，未见有按油精含量测定的 报道
【发明内容】
[0003] 针对上述不足，本发明的目的是提供一种操作简便，结果准确可靠的气相色谱法 测定清艾条中按油精含量的方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0005] -种气相色谱法测定清艾条中按油精含量的方法，依次包括下述步骤：1)对照品 溶液的制备
[0006] 1)分别精密称取按油精9.55mg置25ml量瓶中加无水乙醇使溶解，并稀释至刻度， 作为对照品储备液，精密吸取上述对照品储备液Iml置IOml量瓶中加无水乙醇稀释至刻度， 作为对照品溶液；
[0007] 2)供试品溶液的制备
[000引精密称取本品2g，置锥形瓶中，加精密无水乙醇20ml，称定重量，超声提取20分钟， 放置至室溫，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜孔径过，即得；
[0009] 3)阴性对照溶液的制备
[0010] 取无水乙醇，作为缺按油精的阴性对照溶液；
[0011] 4)专属性测定
[0012] 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各化1注入气 相色谱仪；
[001引5)精密瞄则定
[0014]取同一份对照品溶液，连续进样6次，现憶峰面积，计算RSD值；
[001引 6)线性关系考察
[0016] 分别精密吸取上述对照品储备液Iml至1、5、10、25、50ml量瓶中，进样，测定，W峰 面积为纵坐标，对照品进样量为横坐标绘制标准曲线；
[0017] 所述的色谱条件如下：
[0018] 色谱柱:PhenomenexRT-5石英毛细管柱，30m X 0.32mm，0.25皿;氨火焰离子化检测 器溫度:280°C，进样口溫度：250°C，柱溫:95°C，保持7分钟，W每分钟50°C的速率升至200 °C，保持1分钟;分流比：10:1，进样量化1。
[0019] 进一步的，上述的气相色谱法测定清艾条中按油精含量的方法，所述的气相色谱 仪为安捷伦GC-7890气相色谱仪；
[0020] 进一步的，上述的气相色谱法测定清艾条中按油精含量的方法，所述的对照品储 备液的浓度为0.382mg .mL-i。
[0021] 进一步的，上述的气相色谱法测定清艾条中按油精含量的方法，所述的对照品溶 液的浓度为〇.〇382mg.mL-i。
[0022] 进一步的，上述的气相色谱法测定清艾条中按油精含量的方法，所述的超声提取 时的提取溫度为40°C，功率200W。
[0023] 进一步的，上述的气相色谱法测定清艾条中按油精含量的方法，所述的微孔滤膜 孔径为0.22皿。
[0024] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案操作简便，结果准确可靠，可作为清艾条 的质量控制方法。
【附图说明】
[0025] 图1是对照品GC色谱图；
[0026] 图2是样品GC色谱图；
[0027] 图3是缺按油精阴性样品GC色谱图。
【具体实施方式】
[0028] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0029] 本发明所设及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶 质为固定的均为质量浓度。
[0030] 实施例1
[0031] 1仪器与试药
[0032] 安捷伦GC-7890气相色谱仪，畑emstation色谱工作站，瑞±XA20加 U电子分析天 平。清艾条:苏州市东方艾绒厂，批号:20140406;按油精(批号：110788-201105，供含量测定 用），购于中国药品生物制品检定研究院;氮气99.999%、氨气纯度为99.999%;无水乙醇为 分析纯。
[0033] 2方法与结果
[0034] 2.1色谱条件与系统适用性试验
[00；3日]色谱柱：PhenomenexRT-5石英毛细管柱（30m X 0.32mm，0.25皿）；氨火焰离子化检 测器溫度:280°C，进样口溫度:250°C，柱溫:95°C，保持7分钟，W每分钟50°C的速率升至200 °C，保持1分钟。分流比：10:1，进样量化1。
[0036] 2.2对照品溶液的制备
[0037] 分别精密称取按油精9.55mg置25ml量瓶中加无水乙醇使溶解，并稀释至刻度，作 为对照品储备液(浓度:0.382mg.mL-i)，精密吸取上述对照品储备液Iml置IOml量瓶中加无 水乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液(浓度:0. 〇382mg.mL-i)。
[003引2.3供试品溶液的制备
[0039] 精密称取本品2g，置锥形瓶中，加精密无水乙醇20ml，称定重量，超声提取20分钟， 放置至室溫，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜(0.22皿)滤过，即 得。
[0040] 2.4阴性对照溶液的制备
[0041] 取无水乙醇，作为缺按油精的阴性对照溶液。
[00创 2.5专属性试验
[0043] 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各化1注入气 相色谱仪，记录色谱图1至图3。由图1至图3可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位 置上，有相同保留时间的色谱峰，阴性对照样品无干扰。
[0044] 2.6精密度试验
[0045] 取同一份对照品溶液(浓度:按油精:0.0382mg.m[i)，按2.1项下色谱条件，连续进 样6次，巧憶峰面积，计算RSD值，按油精RSD为0.28 % (n = 6)。结果表明，仪器精密度良好。
[0046] 2.7线性关系考察
[0047] 按2.1的色谱条件分别精密吸取上述对照品储备液Iml至1、5、10、25、50ml量瓶中， 按2.1项下色谱条件，进样，测定，W峰面积为纵坐标(Y)，对照品进样量(ng)为横坐标(X)绘 制标准曲线，得按油精的回归方程为:Y = 1276.5X+5.68 (r = 0.9997)。结果表明：按油精在 7.64~38化g范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系。
[004引 2.8稳定性试验
[0049]取同一份样品溶液，分别在0,2,4,8，1011，按2.1项下色谱条件进样测定，分别测定 峰面积，按油精RSD为0.61 % (n = 5)。结果表明，在10小时内待测物稳定。
[(K)加]2.9重复性实验
[0051]精密称取同一批(批号：20140406)样品6份，按2.1色谱条件和2.3项下方法试验， 结果按油精平均含量是0. 〇96mg. g-i ,RSD = O. 53% (n = 6)，结果表明，该方法重复性良好。 [0化2] 2.9加样回收率实验
[0053] 对照品溶液的配制：分别精密称取按油精10.50mg，置100mL量瓶中加无水乙醇使 溶解，并稀释至刻度，作为加样用对照品溶液(浓度:〇.l〇5mg.mL-i)。
[0054] 精密称取已测定含量的清艾条l.Og置锥形瓶中（按油精平均含量是0.096mg.g-i)， 共取样3份，分别精密加入上述加样用对照品溶液0.8、、1、1.2ml，按2.3项下的方法制备供 试品溶液、按2.1色谱条件测定，计算回收率，结果见表1。按油精的平均回收率为98.90%， RSD = 0.30 %。结果表明，该方法回收率良好，符合定量分析要求。
[0055] 表1按油精回收率测定结果(n = 9)
[0化61
[0057] 2.10样品含量测定
[005引按上述含量测定方法，测定了 3批样品中的按油精含量，结果见表2。
[0059] 表2样品测定结果(n = 3)
[0060]
[00W] 3.讨论：
[0062] 3.1检测方法的选择
[0063] 按油精均为挥发性成分，所W该方法用气相色谱法对按油精进行检测。
[0064] 3.2色谱柱的选择
[0065] 参考《中国药典》2010年版一部豆違中按油精的含量测定使用甲基娃橡胶(SE-54) 为为固定相的毛细管柱分离，甲基娃橡胶(SE-54)为非极性柱固定相，方法中RT-5柱也是非 极性色谱柱，试验中按油精色谱峰与其他杂质峰分离效果良好。
[0066] 3.方法考察了初始柱溫95°C、130°C、14(rC柱溫对样品中按油精分离度的影响，结 果发现柱溫95°C时能使按油精与其他杂质峰完全分离，但薄荷脑出峰时间太长，而用2.1方 法中的程序升溫方法既能使按油精与其他杂质峰完全分离，又能缩短分析时间，考虑到方 法的耐用性及检测效率采用该升溫程序作为检测柱溫。
【主权项】
1. 一种气相色谱法测定清艾条中桉油精含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤： 1) 对照品洛液的制备 分别精密称取桉油精9.55mg置25ml量瓶中加无水乙醇使溶解，并稀释至刻度，作为对 照品储备液，精密吸取上述对照品储备液Iml置IOml量瓶中加无水乙醇稀释至刻度，作为对 照品溶液； 2) 供试品溶液的制备 精密称取本品2g，置锥形瓶中，加精密无水乙醇20ml，称定重量，超声提取20分钟，放置 至室温，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜孔径过，即得； 3) 阴性对照溶液的制备 取无水乙醇，作为缺桉油精的阴性对照溶液； 4) 专属性测定 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各ΙμL注入气相色 谱仪； 5) 精密度测定 取同一份对照品溶液，连续进样6次，测定峰面积，计算RSD值； 6) 线性关系考察 分别精密吸取上述对照品储备液Iml至1、5、10、25、50ml量瓶中，进样，测定，以峰面积 为纵坐标，对照品进样量为横坐标绘制标准曲线； 所述的色谱条件如下： 色谱柱:PhenomenexRT-5石英毛细管柱，30m X 0.32mm，0.25μηι;氢火焰离子化检测器温 度：280 °C，进样口温度:250 °C，柱温:95 °C，保持7分钟，以每分钟50 °C的速率升至200 °C，保 持1分钟;分流比：10:1，进样量Iyl。2. 根据权利要求1所述的气相色谱法测定清艾条中桉油精含量的方法，其特征在于，所 述的气相色谱仪为安捷伦GC-7890气相色谱仪。3. 根据权利要求1所述的气相色谱法测定清艾条中桉油精含量的方法，其特征在于，所 述的对照品储备液的浓度0.382mg .mL一1。4. 根据权利要求1所述的气相色谱法测定清艾条中桉油精含量的方法，其特征在于，所 述的对照品溶液的浓度为0. 〇382mg. mL一1。5. 根据权利要求1所述的气相色谱法测定清艾条中桉油精含量的方法，其特征在于，所 述的超声提取时的提取温度为40°C，功率200W。6. 根据权利要求1所述的气相色谱法测定清艾条中桉油精含量的方法，其特征在于，所 述的微孔滤膜孔径为〇. 22μπι。
【文档编号】G01N30/02GK105954374SQ201610248335
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年4月20日
【发明人】陈学松, 梁慧敏
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所