红丝线的鉴别方法
【专利摘要】本发明提供了一种红丝线的鉴别方法，1)取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加体积浓度为60％的乙醇溶液25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过中性氧化铝柱，收集过柱液作为供试品溶液；2)另取红丝线对照药材2g，按照步骤2的方法制成对照药材溶液；3)取β?谷甾醇对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含0.5mgβ?谷甾醇的溶液，作为对照品溶液；4)吸取供试品溶液与对照药材溶液各5μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷?乙醚?乙酸乙酯(15:4:3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度为10％的硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【专利说明】
红竺线的鉴别方法
技术领域
[0001] 本发明设及一种红丝线药材的鉴别方法，具体来说，设及一种方便判断红丝线的 质量和真伪的红丝线的鉴别方法。
【背景技术】
[0002] 红丝线为爵床科植物观音草化ristrophe baphica(Spreng)化emek.。别名红丝 草、丝线草、染色九头狮子草、山蓝等。W全草入药，其性味甘、淡、微寒。功效清肺止咳、散疲 止血。用于肺热咳嗽，内伤咳血、吐血，外用跌打疲肿等。红丝线在广东地区使用历史悠久， 疗效确切，1996年被收载入《广东中药志》第二卷。
[0003] 目前，如何快速分辨红丝线的真假，目前还没有行之有效的方法，而红丝线的真假 直接决定了其药效。
【发明内容】
[0004] 针对W上的不足，本发明提供了一种方便判断红丝线的质量和真伪的红丝线的鉴 别方法，它包括：1)取样品粉末，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加无水甲醇、无水乙醇 或者体积浓度比为60%的乙醇溶液，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇溶解，倾取 上清液作为供试品溶液;2)另取红丝线对照药材按照步骤1)的方法制成对照药材溶液;3) 取对照品加入无水乙醇中，制成对照品溶液;4)吸取供试品溶液、对照药材溶液各、对照品 溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，添加展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为的硫酸 乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的斑点。
[0005] 为了进一步实现本发明，所述对照品为β-谷酱醇或者芝麻素中的一种或者多种。
[0006] 为了进一步实现本发明，所述展开剂为环己烧-乙酸-乙酸乙醋。
[0007] 为了进一步实现本发明，所述环己烧-乙酸-乙酸乙醋的体积比为15:4:3或者15: 2:3。
[000引为了进一步实现本发明，所述步骤1)中还包括倾取上清液，通过中性氧化侣柱收 集过柱液作为供试品溶液。
[0009] 本发明的有益效果：
[0010] 本发明的选用60%乙醇超声提取和过柱处理，重现性好，杂质干扰少;本发明选用 环己烧-乙酸-乙酸乙醋的体积比为15:4:3作为展开剂，使色谱的重现性、色谱效果W及分 离度更令人满意。
【附图说明】
[0011] 图1为本发明的红丝线的也表面在显微鉴别下的的示意图；
[0012] 图2为本发明的在β-谷酱醇作为对照品下，不同处理供试品溶液的色谱对比效果 示意图；
[0013] 图3为本发明的过柱前后的色谱对比效果示意图；
[0014] 图4为本发明的不同展开剂下色谱对比效果示意图；。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合附图对本发明进行进一步阐述。
[0016] 本发明红丝线的鉴别方法选择了四个批次的红丝线作为样品，四个批次的红丝线 的产地和生产厂家具体如表1，其中，四个批次的红丝线的性状如图1所示。
[0017] 表1:样品的产地和厂家
[001 引
[0019] 分别取四个批次的样品的叶进行表面制片，显微镜下观察样品的叶表面，样品的 上、下表皮细胞垂周壁呈波状弯曲；样品的的上、下表皮均有含大型钟乳体的晶细胞，钟乳 体呈棒状或长楠圆形，长约140~257皿;样品的腺鱗头部扁球形或球形，多由4个细胞组成， 直径约28~40μπι;样品的非腺毛先端较尖，由2~4个细胞组成，壁稍厚，长约100~230μπι;样 品的下表皮气孔多见，类圆形或长圆形，直径约18~30μπι，直轴式或不定式，副卫细胞两个， 大小不等。
[0020] 实施例一：
[0021] 1、选取批号151201的红丝线作为样品。
[0022] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加无水甲醇溶液25ml，超声 处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过中性氧化侣柱 (200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0023] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0024] 4、取β-谷酱醇对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含0.5mgi3-谷酱醇的溶液， 作为对照品溶液。
[0025] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（体积比为：15:4: 3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体 积浓度为10%的硫酸乙醇溶液，在l〇5°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药 材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0026] 实施例二：
[0027] 1、选取批号151101的红丝线作为样品。
[0028] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加无水乙醇溶液25ml，超声 处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过中性氧化侣柱 (200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0029] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0030] 4、取β-谷酱醇对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含0.5m泌-谷酱醇的溶液， 作为对照品溶液。
[0031] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0032] 实施例
[0033] 1、选取批号19315812的红丝线作为样品；
[0034] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加体积浓度为60%的乙醇 溶液25ml，回流处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过 中性氧化侣柱(200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0035] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0036] 4、取β-谷酱醇对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含0.5m泌-谷酱醇的溶液， 作为对照品溶液。
[0037] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[003引实施例四：
[0039] 1、选取批号87664111的红丝线作为样品。
[0040] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加体积浓度为60%的乙醇 溶液25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过 中性氧化侣柱(200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0041] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0042] 4、取β-谷酱醇对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含0.5m泌-谷酱醇的溶液， 作为对照品溶液。
[0043] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0044] 如图2所示，实施例一至四中比较了甲醇、乙醇和60%乙醇，W及回流与超声提取、 过柱的效果，实施例四（60%乙醇，超声处理)的方法较为简单，重现性好，杂质干扰少。
[0045] 实施例五：
[0046] 1、选取批号151201的红丝线作为样品。
[0047] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加无水甲醇溶液25ml，超声 处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过中性氧化侣柱 (200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[004引3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0049] 4、按照质量比1:1取β-谷酱醇和芝麻素对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含 0.5m泌-谷酱醇和芝麻素的溶液，作为对照品溶液。
[0050] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0051] 实施例六：
[0化2] 1、选取批号151101的红丝线作为样品。
[0053] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加无水乙醇溶液25ml，超声 处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过中性氧化侣柱 (200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0054] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0055] 4、按照质量比1:1取β-谷酱醇和芝麻素对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含 0.5m泌-谷酱醇和芝麻素的溶液，作为对照品溶液。
[0056] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0057] 实施例屯：
[0化引1、选取批号87664111的红丝线作为样品。
[0059] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加体积浓度为60%的乙醇 溶液25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过 中性氧化侣柱(200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0060] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0061 ] 4、按照质量比1:1取β-谷酱醇和芝麻素对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含 0.5m泌-谷酱醇和芝麻素的溶液，作为对照品溶液。
[0062] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0063] 如图3所示，实施例五至屯中比较了选用甲醇、乙醇和60%乙醇进行超声处理，过 柱前后的效果，过柱后的色谱明显清晰很多。
[0064] 实施例八：
[00化]1、选取批号151201的红丝线作为样品。
[0066] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加无水甲醇溶液25ml，超声 处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过中性氧化侣柱 (200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0067] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0068] 4、按照质量比1:1取β-谷酱醇和芝麻素对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含 0.5m泌-谷酱醇和芝麻素的溶液，作为对照品溶液。
[0069] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:2:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0070] 实施例九：
[0071] 1、选取批号151101的红丝线作为样品。
[0072] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加无水乙醇溶液25ml，超声 处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过中性氧化侣柱 (200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0073] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0074] 4、按照质量比1:1取β-谷酱醇和芝麻素对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含 0.5m泌-谷酱醇和芝麻素的溶液，作为对照品溶液。
[0075] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0076] 实施例十：
[0077] 1、选取批号87664111的红丝线作为样品。
[0078] 2、取样品粉末2g，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加体积浓度为60%的乙醇 溶液25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇1.5ml溶解，倾取上清液，通过 中性氧化侣柱(200-300目，Ig，直径1cm)，收集过柱液作为供试品溶液。
[0079] 3、另取红丝线对照药材2g(由广州中医药大学第一附属医院提供），按照步骤2的 方法制成对照药材溶液。
[0080] 4、按照质量比1:1取β-谷酱醇和芝麻素对照品加入无水乙醇中，制成每1ml乙醇含 0.5m泌-谷酱醇和芝麻素的溶液，作为对照品溶液。
[0081] 5、吸取供试品溶液与对照药材溶液各扣1、对照品溶液化1，分别点于同一硅胶G薄 层板上，W环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)为展开剂，展开，取出，惊干，喷W体积浓度为 10%的硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和 对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0082] 如图4所示，实施例八至十中比较了展开剂选择不同的效果，环己烧-乙酸-乙酸乙 醋（15:4:3)明显优于环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:2:3)环己烧-乙酸-乙酸乙醋（15:4:3)。
[0083] W上所述仅为本发明的较佳实施方式，本发明并不局限于上述实施方式，在实施 过程中可能存在局部微小的结构改动，如果对本发明的各种改动或变型不脱离本发明的精 神和范围，且属于本发明的权利要求和等同技术范围之内，则本发明也意图包含运些改动 和变型。
【主权项】
1. 一种红丝线的鉴别方法，它包括： 1) 取样品粉末，置于具塞锥形瓶中，再向锥形瓶中添加无水甲醇、无水乙醇或者体积浓 度比为60%的乙醇溶液，超声处理，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇溶解，倾取上清液作为 供试品溶液； 2) 另取红丝线对照药材按照步骤1)的方法制成对照药材溶液； 3) 取对照品加入无水乙醇中，制成对照品溶液； 4) 吸取供试品溶液、对照药材溶液各、对照品溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，添加 展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积浓度为的硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品 色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2. 根据权利要求1所述的明红丝线的鉴别方法，其特征在于，所述对照品为β_谷留醇或 者芝麻素中的一种或者多种。3. 根据权利要求1所述的红丝线的鉴别方法，其特征在于，所述展开剂为环己烷-乙醚-乙酸乙酯。4. 根据权利要求3所述的明红丝线的鉴别方法，其特征在于，所述环己烷-乙醚-乙酸乙 酯的体积比为15:4:3或者15:2:3。5. 根据权利要求1所述的红丝线的鉴别方法，其特征在于，所述步骤1)中还包括倾取上 清液，通过中性氧化铝柱收集过柱液作为供试品溶液。
【文档编号】G01N30/90GK106066373SQ201610508392
【公开日】2016年11月2日
【申请日】2016年6月29日 公开号201610508392.1, CN 106066373 A, CN 106066373A, CN 201610508392, CN-A-106066373, CN106066373 A, CN106066373A, CN201610508392, CN201610508392.1
【发明人】冼绍祥
【申请人】广州中医药大学第一附属医院