用于区分直立木和应拉木的生物标志物组合物的制作方法

文档序号:10722620阅读:935来源:国知局
用于区分直立木和应拉木的生物标志物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于区分木材中直立木和应拉木的生物标志物组合物,其至少包括熊果苷、顺?1,2?二氢?1,2?萘二醇、肌糖、异丙基?β?D?硫代半乳糖苷、木糖醇中的一种或几种的组合。
【专利说明】
用于区分直立木和应拉木的生物标志物组合物
技术领域
[0001 ]本发明涉及一种生物标志物组合物,进一步具体的涉及用于区分直立木和应拉木 的生物标志物组合物。
【背景技术】
[0002] 木材是自然界最为重要的可再生资源,通过生物转化成乙醇,可替代石油做液体 燃料,同时也是纸浆造纸的重要原料。并且具有重要的生态价值,它是大气碳元素长期的沉 淀池,是实现生物圈各种物质循环的关键环节。木材形成是一个关键的发育过程,具有重要 的科学研究意义与应用价值。
[0003] 木材的不同往往对后期的加工有很大的影响。正常的树木应为竖直生长的(称为 直立木),而由于各种外部原因(风吹、斜坡、撞击等)导致树木倾斜/倾斜生长。应拉木是指 在阔叶树材倾斜或弯曲树干和枝条的上方,即受拉部位的木质部。应拉木的抗压强度、顺纹 剪切强度、冲击强度、抗弯强度和弹性模量比正常材低。由于胶质纤维的存在,使其加工时 容易出现起毛现象,并且难于干燥,易产生翘曲和开裂。
[0004] 不同的木材要分类进行利用、加工,但是现实中,将锯刨后是否起毛作为正常木和 应拉木区分的一个依据,仅靠人目测来分类是无法完成大规模的分类。
[0005] 因而,非常有必要开发出一种新的技术方案来分出直立木和应拉木,且能够准确 无误的分出直立木和应拉木。
[0006]

【发明内容】

[0007] 针对上述技术问题,本发明第一个方面提供了一种用于区分木材中直立木和应拉 木的生物标志物组合物,至少包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫 代半乳糖苷、木糖醇中的一种或几种的组合。
[0008] 作为本发明的一种实施方式,所述生物标志物组合物的P值小于0.05。
[0009 ]作为本发明的一种实施方式,所述木材选自杨树、柳树、榆树、樟树、桃树中的任意 一种。
[0010] 本发明第二个方面提供了获取上述生物标志物组合物的方法,至少包括以下步 骤, 获取直立木样品,并进行前处理; 将上述前处理的直立木样品进行GC-MS或者LC-MS进行检测,并收集数据; 分析上述收集数据,获取可行的标志物。
[0011] 本发明第三个方面提供了一种区分木材为直立木的方法,包括以下步骤: 在直立木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在木材的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样本的水平相同, 指示木材为直立木;若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样 本的水平不相同,指示木材为非直立木。
[0012] 本发明第四个方面提供了一种区分木材为应拉木的方法,包括以下步骤: 在应拉木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在木材的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和应拉木的组织样本的水平相同, 指示木材为应拉木;若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样 本的水平不相同,指示木材为非应拉木。
[0013] 本发明第五个方面提供了使用上述生物标志物组合物区分直立木和应拉木的方 法,所述方法包括: 在直立木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在应拉木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 其中,直立木的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和应拉木的组织样本的水平 相比,应拉木的组织样本中生物标志物组合物的水平的差异指示该样品为应拉木。
[0014] 本发明第六个方面提供了应拉木否将对疗法有反应的方法,包括以下步骤: 在开始所述治疗之前,在来自应拉木第一样品中测定上述一种或多种生物标志物组合 物的水平; 在已给予所述治疗的至少一部分之后,在来自应拉木的第二样品中测定上述一种或多 种生物标志物组合物的水平; 将第一样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平与对应第二样品中的一种或多 种生物标志物组合物的水平相比较,第二样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平的 差异指示所述应拉木将对所述治疗有疗效。
[0015] 本发明第七个方面提供了应拉木监测治疗功效的方法,所述方法包括: 在开始所述治疗之前,在来自应拉木第一样品中测定上述一种或多种生物标志物组合 物的水平; 在已给予所述治疗的至少一部分之后,在来自应拉木的第二样品中测定上述一种或多 种生物标志物组合物的水平; 将第一样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平与对应第二样品中的一种或多 种生物标志物组合物的水平相比较,第二样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平的 差异指示所述应拉木将对所述治疗有疗效。
[0016] 本发明第八个方面提供了用于确定木材是否具有或将发展成应拉木的试剂盒,所 述试剂盒包括上述生物标志物组合物。
[0017] 说明书附图 图1:实施例1,以熊果苷为标志物的R0C图; 图2:实施例6,以熊果苷和顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇为标志物的R0C图; 图3:实施例16,以熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖为标志物的R0C图; 图4:实施例26,以熊果苷、顺-1,2_二氢-1,2_萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖 苷为标志物的R0C图; 图5:实施例31,以熊果苷、顺-1,2_二氢-1,2_萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖 苷、木糖醇为标志物的ROC图;
【具体实施方式】
[0018] 参选以下本发明的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本发 明的内容。除非另有限定,本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通 技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时,以本说明书中的定义为准。
[0019] 当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优 选值限定的范围表示时,这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围 下限或优选值的任一配对所形成的所有范围,而不论该范围是否单独公开了。例如,当公开 了范围"1至5"时,所描述的范围应被解释为包括范围"1至4"、"1至3"、"1至2"、"1至2和4至 5"、"1至3和5"等。当数值范围在本文中被描述时,除非另外说明,否则该范围意图包括其端 值和在该范围内的所有整数和分数。
[0020] 单数形式包括复数讨论对象,除非上下文中另外清楚地指明。"任选的"或者"任意 一种"是指其后描述的事项或事件可以发生或不发生,而且该描述包括事件发生的情形和 事件不发生的情形。
[0021] 说明书和权利要求书中的近似用语用来修饰数量,表示本发明并不限定于该具体 数量,还包括与该数量接近的可接受的而不会导致相关基本功能的改变的修正的部分。相 应的,用"大约"、"约"等修饰一个数值,意为本发明不限于该精确数值。在某些例子中,近似 用语可能对应于测量数值的仪器的精度。在本申请说明书和权利要求书中,范围限定可以 组合和/或互换,如果没有另外说明这些范围包括其间所含有的所有子范围。
[0022] 此外,本发明要素或组分前的不定冠词"一种"和"一个"对要素或组分的数量要求 (即出现次数)无限制性。因此"一个"或"一种"应被解读为包括一个或至少一个,并且单数 形式的要素或组分也包括复数形式,除非所述数量明显旨指单数形式。
[0023]如本文所用,以下术语的每一个具有与其在本部分中相关的含义。冠词"一个"和" 一种"在本文用于指该冠词的一个或超过一个(即至少一个)的语法对象。例如,"要素"意指 一个要素或超过一个要素。
[0024] 如本文所用,术语"灵敏度"定义为测定(例如,方法,测试)性能的统计学量度,通 过真阳性数除以真阳性和假阴性的和来计算。
[0025] 如本文所用,术语"特异性"定义为测定(例如,方法,测试)性能的统计学量度,通 过真阴性数除以真阴性和假阳性之和来计算。
[0026] 如本文所用,术语"信息指示的"或"信息指示"指称标志物或标志物组的质量,及 特别指称在阳性样品中发现标志物(或标志物组)的似然性。
[0027] 如本文所用,以下术语的每一个具有与其在本部分中相关的含义。冠词"一个"和" 一种"在本文用于指该冠词的一个或超过一个(即至少一个)的语法对象。例如,"要素"意指 一个要素或超过一个要素。
[0028] "标志物"或"生物标志物"是与另一种表型状态(例如直立木与应拉木)相比,在取 自一种表型状态(例如应拉木)的木材样品中差别存在的有机生物分子。如果在不同组中生 物标志物的平均或中位水平、例如表达水平经计算为统计学显著的,则生物标志物在不同 的表型状态中差别存在。统计学显著性的常见检验特别包括t-检验、AN0VA、Kruskal- Wallis、Wilcoxon、Mann_Whitney和优势比。单独或组合的生物标志物提供应拉木属于一种 表型状态或另一种表型状态的相对风险的度量。
[0029] 在一些实施方案中,用于本发明的组合物和方法的标志物的准确性可通过接收器 工作特征曲线("R0C曲线")来表征。R0C是对于诊断标志物的不同可能的割点的真阳性率相 对假阳性率的曲线。R0C曲线显示灵敏性和特异性之间的关系。即是说,灵敏性的增加将伴 随特异性的降低。曲线越靠近R0C空间的左轴,然后顶缘,标志物越准确。相反地,曲线越靠 近R0C图的45度对角线,标志物越不准确。R0C下的面积是标志物准确性的度量。标志物的准 确性取决于标志物如何适当地将待测试的组分成具有所述直立木组和应拉木组。曲线下面 积(称为"AUC")为1表示完美的标志物,而面积为0.5表示有用性较差的标志物。因此,在一 些实施方案中,本发明的生物标志物和方法的AUC大于约0.50、大于约0.60或大于约0.70。
[0030] "标志物的水平"或"生物标志物的水平"是指在待测试的样品中存在的标志物的 量。标志物的水平可以是绝对水平或量(例如μg/ml)或相对水平或量(例如相对信号强度)。 [0031]标志物的"更高水平"或"水平增加"是指大于用于评估标志物水平的测定法的标 准误差的试验样品中的标志物水平,和优选为对照样品中标志物水平。
[0032] 标志物的"更低水平"或"水平降低"是指小于用于评估标志物水平的测定法的标 准误差的试验样品中的标志物的水平,和优选为对照样品中标志物水平。
[0033] 术语"已知的标准水平"或"对照水平"是指标志物的公认的或预定的水平,其用于 比较源自木材的样品中的标志物的水平。在一个实施方案中,标志物的对照水平基于来自 具有正常的木材的样品中的标志物的水平。在另一实施方案中,标志物的对照水平基于来 自应拉木的一个或多个木材的样品中的标志物的水平。在一个实施方案中,来自木材的样 品中的标志物的对照水平是之前在木材的样品中已确定的标志物的水平。
[0034] 或者,和特别是当因为本文所述方法的常规实施所致进一步的信息成为可用时, 可使用标志物表达的"对照"水平的群体平均值。在其它实施方案中,标志物的"对照"水平 可通过测定获自在木材中应拉木之前的木材样品、获自存档的木材样品等的标志物的水平 来确定。
[0035] 本发明的"木材"包括但不限于:杨柳科植物(如柳树)、桃金娘科植物等。此外,所 述的木材还可包括林业作物、乔木、花卉植物等。
[0036]本发明的"直立木"又称为正常木,为竖直生长的树木。
[0037]本发明的"应拉木"是指树木在生长过程中为了适应外界生长环境和自身生长需 要会产生与正常生长形成的木材在结构和特性方面不同的组织,通常称为非正常组织,如 应力木、树节等。树木栽植在斜坡、林缘或主风方向稳定等区域,外界因素可能导致原本直 立生长的树木树干发生倾斜或者部分弯曲。在这些倾斜或弯曲生长树干和具有一定成枝角 度的树枝木材中可能会产生偏心生长,在圆盘中部分年轮宽度较大,而部分年轮宽度较窄。 这些由于偏心生长而产生的与正常木材性质之间差异较大的木材特殊组织统称为应力木。 在阔叶树材中,应力木产生于倾斜树干和树枝的上部,称之为应拉木,在针叶树材中,应力 产生于在倾斜树干和树枝的下部,称之为应压木,但是,并非所有树种的倾斜或弯曲树干或 一定成枝角度的树枝中都会有偏心生长而产生应力木。此外,某些生长速度较快的阔叶树 种,在正常生长的树干中也会形成应拉木。应拉木的形成机理目前还没有统一定论,但很显 然的是它与木材内部内源激素的分布和树干中轴与重力线之间的夹角有关。应拉木的存在 往往与幼龄材和高生长应力相伴,其结构和性质与正常木之间存在一定差异性,导致对木 材的加工利用产生一定的影响。
[0038] 术语"测定"意指包括检测样品中标志物的存在或不存在、定量测定样品中标志物 的量、和/或确定生物标志物的类型的方法。测量可通过本领域已知的方法和本文进一步描 述的那些方法实现。
[0039] 如本文所用的,术语"调节"的各种形式意图包括刺激(例如增加或增量调节特定 的反应或活性)和抑制(例如降低或减量调节特定的反应或活性)。
[0040] 试剂盒是包含特异性检测本发明的标志物的至少一种试剂例如探针、引物或抗体 的任何制品(例如包装或容器),所述制品作为用于进行本发明的方法的一个单位来推销、 分配或销售。在某些实施方案中,试剂盒可包括基质,例如包含本发明的一种或多种标志物 的捕获试剂和/或与本发明的一种或多种标志物结合的捕获试剂的基质。在一些实施方案 中,这样的试剂盒包含用于使用质谱测定标志物的水平的使用说明书。
[0041 ] 生物标志物组合物 本发明第一个方面提供了一种用于区分木材中直立木和应拉木的生物标志物组合物, 至少包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖醇中的 一种或几种的组合。
[0042]在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物是熊果苷。在一个实施方案中, 生物标志物组合物是顺-1,2-二氢-1,2_萘二醇。在一个实施方案中,生物标志物组合物是 肌糖。在一个实施方案中,生物标志物组合物是异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。在一个实施方 案中,生物标志物组合物是木糖醇。
[0043] 在本发明的其它方面,超过一种标志物,例如多种标志物,例如2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11或更多种标志物,可用于本发明的生物标志物组合物。例如,在一个实施方案中,用于 本发明生物标志物组合物包括熊果苷和顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇。在一个实施方案中,用 于本发明生物标志物组合物包括熊果苷和肌糖。在一个实施方案中,用于本发明生物标志 物组合物包括熊果苷和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。在一个实施方案中,用于本发明生物标 志物组合物包括熊果苷和木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括 顺-1,2_二氢-1,2_萘二醇和肌糖。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括 顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。在一个实施方案中,用于本发明生 物标志物组合物包括顺-1,2_二氢-1,2_萘二醇和木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明 生物标志物组合物包括肌糖和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。在一个实施方案中,用于本发明 生物标志物组合物包括肌糖和木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物 包括异丙基 -β-D-硫代半乳糖苷和木糖醇。
[0044]在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1, 2_萘二醇和肌糖。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。在一个实施方案中,用于本发明生物标志 物组合物包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇和木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明 生物标志物组合物包括熊果苷、肌糖和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。在一个实施方案中,用 于本发明生物标志物组合物包括熊果苷、肌糖和木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明生 物标志物组合物包括熊果苷、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷和木糖醇。在一个实施方案中,用 于本发明生物标志物组合物包括顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖和异丙基-β-D-硫代半乳 糖苷。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌 糖和木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括顺-1,2-二氢-1,2-萘 二醇、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷和木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组 合物包括肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷和木糖醇。
[0045] 在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1, 2_萘二醇、肌糖和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物 组合物包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖和木糖醇。在一个实施方案中,用于本 发明生物标志物组合物包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 和木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括熊果苷、肌糖、异丙基-β-D_硫代半乳糖苷、木糖醇。在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括顺-1,2-二氢,2-萘二醇、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷和木糖醇。
[0046] 在一个实施方案中,用于本发明生物标志物组合物包括熊果苷、顺-1,2-二氢-1, 2-萘二醇、肌糖、异丙基硫代半乳糖苷和木糖醇。
[0047] 在一种优选的实施方式中,所述用于区分木材中直立木和应拉木的生物标志物组 合物的Ρ值小于0.05。
[0048]阈值(Ρ值):统计学上的量,代表结果显著性。Ρ值〈0.05代表随机误差产生这种结 果的概率小于0.05。
[0049] 木材 作为本发明的一种实施方式,所述木材选自杨树、柳树、榆树、樟树、桃树中的任意一 种。
[0050] 杨树是杨柳科植物落叶乔木的通称。全属有100多种,主要分布在欧洲、亚洲、北美 洲的温带、寒带及地中海沿岸国家与中东地区。中国有53种,特有种35种。杨树为喜光树种, 要求温带气候,具有一定的耐寒能力。杨树可分两类:一类为中生偏湿类型,分布在年雨量 500~700(1300)mm的地区,如青杨、滇杨、大青杨、毛青杨、山杨等。另一类属中亚草原和森 林一草原的树种如小叶杨、黑杨、银白杨、新疆杨等,能够忍耐大气干旱,但需要充足的地下 水。胡杨分布于干旱荒漠和沙漠盐碱地带,是杨树中忍耐大气干旱以及土壤盐渍化最强的 树种,能在含盐量达1%的土壤上正常生长。杨树包括5个派:白杨派、青杨派、黑杨派、胡杨、 大叶杨派。
[0051 ]本发明中的生物标志物组合物适用于所有种类的杨树。
[0052]柳树是旱柳、腺柳、垂柳等柳属植物的总称。柳属多为灌木,稀乔木,无顶芽,合轴 分枝,雄蕊数目较少,虫媒花等特征表明,较杨属与钻天柳属进化。本属世界约520多种,主 产北半球温带地区,寒带次之,亚热带和南半球极少,大洋洲无野生种。我国257种,122变 种,33变型。各省区均产。
[0053]本发明中的生物标志物组合物适用于所有种类的柳树。
[0054]榆树:又名春榆、白榆等,素有"榆木疙瘩"之称,为榆科落叶乔木,幼树树皮平滑, 灰褐色或浅灰色,大树之皮暗灰色,不规则深纵裂,粗糙;小枝无毛或有毛,无膨大的木栓层 及凸起的木栓翅;冬芽近球形或卵圆形。叶椭圆状卵形等,叶面平滑无毛,叶背幼时有短柔 毛,后变无毛或部分脉腋有簇生毛,叶柄面有短柔毛。花先叶开放,在生枝的叶腋成簇生状。 翅果稀倒卵状圆形。分布于中国东北、华北、西北及西南各省区,朝鲜、前苏联、蒙古也有分 布。生于海拔1000-2500米以下之山坡、山谷、川地、丘陵及沙岗等处。
[0055]樟树:别名:香樟、樟木、瑶人柴、姥樟、臭樟、乌樟;樟目、樟科、樟属常绿大乔木,高 可达30米,直径可达3米,树冠广卵形;树冠广展,枝叶茂密,气势雄伟,是优良的绿化树、行 道树及庭荫树。产中国南方及西南各省区。越南、朝鲜、日本也有分布,其他各国常有引种栽 培。植物全体均有樟脑香气,可提制樟脑和提取樟油。木材坚硬美观,宜制家具、箱子。香樟 树对氯气、二氧化硫、臭氧及氟气等有害气体具有抗性,能驱蚊蝇,能耐短期水淹,是生产樟 脑的主要原料。材质上乘,是制造家具的好材料。
[0056] 桃树:俗名:桃树,拉丁学名:Prunus per si ca,英文名:Peach。植物类型:被子植 物。科属名:蔷薇科桃亚属。生长分布:原产我国,世界各地广为栽培。落叶小乔木,高4-8m。 叶卵状披针形或圆状披针形,长8-12cm,宽3-4cm,边缘具细密锯齿,两边无毛或下面脉腋间 有鬓毛,叶互生;花单生,先叶开放,近无柄;萼筒钟,有短绒毛,裂叶卵形;花瓣粉红色,倒卵 形或矩圆状卵形;果球形或卵形,径5~7公分,表面被短毛,白绿色,夏末成熟;孰果带粉红 色,肉厚,多汁,气香,味甜或微甜酸。核扁心形,极硬。
[0057]本发明第二个方面提供了获取上述生物标志物组合物的方法,至少包括以下步 骤, 获取直立木样品,并进行前处理; 将上述前处理的直立木样品进行GC-MS或者LC-MS进行检测,并收集数据; 分析上述收集数据,获取可行的标志物。
[0058]本发明中采用代谢组学的方法来筛查并鉴定获取生物标志物组合物。
[0059] 代谢组学是继基因组学、转录组学、蛋白质组学之后迅速崛起的一门新兴学科,已 成为系统生物学的重要组成部分。代谢组学是研究生物体系受外部刺激或扰动后所产生的 内源性代谢物整体及其变化规律的科学,是探明生物体系代谢途径的研究方法细胞内许多 生命活动发生于代谢层面,如细胞信号释放、能量传递、细胞间通信等,机体内任何生理或 病理改变都离不开代谢过程及其组分的变化。
[0060] 代谢组学的研究样本可以是植物体液、细胞提取物、细胞培养液和组织等。其中心 任务包括检测、量化和编录生物内源性代谢物质的整体及其变化规律,并且通过这种变化 规律探究所发生的生物学事件或过程的本质。代谢组学的研究对象是相对分子质量1〇〇〇 Da以下的小分子物质,包括:糖类、氨基酸、脂类、有机酸、肉碱等。
[0061] 代谢组学的研究,一般包括样品的采集及制备、代谢物组数据的采集、预处理、多 变量统计分析和代谢途径分析等步骤:获取生物样本、样品前处理、进行分析测试技术的分 析处理、靶向或非靶向分析、数据预处理、多元变量分析和可能的生物标志物的确定。
[0062] 样品的采集和制备是代谢组学研宄中的最初始的步骤,也是最重要的步骤之一。 可应用于代谢组学研宄的体液除常见的树枝液体外,还包括:树枝分泌的胶状物质等。
[0063] 目前,常用的分析测试技术为以核磁共振谱(NMR)、质谱(MS)为核心的分析技术以 及色谱与波谱联用技术,包括:NMR、LC-NMR或LC-NMR-MS、LC-MS和GC-MS等。NMR技术具有无 偏向性、无损伤样品等特点,但该技术灵敏度低、检测动态范围窄。MS及MS/MS技术具有较高 的灵敏度和专属性,可以实现多个化合物的同时快速检测和定量分析。
[0064]数据预处理与分析:在代谢组学研究中,海量数据的预处理、分析和管理需要专门 的数学、统计学和生物信息学工具。其中,匪R谱数据需要首先把谱信号分成很多小单元 (bins),然后进行基线校正和整合,降低水抑制效应带来的变异和尿素的交叉驰豫效应;基 于MS的分析方法,是对一定质荷比(zw/z)范围进行全扫描的基础上,将获得的数据分成若 干小窗,方便计算机分区域进行峰匹配。
[0065] 由于生物样品中代谢物组分复杂、含量差异大,高含量化合物容易掩盖低含量化 合物的变化,往往使一些含量较低但具有重要生物学意义的代谢物组分不能被识别。因此, 需要对数据进行标度化,以消除不同代谢物的尺度差异。
[0066] 多元变量分析:也称多变量分析或者多元统计分析,主要研究多个变量的集合之 间的关系以及具有这些变量的个体之间的关系。简单地说,就是研究η个观测对象集合之间 特征的方法,其中对每个对象观测Ρ个因素(变量)。观测对象的集合可以是整个集合,也可 以是取自较大集合的一个或多个子集;可以是固定的,也可以是随机的;可以是类型变量, 也可以是数量变量;数量变量可以是连续的,也可以是离散的;并且变量集本身可以是取自 较大变量集合的一个或多个子集。
[0067] 在一种实施方式中,所述木材样品可以是固体、液体,也可以是细胞、微生物等。 [0068]在一种实施方式中,当所述木材样品为固体时,所述具体前处理的方法为:将 100mg固体溶于500 yL提取试剂,加入钢珠进行研磨,所述研磨的条件为50 Ηζ,8分钟;然 后进行离心,取上清。
[0069] 若要进行GC-MS测试,可进行浓缩干燥。所述浓缩干燥的步骤为将上清中加入 20mg/ml的甲氧胺,在70 °C下干燥20min,然后加入试剂BSTFA下进行衍生化处理3小时后,进 行测试。
[0070] 若要进行LC-MS测试,则只需将上清液进行浓缩干燥,加入200 yL乙腈进行复溶, 经过滤塞,可直接进行LC-MS测试。
[0071] 在一种实施方式中,所述木材样品为液体时,例如树枝汁液等。所述具体前处理的 方法为:100 yL液体加入500yL甲醇中,进行斡旋混匀,高速离心,取上清液,进行测试。
[0072] 若要进行GC-MS测试,可进行浓缩干燥。所述浓缩干燥的步骤为将上清中加入 20mg/ml的甲氧胺,在70 °C下干燥20min,然后加入试剂BSTFA下进行衍生化处理2小时后,进 行测试。
[0073]若要进行LC-MS测试,则只需将上清液进行浓缩干燥,加入200 yL乙腈进行复溶, 经过滤塞,可直接进行LC-MS测试。
[0074]在一种实施方式中,所述受试者样品为微生物时,所述处理方式与细胞的处理方 式一样。
[0075]本发明第三个方面提供了一种区分木材为直立木的方法,包括以下步骤: 在直立木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在木材的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样本的水平相同, 指示木材为直立木;若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样 本的水平不相同,指示木材为非直立木。
[0076]在一种优选的实施方式中,以熊果苷为标志物组合物为例,测试直立木的组织样 本的水平,记录水平1;同样以熊果苷为标志物组合物为例,测试待测木材样品的的水平,记 录水平2;区分水平1和水平2相同,指示木材为直立木;区分水平1和水平2不相同,指示木材 为非直立木。
[0077] 本发明第四个方面提供了一种区分木材为应拉木的方法,包括以下步骤: 在应拉木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在木材的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和应拉木的组织样本的水平相同, 指示木材为应拉木;若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样 本的水平不相同,指示木材为非应拉木。
[0078] 在一种优选的实施方式中,以木糖醇为标志物组合物为例,测试应拉木的组织样 本的水平,记录水平1;同样以木糖醇为标志物组合物为例,测试待测木材样品的的水平,记 录水平2;区分水平1和水平2相同或相近,指示木材为应拉木;区分水平1和水平2不相同,指 示木材为非应拉木。
[0079] 本发明第五个方面提供了使用上述生物标志物组合物区分直立木和应拉木的方 法,所述方法包括: 在直立木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在应拉木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 其中,直立木的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和应拉木的组织样本的水平 相比,应拉木的组织样本中生物标志物组合物的水平的差异指示该样品为应拉木。
[0080] 本发明第六个方面提供了应拉木否将对疗法有反应的方法,包括以下步骤: 在开始所述治疗之前,在来自应拉木第一样品中测定上述一种或多种生物标志物组合 物的水平; 在已给予所述治疗的至少一部分之后,在来自应拉木的第二样品中测定上述一种或多 种生物标志物组合物的水平; 将第一样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平与对应第二样品中的一种或多 种生物标志物组合物的水平相比较,第二样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平的 差异指示所述应拉木将对所述治疗有疗效。
[0081] 本发明第七个方面提供了应拉木监测治疗功效的方法,所述方法包括: 在开始所述治疗之前,在来自应拉木第一样品中测定上述一种或多种生物标志物组合 物的水平; 在已给予所述治疗的至少一部分之后,在来自应拉木的第二样品中测定上述一种或多 种生物标志物组合物的水平; 将第一样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平与对应第二样品中的一种或多 种生物标志物组合物的水平相比较,第二样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平的 差异指示所述应拉木将对所述治疗有疗效。
[0082]本发明第八个方面提供了用于确定木材是否具有或将发展成应拉木的试剂盒,所 述试剂盒包括上述生物标志物组合物。
[0083]试剂盒用于评估木材为直立木或者应拉木的试剂盒。所述"试剂盒"是指包含至少 一种用于特异性地检测本发明生物标志物表达的试剂,例如抗体、核酸探针等的任何产品 (例如,包装盒或容器)。所述试剂盒包含一种用于评估本发明标记物表达的试剂。所述试剂 盒包含一种用于评估本发明标记物表达的试剂,和可还包含一或多种上述试剂。
[0084]在本发明的任何方法和试剂盒中,获自受试者的样品中本发明的标志物的水平可 通过各种众所周知的技术和方法中任一种来测定,其将样品中的本发明的标志物转化成可 检测和定量的部分。这样的方法的非限制性实例包括使用用于检测蛋白质的免疫学方法、 蛋白质纯化方法、蛋白质功能或活性测定法、核酸杂交方法、核酸逆转录方法和核酸扩增方 法、免疫印迹法、但报纸印迹法、RNA印迹法、电子显微术、质谱法、免疫沉淀、免疫荧光、免疫 组织化学、酶联免疫吸附测定法、基于血液的定量测定法、基于尿液的定量测定法、流式细 胞术、DNA杂交、陈列分析等和其组合或亚组合分析样品。
[0085]试剂盒可以作为进行本发明方法的单位形式推销、分发或销售。此外,试剂盒可包 含描述试剂盒和其使用方法的说明书。
[0086]本发明通过以下实施例作进一步说明,实施例不应解释为进一步限制。本申请全 文所引用的所有参考文献、专利和公开的专利申请的内容,以及附图,明确地通过引用以其 整体结合到本文中。
[0087]实施方式 实施方式1:用于区分木材中直立木和应拉木的生物标志物组合物,至少包括熊果苷、 顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖醇中的一种或几种的组 合。
[0088] 实施方式2:与实施方式1相同,不同点在于,所述生物标志物组合物的p值小于 0.05〇
[0089] 实施方式3:与实施方式1相同,不同点在于,所述木材选自杨树、柳树、榆树、樟树、 桃树中的任意一种。
[0090] 实施方式4:获取实施方式1至3所述的生物标志物组合物的方法,步骤至少包括, 获取直立木样品,并进行前处理; 将上述前处理的直立木样品进行GC-MS或者LC-MS进行检测,并收集数据; 分析上述收集数据,获取可行的标志物。
[0091] 实施方式5:获取实施方式1或2所述的生物标志物组合物区分木材为直立木的方 法,包括以下步骤: 在直立木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在木材的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样本的水平相同, 指示木材为直立木;若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样 本的水平不相同,指示木材为非直立木。
[0092] 实施方式6:获取实施方式1或2所述的生物标志物组合物区分木材为应拉木的方 法,包括以下步骤: 在应拉木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在木材的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和应拉木的组织样本的水平相同, 指示木材为应拉木;若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样 本的水平不相同,指示木材为非应拉木。
[0093] 实施方式7:获取实施方式1或2所述的生物标志物组合物区分直立木和应拉木的 方法,所述方法包括: 在直立木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 在应拉木的组织样本中测定上述生物标志物组合物的水平; 其中,直立木的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和应拉木的组织样本的水平 相比,应拉木的组织样本中生物标志物组合物的水平的差异指示该样品为应拉木。
[0094] 实施方式8:获取实施方式1或2所述的生物标志物组合物判断应拉木否将对疗法 有反应的方法,其特征在于,包括以下步骤: 在开始所述治疗之前,在来自应拉木第一样品中测定上述一种或多种生物标志物组合 物的水平; 在已给予所述治疗的至少一部分之后,在来自应拉木的第二样品中测定上述一种或多 种生物标志物组合物的水平; 将第一样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平与对应第二样品中的一种或多 种生物标志物组合物的水平相比较,第二样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平的 差异指示所述应拉木将对所述治疗有疗效。
[0095] 实施方式9:获取实施方式1或2所述的生物标志物组合物监测应拉木治疗功效的 方法,其特征在于,所述方法包括: 在开始所述治疗之前,在来自应拉木第一样品中测定上述一种或多种生物标志物组合 物的水平; 在已给予所述治疗的至少一部分之后,在来自应拉木的第二样品中测定上述一种或多 种生物标志物组合物的水平; 将第一样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平与对应第二样品中的一种或多 种生物标志物组合物的水平相比较,第二样品中的一种或多种生物标志物组合物的水平的 差异指示所述应拉木将对所述治疗有疗效。
[0096] 实施方式10:实施方式10提供了用于确定木材为直立木或者应拉木的试剂盒,所 述试剂盒包括如实施方式1或2所述的生物标志物组合物。 具体实施例
[0097] 分组:分为直立木组、应拉木组; 选取1000个木材,其中直立木组500个、应拉木组500个。
[0098] 一、获取标志物 步骤:1、获取杨树树枝的汁液,并进行前处理:100 yL乙醇加入500 yL甲醇中,进行斡 旋混匀,高速离心,取上清液,进行浓缩干燥,加入100 yL乙腈进行复溶,经过滤塞,可直接 进行UHPLC-QQQ-MS测试;收集UHPLC-QQQ-MS数据,进行多元变量统计分析。
[0099] 采用UHPLC-QQQ-MS定量验证后发现直立木组,与应拉木组相比,特异高表达物质 有:熊果苷、顺_1,2_二氢-1,2_萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖醇。对数据进 行t检验,以T-test的p值(阈值〈0.05)来确定差异性表达代谢物,结果如表1所示: 表1
二、以筛选到的标志物组合物区分木材中直立木和应拉木 2.1、以筛选到的单标志物区分木材中直立木和应拉木 实施例1以熊果苷为单标志物区分木材中直立木和应拉木 经过ROC曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(ROC曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0100] 实施例2以顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇为单标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0101] 实施例3以肌糖为单标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0102] 实施例4以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷为单标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0103] 实施例5以木糖醇为单标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0104] 2.2、以筛选到的两标志物区分木材中直立木和应拉木 实施例6以熊果苷和顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇为两标志物区分木材中直立木和应拉 木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0105] 实施例7以熊果苷和肌糖为两标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0106] 实施例8以熊果苷和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷为两标志物区分木材中直立木和 应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0107] 实施例9以熊果苷和木糖醇为两标志物区分木材中直立木和应拉木 经过ROC曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(ROC曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0108] 实施例10以顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇和肌糖为两标志物区分木材中直立木和应 拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0109] 实施例11以顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷为两标志物区 分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0110] 实施例12以顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇和木糖醇为两标志物区分木材中直立木和 应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0111] 实施例13以肌糖和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷为两标志物区分木材中直立木和应 拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0112] 实施例14以肌糖和木糖醇为两标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0113] 实施例15以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷和木糖醇为两标志物区分木材中直立木和 应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0114] 2.3、以筛选到的三标志物区分木材中直立木和应拉木 实施例16以熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖为三标志物区分木材中直立木和 应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0115] 实施例17以熊果昔、顺_1,2_二氛_1,2_蔡二醇、异丙基-β-D-硫代半乳糖昔为二标 志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0116] 实施例18以熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、木糖醇为三标志物区分木材中直 立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0117] 实施例19以熊果苷、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷为三标志物区分木材中直立 木和应拉木 经过ROC曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(ROC曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0118] 实施例20以熊果苷、肌糖、木糖醇为三标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0119] 实施例21以熊果苷、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖醇为三标志物区分木材中直 立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0120] 实施例22以顺_1,2_二氛_1,2_蔡二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖昔为二标志 物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0121] 实施例23以顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖、木糖醇为三标志物区分木材中直立 木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0122] 实施例24以顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖醇为三标 志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0123] 实施例25以肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖醇为三标志物区分木材中直立 木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0124] 2.3、以筛选到的四标志物区分木材中直立木和应拉木 实施例26以熊果苷、顺-1,2_二氢-1,2_萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷为四 标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0125] 实施例27以熊果苷、顺-1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖、木糖醇为四标志物区分木材 中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0126] 实施例28以熊果昔、顺_1,2_二氛_1,2_蔡二醇、异丙基-β-D-硫代半乳糖昔、木糖 醇为四标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0127]实施例29以熊果苷、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖醇为四标志物区分木 材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0128] 实施例30以顺_1,2_二氛_1,2_蔡二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖昔、木糖醇 为四标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0129 ] 2.3、以筛选到的五标志物区分木材中直立木和应拉木 实施例31以熊果苷、顺-1,2_二氢-1,2_萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖 醇为五标志物区分木材中直立木和应拉木 经过R0C曲线(木材工作特征曲线)测试,可知AUC(R0C曲线下的面积)为1,区分灵敏度 为100%,特异度为0%。
[0130]综上所述,以熊果苷、顺,2_二氢-1,2_萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖 苷、木糖醇中的一种或几种的组合为生物标志物对于直立木和应拉木的区分,区分的灵敏 度达到100%,特异度达到0%,取得了较好的有益效果。
【主权项】
1. 一种用于区分木材中直立木和应拉木的生物标志物组合物,其特征在于,至少包括 熊果苷、顺 _1,2-二氢-1,2-萘二醇、肌糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷、木糖醇中的一种或几 种的组合。2. 如权利要求1所述的生物标志物组合物,其特征在于,所述生物标志物组合物的p值 小于0.05。3. 如权利要求1所述的生物标志物组合物,其特征在于,所述木材选自杨树、柳树、榆 树、樟树、桃树中的任意一种。4. 获取权利要求1至3所述的生物标志物组合物的方法,其特征在于,步骤至少包括, 获取直立木样品,并进行前处理; 将上述前处理的直立木样品进行GC-MS或者LC-MS进行检测,并收集数据; 分析上述收集数据,获取可行的标志物。5. 使用权利要求1或2所述的生物标志物组合物区分木材为直立木的方法,其特征在 于,包括以下步骤: 在直立木的组织样本中测定权利要求1或2所述生物标志物组合物的水平; 在木材的组织样本中测定权利要求1或2所述生物标志物组合物的水平; 若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样本的水平相同, 指示木材为直立木;若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样 本的水平不相同,指示木材为非直立木。6. 使用权利要求1或2所述的生物标志物组合物区分木材为应拉木的方法,其特征在 于,包括以下步骤: 在应拉木的组织样本中测定权利要求1或2所述生物标志物组合物的水平; 在木材的组织样本中测定权利要求1或2所述生物标志物组合物的水平; 若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和应拉木的组织样本的水平相同, 指示木材为应拉木;若木材的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和直立木的组织样 本的水平不相同,指示木材为非应拉木。7. 使用权利要求1或2所述的生物标志物组合物区分直立木和应拉木的方法,其特征在 于,所述方法包括: 在直立木的组织样本中测定权利要求1或2所述生物标志物组合物的水平; 在应拉木的组织样本中测定权利要求1或2所述生物标志物组合物的水平; 其中,直立木的组织样本中所述生物标志物组合物的水平和应拉木的组织样本的水平 相比,应拉木的组织样本中生物标志物组合物的水平的差异指示该样品为应拉木。8. 使用权利要求1或2所述的生物标志物组合物判断应拉木对疗法有反应的方法,其特 征在于,包括以下步骤: 在开始所述治疗之前,在来自应拉木第一样品中测定权利要求1或2所述的生物标志物 组合物的水平; 在已给予所述治疗的至少一部分之后,在来自应拉木的第二样品中测定权利要求1或2 所述的生物标志物组合物的水平; 将第一样品中的生物标志物组合物的水平与对应第二样品中的生物标志物组合物的 水平相比较,第二样品中的生物标志物组合物的水平的差异指示所述应拉木将对所述治疗 有疗效。9. 使用权利要求1或2所述的生物标志物组合物监测应拉木治疗功效的方法,其特征在 于,所述方法包括: 在开始所述治疗之前,在来自应拉木第一样品中测定权利要求1或2所述的生物标志物 组合物的水平; 在已给予所述治疗的至少一部分之后,在来自应拉木的第二样品中测定权利要求1或2 所述的生物标志物组合物的水平; 将第一样品中的生物标志物组合物的水平与对应第二样品中的生物标志物组合物的 水平相比较,第二样品中的生物标志物组合物的水平的差异指示所述应拉木将对所述治疗 有疗效。10. 用于确定木材为直立木或者应拉木的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括如权利 要求1或2所述的生物标志物组合物。
【文档编号】G01N33/00GK106093300SQ201610392042
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月6日 公开号201610392042.3, CN 106093300 A, CN 106093300A, CN 201610392042, CN-A-106093300, CN106093300 A, CN106093300A, CN201610392042, CN201610392042.3
【发明人】吴洪强, 楼格尔, 邓军亮
【申请人】上海阿趣生物科技有限公司
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