一种定量加样的甘油三酯检测芯片的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型属于检测技术领域，涉及一种定量加样的甘油三酯检测芯片。
【背景技术】
[0002]芯片技术是将生物或化学的基本操作单元集成到一块芯片上完成。因其生物试样消耗少，分析速度快，费用低等特点，已在医药、化学及生命科学等领域得到快速发展。
[0003]目前传统芯片材料主要集中在石英、玻璃材料及高分子聚合物等。纸具有生物相容性好、成本低、操作简单等特点，成为芯片制作的新型材料，将在快速检测及监控等领域具有潜在应用价值。
[0004]本实用新型基于纸制芯片，结合脂肪酶、甘油激酶、甘油3-磷酸氧化酶、辣根过氧化物酶及其底物的显色体系，提供了一种定量加样的用于甘油三酯检测的新技术。
【发明内容】
[0005]本实用新型目的是提出了一种定量加样的甘油三酯检测芯片。
[0006]本实用新型所采用的技术方案是:本实用新型的一种定量加样的甘油三酯检测芯片，包括纸芯片，纸芯片采用纸材料制成，其特征是:在纸芯片上设有一个样品区、一个空白对照区和两个甘油三酯检测区，纸芯片的中心有一个样品区，样品区与自动微量注射栗连接，通过自动微量注射栗向样品区中自动定量注射样品，空白对照区通过微通道与样品区连通，在纸芯片上的两个甘油三酯检测区为并排设置，并排设置的两个甘油三酯检测区分别通过微通道与样品区连通。
[0007]本实用新型的有益效果为:本实用新型基于纸制芯片，结合脂肪酶、甘油激酶、甘油3-磷酸氧化酶、辣根过氧化物酶及其底物的显色体系，提供了一种定量加样的用于甘油三酯检测的新技术，可用于医学快速诊断、食品安全等领域研究。
【附图说明】
[0008]图I为本实用新型的结构示意图。
[0009]图中：I，样品区；2，空白对照区；3，甘油三酯检测区；4，微通道;5，纸芯片;6，自动微量注射栗。
【具体实施方式】
[0010]如图I所示，本实用新型所述的一种定量加样的甘油三酯检测芯片，包括纸芯片5，纸芯片5采用纸材料制成，其特征是:在纸芯片5上设有一个样品区1、一个空白对照区2和两个甘油三酯检测区3，纸芯片5的中心有一个样品区I，样品区I与自动微量注射栗6连接，通过自动微量注射栗6向样品区I中自动定量注射样品，空白对照区2通过微通道4与样品区I连通，在纸芯片5上的两个甘油三酯检测区3为并排设置，并排设置的两个甘油三酯检测区3分别通过微通道4与样品区I连通。检测时，用自动微量注射栗6控制定量取5 yL样品于样品区，经微通道4流通至甘油三酯检测区3，反应Smin后，使用扫描仪扫描得到芯片检测甘油三酯的显色图像，用Photoshop读取显色值。根据显色剂颜色的不同，即可测定甘油三酯的浓度。
[0011]本实用新型所提供的芯片制作分为以下5个步骤：
[0012](I)利用矢量作图软件绘制好所需的芯片微通道构型（I，样品区；2，空白对照区；3，甘油三酯检测区；4，微通道;纸材料）；为检测区和空白对照区直径为3 mm，加样品区直径为4 mm，微通道的管道为I mmXl mm。
[0013](2)利用热蜡打印机将绘制的芯片微通道构型矢量图，打印到定性滤纸上，得到用于甘油三酯检测的芯片。
[0014](3)甘油三酯检测液的配制：
[0015]I)混合显色剂为50 mmol/L 4-氨基安替吡啉(4-AAP)，50 mmol/L 3，5_二氯-2-羟基苯磺酸钠(DHBS)，置于4°C避光保存备用。
[0016]2)酶试剂为20 U/mL脂肪酶(LP)、20 U/mL甘油激酶(GK)、20 U/mL甘油3-磷酸氧化酶(GPO)，20 U/mL辣根过氧化酶(HRP)置于4°C避光保存备用。
[0017]3)反应液体系：4-AAP:DHBS ：HRP：LP：GK：GP0 按体积5:5:1:1:1:1混合后，使用移液枪吸取IyL滴加于甘油三酯检测区域。待进行样品检测时甘油三酯检测区域显橙红色。
[0018](4)用自动微量注射栗控制定量取5yL样品于样品区，经微通道流通至甘油三酯检测区，反应Smin后，使用扫描仪扫描得到芯片检测甘油三酯的显色图像，用Photoshop读取显色值。根据显色剂颜色的不同，即可测定甘油三酯的浓度。
[0019](5)血清样品中甘油三酯的测定：在pH值7.0，将50 mmol/L 4_AAP、50 mmol/LDHBS、20 U/mL HRP^20 U/mL LP、20 U/mL GK^20 U/mL GPO的显色体系按体积5:5:1:1:I ： I混合后，取I yL显色体系溶液滴加在甘油三酯检测区；再用自动微量注射栗控制定量加5此血清样品滴加到样品区，经微管道到达甘油三酯检测区反应10 min，显色后。利用扫描仪扫描得到芯片检测甘油三酯的显色图像，再利用Photoshop软件对检测区域显色进行数据处理，根据实验得出的标准曲线的回归方程即可计算血清样品中的甘油三酯的含量。
【主权项】
1.一种定量加样的甘油三酯检测芯片，包括纸芯片（5)，纸芯片(5)采用纸材料制成，其特征是：在纸芯片（5)上设有一个样品区（1)、一个空白对照区（2)和两个甘油三酯检测区(3)，纸芯片(5)的中心有一个样品区（1)，样品区（I)与自动微量注射栗(6)连接，通过自动微量注射栗(6)向样品区（I)中自动定量注射样品，空白对照区（2)通过微通道(4)与样品区(I)连通，在纸芯片(5)上的两个甘油三酯检测区（3)为并排设置，并排设置的两个甘油三酯检测区（3)分别通过微通道(4)与样品区（I)连通。
【专利摘要】本实用新型公开<b>一种定量加样的甘油三酯检测芯片</b>，包括纸芯片，纸芯片采用纸材料制成，其特征是：在纸芯片上设有一个样品区、一个空白对照区和两个甘油三酯检测区，纸芯片的中心有一个样品区，样品区与自动微量注射泵连接，通过自动微量注射泵向样品区中自动定量注射样品，空白对照区通过微通道与样品区连通，在纸芯片上的两个甘油三酯检测区为并排设置，并排设置的两个甘油三酯检测区分别通过微通道与样品区连通。本实用新型制作简便，检测快速，易被推广使用。
【IPC分类】G01N21/78
【公开号】CN205157441
【申请号】CN201520939794
【发明人】姜炜炜
【申请人】姜炜炜
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年11月21日