一种南方红豆杉组培苗的驯化移栽方法
【技术领域】
[0001]本发明属于红豆杉快速繁殖领域，具体涉及一种南方红豆杉组培苗的驯化移栽方法。
【背景技术】
[0002]南方红豆杉(Taxuschinensis var.maire i )为裸子植物，属于红豆杉科(Taxaceae)红豆杉属(Taxus)植物，常绿乔木或者灌木，雌雄异株植物。南方红豆杉为我国特有的第三纪孑遗植物，集观赏、药用及材用为一体的重要的资源植物。自20世纪70年代以来，从短叶红豆杉中提取分离得到天然抗癌产物紫杉醇以来，红豆杉作为一种重要的药用植物，其药用价值得到越来越多的认可。红豆杉除了具有抗肿瘤药理作用外，还具有如抗炎、抗菌、保肝、止痛、抗惊厥、降血糖、抗氧化、抗应变性、退热等多方面的药效(曹基武，等.中国南方红豆杉研究.中国林业出版社，2014，2-3)。南方红豆杉树皮中紫杉醇含量可达0.049%-0.069%，是该属中紫杉醇含量最高的一种(茹文明和铁军.南方红豆杉生态学研究.中国林业出版社，2012，I)。南方红豆杉自然繁殖能力较低，天然资源缺乏，加之利益所趋，南方红豆杉的滥砍滥伐现象屡禁不止，天然的红豆杉林数目越来越少，其已处于濒危状态，被视为国家一级保护植物。
[0003]红豆杉的繁殖主要有扦插繁殖和种子繁殖为主。南方红豆杉为浅根系植物，主根不发达，侧根水平展开，扩展面较广，易倒伏。而扦插繁殖植物根系无显著的主根，通过种子繁殖的植物具有明显的主根，根系发达，生长强健。因此南方红豆杉的种子繁殖具有较强的优势，但是红豆杉属植物种子因种皮结构由里到外包括蜡质层、木栓层、石细胞层等，这种坚硬致密的结构不利于种子的萌发和抑制种子萌发物质的散出和种胚的后熟，导致种子长时间的休眠，一般在自然条件下要经过两春一夏才能发芽。显然南方红豆杉植物在天然生境下依靠种子繁殖扩大其群体、拓展生存空间的演替是极其缓慢的(茹文明和铁军.南方红豆杉生态学研究.中国林业出版社，2012，I)。因此采用种子离体繁殖和微繁技术繁殖红豆杉是其重要的繁殖方式之一，目前红豆杉的组培苗获取已经取得了一定进展，但组培苗炼苗驯化移栽的研究还有提升空间。
[0004]影响红豆杉微繁种苗炼苗成活的因素除了种类因素以外，还与组培苗的质量、炼苗的基质、温度和炼苗过程中水分的管理、光照管理等因素有关。东北红豆杉的组培苗的不定根长到1.5厘米左右时，从瓶中取出，用1.2g/L的多菌灵溶液处理20分钟后，在恒温恒湿的条件下，分三周时间逐步降低培养温度和培养湿度，在以苔藓、珍珠岩和河沙的驯化基质中移栽驯化成活率分别为91 %,26%和73 % (程广有和王明启.东北红豆杉的微繁技术.东北林业大学学报，2000.28(2): 13-16)。采用营养钵(基质为河砂+泥炭的混合基质)移栽南方红豆杉的组培苗在温度为25°C、湿度为75%以上移栽30左右，植株成活率为90.1%，但文章没有详细交代营养钵中的培养基(唐道方，等.南方红豆杉的组织培养及植株再生研究，湖南农业科学，2008，( 2): 21 - 23)。将南方红豆杉茎段诱导出高约2cm健壮小苗转入DCR+NAA0.lmg/L培养基诱导生根，45天左右有根长出，待根长约0.5cm时，移栽至泥炭细沙混合培养基质中，在温度25 °C、65%以上湿度下栽培30天左右，逐渐加大光照强度，植株成活率可达57.3%(张圣喜，等.南方红豆杉茎段组织培养.中国农村小康科技.2010，6:35 - 36，52.)。南方红豆杉愈伤组织分化成苗后生根组培苗在河沙+泥炭的混合基质上成苗率可达95%以上(叶添谋和王羽梅.南方红豆杉组织培养育苗试验.福建林业科技，2008，35(3): 102 -105)。
[0005]由此可见，红豆杉不同种类、不同外植体起源、不同的驯化炼苗基质、不同的驯化移栽温度、湿度的控制等显著的影响红豆杉组培苗的驯化移栽成活率和成苗率。目前为止，还没有一种快速、简便的种胚离体萌发南方红豆杉组织苗的驯化移栽方法报道。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种南方红豆杉组培苗的驯化移栽方法，该方法快速、简便，移栽炼苗成活率高，可以实现南方红豆杉种苗的大规模化生产。
[0007]本发明的目的是通过以下方式实现的。
[0008]—种南方红豆杉组培苗的驯化移栽方法，包括以下步骤:
[0009](I)组培苗的选择:选择根系发育良好，I片以上真叶的南方红豆杉组培苗；
[0010](2)组培苗初步驯化:将组培容器带组培苗放入50%遮阳网的温室中3-5天，室内温度不超过35 °C ;
[0011](3)移栽容器及栽培基质的准备:选用育苗盒，往育苗盒孔穴中填充蛭石、草炭或者用无纺布包裹的新鲜椰糠；
[0012](4)移栽与炼苗:将组培苗植入步骤(3)中的栽培基质中间，浇足水分直到育苗盒穴盘的基质中有水溢出为止，合上育苗盒盖，放入带50%遮阳网的温室大棚中培养，环境温度不超过35°C，2周后打开育苗盒盖子进入常规的种苗生产管理模式。
[0013]所述步骤(3)炼苗移栽的基质为用无纺布包裹新鲜椰糠粉或者直接是蛭石，将基质填入育苗盒孔穴中，压平。
[0014]所述步骤(4)将组培苗植入步骤(3)中的栽培基质中间，水分一次性浇足后不需要再浇水。
[0015]所述方法中育苗盒盒盖高度25厘米；育苗盒的高度(不包括盒盖的高度)2 6厘米;配套穴盘的直径2 3厘米，穴盘深度与育苗盒的高度一致。孔穴数目和育苗盘的规格不受限制。
[0016]本发明具有以下优点:
[0017](I)本发明首次提供了一套基于南方红豆杉种胚离体萌发成苗的驯化移栽的完整操作流程；
[0018](2)本发明通过大量试验探索出适合用于南方红豆杉组培苗炼苗的基质，包括蛭石、草炭和用无纺布包裹新鲜椰糠粉三个种类，以及配套的育苗盒装置；
[0019](3)与现有的红豆杉组培苗炼苗技术相比，一次移栽炼苗成活率高，无需繁琐的温度和水分管理方面的工作；
[0020](4)与现有技术相比，本发明炼苗时间短，炼苗后方便移栽，且适合物联网模式的种苗销售。
[0021](5)本发明可以实现南方红豆杉种苗的大规模化生产。
【附图说明】
[0022]图1是采用本发明获得南方红豆杉组培苗的驯化移栽方法的部分过程；
[0023]其中图A南方红豆杉种胚离体萌发形成的组培苗；
[0024]B南方红豆杉初步驯化后准备移栽；
[0025]C-D南方红豆杉组培苗蛭石-育苗盒体系炼苗移栽21天，驯化移栽成活率100%;
[0026]E-F南方红豆杉组培苗无纺布包裹新鲜椰糠-育苗盒体系炼苗移栽21天，驯化移栽成活率100% ；
[0027]G-H南方红豆杉组培苗草炭-育苗盒体系炼苗移栽21天，驯化移栽成活率91.67% ;
[0028]1-J南方红豆杉组培苗珍珠岩-育苗盒体系炼苗移栽2 I天，驯化移栽成活率66.66% ;南方红豆杉叶片颜色在生长后期偏黄；
[0029]K-L南方红豆杉组培苗园土-育苗盒体系炼苗移栽21天，驯化移栽成活率0% ;
[0030]M-N南方红豆杉组培苗河沙-育苗盒体系炼苗移栽21天，驯化移栽成活率33.33%;南方红豆杉叶片颜色在生长后期偏黄。
【具体实施方式】
[0031]以下实施例旨在进一步说明本发明，而不会限制本发明。
[0032]优选实施例1
[0033](I)组培苗的选择:选择根系发育良好，I片以上真叶的南方红豆杉组培苗；
[0034](2)组培苗初步驯化:将组培容器带组培苗放在温室中3 - 5天；
[0035](3)移栽容器及栽培基质的准备:选用育苗盒，往育苗盒孔穴中填充蛭石；
[0036](4)移栽与炼苗:将组培苗植入步骤(3)中的栽培基质中间，浇足水分，合上育苗盒盖，放入带50%遮阳网的温室大棚中培养，环境温度不超过35°C，2周后可以打开育苗盒盖子进入常规的种苗生产管理模式，组培苗移栽成活率在100%。
[0037]优选实施例2
[0038](I)组培苗的选择:选择根系发育良好，I片以上真叶的南方红豆杉组培苗；
[0039](2)组培苗初步驯化:将组培容器带组培苗放在温室中3 - 5天；
[0040](3)移栽容器及栽培基质的准备:选用育苗盒，往育苗盒孔穴中填充草炭；
[0041](4)移栽与炼苗:将组培苗植入步骤(3)中的栽培基质中间，浇足水分，合上育苗盒盖，放入带50%遮阳网的温室大棚中培养，环境温度不超过35°C，2周后可以打开育苗盒盖子进入常规的种苗生产管理模式，组培苗移栽成活率在91.67%。
[0042]优选实施例3
[0043](I)组培苗的选择:选择根系发育良好，I片以上真叶的南方红豆杉组培苗；
[0044](2)组培苗初步驯化:将组培容器带组培苗放在温室中3 - 5天；
[0045](3)移栽容器及栽培基质的准备:选用育苗盒，往育苗盒孔穴中填充无纺布包裹新鲜椰糠粉；
[0046](4)移栽与炼苗:将组培苗植入步骤(3)中的栽培基质中间，浇足水分，合上育苗盒盖，放入带50%遮阳网的温室大棚中培养，环境温度不超过35°C，2周后可以打开育苗盒盖子进入常规的种苗生产管理模式，组培苗移栽成活率在100%。
【主权项】
1.一种南方红豆杉组培苗的驯化移栽方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)组培苗的选择:选择根系发育良好，I片以上真叶的南方红豆杉组培苗； (2)组培苗初步驯化:将组培容器带组培苗放入50%遮阳网的温室中3 - 5天； (3)移栽容器及栽培基质的准备:选用育苗盒，往育苗盒孔穴中填充蛭石、草炭或者用无纺布包裹的新鲜椰糠； (4)移栽与炼苗:将组培苗植入步骤(3)中的栽培基质中间，浇足水分直到育苗盒穴盘的基质中有水溢出为止，合上育苗盒盖，放入带50%遮阳网的温室大棚中培养，环境温度不超过35°C，2周后打开育苗盒盖子进入常规的种苗生产管理模式。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于， 所述步骤(3)炼苗移栽的基质为用无纺布包裹新鲜椰糠粉或者直接是蛭石，将基质填入育苗盒孔穴中，压平。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于， 所述步骤(4)将组培苗植入步骤(3)中的栽培基质中间，水分一次性浇足后不需要再浇水。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，育苗盒盒盖高度I5厘米;育苗盒的高度I6厘米;配套穴盘的直径I 3厘米。
【专利摘要】本发明公开了一种南方红豆杉组培苗驯化移栽的方法。包括：(1)组培苗的选择：选择根系发育良好，1片以上真叶的南方红豆杉组培苗；(2)组培苗初步驯化：将组培容器带组培苗放在温室中3‐5天；(3)移栽容器及栽培基质的准备：选用育苗盒，往育苗盒孔穴中填充蛭石、草炭或者用无纺布包裹的新鲜椰糠；(4)移栽与炼苗：将组培苗植入(3)中的栽培基质中间，浇足水分，合上育苗盒盖，放入带50％遮阳网的温室大棚中培养，环境温度不超过35℃，2周后可以打开育苗盒盖子进入常规的种苗管理模式，组培苗移栽成活率最高达100％。本发明克服了现有技术的不足，操作简单、成本低、育苗盒可以重复利用、高效稳定的方法。
【IPC分类】A01G9/10, A01H4/00
【公开号】CN105638462
【申请号】
【发明人】李炎林, 熊兴耀, 李莉
【申请人】湖南农业大学
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2015年12月30日