一种定量加样的胆固醇检测芯片的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型属于检测技术领域，涉及一种定量加样的胆固醇检测的芯片。
【背景技术】
[0002]芯片技术是将生物或化学的基本操作单元集成到一块芯片上完成。因其生物试样消耗少，分析速度快，费用低等特点，已在医药、化学及生命科学等领域得到快速发展。
[0003]目前传统芯片材料主要集中在石英、玻璃材料及高分子聚合物等。纸具有生物相容性好、成本低、操作简单等特点，成为芯片制作的新型材料，将在快速检测及监控等领域具有潜在应用价值。
[0004]本实用新型基于纸制芯片，结合胆固醇氧化酶、胆固醇酯水解酶、辣根过氧化物酶及其底物的显色体系，提供了一种定量加样的用于胆固醇检测的新技术。
【发明内容】
[0005]本实用新型目的是提出了一种能定量加样的胆固醇检测芯片。
[0006]本实用新型所采用的技术方案是:本实用新型的一种定量加样的胆固醇检测芯片，包括纸材料片，所述的纸材料片为方形，其特征是:在方形纸材料片上设置有一个样品区、一个空白对照区和两个胆固醇检测区;方形纸材料片的中心有样品区，样品区与自动微量注射栗连接，通过自动微量注射栗向样品区中自动定量注射样品，空白对照区通过样品流通微通道与样品区连通，在方形纸材料片上的两个胆固醇检测区为并排设置，并排设置的两个胆固醇检测区分别通过样品流通微通道与样品区连通。
[0007]本实用新型的有益效果为:本实用新型基于纸制芯片，结合胆固醇氧化酶、胆固醇酯水解酶、辣根过氧化物酶及其底物的显色体系，提供了一种定量加样的用于胆固醇检测的新技术，可用于医学快速诊断、食品安全等领域研究。
【附图说明】
[0008]图1为本实用新型的结构示意图。
[0009]图中:I，样品区；2，空白对照区；3，胆固醇检测区；4，样品流通微通道;5，纸材料片;6，自动微量注射栗。
【具体实施方式】
[0010]如图1所示，本实用新型所述的一种定量加样的胆固醇检测芯片，包括纸材料片5，纸材料片为方形，其特征是:在方形纸材料片5上设置有一个样品区1、空白对照区2和2个胆固醇检测区3;方形纸材料片5的中心有样品区I，样品区I与自动微量注射栗6连接，通过自动微量注射栗6向样品区I中自动定量注射样品，空白对照区2通过样品流通微通道4与样品区I连通，在方形纸材料片5上的2个胆固醇检测区3为并排设置，并排设置的2个胆固醇检测区3分别通过样品流通微通道4与样品区I连通;检测时，通过自动微量注射栗将5yL样品注入样品区，经样品流通微通道4流通至胆固醇检测区3，反应Smin后，使用扫描仪扫描得到芯片检测胆固醇的显色图像，用Photoshop读取显色值。根据显色剂颜色的不同，即可测定胆固醇的浓度。
[0011]本实用新型所提供的芯片制作分为以下5个步骤:
[0012](I)利用矢量作图软件绘制好所需的芯片微通道构型(I，样品区；2，空白对照区；3，胆固醇检测区；4，样品流通微通道;5，纸材料片)；为检测区和空白对照区直径为3 mm,加样品区直径为4 _，微通道的管道为I _X1 mm。
[0013](2)利用热蜡打印机将绘制的芯片微通道构型矢量图，打印到定性滤纸上，得到用于胆固醇检测的芯片。
[0014](3)胆固醇检测液的配制:
[0015]I)混合显色剂为50 mmol/L 4-氨基安替吡啉(4-AAP)，50 mmol/L N-乙基-N_(3_磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOPS)，置于4°C避光保存备用；。
[0016]2)酶试剂为20 U/mL胆固醇酯水解酶(CEH)、10 U/mL胆固醇氧化酶(COD)，20 U/mL辣根过氧化酶(HRP)置于4°C避光保存备用。
[0017]3)反应液体系:4-AAP:TOPS:HRP:COD:CEH按体积5:5:1:1:1混合后，使用自动微量注射栗将IyL注射于胆固醇检测区域。待进行样品检测时胆固醇检测区域显蓝紫色。
[0018](4)通过自动微量注射栗将5yL样品注入样品区，经样品流通微通道4流通至胆固醇检测区3，反应Smin后，使用扫描仪扫描得到芯片检测胆固醇的显色图像，用Photoshop读取显色值。根据显色剂颜色的不同，即可测定胆固醇的浓度。
[0019](5)血清样品中胆固醇的测定:在pH值7.0，将50 mmol/L 4-AAP,50 mmol/L TOPS、20 U/mL HRP、10 U/mL COD、20 U/mLCEH的显色体系按体积5:5:1:1:1混合后，取I yL显色体系溶液滴加在胆固醇检测区;再用自动微量注射栗控制定量加5此血清样品滴加到样品区，经微管道到达胆固醇检测区反应10 min，显色后。利用扫描仪扫描得到芯片检测胆固醇的显色图像，再利用Photoshop软件对检测区域显色进行数据处理，根据实验得出的标准曲线的回归方程即可计算血清样品中的胆固醇的含量。
【主权项】
1.一种定量加样的胆固醇检测芯片，包括纸材料片(5)，所述的纸材料片为方形，其特征是:在方形纸材料片(5)上设置有一个样品区(1)、一个空白对照区(2)和两个胆固醇检测区(3);方形纸材料片(5)的中心有样品区(1)，样品区(I)与自动微量注射栗(6)连接，通过自动微量注射栗(6 )向样品区(I)中自动定量注射样品，空白对照区(2 )通过样品流通微通道(4)与样品区(I)连通，在方形纸材料片(5)上的两个胆固醇检测区为并排设置，并排设置的两个胆固醇检测区(3)分别通过样品流通微通道(4)与样品区连通。
【专利摘要】本实用新型公开<b>一种定量加样的胆固醇检测芯片</b>，包括纸材料片，所述的纸材料片为方形，其特征是：在方形纸材料片上设置有一个样品区、一个空白对照区和两个胆固醇检测区；方形纸材料片的中心有样品区，样品区与自动微量注射泵连接，通过自动微量注射泵向样品区中自动定量注射样品，空白对照区通过样品流通微通道与样品区连通，在方形纸材料片上的两个胆固醇检测区为并排设置，并排设置的两个胆固醇检测区分别通过样品流通微通道与样品区连通。本实用新型制作简便，检测快速，易被推广使用。
【IPC分类】G01N21/78
【公开号】CN205301178
【申请号】
【发明人】姜炜炜
【申请人】姜炜炜
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2015年11月21日