专利名称：一种沼虾类人工种间杂交方法
技术领域：
本发明涉及虾类育种技术，更确切地说是一种应用精荚移植进行沼虾类种间杂交的方法。
鱼类受精卵离体发育，完全不依赖母体，人工授精时，只需将成熟的卵和精子分别挤出，然后混合在一起即可，因此杂交较方便。
虾类中的对虾不抱卵，卵子受精后即分散于水中自行发育，其繁殖方式与鱼类有类似之处；另一方面，雌雄对虾在繁殖时间方面不需要严格配合，可提前数月将雄虾精荚植入雌虾纳精囊中。正因为如此，在虾类中，对虾的种间杂交率先取得突破。
沼虾类为抱卵虾，其繁殖方式非常特殊(1)沼虾类雄虾必须在雌虾出现生殖蜕皮几小时内与其交配，时间上要求雌雄严格配合；(2)对虾雌性腹部有纳精囊，便于精荚的储存，而沼虾类无纳精囊，精荚必须粘在腹部体表；(3)沼虾类受精卵粘于母虾腹部，整个发育过程都不能离开母体，即具有抱卵现象。Sandifer&Smith(1979)曾尝试沼虾类的种间杂交，但未取得成功。Grazianid等(2002)也探索了沼虾类的人工种间杂交，同样未取得成功。长期以来，沼虾类的人工种间杂交一直是一个未能攻克的难题。
我国大多数淡水经济虾类都属于沼虾，如青虾、罗氏沼虾、海南沼虾等，近年来，随着养殖业的高速发展，生产规模和养殖产量急剧增加，集约化程度不断提高，青虾等淡水养殖虾类出现严重的品种退化，养殖效益急剧下降，严重威胁淡水虾类养殖业的发展。要实现淡水虾类养殖的可持续发展，必须从品种改良着手。
实现本发明目的的主要技术方案将不同种的雌雄亲虾配对养殖，性激素催情，雌虾出现生殖脱皮时，将雄虾的精荚取出，粘贴在雌虾腹部第四对步足与第五对步足之间，然后雌虾单独养殖，待其产卵，完成抱卵后转入孵化缸饲养，直至孵出杂交虾苗。
本发明的沼虾类人工种间杂交方法包括以下步骤(1)挑选亲本挑选出个体大而健壮、无病害、无伤残、体表无寄生物、营养状况良好的成虾作亲本，雌虾头部背面应部分或全部充满生殖腺，雄虾头部两侧应可见白色生殖腺团；(2)催情将雌雄亲虾按1∶3-5配对放入水深为25-35cm的水族箱中饲养，在青虾配合饲料中添加30-90ppm的鱼用激素LH-RH-A，并按青虾配合饲料∶猪肝∶猪肾∶螺丝肉∶土豆丝＝2∶0.5∶0.5∶1∶1的比例投喂，每天上午800、下午400和晚上900各喂一次，每次投喂量为虾总重的5-8％，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，维持水温22-29℃，水体溶氧量保持在5毫克/升以上，并放置一些树枝作为隐蔽物，所述的水族箱的尺寸为长×宽×高＝100×50×60cm，并靠南窗摆放，每天照射2-3小时阳光；(3)人工授精即精荚移植当发现雌虾生殖蜕皮时，待其完成生殖蜕皮后，将雌虾捞出，用滤纸吸干体表水份，然后选出发育成熟的雄虾，同样用滤纸吸干其体表水份，用镊子将雄虾的精荚挤出，并将精荚粘贴到雌虾腹部的第四对步足与第五对步足之间，静置，放入抱卵缸；(4)抱卵将人工授精的雌虾在水深15-25cm的抱卵缸中单独饲养，一虾一缸，不得与雄虾混养，保持水质清爽，增氧泵24小时增氧，投喂青虾配合饲料、螺丝肉和土豆丝，其配比为2∶2∶1(重量)，每天上午800和晚上600各喂一次，每次投喂量为母虾体重的5-8％，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，水温维持22-29℃，12-72小时移植精荚的雌虾产卵并抱卵，所述的抱卵缸尺寸为长×宽×高＝50×30×35cm；(5)孵化将抱卵的雌虾转水深15-25cm的孵化缸单独饲养并进行孵化，维持水温22-29℃，溶氧量保持在5毫克/升以上，投喂青虾配合饲料、螺丝肉和土豆丝，其配比为1∶1∶1(重量)，每天上午800、下午400和晚上900各喂一次，每次投喂量为母虾体重的5-8％，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，10-20天孵出杂交虾苗，所述的孵化缸尺寸为长×宽×高＝60×30×35cm。
所述的LH-RH-A，中文名为促黄体释放激素，D-丙氨酸类似物，是上海丽珠东风生物科技股份有限公司生产。
所述的青虾配合饲料为宁波天邦饲料科技股份有限公司生产。
本发明的优点和效果本发明是沼虾类人工种间杂交的首次突破，不仅具有巨大的理论意义，而且为淡水虾类的杂交育种奠定了基础，可望由此培养出优良的虾类新品种，提高虾类养殖的经济效益，促进我国水产养殖业健康、稳定、持续的发展。
具体实施例方式
下面通过具体实例进一步对本发明作详细说明。
实例1雌性亲虾为青虾，体长5.5-7cm，头部背面充满生殖腺，颜色发绿，雄性亲虾为海南沼虾，体长5-7cm，头部两侧可见白色生殖腺团；LH-RH-A催情剂量为60ppm，水温控制在22-29℃，7天后雌虾出现生殖蜕皮；雌虾生殖蜕皮后约6小时完成精荚移植，放回水中饲养；在26-27℃水温下，精荚移植后45小时，雌虾产卵并抱卵；抱卵雌虾在22-29℃水温下孵化，13天后孵出杂交虾苗约500尾。
实例2雌性亲虾为青虾，体长5.5-7cm，头部背面充满生殖腺，颜色发绿，雄性亲虾为海南沼虾，体长5-7cm，头部两侧可见白色生殖腺团；LH-RH-A催情剂量为40ppm，水温控制在22-29℃，10天后雌虾出现生殖蜕皮；雌虾生殖蜕皮后约8小时完成精荚移植，放回水中饲养；在27-29℃水温下，精荚移植后36小时，雌虾产卵并抱卵；抱卵雌虾在22-29℃水温下孵化，15天后孵出杂交虾苗约1200尾。
实例3雌性亲虾为青虾，体长6-7.5cm，头部背面充满生殖腺，颜色发绿，雄性亲虾为海南沼虾，体长6-7cm，头部两侧可见白色生殖腺团；LH-RH-A催情剂量为80ppm，水温控制在22-29℃，5天后雌虾出现生殖蜕皮；雌虾生殖蜕皮后约5小时完成精荚移植，放回水中饲养；在27-28℃水温下，精荚移植后28小时，雌虾产卵并抱卵；抱卵雌虾在22-29℃水温下孵化，10天后孵出杂交虾苗约2300尾，杂种一代已发育至成体，其形态介于双亲之间，同工酶电泳分析表明杂种虾中有双亲基因的表达。
权利要求
1.一种沼虾类人工种间杂交方法，其特征在于包括以下过程(1)挑选亲本挑选出个体大而健壮、无病害、无伤残、体表无寄生物、营养状况良好的成虾作亲本，雌虾头部背面应部分或全部充满生殖腺，雄虾头部两侧应可见白色生殖腺团；(2)催情将雌雄亲虾按1∶3-5配对放入水深为25-35cm的水族箱中饲养，在青虾配合饲料中添加30-90ppm的鱼用激素LH-RH-A，并按青虾配合饲料∶猪肝∶猪肾∶螺丝肉∶土豆丝＝2∶0.5∶0.5∶1∶1的比例投喂，每天上午800、下午400和晚上900各喂一次，每次投喂量为虾总重的5-8％，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，维持水温22-29℃，水体溶氧量保持在5毫克/升以上，并放置一些树枝作为隐蔽物，所述的水族箱的尺寸为长×宽×高＝100×50×60cm，并靠南窗摆放，每天照射2-3小时阳光；(3)人工授精即精荚移植当发现雌虾生殖蜕皮时，待其完成生殖蜕皮后，将雌虾捞出，用滤纸吸干体表水份，然后选出发育成熟的雄虾，同样用滤纸吸干其体表水份，用镊子将雄虾的精荚挤出，并将精荚粘贴到雌虾腹部的第四对步足与第五对步足之间，静置，放入抱卵缸；(4)抱卵将人工授精的雌虾在水深15-25cm的抱卵缸中单独饲养，一虾一缸，不得与雄虾混养，保持水质清爽，增氧泵24小时增氧，投喂青虾配合饲料、螺丝肉和土豆丝，其重量配比为2∶2∶1，每天上午800和晚上600各喂一次，每次投喂量为母虾体重的5-8％，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，水温维持22-29℃，12-72小时移植精荚的雌虾产卵并抱卵，所述的抱卵缸尺寸为长×宽×高＝50×30×35cm；(5)孵化将抱卵的雌虾转水深15-25cm的孵化缸单独饲养并进行孵化，维持水温22-29℃，溶氧量保持在5毫克/升以上，投喂青虾配合饲料、螺丝肉和土豆丝，其重量配比为1∶1∶1重量，每天上午800、下午400和晚上900各喂一次，每次投喂量为母虾体重的5-8％，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，10-20天孵出杂交虾苗，所述的孵化缸尺寸为长×宽×高＝60×30×35cm。
全文摘要
本发明是一种沼虾类人工种间杂交方法，其特点是将不同种的雌雄亲虾配对养殖，性激素催情，雌虾出现生殖蜕皮时，将雄虾的精荚取出，粘贴于雌虾腹部第四对步足与第五对步足之间，然后雌虾单独养殖，待其产卵，完成抱卵后，将抱卵雌虾转入孵化缸养殖，直至孵出杂交虾苗。本发明首次攻克了沼虾类人工种间杂交的难题，不仅具有重要的理论意义，而且为沼虾类的杂交育种提供了一条可行的途径，可望由此培育出优良的虾类新品种，提高虾类养殖的经济效益，促进我国水产养殖业健康、稳定、持续的发展。
文档编号A01K61/00GK1463596SQ0212156
公开日2003年12月31日 申请日期2002年6月26日 优先权日2002年6月26日
发明者傅洪拓, 龚永生, 吴滟, 徐跑 申请人:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心