专利名称：金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂的方法
技术领域：
本发明涉及食品技术领域，尤其是金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂的方法。
背景技术：
金耳(Tremella aurantialba Bandoni et Zang)为担子菌纲银耳目银耳科银耳属的食药两用真菌，主要分布于我国西南地区，金耳人工栽培已成功(包括段木、袋料栽培)。
用金耳子实体和混合菌株[金耳(Tremella aurantialba Bandoni et Zang)和毛韧革菌(Stereum hirsutum(willdFr.)S.F.Gray)]发酵生产的金耳多糖、金耳食品和食品添加剂已逐步投放市场。由于栽培技术及森林保护方面的原因，没有足够的金耳子实体或子实体加工产品提供市场。而用混合菌株发酵生产金耳食品或食品添加剂时，由于金耳菌丝生长较弱，毛韧革菌占优势，混合菌株发醇生产的产品以毛韧革菌为主，金耳少。
发明内容
本发明的目的在于解决金耳产品生产中存在的问题，提供一种针对金耳酵母状孢子生长的条件、通过深层发酵技术提高金耳产量并生产出包括多糖在内的金耳食品或食品添加剂的方法。
本发明通过孢子分离得到的酵母状(yeast-like)孢子的金耳菌株，yaasm-17，以酵母状的金耳菌株为生产菌株，通过深层发酵技术生产金耳食品和食品添加剂。通过发酵可生产具生物活性的金耳胞内和胞外多糖。深层发酵的产品匀浆处理后可制成营养丰富的食品或食品添加剂。具体方法下按以下步骤进行，所用原料按重量百分比计1)金耳酵母状孢子菌种的培养将金耳酵母状孢子接种在改进的PDA培养基斜面上20～28℃培养7～10天，改进PDA培养基为10％马铃薯煮液加0.05～0.2％酵母粉或膏，0.05～0.2％蛋白胨，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁，2％葡萄糖或蔗糖；2)金耳酵母状菌株液体种子的培养在5～10％黄豆粉，5～10％玉米粉，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入试管种，20～28℃ 100～300rpm摇床培养3～10天。
3)金耳酵母状孢子的摇床培养在5～15％黄豆粉，5～15％玉米粉，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入培养基量的5～10％的上一步所得种子，20～28℃、100～300rpm摇床培养5～8天。
4)金耳的发酵罐培养在5～15％黄豆粉，5～15％玉米粉，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀装在发酵罐中灭菌后冷却，接入培养基量的5～10％的上一步所得种子，通气0.5～2L/min，100～300rpm搅拌20～28℃培养5～8天。
5)将摇床或发酵罐生长的发酵液收集后，进行匀浆处理，加工成金耳食品或食品添加剂。
以上所述的金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂的方法是1、金耳饮料的制备是将摇床或发酵罐生长的发酵液收集进行匀浆处理后，直接加工成金耳饮料或作饮料的辅料。
2、金耳食品添加剂的制备是将摇床或发酵罐生长的发酵液收集后进行匀浆处理，匀浆液干燥后得乳白色粉末的金耳食品添加剂。
3、金耳多糖的提取是将下罐后的发酵液静置12～24小时，进行煮沸处理，过滤，煮沸滤液用真空进行浓缩，浓缩至原体积的20％左右时，浓缩液加2倍体积95％的酒精，搅拌均匀后静置12小时，收集沉淀，干燥后得乳白色粉末的金耳多糖。
本发明克服了现有技术存在的缺陷，解决了用混合菌株发酵生产的金耳产量低，原料不足的问题。用本发明的发酵技术生产金耳食品和食品添加剂大大提高了产时，同时减少了加工金耳食品和食品添加剂原料的用量，通过本发明生产的金耳多糖质量上乘，加工的食品和食品添加剂有独特的乳香味。
具体实施例方式
(所用百分比均为重量百分比)
实施例1培养1)金耳酵母状菌株的试管种培养金耳酵母状孢子接种在改进的PDA培养基斜面上25℃培养7天，改进PDA培养基为10％马铃薯煮液加0.05％酵母粉、0.05％蛋白胨、0.05％磷酸氢二钾(K2HPO4)、0.05％硫酸镁(MgSO4)、2％葡萄糖。
2)金耳酵母状菌株的液体种子培养在5％黄豆粉、5％玉米粉、0.05％磷酸氢二钾、0.05％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入试管种，20℃ 100rpm摇床培养10天。
3)金耳酵母状菌株的摇床培养在10％黄豆粉、10％玉米粉、0.05％磷酸氢二钾、0.05％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入培养基量的5％的上一步(培养)所得种子，20℃ 100rpm摇床培养8天。
4)金耳酵母状菌株的发酵罐培养在10％黄豆粉、10％玉米粉、0.05％磷酸氢二钾、0.05％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀装在发酵罐中灭菌后冷却，接入培养基量的5％的上一步(培养)所得种子，通气0.5L/min，100rpm搅拌20℃培养8天。
实施例2培养1)金耳酵母状菌株的试管种培养金耳酵母状孢子接种在改进的PDA培养基斜面上25℃培养7天，改进PDA培养基为10％马铃薯煮液加0.2％酵母膏、0.2％蛋白胨、0.1％磷酸氢二钾、0.1％硫酸镁、2％蔗糖。
2)金耳酵母状菌株的液体种子培养在10％黄豆粉、10％玉米粉、0.2％磷酸氢二钾、0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入试管种，28℃ 300rpm摇床培养3天。
3)金耳酵母状菌株的摇床培养在15％黄豆粉、15％玉米粉、0.2％磷酸氢二钾、0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入培养基量的10％的上一步(培养)所得种子，28℃ 300rpm摇床培养3天。
4)金耳酵母状菌株的发酵罐培养在15％黄豆粉、15％玉米粉、0.2％磷酸氢二钾、0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀装在发酵罐中灭菌后冷却，接入培养基量的10％的上一步(培养)所得种子，通气2L/min，300rpm搅拌28℃培养5天。
实施例3金耳饮料将实施例1、2中摇床或发酵罐生长的发酵液收集后，进行匀浆处理，匀浆液用离心或过滤的方法收集清液，清液含多种多糖、蛋白质及矿物元素，可直接加工成金耳饮料或作饮料的辅料，加工的饮料为乳白色，不加糖的情况下有一定甜度，具乳香味。
实施例4金耳添加剂将实施例1、2中摇床或发酵罐生长的发酵液收集后进行匀浆处理，匀浆液含多种多糖、蛋白质及矿物元素，匀浆液干燥后为乳白色粉末(金耳添加剂)，干粉以5～10％的比例加入到面粉中加工面包、蛋糕、饼干等面食，生产的面食营养丰富，具乳香味，口感好。
实施例5提取金耳多糖将实施例1、2中下罐后的发酵液静置12-24小时，进行煮沸处理，煮沸液板筐过滤或离心的办法收集滤液，滤液较粘，含糖量较高，滤液用真空进行过滤，浓缩至原体积的20％左右时，浓缩液加2倍体积95％的酒精，搅拌均匀后静置12小时，用过滤或离心的办法收集沉淀，干燥后的乳白色粉末为金耳多糖(粗多糖)，粗多糖以粘多糖为主。
权利要求
1.一种金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂方法，其特征在于按以下步骤进行，所用原料按重量百分比计1)金耳酵母状孢子菌种的培养将金耳酵母状孢子接种在改进的PDA培养基斜面上20～28℃培养7～10天，改进PDA培养基为10％马铃薯煮液加0.05～0.2％酵母粉或膏，0.05～0.2％蛋白胨，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁，2％葡萄糖或蔗糖；2)金耳酵母状菌株液体种子的培养在5～10％黄豆粉，5～10％玉米粉，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入试管种，20～28℃100～300rpm摇床培养3～10天。3)金耳酵母状孢子的摇床培养在5～15％黄豆粉，5～15％玉米粉，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入培养基量的5～10％的上一步所得种子，20～28℃、100～300rpm摇床培养5～8天。4)金耳的发酵罐培养在5～15％黄豆粉，5～15％玉米粉，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀装在发酵罐中灭菌后冷却，接入培养基量的5～10％的上一步所得种子，通气0.5～2L/min，100～300rpm搅拌20～28℃培养5～8天。5)将摇床或发酵罐生长的发酵液收集后，进行匀浆处理，加工成金耳食品或食品添加剂。
2.根据权利要求1所述的金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂方法，其特征在于金耳饮料的制备是将摇床或发酵罐生长的发酵液收集进行匀浆处理后，直接加工成金耳饮料或作饮料的辅料。
3.根据权利要求1所述的金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂方法，其特征在于金耳食品添加剂的制备是将摇床或发酵罐生长的发酵液收集后进行匀浆处理，匀浆液干燥后得乳白色粉末的金耳食品添加剂。
4.根据权利要求1所述的金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂方法，其特征在于金耳多糖的提取是将下罐后的发酵液静置12～24小时，进行煮沸处理，过滤，煮沸滤液用真空进行浓缩，浓缩至原体积的20％左右时，浓缩液加2倍体积95％的酒精，搅拌均匀后静置12小时，收集沉淀，干燥后得乳白色粉末的金耳多糖。
全文摘要
本发明是一种金耳酵母状孢子发酵生产食品和食品添加剂方法。其特征在于按以下步骤进行经金耳酵母状孢子菌种的培养、金耳酵母状菌株液体种子的培养、金耳酵母状孢子的摇床培养、金耳的发酵罐培养后，将摇床或发酵罐生长的发酵液收集后，进行匀浆处理，加工成金耳食品或食品添加剂。本发明克服了现有技术存在的缺陷，解决了用混合菌株发酵生产的金耳产量低，原料不足的问题。用本发明的发酵技术生产金耳食品和食品添加剂大大提高了产时，同时减少了加工金耳食品和食品添加剂原料的用量，通过本发明生产的金耳多糖质量上乘，加工的食品和食品添加剂具有独特的乳香味。
文档编号A01G1/04GK1561667SQ20041002237
公开日2005年1月12日 申请日期2004年4月21日 优先权日2004年4月21日
发明者赵永昌, 柴红梅, 杨志力, 李树红 申请人:云南省农业科学院