专利名称：蕈类粉碎水平评价方法、蕈类提取物及其提取方法
技术领域：
本发明涉及以灵芝(Ganoderma lucidum)为主的蕈类的粉碎水平的评价方法、蕈类提取物的提取方法、蕈类提取物制品的制备方法、提取物粉末的制备方法、蕈类的提取物、蕈类提取物制品、蕈类提取物胶囊。
背景技术：
灵芝是也被称作吉祥茸的蕈类，中国名叫作灵芝，以前被作为壁龛的装饰品等欣赏用。
近年来，灵芝的药效受到关注。灵芝以颗粒、片剂等的形式被提供作为健康补助食品。
栽培灵芝，是将锯屑、米糠、麦糠等混合成的物质(将此称作培养基)充填到培养袋和广口瓶等容器内后，在该培养基上接种种菌，将其培养一定期间。而后，菌(菌丝)在容器内的培养基上蔓延，得到所谓的菌床。将该菌床维持在规定范围内的湿度·温度·照度环境下，从菌床中长出灵芝的子实体。将上述环境再维持一定期间，使子实体生育成所需要的大小。而后，收获生育的子实体后，经过粉碎、提取物提取、粉末化的工序，制成颗粒、片剂、胶囊等形式的健康补助食品。
可是，这种粉碎工序等中，作为控制子实体的粉碎水平的尺度，以往例如使用“2～20mm”的长度、粒径、筛的筛孔尺寸等(例如，参照特开平9-56362号公报(第3页，段落 )、特开2003-212788号公报(权利要求1等)、特开平5-139989号公报(权利要求1等))。
但是，像灵芝这种由菌丝的集合体构成的物质，即使粉碎也难以将纤维完全破坏。因此，粉碎的粉碎物不是近似球状、块状的形状，而是变成针状或纤维缠绕样的棉状等异形(不规则形状)。
因此，说到测定长度，也难以按异形粉碎物的长度方向准确测定。使用粒径时，也难以用粒度分布计准确测定异形的测定对象物(粉碎物)的粒径。使用筛孔尺寸时，实际上是判定是否通过具有规定筛孔尺寸的筛，由于针状粉碎物根据其方向通过或不通过筛孔，所以使用该方法也难以准确评价。
这样，实际情况是，在现有技术中，难以准确评价粉碎物的粉碎水平，还不能说实质上控制了粉碎水平。灵芝等的场合，由于粉碎物的粉碎水平影响得到的有效成分的收率，所以可以说有效成分的收率有提高的余地。
另外，由这种不能控制粉碎水平的粉碎物制备的颗粒、片剂、胶囊等，还不能断言质量十分稳定。
而且，从粉碎物中提取了有效成分的提取物后的残渣，也可能混杂粒大的物质。因此，含有残渣的提取物直接作为食品摄取时，由于咽下时等有不适感，所以不适用。
本发明是基于这样的技术课题而完成的，目的是提供能够准确评价灵芝的粉碎水平、可以提高有效成分的收率的蕈类的粉碎水平的评价方法、蕈类提取物的提取方法、蕈类提取物制品的制备方法等。
另外，另一目的是通过准确评价灵芝的粉碎水平，提供具有有效成分的高收率的蕈类的提取物、蕈类提取物制品。
另外，在现有技术中，如上所述，由于难以准确评价粉碎物的粉碎水平，由粉碎物形成胶囊和片剂形式的制品时，有时也发生以下不理想的情况。
通常，胶囊和片剂使用规定重量的粉碎物成型。因此，例如，粉碎进行不充分的场合，由于粉碎物是针状或纤维缠绕样的棉状等，体积增大，不能将规定重量的粉碎物充填到胶囊中，或者虽然能充填到胶囊中，胶囊的帽也合不上，或无法压片等。
因此，准确评价粉碎物的粉碎水平，在成型为最终的胶囊和片剂制品的过程中非常重要。但是，如上所述，现状是用现有的方法不能准确评价粉碎水平。
为了提高胶囊的充填性，优选提高粉末的流动性。因此，通常，为了提高流动性，多数是在粉末中添加润滑剂、赋形剂。但是，如果加入添加物，由于不能只用灵芝的成分制备制品，所以采取这种方法不理想。
本发明是基于这样的技术课题而完成的，目的是提供能够控制灵芝等的子实体的粉碎水平、可以稳定制备胶囊和片剂等制品的蕈类提取物制品的制备方法、提取物粉末的制备方法等。
提取物提取的工序中，使用水、醇或含水醇，进行水溶性、醇可溶性有效成分的提取。
例如，在特开2003-235502号公报所述的技术中，在灵芝子实体的粉碎物中加入冷含水醇，提取含水醇可溶性成分。另外，在专利第3128147号公报所述的技术中，将通过非极性溶剂提取处理灵芝后的提取残渣用热水或醇水溶液提取有效成分。在专利第2965490号公报所述的技术中，进行2步提取在灵芝子实体的粉碎物中用30～70[％]浓度的热含水醇提取含水醇可溶成分、用热水提取水溶性成分。
这种提取物提取的工序中，希望能提高提取物的总收率、有效进行三萜类等特定成分的提取。但是，在特开2003-235502号公报所述的技术中，提取物的总收率低，另外三萜类的提取量也低。另外，在专利第3128147号公报所述的技术中，使用非极性溶剂，除掉了灵芝的有效成分三萜类。而且，要经过用非极性溶剂提取和用热水或醇水溶液提取2步提取工序，也存在工艺烦杂的问题。在专利第2965490号公报所述的技术中，经过2步提取工序，也存在工艺烦杂的问题，另外提取物收率低，只有8.51～9.54[％]。
本发明是基于这样的技术课题而完成的，目的是提供能够提高提取物收率、有效进行有效成分提取的蕈类提取物的提取方法、蕈类提取物制品的制备方法等。
发明内容
在这种目的的基础上完成的本发明的蕈类的粉碎水平的评价方法，其特征是包括将蕈类的子实体粉碎的工序；测定粉碎的子实体的粉碎物的容积密度，根据容积密度评价子实体的粉碎水平的工序。这样，使用容积密度，可以不受粉碎物的形状等影响，能够以比以往高的精度评价子实体的粉碎水平。
这种评价方法，可以在需要评价蕈类的粉碎水平的各种情况下使用。例如，适用于以下所示的蕈类提取物的提取方法、蕈类提取物制品的制备方法。
本发明的蕈类提取物的提取方法，其特征是包括将蕈类的子实体粉碎至容积密度达到规定以上的水平的粉碎工序；从粉碎的子实体的粉碎物中提取子实体的提取物的提取工序。这样，通过粉碎至容积密度达到规定以上的水平，可以通过容积密度进行工序控制。
这里，蕈类提取物为含有蕈类的有效成分的提取物，有水溶性提取物、水溶性多糖等。
在粉碎工序中，作为粉碎方法，也可以使用冻结粉碎法等，例如，可以使用气流式粉碎装置粉碎子实体。
另外，在提取工序中，可以通过热水提取来提取子实体的提取物。这种场合，通过将容积密度控制在例如0.2[g/cm3]以上，更加优选0.25[g/cm3]以上，可以只用热水提取，便可得到高的提取物收率、水溶性多糖收率。
而且，在提取工序中，也可以使用乙醇提取子实体的提取物。这种场合，可以只用乙醇提取，另外也可以用含水乙醇提取，而且也可与用热水提取进行的提取组合。
本发明也可以作为蕈类提取物制品的制备方法提出，其特征是包括将蕈类的子实体粉碎至容积密度达到规定以上的水平的粉碎工序；从粉碎的子实体的粉碎物中提取子实体的提取物的提取工序；以及将提取的提取物粉末化，使用得到的粉末形成蕈类提取物制品的制品形成工序。这种场合，容积密度可以在制备蕈类提取物制品时每次测定，但如果事先掌握达到规定以上的水平的容积密度的粉碎条件等，也可以不每次测定，根据粉碎时间等进行控制。
这里，作为蕈类提取物制品，有胶囊状、片状、颗粒状、粉末状、饮料状等形式。
这时，在粉碎工序中，从提取物收率、水溶性多糖收率等方面考虑，优选粉碎子实体至子实体的粉碎物的容积密度达到0.2[g/cm3]以上，更加优选0.25[g/cm3]。即，将容积密度设为0.2[g/cm3]以上，可以使提取工序中的提取物收率达到10[％]以上，水溶性多糖收率达到1.3[％]以上等。
本发明也可以作为从粉碎蕈类的子实体的粉碎物中提取的蕈类的提取物提出。该蕈类的提取物，特征是从粉碎子实体至容积密度达到0.2[g/cm3]以上而得到的粉碎物中提取的。这样的蕈类的提取物，是成为上述蕈类提取物制品的原料的中间生成物。
从容积密度为0.2[g/cm3]以上的粉碎物中提取的蕈类的提取物，可以使提取物收率达10[％]以上，水溶性多糖收率达1.3[％]以上。另外，该蕈类的提取物可以含有7[mg/g子实体]以上的分子量5000以上的水溶性多糖。这里，单位[mg/g子实体]是1[g]子实体中的含有量[mg]。
本发明也可以作为从粉碎蕈类的子实体的粉碎物中提取蕈类的提取物，以提取的提取物作为原料制备的蕈类提取物制品提出。这种场合的蕈类提取物制品，特征是将从粉碎子实体至容积密度达到0.2[g/cm3]以上得到的粉碎物中提取的提取物作为原料。
另外，本发明的蕈类提取物制品的制备方法，其特征是包括将蕈类的子实体粉碎的粉碎工序；从粉碎的子实体的粉碎物中提取子实体的提取物的提取工序；将提取的提取物粉末化的粉末化工序；使用粉末化工序得到的提取物粉末，形成蕈类提取物制品的制品形成工序；以及在制品形成工序前测定粉碎物或提取物粉末的容积密度的容积密度测定工序。
在本发明中，特征可以是在容积密度测定工序中，测定粉碎工序中粉碎的粉碎物的容积密度时，可以继续粉碎工序至测定的容积密度满足规定的条件。这种场合，优选继续粉碎工序至粉碎物的容积密度达到0.20[g/cm3]以上，更加优选0.25[g/cm3]以上。
另外，特征也可以是在容积密度测定工序中，测定粉末化工序得到的提取物粉末的容积密度，在制品形成工序中，使用容积密度满足规定的条件的提取物粉末形成蕈类提取物制品。这种场合，在制品形成工序中，优选使用容积密度为0.5[g/cm3]以上的提取物粉末，形成蕈类提取物制品。当然，也可以测定粉碎工序中粉碎的粉碎物的容积密度，再测定粉末化工序中得到的提取物粉末的容积密度。
在制品形成工序中，将提取物粉末充填到胶囊中，或者将提取物粉末压成片剂，制成蕈类提取物制品时，这样测定粉碎物和提取物粉末的容积密度，优选使用容积密度满足预先设定的规定的条件的物质。这样做，可以确实进行胶囊充填、片剂压片。
再者，达到阈值的容积密度，也可以是上述以外的值。例如，可以根据胶囊和片剂的尺寸、充填的提取物粉末的量设定。
本发明也可以作为蕈类提取物制品的制备方法提出，其特征是使用由从蕈类的子实体提取的成分形成的、容积密度在规定值以上的提取物粉末，形成蕈类提取物制品。这里，使用的提取物粉末，容积密度只要在规定值以上便可，例如为0.3[g/cm3]以上，更加优选为0.5[g/cm3]以上，用哪一种方法制备的均可以，例如，可以使用根据以下所示的本发明的提取物粉末的制备方法制备的提取物粉末。
即，本发明的提取物粉末的制备方法，其特征是包括将蕈类的子实体粉碎的工序；从粉碎的子实体的粉碎物中提取子实体的提取物的工序；将提取的提取物粉末化得到提取物粉末的工序；以及测定粉碎物及提取物粉末的至少一方的容积密度，使规定量的提取物粉末能够充填到胶囊中的工序，得到容积密度在规定值以上，例如为0.3[g/cm3]以上，更加优选0.5[g/cm3]以上的提取物粉末。
这里，根据本制备方法，如果最终得到的提取物粉末的容积密度达到规定值以上，容积密度的测定可以适当定时进行。例如，可以通过测定粉碎的子实体的粉碎物的容积密度，控制最终得到的提取物粉末的容积密度，另外，也可以直接测定将提取物粉末化得到的提取物粉末的容积密度。
本发明也可以作为蕈类提取物胶囊提出，其特征是包括内部中空的胶囊本体和胶囊本体的内部充填的容积密度为0.5[g/cm3]以上的蕈类的提取物粉末。作为这样的蕈类，优选灵芝。
本发明的蕈类提取物的提取方法，其特征也可以是包括将蕈类的子实体粉碎的粉碎工序；用醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水醇从粉碎的子实体的粉碎物中提取子实体的含水醇可溶性提取物的提取工序；提取工序后，接着将含有提取物的含水醇在沸点以下加热，除去醇的除去工序。
如果用醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水醇从灵芝等蕈类的子实体的粉碎物中提取提取物，可以有效地提取提取物。为了提高提取物收率，优选醇浓度为30～80[％]。为了提高多酚的提取效率，优选醇浓度为30～90[％]，更加优选为60～70[％]。另外，为了提高灵芝醇(Ganoderic Alcohols)量，优选醇浓度为40～85[％]。
这时，提取物提取只用满足上述条件的含水醇进行1步提取。即，通过将粉碎子实体得到的粉碎物以规定时间投入到含水醇中，便完成提取物的提取。
另外，在现有技术中，由于难以准确评价粉碎物的粉碎水平，本发明的蕈类提取物的提取方法中，优选使用容积密度评价粉碎物的粉碎水平。这种场合，在提取工序中，如果从容积密度为0.2[g/cm3]以上的粉碎物中提取提取物，便可以显著提高提取物收率，使提取物收率达到10[％]以上，提取的多酚量达到4[mg/g子实体]以上。
用这种方法提取的提取物可以用于任何目的。但是，将提取物作为食用·饮用时，作为醇优选使用乙醇。
本发明也可以作为蕈类提取物制品的制备方法提出，其特征是包括将蕈类的子实体粉碎的粉碎工序；用乙醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水乙醇从粉碎的子实体的粉碎物中提取子实体的含水乙醇可溶性提取物的提取工序；提取工序后，接着将含有提取物的含水乙醇在沸点以下加热，除去乙醇的除去工序；将提取物粉末化，使用得到的粉末，形成蕈类提取物制品的制品形成工序。这里，作为蕈类提取物制品，有胶囊状、片状、颗粒状、粉末状、饮料状等形式。
这种场合，在粉碎工序中，优选粉碎子实体至子实体的粉碎物的容积密度达到0.2[g/cm3]以上。
本发明也可以作为从粉碎蕈类的子实体的粉碎物中提取的蕈类的提取物提出。这种场合，蕈类的提取物的特征是子实体中的提取物收率为10[％]以上，提取的多酚量为4[mg/g子实体]以上。而且，其特征也可以是子实体中的灵芝醇的提取量为500[μg/g子实体]以上。
这种蕈类的提取物，可以通过醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水醇，从粉碎物中提取。
本发明是从粉碎蕈类的子实体的粉碎物中提取蕈类的提取物，以提取的提取物为原料制备的蕈类提取物制品，其特征可以是将用乙醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水乙醇从粉碎物中提取得到的提取物作为原料。
本发明作为对象的蕈类，主要为灵芝。其他例如有香菇、蕈朴、平菇、真姬菇、金针菇、木耳、舞菇、扇菇、猪苓舞茸、梅寄生茸、瓦菇、桑黄、姬松茸、猴头菇、花瓣菇等。对于这些蕈类也可以适用本发明。进一步说，这些当中，本发明特别适于纤维质硬、多孔菌科的蕈类、桑黄等。
图1是表示本实施方式中蕈类提取物的提取方法、蕈类提取物制品的制备方法的图。图2是表示容积密度的测定方法的原理的图。图3是表示胶囊的图。图4是表示胶囊尺寸和提取物粉末的充填量与容积密度的关系的图。图5(a)是供给流量为5.0[kg/Hr]时得到的微粉碎物的SEM像，图5(b)是供给流量为3.5[kg/Hr]时得到的微粉碎物的SEM像。图6(a)是供给流量为2.5[kg/Hr]时得到的微粉碎物的SEM像，图6(b)是供给流量为1.5[kg/Hr]时得到的微粉碎物的SEM像。图7是供给流量为0.5[kg/Hr]时得到的微粉碎物的SEM像。图8是表示微粉碎物的容积密度和微粉碎物的粒度分布的测定值的表。图9是表示粉碎速度与粉碎得到的微粉碎物的容积密度的关系的图。图10是表示容积密度与提取物收率、容积密度与水溶性多糖收率的关系的图。图11是表示容积密度与水溶性多糖分子量的关系的图。图12是得到的提取物粉末的SEM像。图13是表示粉碎得到的微粉碎物的容积密度与喷雾干燥得到的提取物粉末的容积密度的关系的图。图14表示实施例3的结果，是表示乙醇浓度与提取物收率的关系的图。图15表示实施例4的结果，(a)是表示乙醇浓度与灵芝醇的提取量的关系的图，(b)是表示乙醇浓度与灵芝酸(ganoderic acids)的提取量的关系的图。图16表示实施例5的结果，是表示乙醇浓度与多酚提取量的关系的图。图17表示实施例6的结果，是表示提取温度与提取物收率及多酚量的关系的图。
具体实施例方式
以下根据附图所示的实施方式详细说明本发明。
图1是说明本实施方式中蕈类提取物的提取方法、蕈类提取物制品的制备方法的流程图。
用于提取灵芝(蕈类)提取物的子实体，是在培养基上植入菌种，将其培养一定时间得到菌床，将菌床维持在规定范围内的湿度·温度·照度环境下得到的。从菌床长出灵芝的鹿角状的子实体(所谓的鹿角灵芝)。从菌床切下该子实体，在规定时间内干燥，得到干燥子实体，从该干燥子实体中按照下述方法进行灵芝提取物的提取。
<粉碎工序>
将干燥子实体(以下简单地称作子实体)用装有旋转刀的粉碎装置等粗粉碎后，通过干式喷射粉碎机等粉碎方法进行微粉碎。
这时，微粉碎得到的微粉碎物的大小(粉碎水平)，优选通过容积密度进行评价。
容积密度原理上如图2所示，在规定容积的容器21中，从上方倒入微粉碎物或提取物粉末10，使之升高到容器21的上端面21a的上方。这时，为了防止混入过大的微粉碎物或提取物粉末10，优选使倒入容器21中的微粉碎物或提取物粉末10通过规定筛孔尺寸的筛。而且，将高出上端面21a的微粉碎物或提取物粉末10，用板22等沿着容器21的上端面21a刮平。然后，测定容器21内剩余的微粉碎物或提取物粉末10的重量W，将其除以容器21的容积V，得到容积密度X。
X＝W/V[g/cm3]在本实施方式中，优选进行微粉碎至容积密度X达到X≥0.2，更加优选X≥0.25。
<提取工序>
得到的微粉碎物，通过热水提取、乙醇提取、含水乙醇提取等提取方法，从微粉碎物中提取β-葡聚糖等有效成分。在本实施方式中，并没有限定该提取方法的意思，也可以采用上述以外的其他提取方法。
从微粉碎物中提取有效成分后，在常压或减压下蒸发水和乙醇，提取物提取本身结束。
<粉末化工序>
接着，将提取的提取物或还含有残渣的浆状的提取物通过喷雾干燥等粉末化，得到提取物粉末。
<制品形成工序>
将得到的提取物粉末充填到胶囊中时，如图3所示，在由体1和套在该体1上的帽2构成的胶囊(胶囊本体)3中充填规定重量的提取物粉末，可以制备胶囊状的蕈类提取物制品。另外，在规定重量的提取物粉末中混合粘合剂等，进行规定形状的压片成型，可以形成片状的蕈类提取物制品。当然，除胶囊和片剂以外，粉末化时也可以制成规定粒度的微粉末或颗粒状，也可以将其在液体中混合制成饮料剂等。
那么，在上述流程中，在制品形成工序中，使用通过喷雾干燥等粉末化的提取物粉末，形成胶囊状或片状的蕈类提取物制品时，优选在此之前，通过用图2所示的方法测定的容积密度控制子实体的粉碎水平(容积密度测定工序)。
在本实施方式中，在粉碎工序后不久，测定得到的微粉碎物的容积密度X，判定容积密度X是否进入预先确定的范围内，可以只使用条件明确的微粉碎物。这种场合，例如，2号胶囊(内容量0.37ml)中如果充填280mg提取物粉末，优选反复(连续)进行微粉碎至容积密度X达到X≥0.25。如果这样做，经提取工序、粉末化工序得到的提取物粉末，其容积密度X也进入某个范围。使用这种提取物粉末，在制品形成工序中得到胶囊状或片状的蕈类提取物制品，能够确实进行向胶囊中充填提取物粉末、片剂的压片。
另外，测定经粉末化工序得到的提取物粉末的容积密度X，判定容积密度X是否进入预先确定的范围内，只使用条件明确的提取物粉末，在制品形成工序中也可以得到胶囊状或片状的蕈类提取物制品。这种场合，2号胶囊(内容量0.37ml)中如果充填280mg提取物粉末，优选只将容积密度X达到X≥0.50的提取物粉末投入制品形成工序中。据此，也可以确实进行向胶囊中充填提取物粉末、片剂的压片。
当然，在粉碎工序后不久，测定微粉碎物的容积密度X，再测定经粉末化工序得到的提取物粉末的容积密度X，共计2次，也可以通过容积密度X进行控制。
再者，通过粉碎工序后不久测定的微粉碎物的容积密度X、粉末化工序后测定的提取物粉末的容积密度X进行控制时，容积密度X例如可以根据充填提取物粉末的胶囊的尺寸、胶囊中提取物粉末的规定充填量等适当设定。例如，2号胶囊中，充填150mg提取物粉末时，优选容积密度X为0.3以上。另外，2号胶囊中，充填200mg提取物粉末时，优选容积密度X为0.4以上。通常使用的胶囊有00号(内容量0.95ml)、0号(内容量0.68ml)、1号(内容量0.47ml)、2号(内容量0.37ml)、3号(内容量0.27ml)、4号(内容量0.20ml)、5号(内容量0.13ml)。
对于这些尺寸的胶囊，与上述相同，容积密度X为0.3、0.4、0.5时与胶囊中提取物粉末的充填量的关系如图4所示。当然，胶囊中的充填量为和图4所示的不重复的中间值时，容积密度X也可以取0.3、0.4、0.5以外的中间值。
<第二实施方式>
下面，作为第二实施方式，以使用含水醇进行提取物提取的例子加以说明。
<粉碎工序>
将与上述第一实施方式同样生育的子实体，用装有旋转刀的粉碎装置等粗粉碎后，通过干式喷射粉碎机等粉碎方法进行微粉碎。
这里，也优选通过容积密度控制子实体的粉碎水平。在本实施方式中，优选进行微粉碎至容积密度X达到X≥0.2。这样，通过将微粉碎物的粉碎水平粉碎到规定以上，可以提高提取物收率。
<提取工序>
将得到的微粉碎物用含水乙醇提取，进行β-葡聚糖等有效成分的提取。这里，提取使用的含水乙醇，是使用乙醇浓度为30～90[％]、温度为30～80[℃]的温含水乙醇。据此，从微粉碎物中提取含水醇可溶性成分。
从微粉碎物中提取有效成分后，将乙醇在沸点以下的温度(常压或减压下)蒸发干燥，提取物提取本身结束。
再者，这样提取的提取物，灵芝提取液也可以在-20[℃]下直接以溶液的形式保存，或者也可以通过冻结干燥及减压浓缩等作为固体物质保存。
<粉末化工序>
向提取的提取物中投入提取时产生的残渣，得到浆状的提取物。然后，将浆状的提取物通过喷雾干燥等粉末化，得到提取物粉末。
<制品形成工序>
测定得到的提取物粉末，将其充填到胶囊中，可以制备以胶囊状等为主的各种形式的蕈类提取物制品。
这样，在提取物提取工序中，通过使用乙醇浓度为30～90[％]、温度为30～80[℃]的温含水乙醇，可以提高提取物收率，特别是可以有效提取三萜类、多酚等有效成分。而且，由于只用含水乙醇进行1步提取，不需要进行以往那样的2步提取，可以简单地进行提取。
而且，从容积密度X为X≥0.2，更加优选X≥0.25的微粉碎物中进行提取，上述效果变得更加显著。
这里，用容积密度评价微粉碎物的粉碎水平时，与以往用粒度分布进行评价时做了比较，其结果表示如下。
收获后，将干燥的鹿角灵芝粗粉碎成3mm的方块。然后，用干式喷射粉碎机进行微粉碎，得到微粉碎物。这里，相对于干式喷射粉碎机的粗粉碎后的粗粉碎物的供给速度设为实验15.0[kg/Hr]实验23.5[kg/Hr]实验32.5[kg/Hr]实验41.5[kg/Hr]实验50.5[kg/Hr]得到粉碎状态不同的5种微粉碎物。
换句话说，处理10[kg]粗粉碎物所需的时间(粉碎时间)为实验12小时实验22小时50分钟实验34小时实验46小时42分钟实验520小时将上述得到的微粉碎物固定在碳胶带上，而且为了防止带电，用扫描电子显微镜(SEM)观察溅涂Pt-Pd的物质(观察时的加速电压0.5kV，放射电流5nA)。
图5(a)是根据实验1、图5(b)是根据实验2、图6(a)是根据实验3、图6(b)是根据实验4、图7是根据实验5得到的微粉碎物的SEM照片。
由这些SEM照片可清楚地知道，干式喷射粉碎机中粗粉碎物的供给速度降低，也就是粉碎时间延长，在干式喷射粉碎机内粉碎的时间越长，得到的微粉碎物的颗粒变得越细小，这从视觉上看来也很清楚。
关于这样得到的实验1～实验5的微粉碎物，测定容积密度。在体积20ml的测定用槽(容器1)中，通过42目开孔的筛使微粉碎物落下，测定每20ml体积的微粉碎物的重量，算出容积密度。
为了比较，将上述实验1～实验5的微粉碎物，在甲醇中使用超声波使之分散，用激光衍射式粒度分布测定仪测定微粉碎物的粒度分布。
其结果如图8所示。
如图8所示，实验1～实验5的微粉碎物，在图5～图7所示的SEM照片中，虽然可以确认粉碎水平有明显不同，但是，粒度分布的测定结果中，实验1～实验5的微粉碎物的平均粒径、粒度分布均几乎没有变化。
而容积密度为实验10.18[g/cm3]实验20.22[g/cm3]实验30.26[g/cm3]实验40.28[g/cm3]实验50.35[g/cm3]实验1～实验5的微粉碎物中容积密度明显不同。另外，使用容积密度时，与图5～图7所示的SEM照片同样，得到一种相关关系干式喷射粉碎机中粗粉碎物的供给速度降低，也就是粉碎时间延长，在干式喷射粉碎机内粉碎的时间越长，得到的微粉碎物的容积密度变得越大。
这样，像灵芝这种由菌丝的集合体构成的试样，即使粉碎也难以完全破坏纤维，由于变成棉状和针状，可以确认用在溶液中测定的粒度分布不能评价真实的粒径。而容积密度充分对应SEM照片的粉碎水平，将灵芝的粉碎水平数值化，可以确认能够准确评价。
而且，如图7所示的实验5的微粉碎物中，可以确认灵芝的菌丝几乎完全被粉碎。就是说，将容积密度设为0.35[g/cm3]时，可以得到灵芝的菌丝几乎完全被粉碎的微粉碎物。
另外，相对于干式喷射粉碎机的粗粉碎后的粗粉碎物的供给速度(粉碎速度)与得到的微粉碎物的容积密度的关系如图9所示。如图9所示，显然，用干式喷射粉碎机粉碎时，干式喷射粉碎机中粗粉碎物的供给速度与得到的微粉碎物的容积密度具有相关关系。可以确认，干式喷射粉碎机中粗粉碎物的供给速度越低，得到的微粉碎物的容积密度变得越大，确认容积密度能够调节。
微粉碎后，通过100℃、热水提取1小时，进行提取物的提取。然后，将提取液用膜滤器过滤，使滤液蒸发干固后，测定其重量，将此作为提取物收率。
其结果如图10所示。
如图10所示，确认水溶性提取物及水溶性多糖的收率，当容积密度小于0.2[g/cm3]时大致一定，当容积密度达到0.2[g/cm3]以上时，水溶性提取物及水溶性多糖的收率变高。
而且，将上述滤液的上清液用三氟乙酸水解，测定葡萄糖量，评价水溶性多糖类的收率。这时，将水溶性多糖的分子量划分为小于5000、5000以上小于30000、30000以上小于100000、100000以上，研究各划分范围的收率。
其结果如图11所示。
如图11所示，显然，随着容积密度变大，虽然小于5000的分子量大的多糖的收率没有大的变化，但是5000以上小于30000、30000以上小于100000、100000以上的分子量大的多糖的收率明显增加。据此，可以确认，容积密度变大，水溶性多糖，即有效成分β-葡聚糖的收率提高。
这样，在从灵芝的子实体中提取提取物的过程中，使用容积密度，可以准确评价粉碎水平。据此，在批量生产工艺中，能够控制得到的有效成分的收率，可以使有效成分的收率高于以往。而且，由于可以准确评价粉碎水平，由粉碎水平控制在一定范围内的微粉碎物制备的颗粒、片剂、胶囊等中，可以使水溶性多糖的含有量等质量比以往稳定。
再加上，由于可以准确评价粉碎水平，通过将粉碎水平控制在规定水平以上，也可以防止从微粉碎物中提取有效成分后的残渣混杂粒大的物质。据此，也可以将该残渣直接作为食品摄取，所以也可以兼具有效利用原料、减少废弃量的效果。
另外，将容积密度控制在0.2[g/cm3]以上，更加优选0.25[g/cm3]以上，能够以高收率得到提取物和水溶性多糖。
再者，也可以说，将容积密度控制在0.2[g/cm3]以上，更加优选0.25[g/cm3]以上，如图11所示，只用热水提取，便能够得到大量高分子量的提取物和水溶性多糖。
与实施例1同样，将干燥的子实体粗粉碎后，用干式喷射粉碎机进行微粉碎，得到微粉碎物。这里，通过使相对于干式喷射粉碎机的粗粉碎物的供给速度不同，得到容积密度为0.17～0.57[g/cm3]的微粉碎物。
将得到的微粉碎物用热水或含水乙醇溶液提取提取物，将含有残渣的状态的浆状提取物通过喷雾干燥进行干燥，得到提取物粉末。在热量输入185℃、排热95℃、喷嘴口径1.3mm、喷雾压力170kg/cm2、溶液浓度10～15％下进行干燥处理。
图12是将容积密度0.26[g/cm3]的微粉碎物进行提取·干燥处理的粉体(提取物粉末)的SEM照片。
如图12所示，与微粉碎时的针状的形态不同，通过在提取物成分与残渣混合的状态下进行干燥，变成颗粒状。
接着，测定得到的提取物粉末的容积密度。
在提取前的微粉碎物的状态下测定的容积密度与在提取处理后的提取物粉末的状态下测定的容积密度的关系如图13所示。
如图13所示，确认提取前的微粉碎物的容积密度与提取处理后的提取物粉末的容积密度有相关关系，确认相对于提取前的微粉碎物的容积密度，提取处理后的提取物粉末具有约2倍的容积密度。也就是说，通过变成空隙少的颗粒状的粒子，容积密度也比微粉末的状态变大。
进一步，在Capsugel株式会社生产的2号胶囊中，分别充填提取前的微粉碎物的容积密度为0.17[g/cm3]、提取处理后的提取物粉末的容积密度为0.30[g/cm3]的提取物粉末，以及提取前的微粉碎物的容积密度为0.25[g/cm3]以上、提取处理后的提取物粉末的容积密度为0.50[g/cm3]以上的提取物粉末，充填量分别以280mg作为目标。
结果，提取前的微粉碎物的容积密度为0.17[g/cm3]，提取处理后的提取物粉末的容积密度为0.30[g/cm3]的提取物粉末，胶囊中只能充填170mg，如果想多充填些，胶囊的帽固定不上，或固定时胶囊上残留打痕等，不能充填目标量280mg。而提取前的微粉碎物的容积密度为0.25[g/cm3]以上、提取处理后的提取物粉末的容积密度为0.50[g/cm3]以上的提取物粉末，可以正常进行胶囊的充填。
而且，关于不能达到目标量280mg的提取处理后的提取物粉末的容积密度为0.30[g/cm3]的提取物粉末，添加蒸馏水进行造粒处理，使容积密度增大后，再度尝试充填胶囊，也只能充填250mg。
另外，研究了提取物提取中使用的含水乙醇的浓度与提取物收率的关系，结果表示如下。
收获后，将干燥的鹿角灵芝粗粉碎成3[mm]的方后，用干式喷射粉碎机进行微粉碎，粉碎成容积密度达到0.2[g/cm3]以上。再者，在体积20[ml]的测定用槽中，使微粉碎物通过42目开孔的筛落下，测定每20[ml]体积的微粉碎物的重量，算出容积密度。
然后，将4[g]微粉碎物加到用蒸馏水稀释的浓度不同的含水乙醇100[ml]中，在60[℃]水浴中边搅拌边加热1小时，进行提取物提取。这里，乙醇浓度设为0(即，使用水的热水提取)、30、40、50、60、65、70、75、80、85、90、100(即，乙醇提取)[％]。
提取物收率的测定是将提取液用膜滤器过滤，使滤液蒸发干固后，根据重量来测定。
其结果如图14所示。
如图14所示，确认不含乙醇的热水提取的场合，以及乙醇浓度过低或过高的场合，提取物收率变低，乙醇浓度在30～80[％]范围内能够得到高的提取物收率。
另外，关于通过提取物提取得到的三萜类的量，进行了评价，结果表示如下。
从与实施例3同样得到的微粉碎物中，以不同的乙醇浓度进行提取物提取。通过提取物提取得到的提取液进行固液分离，分成提取液和提取残渣。然后，将提取液蒸发干固后，用100[％]甲醇溶解三萜类，回收，减压浓缩后，用HPLC(高效液相色谱法)测定三萜类的量。HPLC的分析条件如下。
柱TOSOH TSK-GEL ODS-80TM(4.6Φ×150[mm])流动相灵芝醇部分 乙腈∶2[％]乙酸60∶40灵芝酸部分 乙腈∶2[％]乙酸30∶70流量1[ml/分钟]HPLC装置日立D-7000 HSM将调节成各浓度的含水乙醇作为提取溶剂时，提取的提取物中含有的灵芝醇或灵芝酸量如图15(a)和(b)所示。
结果，提取的提取物中的灵芝醇的提取量，在含水乙醇的乙醇浓度为40[％]以上时变高，灵芝酸量在30[％]以上时变高。
另外，提取处理及除去乙醇的工序中，如果加热到含水乙醇的沸点以上的温度，三萜类分解。
由此确认，为了提高三萜类的提取量，提取物提取中使用的含水乙醇的乙醇浓度优选设为30～40[％]以上，上限设为小于沸点。
下面研究了提取物提取中使用的含水乙醇的乙醇浓度与得到的提取物的总多酚量的关系，结果表示如下。
用Folin-Denis法测定实施例3得到的提取物的总多酚量，将苯酚性羟基的存在换算成儿茶酸量，作为1[g]子实体中的含有量[mg/g子实体]算出。
其结果如图16所示。
如图16所示，确认，将提取物提取中使用的含水乙醇的乙醇浓度设为30～90[％]，多酚提取量增加，特别是将乙醇浓度设为60～70[％]时，多酚提取量特别高。
将与实施例3同样得到的微粉碎物4[g]加到用蒸馏水稀释的乙醇浓度为70[％]的100[ml]含水乙醇中，在将温度(提取温度)从室温25[℃]调节为90[℃]的水浴中边搅拌边加热1小时，进行提取物提取。
用Folin-Denis法测定得到的提取物的总多酚量，将苯酚性羟基的存在换算成儿茶酸量，作为1[g]子实体中的含有量算出。
其结果如图17所示。
如图17所示，提取物收率、多酚提取量均在比室温25℃高的温度下变高，在比乙醇的沸点以上的80℃高的温度下没有什么差别。
由此确认，在比室温25℃高的温度下进行提取物提取，也就是将提取物提取中使用的含水乙醇加热，通过使用温含水乙醇，提取物收率、多酚收率均变高。
上述实施方式中，是经过粗粉碎工序、微粉碎工序的2步构成，但是并不只限于此，也可以只经过1步或3步以上的粉碎工序。另外，粉碎、提取、粉末化使用的方法，可以使用任何方法。还有，关于生育灵芝的子实体的方法，也没有任何限定的意思。
除此之外，只要不脱离本发明的精神，对于上述实施方式所示的构成，可以进行变更、删除、追加等。
产业上的可利用性根据本发明，使用容积密度可以准确评价粉碎物的粉碎水平。据此，在从蕈类的子实体中提取提取物的过程等中，可以控制提取物收率，也就是得到的有效成分的收率。结果，可以使有效成分的收率高于以往。而且，由于可以准确评价粉碎水平，在由粉碎水平控制在一定范围的粉碎物制备的颗粒、片剂、胶囊等中，可以使有效成分的含有量等质量比以往稳定。
再加上，由于可以准确评价粉碎水平，通过将粉碎水平控制在规定水平以上，也可以防止从粉碎物中提取有效成分后的残渣混杂粒大的物质。据此，也可以将残渣直接作为食品摄取。因此，可以有效利用原料，还可以减少废弃量。
另外，将容积密度控制在0.2[g/cm3]以上，更加优选0.25[g/cm3]以上，得到的蕈类的提取物、蕈类提取物制品，与用现有方法控制的场合得到的相比，能够以高收率得到含有提取物和水溶性多糖的物质。
根据本发明，在胶囊充填、片剂压片等形成蕈类提取物制品的工序前，测定将蕈类的子实体粉碎的粉碎物或由从粉碎物中提取的提取物得到的提取物粉末的容积密度，可以控制灵芝等的子实体的粉碎水平。据此，使用规定量的提取物粉末，可以确实进行规定的胶囊充填和片剂压片，能够稳定制备蕈类提取物制品。
根据本发明的方法，用醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水醇从灵芝等蕈类的子实体的粉碎物中提取提取物，可以提高提取物收率、有效进行有效成分的提取。
另外，用这种方法得到的蕈类的提取物、蕈类提取物制品，与用现有方法得到的相比，能够以高收率得到含有提取物和多酚等有效成分的物质。
权利要求
1.蕈类的粉碎水平的评价方法，其特征在于包括粉碎蕈类的子实体的工序；以及测定粉碎的上述子实体的粉碎物的容积密度，根据上述容积密度评价上述子实体的粉碎水平的工序。
2.蕈类提取物的提取方法，其特征在于包括粉碎蕈类的子实体至容积密度达到规定以上的水平的粉碎工序；以及从粉碎的上述子实体的粉碎物中提取该子实体的提取物的提取工序。
3.权利要求2所述的蕈类提取物的提取方法，其特征在于在上述粉碎工序中，使用气流式粉碎装置粉碎上述子实体。
4.权利要求2所述的蕈类提取物的提取方法，其特征在于在上述提取工序中，通过热水提取来提取上述子实体的提取物。
5.权利要求2所述的蕈类提取物的提取方法，其特征在于在上述提取工序中，使用乙醇提取上述子实体的提取物。
6.蕈类提取物的提取方法，其特征在于包括粉碎蕈类的子实体的粉碎工序；用醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水醇从粉碎的上述子实体的粉碎物中提取含水醇可溶性的提取物的提取工序；以及上述提取工序后，接着将含有上述提取物的上述含水醇在沸点以下加热，除去醇的除去工序。
7.权利要求6所述的蕈类提取物的提取方法，其特征在于在上述提取工序中，从容积密度设为0.2[g/cm3]以上的上述粉碎物中提取上述提取物。
8.权利要求6所述的蕈类提取物的提取方法，其特征在于在上述提取工序中，提取物收率为10[％]以上。
9.权利要求6所述的蕈类提取物的提取方法，其特征在于在上述提取工序中，提取的多酚量为4[mg/g子实体]以上。
10.蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于包括粉碎蕈类的子实体至容积密度达到规定以上的水平的粉碎工序；从粉碎的上述子实体的粉碎物中提取该子实体的提取物的提取工序；以及将提取的上述提取物粉末化，使用得到的粉末，形成蕈类提取物制品的制品形成工序。
11.权利要求10所述的蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于在上述粉碎工序中，粉碎上述子实体至上述子实体的粉碎物的容积密度达到0.2[g/cm3]以上。
12.权利要求10所述的蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于在上述提取工序中，提取物收率为10[％]以上。
13.权利要求10所述的蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于在上述提取工序中，水溶性多糖收率为1.3[％]以上。
14.权利要求10～13之任一项所述的蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于上述蕈类为灵芝。
15.蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于包括粉碎蕈类的子实体的粉碎工序；测定粉碎的上述子实体的粉碎物的容积密度的容积密度测定工序；从上述粉碎物中提取上述子实体的提取物的提取工序；将提取的上述提取物粉末化的粉末化工序；以及使用上述粉末化工序得到的提取物粉末，形成蕈类提取物制品的制品形成工序。
16.权利要求15所述的蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于继续上述粉碎工序至上述容积密度测定工序中测定的上述容积密度满足规定的条件。
17.蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于包括粉碎蕈类的子实体的粉碎工序；从粉碎的上述子实体的粉碎物中提取上述子实体的提取物的提取工序；将提取的上述提取物粉末化的粉末化工序；测定上述粉末化工序得到的提取物粉末的容积密度的容积密度测定工序；以及使用上述容积密度满足规定的条件的上述提取物粉末，形成蕈类提取物制品的制品形成工序。
18.权利要求17所述的蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于使上述容积密度为0.5[g/cm3]以上的上述提取物粉末满足上述规定的条件。
19.权利要求17所述的蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于在上述制品形成工序中，将上述提取物粉末充填到胶囊中，或者将上述提取物粉末压成片剂。
20.蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于使用由从蕈类的子实体中提取的成分生成的、容积密度在规定值以上的提取物粉末，形成蕈类提取物制品。
21.提取物粉末的制备方法，其特征在于包括粉碎蕈类的子实体的工序；从粉碎的上述子实体的粉碎物中提取上述子实体的提取物的工序；将提取的上述提取物粉末化，得到提取物粉末的工序；以及测定上述粉碎物及上述提取物粉末的至少一方的容积密度，使胶囊中能够充填规定量的上述提取物粉末的工序；从而得到上述容积密度在规定值以上的上述提取物粉末。
22.蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于包括粉碎蕈类的子实体的粉碎工序；用乙醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水乙醇从粉碎的上述子实体的粉碎物中提取含水乙醇可溶性的提取物的提取工序；上述提取工序后，接着将含有上述提取物的上述含水乙醇在沸点以下加热，除去乙醇的除去工序；以及将上述提取物粉末化，使用得到的粉末，形成蕈类提取物制品的制品形成工序。
23.权利要求22所述的蕈类提取物制品的制备方法，其特征在于在上述粉碎工序中，粉碎上述子实体至上述子实体的粉碎物的容积密度达到0.2[g/cm3]以上。
24.蕈类的提取物，其为从粉碎蕈类的子实体的粉碎物中提取的上述蕈类的提取物，其特征在于其是从粉碎上述子实体至容积密度达到0.2[g/cm3]以上得到的上述粉碎物中提取的提取物。
25.权利要求24所述的蕈类的提取物，其特征在于提取物收率为10[％]以上。
26.权利要求24所述的蕈类的提取物，其特征在于水溶性多糖收率为1.3[％]以上。
27.权利要求24所述的蕈类的提取物，其特征在于含有7[mg/g子实体]以上分子量5000以上的水溶性多糖。
28.蕈类的提取物，其为从粉碎蕈类的子实体的粉碎物中提取的上述蕈类的提取物，其特征在于上述子实体中的提取物收率为10[％]以上，提取的多酚量为4[mg/g子实体]以上。
29.权利要求28所述的蕈类的提取物，其特征在于上述子实体中的灵芝醇的提取量为500[μg/g子实体]以上。
30.权利要求28所述的蕈类的提取物，其特征在于其为用醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水醇从上述粉碎物中提取的提取物。
31.蕈类提取物制品，其为从粉碎蕈类的子实体的粉碎物中提取上述蕈类的提取物，以提取的上述提取物作为原料制备的蕈类提取物制品，其特征在于以从粉碎上述子实体至容积密度达到0.2[g/cm3]以上得到的上述粉碎物中提取的上述提取物作为上述原料。
32.蕈类提取物制品，其为从粉碎蕈类的子实体的粉碎物中提取上述蕈类的提取物，以提取的上述提取物作为原料制备的蕈类提取物制品，其特征在于以用乙醇浓度为30～90[％]、30～80[℃]的含水乙醇从上述粉碎物中提取得到的上述提取物作为上述原料。
33.蕈类提取物胶囊，其特征在于包括内部中空的胶囊本体和在上述胶囊本体的内部充填的容积密度为0.5[g/cm3]以上的蕈类的提取物粉末。
34.权利要求33所述的蕈类提取物胶囊，其特征在于上述蕈类为灵芝。
全文摘要
以能够准确评价灵芝的粉碎水平、提高有效成分的收率为目的，经过以下工序粉碎至容积密度达到规定以上的水平的粉碎工序；从粉碎的子实体的粉碎物中提取子实体的提取物的提取工序；将提取的提取物粉末化，使用得到的粉末制成蕈类提取物制品的制品形成工序；从而制备蕈类提取物制品。这时，在粉碎工序中，优选粉碎子实体至子实体的粉碎物的容积密度达到0.2(g/cm
文档编号A23P1/04GK1647706SQ20041008609
公开日2005年8月3日 申请日期2004年10月20日 优先权日2004年1月29日
发明者神谷晋司, 佐藤莉香, 进藤美穗, 青山香 申请人:Tdk株式会社