专利名称：用saha和硼替佐米治疗癌症的方法
技术领域：
本发明涉及治疗癌症或其它疾病的方法，该方法包括给予有需要的患者一定量的HDAC抑制剂例如SAHA和一定量的另一种抗癌药例如硼替佐米。硼替佐米以Velcade
名销售。
本发明还涉及可用于治疗癌症或其它疾病的联合药物，该联合药物含一定量的HDAC抑制剂例如SAHA和一定量的抗癌药例如硼替佐米。
在本发明特定实施方案中，联合在一起的治疗包括治疗有效量。另外，HDAC抑制剂和抗癌药物例如硼替佐米的联合还可提供加性或协同疗效。
在再一些实施方案中，按任何顺序序贯、按任何顺序交替、同时或其任何组合实施治疗方法。尤其是，可同时、连续或例如同时和连续交替给予，来进行HDAC抑制剂例如SAHA的给药和抗癌药例如硼替佐米的给药。
本发明还涉及通过给予患者一定量的HDAC抑制剂例如SAHA、一定量的抗癌药物例如硼替佐米，选择性诱导肿瘤细胞终末分化、细胞生长停滞和/或凋亡从而抑制患者中此类细胞增殖的方法，其中按有效诱导细胞终末分化、细胞生长停滞或凋亡的量给予HDAC抑制剂和硼替佐米。
本发明还涉及通过使细胞与一定量的HDAC抑制剂例如SAHA、一定量的抗癌药物例如硼替佐米接触，选择性诱导肿瘤细胞终末分化、细胞生长停滞和/或凋亡从而抑制此类细胞增殖的体外方法，其中按有效诱导细胞终末分化、细胞生长停滞或凋亡的量给予HDAC抑制剂和第二种(和任选的第三种和/或第四种)抗癌药物。
在本发明方面，通过口服给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
在本发明的另一方面，静脉内给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在另一个实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，至少一个21天的疗程，其中给药7天。
在又另一个实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，至少一个21天的疗程，其中给药10天。
在另一个实施方案中，按200mg剂量，每日两次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，至少一个21天的疗程，其中给药14天。
在另一个实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，至少一个21天的疗程，其中给药14天。对于这些实施方案，重复给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，最长达8个21天的疗程。
在一个实施方案中，在21天中的第4、8、11和15天，每日一次，按0.7mg/m2剂量，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在另一个实施方案中，在21天中的第4、8、11和15天，每日一次，按0.9mg/m2剂量，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在又另一个实施方案中，在21天中的第1、4、8和11天，每日一次，按0.9mg/m2剂量，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在又另一个实施方案中，在21天中的第1、4、8和11天，每日一次，按约1.1mg/m2剂量，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在又另一个实施方案中，在21天中的第1、4、8和11天，每日一次，按约1.3mg/m2剂量，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在另一个实施方案中，每日两次，按200mg剂量，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物；和按总日剂量0.7mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在又另一个实施方案中，每日两次，按200mg剂量，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物；和按总日剂量0.9mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在再一些实施方案中，每日一次，按400mg剂量，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物；和按总日剂量0.9mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在另一个实施方案中，每日一次，按400mg剂量，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物；和按总日剂量1.1mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在再一些实施方案中，每日一次，按400mg剂量，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物；和按总日剂量1.3mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
本发明也考虑还含地塞米松或其药学上可接受的盐或水合物的SAHA和硼替佐米的联合药物，其中在第1-4天和第9-12天，至少一个21天的疗程，按20mg剂量，每日一次，通过口服给予地塞米松或其药学上可接受的盐或水合物。
除另有定义外，本文中使用的所有技术和科学术语的含义与本发明相关领域中普通技术人员通常理解的相同。尽管在本发明实践中，可使用与本文中所述相似或等同的方法和物质，但以下阐述合适的方法和物质。本文中所述所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献均通过引用整体并明确地结合到本文中。如果发生冲突，以包括定义的本发明说明书为准。另外，本文中所述物质、方法和实施例仅为举例说明性而非限制性的。
通过以下详述和权利要求及其所包括的内容，本发明的其它特征和优点将是显而易见的。
附图简述 根据以下本发明各种实施方案的更具体阐述，如附图中说明的那样，本发明的前述和其它目的、特征和优点将是显而易见的，其中相似的引用字符是指整个不同视图中的相同部分。附图无须按比例绘制，重点在于进一步说明本发明原理。
图1显示伏立诺他(Vorinostat)/硼替佐米联合药物对多发性骨髓瘤细胞系生长的影响。
发明详述 出乎意料之外地发现，包括给予本文中所述HDAC抑制剂SAHA和本文中所述硼替佐米的联合治疗方法可提供改善的疗效。用各治疗药物(给予HDAC抑制剂和给予硼替佐米)提供有效治疗。
本发明还涉及在有需要的患者中治疗癌症的方法，该方法按照一种治疗程序给予有需要的患者一定量的N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物；和按照另一种治疗程序，给予一定量的抗代谢药物例如硼替佐米，其中这些量可包括治疗有效量。SAHA和硼替佐米治疗癌症作用可以是例如加性或协同。
在一个方面，所述方法包括按第一种治疗程序给予有需要的患者第一种量的SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，和另一种量的硼替佐米。本发明还涉及可用于治疗癌症或其它疾病的联合药物。在一个方面，联合药物包含第一种量的HDAC抑制剂例如SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，和另一种量的抗癌药例如硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。第一种和第二种量可包括治疗有效量。
本发明还涉及通过给予患者一定量的HDAC抑制剂例如SAHA、一定量的抗癌药例如硼替佐米，选择性诱导瘤细胞终末分化、细胞生长停滞和/或细胞凋亡从而抑制患者中此类细胞增殖的方法，其中给予有效诱导细胞终末分化、细胞生长停滞或凋亡的量的HDAC抑制剂和硼替佐米。
本发明还涉及通过使细胞与一定量的HDAC抑制剂例如SAHA、一定量的抗癌药例如硼替佐米接触，选择性诱导瘤细胞终末分化、细胞生长停滞和/或凋亡从而抑制此类细胞增殖的体外方法，其中给予有效诱导细胞终末分化、细胞生长停滞或凋亡的量的HDAC抑制剂和第二种(和任选的第三种和/或第四种)抗癌药。
鉴于与两种治疗药征有关的不同毒性，本发明联合疗法提供治疗优点。例如，用HDAC抑制剂治疗可导致抗癌药未出现过的特殊毒性，反之亦然。因此，该不同毒性可允许按所述毒性不存在或最小的剂量给予各治疗，以使联合疗法一起提供治疗剂量同时避免联合药物中各成分的毒性。另外，当由于联合治疗获得提高或协同的疗效，例如明显比加性疗效好时，甚至可进一步减少各药物的剂量，因此将相关毒性降至甚至更大的程度。
定义 与本发明有关的各种语法形式的术语“治疗”是指预防(即化学预防)、治愈、反转、减轻、缓解、使最小、抑制或终止疾病状态、疾病发展、病原体(例如细菌或病毒)或其它异常状态的有害作用。例如，治疗可涉及缓解疾病的症状(即不一定为所有症状)或减缓疾病发展。因为某些本发明方法涉及物理除去病原体，所以技术人员会意识到，在暴露于病原体之前或同时给予本发明化合物(预防性治疗)的情况和暴露于病原体后(甚至长时间后)给予本发明化合物的情况中，它们同等有效。
本文中使用的癌症治疗是指部分或完全抑制、延缓或阻止哺乳动物例如人中包括癌转移的癌症发展；抑制、延缓或阻止包括癌转移的癌症复发；或防止癌症发作或发展(化学预防)。另外，本发明方法还可化学预防性治疗人癌患者。但是，该方法还可有效治疗其它哺乳动物的癌症。
本发明抗癌药包括本文中所述那些，它们包括此类药物的任何药学上可接受的盐或水合物，或此类药物的任何游离酸、游离碱或其它游离形式，它们的非限制性实例为A)极性化合物(Marks et al.(1987)；Friend，C，Scher，W.，Holland，J.W.，and Sato，T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68378-382；Tanaka，M.，Levy，J.，Terada，M.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.，and Marks，P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)721003-1006；Reuben，R.C，Wife，R.L.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.，andMarks，P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73862-866)；B)维生素D和视黄酸的衍生物(Abe，E.，Miyaura，C，Sakagami，H.，Takeda，M.，Konno，K.，Yamazaki，T.，Yoshika，S.，and Suda，T.(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)784990-4994；Schwartz，E.L.，Snoddy，J.R.，Kreutter，D.，Rasmussen，H.，and Sartorelli，A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.CancerRes.2418；Tanenaga，K.，Hozumi，M.，and Sakagami，Y.(1980)CancerRes.40914-919)；C)甾体激素(Lotem，J.and Sachs，L.(1975)Int.J.Cancer 15731-740)；D)生长因子(Sachs，L.(1978)Nature(Lond.)274535，Metcalf，D.(1985)Science，22916-22)；E)蛋白酶(Scher，W.，Scher，B.M.，and Waxman，S.(1983)Exp.Hematol.11490-498；Scher，W.，Scher，B.M.，and Waxman，S.(1982)Biochem.& Biophys.Res.Comm.109348-354)；F)肿瘤启动子(Huberman，E.and Callaham，M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)761293-1297；Lottem，J.and Sachs，L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)765158-5162)；和G)DNA或RNA合成抑制剂(Schwartz，E.L.and Sartorelli，A.C.(1982)Cancer Res.422651-2655，Terada，M.，Epner，E.，Nudel，U.，Salmon，J.，Fibach，E.，Rifkind，R.A.，and Marks，P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)752795-2799；Morin，M.J.and Sartorelli，A.C.(1984)Cancer Res.442807-2812；Schwartz，E.L.，Brown，B.J.，Nierenberg，M.，Marsh，J.C，and Sartorelli，A.C.(1983)Cancer Res.432725-2730；Sugano，H.，Furusawa，M.，Kawaguchi，T.，and Ikawa，Y.(1973)Bibl.Hematol.39943-954；Ebert，P.S.，Wars，L，and Buell，D.N.(1976)Cancer Res.361809-1813；Hayashi，M.，Okabe，J.，and Hozumi，M.(1979)Gann 70235-238)。
本文中使用的术语“治疗有效量”用于量化联合疗法中的治疗药物的组合量。该组合量可达到需要的生物反应。在本发明中，需要的生物反应是部分或完全抑制、延缓或防止哺乳动物例如人中包括癌转移的癌症发展；抑制、延缓或防止包括癌转移的癌症复发；或防止癌症发作或发展(化学预防)。
本文中混用的术语“联合治疗”、“联合疗法”、“组合疗法”或“组合治疗”是指用至少两种不同治疗药物治疗个体。按照本发明的一个方面，用第一种治疗药物例如SAHA或本文中所述另一种HDAC抑制剂治疗个体。第二种治疗药物可以是另一种HDAC抑制剂，或可以是本文中定义的任何临床上认可的抗癌药(例如硼替佐米)。组合治疗可包括第三种或甚至其它治疗药物(在此定义的例如地塞米松)。可序贯或同时进行组合治疗。
本文中引用的“HDAC抑制剂”(例如SAHA)包括任何合成、重组或天然抑制剂，它们包括此类抑制剂的任何药用盐或水合物，和此类抑制剂的任何游离酸、游离碱或其它游离形式。本文中使用的“异羟肟酸衍生物”是指为异羟肟酸衍生物的一类组蛋白脱乙酰酶抑制剂。本文中提供这些抑制剂的具体实例。
本文中使用的“类视色素”或“类视色素药物”(例如3-甲基TTNEB)包括与一种或多种类视色素受体结合的任何合成、重组或天然化合物，它们包括此类药物的任何药学上可接受的盐或水合物，和此类药物的任何游离酸、游离碱或其它游离形式。
“酪氨酸激酶抑制剂”(例如埃罗替尼(erlotinib))包括与一种或多种酪氨酸激酶(例如受体酪氨酸激酶)结合或减少其活性或降低其水平的任何合成、重组或天然药物，它们包括此类抑制剂的任何药学上可接受的盐或水合物，和此类抑制剂的任何游离酸、游离碱或其它游离形式。包括作用于EGFR(ErbB-1；HER-1)的酪氨酸激酶抑制剂。还包括特异性作用于EGFR的酪氨酸激酶抑制剂。本文中提供酪氨酸激酶抑制剂的非限制性实例。
“辅助药物”是指用于增强抗癌药物有效性或预防或治疗与抗癌药物有关的病症的任何化合物，这些病症例如是血细胞计数低、中性白细胞减少、贫血、血小板减少、高钙血症、粘膜炎、挫伤、出血、毒性、疲劳、疼痛、恶心和呕吐。
本文使用的术语“患者”或“受试者”是指治疗的接受者。包括哺乳动物和非哺乳动物患者。在具体实施方案中，患者是哺乳动物例如人、犬、鼠、猫、牛、绵羊、猪或公山羊。在特定实施方案中，患者是人。
本文使用的术语“间歇”或“间歇性”表示在固定的或非固定的时间间隔停止和开始。
术语“水合物”包括但不限于半水合物、一水合物、二水合物、三水合物等。
组蛋白脱乙酰酶和组蛋白脱乙酰酶抑制剂 组蛋白脱乙酰酶(HDAC)包括催化除去核小体核心组蛋白的氨基末尾端中赖氨酸残基中乙酰基的酶。因此，HDAC与组蛋白乙酰转移酶(HAT)一起调节组蛋白的乙酰化状态。组蛋白乙酰化影响基因表达，HDAC的抑制剂例如异羟肟酸基的杂化极性化合物N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)在体外诱导转化细胞生长停滞、分化和/或凋亡并在体内抑制肿瘤生长。
按结构同源性，HDAC可分为三类。I类HDAC(HDAC 1，2，3和8)与酵母RPD3蛋白相似，位于细胞核内，发现存在于与转录辅阻遏物结合的复合体中。II类HDAC(HDAC 4，5，6，7和9)与酵母HDA1蛋白相似，具有细胞核和细胞质亚细胞定位。异羟肟酸基HDAC抑制剂例如SAHA抑制I和II类HDAC。III类HDAC形成结构差异大的一类依赖NAD的酶，它们与酵母SIR2蛋白有关，不被异羟肟酸基HDAC抑制剂抑制。
组蛋白脱乙酰酶抑制剂或HDAC抑制剂是可在体内、体外或两者抑制组蛋白脱乙酰化的化合物。因此，HDAC抑制剂抑制至少一种组蛋白脱乙酰酶的活性。由于抑制至少一种组蛋白脱乙酰化，出现乙酰化组蛋白增加，乙酰化组蛋白蓄积是评价HDAC抑制剂活性的合适的生物学标记。因此，可测定乙酰化组蛋白蓄积的方法可用于测定目的化合物的HDAC抑制活性。可以理解，可抑制组蛋白脱乙酰酶活性的化合物也可与其它底物结合，且同样可抑制其它生物活性分子例如酶。还可理解，本发明化合物可抑制上述任何组蛋白脱乙酰酶或任何其它组蛋白脱乙酰酶。
例如在接受HDAC抑制剂的患者中，可相对于合适的对照，测定用HDAC抑制剂处理的外周单核细胞和组织中蓄积的乙酰化组蛋白。
可在体外，用例如证明抑制至少一种组蛋白脱乙酰酶的酶测定，确定特定化合物的HDAC抑制活性。另外，通过测定用特定成分处理的细胞中的乙酰化组蛋白蓄积，可确定化合物的HDAC抑制活性。
在文献中熟知乙酰化组蛋白蓄积的测定方法。参见例如Marks，P.A.et al，J.Natl.Cancer Inst.，921210-1215，2000，Butler，L.M.et al，Cancer Res.605165-5170(2000)，Richon，V.M.et al，Proc.Natl.Acad.Sci，USA，953003-3007，1998和Yoshida，M.et al.，J.Biol.Chem.，26517174-17179，1990。
例如，可如下进行测定HDAC抑制剂化合物的活性的酶测定法。简而言之，可通过将不存在底物的酶制剂和指示量的抑制剂化合物在冰上温育约20分钟，测定HDAC抑制剂化合物对纯化的人已附加表位的(Flag)HDACl的亲和力作用。可加入底物([3H]乙酰基-标记的鼠红白血病细胞衍生组蛋白)，将总体积30μL的样品在37℃下温育20分钟。然后终止反应，可提取释放的乙酸酯，通过闪烁计数测定放射性释放量。可用于测定HDAC抑制剂化合物活性的备选测定方法是BIOMOL
Research Laboratories，Inc.，Plymouth Meeting，PA提供的″HDAC Fluorescent Activity Assay；Drug DiscoveryKit-AK-500″(HDAC荧光活性测定药物发现试剂盒-500)。
可如下进行体外研究。可向动物例如小鼠腹膜内注射HDAC抑制剂化合物。给药后，可在规定时间分离选择的组织例如脑、脾、肝等。可基本上按照Yoshida et al.，J.Biol.Chem.26517174-17179，1990中所述，从组织中分离组蛋白。可在15％SDS-聚丙烯酰胺凝胶上，使等量的组蛋白(约1μg)通过电泳，可转移到Hybond-P滤器(得自Amersham)上。可用3％牛奶封闭滤器，并可用兔纯化多克隆抗乙酰化组蛋白H4抗体(αAc-H4)和抗乙酰化组蛋白H3抗体(αAc-H3)(UpstateBiotechnology，Inc.)探测。可用辣根过氧化物酶缀合的山羊抗兔抗体(15000)和SuperSignal化学发光底物(Pierce)目测乙酰化组蛋白水平。作为组蛋白的负荷对照，可进行平行凝胶试验，用Coomassie蓝(CB)染色。
另外，还已证实异羟肟酸基HDAC抑制剂上调P21WAFI基因表达。用标准方法，通过将HDAC抑制剂用多种转化细胞培养2小时，诱导p21WAFI蛋白。p21WAFI基因诱导与该基因的染色质区域中乙酰化组蛋白蓄积有关。因此，可认为p21WAFI诱导涉及转化细胞中HDAC抑制剂造成的G1细胞周期停滞。
颁给某些本发明人的U.S.专利号5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990公开了可用于选择性诱导瘤细胞终末分化的化合物，这些化合物具有被亚甲基柔性链或刚性苯基分隔的两个极性末端基团，其中极性末端基团中的一个或全部是大疏水基团。其中的某些化合物在第一个疏水基团所处的分子的同一末端具有另一个大疏水基团，在酶测定中，该基团使分化活性进一步增加约100倍，在细胞分化测定中，增加约50倍。合成用于本发明方法和药用组合物的化合物的方法在前述专利中完全阐述，这些文献通过引用整体结合到本文中。
因此，本发明在其广泛范围内包括含HDAC抑制剂的组合物，这些抑制剂是1)异羟肟酸衍生物；2)短链脂肪酸(SCFA)；3)环四肽；4)苯甲酰胺；5)亲电性酮；和/或可抑制组蛋白脱乙酰酶的任何其它类化合物，该组合物用于抑制组蛋白脱乙酰酶、诱导瘤细胞终末分化、细胞生长停滞和/或凋亡；和/或诱导肿瘤中肿瘤细胞分化、细胞生长停滞和/或凋亡。
此类HDAC抑制剂的非限制性实例列举如下。可以理解，本发明包括本文中所述HDAC抑制剂的任何盐、结晶结构、无定形结构、水合物、衍生物、代谢物、立体异构体、结构同分异构体和前药。
A.异羟肟酸衍生物例如N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)(Richonet al，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95，3003-3007(1998))；间羧基肉桂酸二异羟肟酰胺(CBHA)(Richon et al.，同上)；Pyroxamide；曲古抑菌素类似物例如曲古抑菌素A(TSA)和曲古抑菌素C(Koghe et al.1998.Biochem.Pharmacol.561359-1364)；水杨基二异羟肟酸(Andrews etal.，International J.Parasitology 30，761-768(2000))；辛二酰二异羟肟酸(SBHA)(U.S.专利号5,608,108)；壬二酸(Azelaic)二异羟肟酸(ABHA)(Andrews et al.，同上)；壬二酸-1-异羟肟酸-9-苯胺(AAHA)(Qiu et al.，Mol.Biol.Cell 11，2069-2083(2000))；6-(3-氯苯基脲基)癸基(carpoic)异羟肟酸(3Cl-UCHA)；Oxamflatin[(2E)-5-[3-[(苯基磺酰基)氨基苯基]-戊-2-烯-4-yno异羟肟酸](Kim et al.Oncogene，182461 2470(1999))；A-161906、Scriptaid(Su et al.2000 Cancer Research，603137-3142)；PXD-101(Prolifix)；LAQ-824；CHAP；MW2796(Andrews et al，同上)；MW2996(Andrews et al，同上)；或U.S.专利号5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990中公开的任何异羟肟酸。
B.环四肽例如Trapoxin A(TPX)-环四肽(环-(L-苯基丙氨酰-L-苯基丙氨酰-D-2-甲基哌啶基-L-2-氨基-8-氧代-9，10-环氧癸酰基))(Kijimaet al，J.Biol.Chem.268，22429-22435(1993))；FR901228(FK 228，酯肽)(Nakajima et al，Ex.Cell Res.241，126-133(1998))；FR225497环四肽(H.Mori et al，PCT申请WO 00/08048(2000年2月17日))；Apicidin环四肽[环(N-O-甲基-L-色氨酰-L-异亮氨酰-D-2-甲基哌啶基-L-2-氨基-8-氧代癸酰基)](Darkin-Rattray et al，Proc.Aatl.Acad.Sci.USA93，13143-13147(1996))；Apicidin Ia、Apicidin Ib、Apicidin Ic、ApicidinIIa和Apicidin IIb(P.Dulski et al，PCT申请WO 97/11366)；CHAP、HC-毒素环四肽(Bosch et al，Plant Cell 7，1941-1950(1995))；WF27082环四肽(PCT申请WO 98/48825)；和Chlamydocin(Bosch et al，同上)。
C.短链脂肪酸(SCFA)衍生物例如丁酸钠(Cousens et al，J.Biol.Chem.254，1716-1723(1979))；异戊酸盐(酯)(McBain et al，Biochem.Pharm.531357-1368(1997))；戊酸盐(酯)(McBain et al，同上)；4-苯基丁酸盐(酯)(4-PBA)(Lea and Tulsyan，Anticancer Research，15，879-873(1995))；丁酸苯酯(PB)(Wang et al，Cancer Research，59，2766-2799(1999))；丙酸盐(酯)(McBain et al，同上)；丁酰胺(Lea and Tulsyan，同上)；异丁酰胺(Lea and Tulsyan，同上)；乙酸苯酯(Lea and.Tulsyan，同上)；3-溴丙酸盐(酯)(Lea and Tulsyan，同上)；三丁精(Guan et al，CancerResearch，60，749-755(2000))；丙戊酸、丙戊酸盐(酯)和PivanexTM。
D.苯甲酰胺衍生物例如CI-994；MS-275[N-(2-氨基苯基)-4-[N-(吡啶-3-基甲氧基羰基)氨基甲基]苯甲酰胺](Saito et al，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 96，4592-4597(1999))；和MS-275的3′-氨基衍生物(Saito et al.，同上)。
E.亲电性酮衍生物例如三氟甲基酮(Frey et al，Bioorganic & Med.Chem.Lett.(2002)，12，3443-3447；U.S.6,511,990)和α-酮基酰胺例如N-甲基-α-酮基酰胺。
F.其它HDAC抑制剂例如天然产物psammaplins和Depudecin(Kwon et al.1998.PNAS 953356-3361)。
异羟肟酸基HDAC抑制剂包括N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)、间羧基肉桂酸二异羟肟酸酯(CBHA)和pyroxamide。已证实SAHA与组蛋白脱乙酰酶的催化袋直接结合。SAHA诱导培养基中转化细胞的细胞周期停滞、分化和/或凋亡，和抑制啮齿动物中肿瘤生长。SAHA在实体瘤和血癌具有这些有效诱导作用。已证实，SAHA有效抑制动物中肿瘤生长并对动物无毒性。SAHA引起的肿瘤生长抑制与肿瘤中乙酰化组蛋白蓄积有关。SAHA有效抑制致癌原(N-甲基亚硝基脲)诱发的大鼠乳腺肿瘤发育和连续生长。在130天研究中，给予大鼠掺入SAHA的饲料。因此，SAHA是无毒的口服活性抗肿瘤药物，其作用机理涉及组蛋白脱乙酰酶活性抑制。
HDAC抑制剂包括在颁给某些本发明人的美国专利号5,369,108、5,932,616、5,700,811、6,087,367和6,511,990中公开的那些化合物，这些专利的公开化合物、全部内容通过引用结合到本文中，它们的非限制性实例列举如下 具体的HDAC抑制剂包括由以下结构式代表的N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA；N-羟基-N′-苯基辛二酰胺)
此类化合物和其它HDAC抑制剂的其它实例可在以下找到均授予Breslow等的1994年11月29日颁布的U.S.专利号5,369,108；1997年12月23日颁布的U.S.专利号5,700,811；1998年6月30日颁布的U.S.专利号5,773,474；1999年8月3日颁布的U.S.专利号5,932,616和2003年1月28日颁布的U.S.专利号6,511,990；均授予Marks等的1991年10月8日颁布的U.S.专利号5,055,608；1992年12月29日颁布的U.S.专利号5,175,191和1997年3月4日颁布的U.S.专利号5,608,108；和Yoshida，M.，et al.，Bioassays 17，423-430(1995)；Saito，A.，et al.，PNAS USA 96，4592-4597，(1999)；Furamai R.et al.，PNAS USA 98(1)，87-92(2001)；Komatsu，Y.，et al.，Cancer Res.61(11)，4459-4466(2001)；Su，G.H.，et al.，Cancer Res.60，3137-3142(2000)；Lee，B.I.et al.，Cancer Res.61(3)，931-934；Suzuki，T.，et al.，J.Med.Chem.42(15)，3001-3003(1999)；2001年3月15日公布的Sloan-Kettering Institute for Cancer Research and The Trustees ofColumbia University的PCT申请WO 01/18171；公布的Hoffmann-LaRoche的PCT申请WO 02/246144；公布的Novartis的PCT申请WO02/22577；公布的Prolifix的PCT申请WO 02/30879；公布的均为Methylgene，Inc.的PCT申请WO 01/38322(2001年5月31日公布)、WO 01/70675(2001年9月27日公布)和WO 00/71703(2000年11月30日公布)；1999年10月8日公布授予Fujisawa Pharmaceutical Co.，Ltd.的PCT申请WO 00/21979；1998年3月11日公布的Beacon Laboratories，L.L.C.的PCT申请WO 98/40080；和Curtin M.(Current patent status ofHDAC inhibitors(目前HDAC抑制剂的专利状态)Expert Opin.Ther.Patents(2002)12(9)1375-1384和其中引用的参考文献)。
可按照实验详述部分概括的方法或按照U.S.专利号5,369,108、5,700,811、5,932,616和6,511,990中列举的方法或按照本领域技术人员已知的任何其它方法，合成SAHA或任何其它HDAC，所述专利内容通过引用整体结合到本文中。
具体的HDAC抑制剂的非限制性实例列于下表中。应注意，本发明包括与以下代表的化合物结构相似且能够抑制组蛋白脱乙酰酶的任何化合物。
酪氨酸激酶抑制剂和其它疗法 除用于治疗癌症的传统细胞毒和激素疗法外，还引入新开发的治疗癌症的其它方法。例如，多种形式的基因疗法正在进行临床前或临床试验。另外，目前正在开发基于肿瘤血管化(血管发生)抑制的方法。该计划的目的是切断肿瘤的通过新建立的肿瘤血管系统提供的营养和氧来源。另外，还正在试图通过诱导瘤细胞终末分化进行癌症治疗。合适的分化药物包括在以下任何一个或多个参考文献中公开的化合物，文献内容通过引用结合到本文中。
A)极性化合物(Marks et al.(1987)；Friend，C，Scher，W.，Holland，J.W.，and Sato，T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)68378-382；Tanaka，M.，Levy，J.，Terada，M.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.，and Marks，P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)721003-1006；Reuben，R.C，Wife，R.L.，Breslow，R.，Rifkind，R.A.，and Marks，P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)73862-866)；B)维生素D和视黄酸的衍生物(Abe，E.，Miyaura，C，Sakagami，H.，Takeda，M.，Konno，K.，Yamazaki，T.，Yoshika，S.，and Suda，T.(1981)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)784990-4994；Schwartz，E.L.，Snoddy，J.R.，Kreutter，D.，Rasmussen，H.，and Sartorelli，A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.Cancer Res.2418；Tanenaga，K.，Hozumi，M.，and Sakagami，Y.(1980)Cancer Res.40914-919)；C)甾体激素(Lotem，J.and Sachs，L.(1975)Int.J.Cancer 15731-740)；D)生长因子(Sachs，L.(1978)Nature(Lond.)274535，Metcalf，D.(1985)Science，22916-22)；E)蛋白酶(Scher，W.，Scher，B.M.，andWaxman，S.(1983)Exp.Hematol.11490-498；Scher，W.，Scher，B.M.，and Waxman，S.(1982)Biochem.& Biophys.Res.Comm.109348-354)；F)肿瘤启动子(Huberman，E.and Callaham，M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)761293-1297；Lottem，J.and Sachs，L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)765158-5162)；和G)DNA或RNA合成的抑制剂(Schwartz，E.L.and Sartorelli，A.C.(1982)Cancer Res.422651-2655，Terada，M.，Epner，E.，Nudel，U.，Salmon，J.，Fibach，E.，Rifkind，R.A.，and Marks，P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)752795-2799；Morin，M.J.and Sartorelli，A.C.(1984)Cancer Res.442807-2812；Schwartz，E.L.，Brown，B.J.，Nierenberg，M.，Marsh，J.C，and Sartorelli，A.C.(1983)Cancer Res.432725-2730；Sugano，H.，Furusawa，M.，Kawaguchi，T.，and Ikawa，Y.(1973)Bibl.Hematol.39943-954；Ebert，P.S.，Wars，L，and Buell，D.N.(1976)Cancer Res.361809-1813；Hayashi，M.，Okabe，J.，and Hozumi，M.(1979)Gann 70235-238)。
可与本发明一起使用的酪氨酸激酶抑制剂包括降低一种或多种酪氨酸激酶活性或水平的所有天然、重组和合成药物(例如受体酪氨酸激酶)，例如EGFR(ErbB-1；HER-1)、HER-2/neu(ErbB-2)、HER-3(ErbB-3)、HER-4(ErbB-4)、中域(discoidin domain)受体(DDR)、ephrin受体(EPHR)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)、肝细胞生长因子受体(HGFR)、胰岛素受体(INSR)、白细胞酪氨酸激酶(Ltk/Alk)、肌肉特异性激酶(Musk)、转化生长因子受体(例如TGFβ-RI和TGFβ-RII)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)和血管内皮生长因子受体(VEGFR)。抑制剂包括受体酪氨酸激酶的内源性或改性配体例如表皮生长因子(例如EGF)、神经生长因子(例如NGFα、NGFβ、NGFγ)、heregulin(例如HRGα、HRGβ)、转化生长因子(例如TGFα、TGFβ)、epiregulin(例如EP)、双调蛋白(例如AR)、β动物纤维素(例如BTC)、结合肝素的EGF样生长因子(例如HB-EGF)、神经调节蛋白(例如NRG-1、NRG-2、NRG-4、NRG-4又称为胶质生长因子)、乙酰胆碱受体-诱导活性(ARIA)和感觉运动神经元衍生生长因子(SMDGF)。
其它抑制剂包括DMPQ(5，7-二甲氧基-3-(4-吡啶基)喹啉二盐酸盐)、氨基染料木黄酮(4′-氨基-6-羟基黄酮)、制表霉素类似物(2，5-二羟甲基肉桂酸酯、2，5-二羟基肉桂酸甲酯)、伊马替尼(Gleevec TM，GlivecTM；STI-571；4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基(yrimidinyl)]氨基]-苯基]苯甲酰胺甲磺酸盐)、LFM-A13(2-氰基-N-(2，5-二溴苯基)-3-羟基-2-丁烯酰胺)、PD153035(ZM 252868；4-[(3-溴苯基)氨基]-6，7-二甲氧基喹唑啉盐酸盐)、Piceatannol(反式-3，3′，4，5′-四羟基-1，2-二苯乙烯、4-[(1E)-2-(3，5-二羟基苯基)乙烯基]-1，2-苯二酚)、PP1(4-氨基-5-(4-甲基苯基)-7-(叔丁基)吡唑并[3，4-d]嘧啶)、PP2(4-氨基-5-(4-氯苯基)-7-(叔丁基)吡唑并[3，4，d]嘧啶)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)(OmnitargTM；rhuMAb2C4)、SU4312(3-[[4-(二甲基氨基)苯基]亚甲基]-1，3-二氢-2H-吲哚-2-酮)、SU6656(2，3-二氢-N，N-二甲基-2-氧代-3-[(4，5，6，7-四氢-1H-吲哚-2-基)亚甲基]-1H-吲哚-5-磺酰胺)、贝伐单抗(Avastin
rhuMAb VEGF)、Semaxanib(SU5416)、SU6668(Sugen，Inc.)和ZD6126(Angiogene Pharmaceuticals)。包括EGFR抑制剂例如西妥昔单抗(Erbitux；IMC-C225；MoAb C225)和Gefitinib(IRESSATM；ZD1839；ZD1839；4-(3-氯-4-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代丙氧基)喹唑啉)、ZD6474(AZD6474)和EMD-72000(Matuzumab)、Panitumab(ABX-EGF；MoAb ABX-EGF)；ICR-62(MoAbICR-62)、CI-1033(PD183805；N-[-4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-6-喹唑啉基]-2-丙烯酰胺)、Lapatinib(GW572016)、AEE788(吡咯并嘧啶；Novartis)、EKB-569(Wyeth-Ayerst)和EXEL7647/EXEL 09999(EXELIS)。还包括埃罗替尼(erlotinib)和衍生物例如Tarceva
NSC 718781、CP-358774、OSI-774、R1415；由以下结构代表的N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺或其药学上可接受的盐或水合物(例如甲磺酸盐、一盐酸盐)
可用于治疗肺癌(例如NSCLC)的药物包括上述抑制剂和培美曲塞(Alimta
)、硼替佐米(Velcade
)、Tipifarnib、Lonafarnib、BMS214662、普啉司他、BMS275291、新伐司他、ISIS3521(AffmitakTM；LY900003)、ISIS 5132、Oblimersen(Genasense
G3139)和羧基酰氨基三唑(CAI)(参见例如Isobe T，et al，Semin.Oncol.32315-328，2005)。
其它药物例如辅助治疗药物也可与本发明一起使用。可用此类辅助药物增加抗癌药物的有效性，或防止或治疗与抗癌药有关的病症例如血细胞数低、中性白细胞减少、贫血、血小板减少、高钙血症、粘膜炎、挫伤、出血、毒性(例如亚叶酸)、疲劳、疼痛、恶心和呕吐。这些药物包括刺激血红细胞生成的阿法依泊汀(例如Procrit
Epogen
)、G-CSF(粒细胞集落刺激因子；刺激嗜中性粒细胞生成的非格司亭例如Neupogen
)、刺激几种血白细胞生成的GM-CSF(粒细胞巨嗜细胞集落刺激因子)，它们包括刺激血小板生成的巨嗜细胞和IL-11(白介素-11例如Neumega
)。
亚叶酸(例如亚叶酸钙，Roxane Laboratories，Inc.，Columbus，OH)可作为叶酸拮抗剂药物的解毒药。用亚叶酸钙减少毒性和抵消甲氨蝶呤消除减少和疏忽导致叶酸拮抗剂过量的作用。给药后，亚叶酸被吸收，进入还原叶酸的总身体池。给予亚叶酸后出现的血浆和血清中叶酸活性增加主要是因5-甲基四氢叶酸所致。参于使用叶酸的反应的亚叶酸不需要通过二氢叶酸还原酶还原。亚叶酸钙是由以下结构代表的N-[4-[[(2-氨基-5-甲酰基-1，4，5，6，7，8-六氢-4-氧代-6-蝶啶基)甲基]氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸的钙盐
立体化学 许多有机化合物存在具有使平面偏振光旋转的能力的旋光形式。当描述旋光化合物时，用前缀D和L或R和S表示围绕其手性中心的分子的绝对构型。用前缀d和1或(+)和(-)表示化合物使平面偏振光旋转的标记，(-)或表示化合物是左旋的。具有(+)或d前缀的化合物为右旋。对于给出的化学结构，除它们互相是非重叠的镜像外，这些称为立体异构体的化合物是相同的。具体立体异构体也可称为对映体，此类异构体的混合物通常称为对映体混合物。50∶50的对映体的混合物称为外消旋混合物。
本文中所述多种化合物可具有一个或多个手性中心。因此可存在不同对映体形式。如果需要，可用星号(*)表示手性碳。当与手性碳连接的键绘制为本发明结构式的直线时，应理解手性碳的(R)和(S)构型和由此产生的对映体及其混合物包括在该结构式中。与本领域中使用的相同，当需要阐明手性碳的绝对构型时，可将与手性碳连接的键中的一条绘制为楔形(与平面之上的原子连接的键)，可将其它绘制为一系列短平行线或楔形状短平行线(与平面之下的原子连接的键)。可用Cahn-Inglod-Prelog系统将(R)或(S)构型分配给手性碳。
当本发明HDAC抑制剂含有一个手性中心时，化合物存在两种对映体形式，本发明包括对映体和对映体的混合物例如称为外消旋混合物的特殊的50∶50的混合物。可通过本领域技术人员已知的方法拆分对映体，这些方法例如为形成非对映体的盐，通过结晶将其分离(参见CRC Handbook of Optical Resolutions via Diastereomeric SaltFormation by David Kozma(CRC Press，2001))；形成非对映体衍生物或络合物，通过例如结晶、气-液或液体层析将其分离；使一种对映体与专一性对映体试剂选择性反应例如酶酯化；或在手性环境中例如在手性载体例如含结合的手性配体的硅胶上或在手性溶剂存在下，进行气-液或液体层析。可意识到，当通过上述分离方法将需要的对映体转化为另一种化学实体时，需要进一步的步骤以释放需要的对映体形式。或者，可通过不对称合成，用旋光试剂、底物、催化剂或溶剂合成特定的对映体，或通过不对称转化将一种对映体转化为另一种，得到特定的对映体。
可以理解，本发明化合物的手性碳的特定的绝对构型的名称表示标示的对映体形式的化合物为对映体过量(ee)，或换言之为基本上不含其它对映体。例如，″R″型化合物基本上不含″S″型化合物，因此为″S″型对映体过量。相反，″S″型的化合物基本上不含″R″型化合物，因此为″R″型对映体过量。本文中使用的对映体过量是存在的特定对映体大于50％。例如，对映体过量可以为约60％或更多，例如约70％或更多，例如约80％或更多，例如约90％或更多。在特定的实施方案中，当标明具体绝对构型时，描绘的化合物的对映体过量为至少约90％。在更特定的实施方案中，化合物的对映体过量为至少约95％，例如至少约97.5％，例如至少99％对映体过量。
当本发明化合物具有两个或多个手性碳时，它可具有两个以上的旋光异构体，且可存在非对映体形式。例如，当有两个手性碳时，化合物可具有高达4个旋光异构体和2对对映体((S，S)/(R，R)和(R，S)/(S，R))。对映体对(例如(S，S)/(R，R))互为镜像立体异构体。不为镜像(例如(S，S)和(R，S))的立体异构体为非对映体。可通过本领域技术人员已知的方法例如层析或结晶将非对映体对分离，可按上述将各对中的单一对映体分离。本发明包括此类化合物的各非对映体及其混合物。
除本文中另有明确说明外，本文中使用的“一”和“该”包括单数和复数指示物。因此，例如提及“活性剂”或“药理活性剂”包括单一活性剂和两个或多个不同活性剂的组合，提及“载体”包括两种或多种载体的混合物和单一载体等。
本发明还包括本文中公开的HDAC抑制剂的前药。可用熟知的药理学技术制备任何化合物的前药。
除以上列举的化合物外，本发明还包括此类化合物的同系物和类似物的用途。在本文中，同系物是具有与上述化合物的结构基本相似结构的分子，类似物是无论结构是否相似均具有生物基本相似性的分子。
烷化剂 烷化剂的实例包括但不限于双氯乙胺(氮芥例如苯丁酸氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、氮芥、美法仑、乌拉莫司汀)、吖丙啶(例如塞替派)、烷基酮磺酸酯(例如白消安)、亚硝基脲(例如卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星)、非典型烷化剂(六甲蜜胺、达卡巴嗪和丙卡巴肼)、铂化合物(卡铂和顺铂)。这些化合物与磷酸酯基、氨基、羟基、巯基(sulfihydryl)、羧基和咪唑基反应。
顺铂(例如Platinol
-AQ，Bristol-Myers Squibb Co.，Princeton，NJ)是含被处于顺位的两个氯原子和两个氨分子包围的铂中心原子的重金属络合物。顺铂的抗癌机理未完全明了，但通常公认它通过形成DNA加合物起作用。据信，顺铂与细胞核DNA结合，干扰正常转录和/或DNA复制机制。当顺铂-DNA加合物不能被细胞机器有效加工时，则导致细胞死亡。细胞可通过凋亡或坏死死亡，两种机制均可在肿瘤细胞群体中起作用。顺铂的化学名是由以下结构代表的顺式-二胺二氯合铂(例如顺式-二胺二氯合铂(II))
环磷酰胺(例如Cytoxan
，Baxter Healthcare Corp.，Deerfield，IL)在化学上与氮芥有关。环磷酰胺通过微粒体氧化酶系统的混合功能转化为活性烷基化代谢物。这些代谢物可干扰快速增殖癌细胞的生长。据认为，该作用机制涉及肿瘤细胞DNA交联。以Cytoxan
出现的环磷酰胺一水合物的化学名是由以下结构代表的2-[二(2-氯乙基)氨基]四氢-2H-1，3，2-氧杂氮杂磷杂苯(phosphorine)2-氧化物一水合物
奥沙利铂(例如EloxatinTM，Sanofi-Synthelabo，Inc.，New York，NY)是其中铂原子与1，2-二氨基环己烷(DACH)和作为离去基团的草酸配体络合的有机铂络合物。奥沙利铂在生理溶液中经历非酶转化，成为形成链间和链内铂-DNA交联体的活性衍生物。交联体在两相邻鸟嘌呤(GG)、相邻腺嘌呤-鸟嘌呤(AG)之间的N7位形成，鸟嘌呤之间被间插核苷酸(GNG)分隔。这些交联体抑制癌和非癌细胞中DNA复制和转录。奥沙利铂的化学名是由以下结构代表的顺式-[(1R，2R)-1，2-环己烷二胺-N，N′][草酸根(oxalato)(2-)-O，O′]铂
Flavopiridol(例如L86-8275；Alvocidib Flavopiridol(例如L86-8275；Alvocidib条件，这些药物离子化，产生与有接受力的核酸和蛋白连接的正电离子，导致细胞周期停滞和/或细胞死亡。烷化剂是细胞周期阶段Flavopiridol(例如L86-8275；Alvocidib非特异性药物，因为它们独立于细胞周期的特定阶段发挥活性。氮芥和烷酮磺酸烷基酯对细胞的G1或M期最有效。亚硝基脲、氮芥和吖丙啶削弱G1和S期至M期的进程。Chabner and Collins eds.(1990)“CancerChemotherapyPnnciples and Practice″，PhiladelphiaJB Lippincott。
烷化剂对多种肿瘤疾病有活性，在治疗白血病和淋巴瘤以及实体瘤中有明显活性。在临床上，该组药物通常用于治疗急性和慢性白血病；霍奇金病；非霍奇金淋巴瘤；多发性骨髓瘤；原发性脑瘤；乳腺、卵巢、睾丸、肺、膀胱、子宫颈、头和颈的癌；和恶性黑素瘤。
抗生素药物 抗生素(例如细胞毒抗生素)通过直接抑制DNA或RNA合成起作用，对整个细胞周期有效。抗生素的实例包括蒽环霉素类(例如多柔比星、柔红霉素、表柔比星、伊达比星和蒽二酮)、丝裂霉素C、博来霉素、放线菌素D、Plicatomycin。这些抗生素药物通过导向不同细胞元件干扰细胞生长。例如，据信蒽环霉素类通常在具有转录活性的DNA区域干扰DNA拓扑酶II的作用，导致DNA链分离。
伊达比星(例如Idamycin PFS
Pharmacia & Upjohn Co.，Kalamazoo，MI)是柔红霉素的DNA-嵌入类似物，它对核酸合成有抑制作用，与拓扑异构酶II相互作用。盐酸伊达比星的化学名是由以下结构代表的5，12-并四苯二酮、9-乙酰基-7-[(3-氨基-2，3，6-三脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖基(hexopyranosyl))氧基]-7，8，9，10-四氢-6，9，11-三羟基盐酸盐、(7S-顺式)
多柔比星(例如Adriamycin
Ben Venue Laboratories，Inc.，Bedford，OH)是从Streptomyces peucetius var.caesius分离的细胞毒蒽环抗生素。多柔比星可能通过平面蒽环霉素核特异性嵌入DNA双螺旋与核酸结合。多柔比星由通过7位环原子上的糖苷键与氨基糖六碳氨糖(daunosamine)连接的并四苯醌核组成。盐酸多柔比星的化学名是由以下结构代表的(8S，10S)-10-[(3-氨基-2，3，6-三脱氧-a-L-来苏-己吡喃糖基)-氧基]-8-乙醇酰-7，8，9，10-四氢-6，8，11-三羟基-1-甲氧基-5，12-并四苯二酮盐酸盐
通常相信，博来霉素与铁螯合，形成活化络合物形式，然后该络合物与DNA的碱基结合，造成链分离和细胞死亡。
抗生素药物已用作多种肿瘤疾病的治疗药物，这些疾病包括乳腺、肺、胃和甲状腺的癌；淋巴瘤；骨髓性白血病；骨髓瘤和肉瘤。
抗代谢药物 抗代谢药物(即抗代谢物)是对癌细胞的生理和增殖至关重要的代谢过程进行干扰的一组药物。活性增殖癌细胞需要不断合成大量核酸、蛋白、脂质和其它必需的细胞元件。
多种抗代谢物抑制嘌呤或嘧啶核苷的合成，或抑制DNA复制的酶。某些抗代谢物还干扰核苷和RNA的合成和/或氨基酸代谢和蛋白合成。通过干扰必需的细胞元件的合成，抗代谢物可延缓或抑制癌细胞生长。抗有丝分裂药物包括在该组内。抗代谢药物的实例包括但不限于氟尿嘧啶(5-FU)、氟尿苷(5-FUdR)、甲氨蝶呤、亚叶酸、羟基脲、硫鸟嘌呤(6-TG)、巯基嘌呤(6-MP)、阿糖胞苷、喷司他汀、磷酸氟达拉滨、克拉曲滨(2-CDA)、天冬酰胺酶和吉西他滨。
吉西他滨(例如Gemzar
HCl，Eli Lilly and Co.，Indianapolis，IN)是有抗肿瘤活性的核苷类似物。吉西他滨具有细胞周期特异性，主要杀伤经历DNA合成(S期)的细胞，还阻断细胞通过G1/S期边界递进。吉西他滨在细胞内通过核苷激酶代谢为活性二磷酸(dFdCDP)和三磷酸(dFdCTP)核苷。吉西他滨的细胞毒作用归因于二磷酸核苷和三磷酸核苷两种作用的结合，该作用导致DNA合成抑制。吉西他滨引起核小体间DNA断裂，它是程序性细胞死亡特性之一。盐酸吉西他滨的化学名是由以下结构代表的2′-脱氧-2′，2′-二氟胞苷一盐酸盐(β-异构体)
硼替佐米(例如Velcade
Millennium Pharmaceuticals，Inc.，Cambridge，MA)是改性二肽硼酸。硼替佐米是哺乳动物细胞中26S蛋白酶体的可逆抑制剂。抑制26S蛋白酶体可阻止定向蛋白水解，它可影响细胞内多信号级联。该正常稳态破坏机制可导致细胞死亡。实验证明硼替佐米在体外为细胞毒，在体内可造成细胞生长延缓。硼替佐米单体硼酸的化学名是由以下结构代表的[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸
培美曲塞(例如Altima
Eli Lilly and Co.，Indianapolis，IN)是抗叶酸药，它通过破坏对细胞复制至关重要的依赖叶酸的代谢过程发挥作用。体外研究证实，培美曲塞抑制胸苷酸合成(TS)、二氢叶酸还原酶(DHFR)，甘氨酰胺核苷酸甲酰基转移酶(GARFT)和参与全程生物合成胸苷和嘌呤核苷酸的所有依赖叶酸的酶。培美曲塞二钠七水合物的化学名为由以下结构代表的L-谷氨酸、N-[4-[2-(2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-1H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基]-，二钠盐，七水合物
阿扎胞苷(例如VidazaTM，Pharmion Corp.，Boulder，CO)是胞苷的嘧啶核苷类似物，它造成DNA高甲基化和对骨髓中异常造血细胞的细胞毒性。高甲基化可恢复涉及分化和增殖的基因的正常功能，DNA合成不造成重大抑制。阿扎胞苷的细胞毒作用造成快速分裂的细胞死亡，它们包括对正常生长控制机制细胞不再敏感的细胞。阿扎胞苷的化学名是由以下结构代表的4-氨基-1β-D-呋喃核糖基-s-三嗪(trianzin)-2(1H)-酮
Flavopiridol(例如L86-8275；Alvocidib；Aventis Pharmaceuticals，Inc.，Bridgewater，NJ)是合成的黄酮，它起依赖细胞周期蛋白激酶(CDK)的抑制剂的作用。细胞通过细胞周期的不同期需要激活CDK，这些期包括G1-S和G2-M。已证实，Flavopiridol在G1-S和G2-M阶段阻断细胞周期递进，体外诱导凋亡。按照在Alvocidib中的发现，Flavopiridol的化学名是由以下结构代表的(-)-2-(2-氯苯基)-5，7-二羟基-8-[(3R，4S)-3-羟基-1-甲基-4-哌啶基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮盐酸盐
氟尿嘧啶(例如氟尿嘧啶注射液，Gensia Sicor Pharmaceuticals，Inc.，Irvine，CA；Adrucil
SP Pharmaceuticals Albuquerque，NM)是氟化嘧啶。氟尿嘧啶的代谢可在合成代谢途径中阻断脱氧尿苷酸甲基化反应为胸苷酸。按照该方式，氟尿嘧啶可干扰DNA合成，且在较低程度上抑制核苷酸(RNA)形成。因为DNA和RNA是细胞分裂和生长所必需的，所以氟尿嘧啶的作用在较低程度上可以造成胸腺嘧啶缺乏，由此引起细胞生长和死亡失衡。DNA和RNA抑制作用在生长更快和以更快速度吸收氟尿嘧啶的那些细胞上最显著。氟尿嘧啶的化学式是由以下结构代表的5-氟-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮
抗代谢药物已广泛用于治疗几种普通形式的癌症，它们包括结肠、直肠、乳腺、肝脏、胃和胰腺的癌；恶性黑素瘤、急性和慢性白血病和毛细胞白血病。
激素药物 激素药物是调节其靶器官生长和发育的一组药物。大多数激素药物是性甾体及其衍生物和类似物例如雌激素、孕激素、抗雌激素、雄激素、抗雄激素和孕酮。这些激素药物可作为性甾体的受体的拮抗剂下调受体表达和关键基因转录。此类激素药物的实例是合成雌激素(例如己烯雌酚)、抗雌激素(例如他莫昔芬、托瑞米芬、Fluoxymesterol和雷洛昔芬)、抗雄激素(例如比卡鲁胺、尼鲁米特和氟他胺)、芳香酶抑制剂(例如氨鲁米特、阿那曲唑和四唑)、黄体激素释放激素(LHRH)类似物、酮康唑、醋酸戈舍瑞林、亮丙立德、醋酸甲地孕酮和米非司酮。
泼尼松(例如Deltasone
Pharmacia & Upjohn Co.，Kalamazoo，MI)是易在胃肠道中吸收的肾上腺皮质类固醇和合成糖皮质素。糖皮质素调节身体对不同刺激的免疫反应。合成糖皮质素主要用于其抗炎作用和治疗白血病和淋巴瘤，和其它造血障碍例如血小板减少、成红细胞减少和贫血。泼尼松的化学名为由以下结构代表的孕-1，4-二烯-3，11，20-三酮，17，21-二羟基-(又为1，4-孕二烯-17α，21-二醇-3，11，20-三酮；1-可的松；17α，21-二羟基-1，4-孕二烯-3，11，20-三酮；和脱氢可的松)
激素药物用于治疗乳腺癌、前列腺癌、黑素瘤和脑膜瘤。因为激素的主要作用通过甾体受体介导，所以60％乳腺癌阳性受体对一线激素药物产生反应；而小于10％受体阴性的肿瘤有反应。与激素药物有关的主要副作用是潮红。经常发生的表现是骨痛、皮肤周围红斑损害突然增加和高钙血下降。
尤其是，孕激素用于治疗子宫内膜癌，因为这些癌发生在暴露于不被孕激素拮抗的高水平的雌激素的妇女中。
抗雄激素主要用于治疗依赖激素的前列腺癌。它们用于降低睾酮水平，从而抑制肿瘤生长。
乳腺癌的激素治疗涉及降低乳腺癌细胞中依赖雌激素激活的雌激素受体水平。抗雌激素通过与雌激素受体结合和阻止辅激活蛋白募集起作用，因此抑制雌激素信号。
LHRH类似物通过降低睾酮水平用于治疗前列腺癌，从而减少肿瘤生长。
芳香酶抑制剂通过抑制激素合成所需的酶起作用。在绝经后的妇女中，雌激素的主要来源是通过芳香酶转化雄烯二酮。
植物来源药物 植物来源药物是来源于植物或根据药物的分子结构改良的一组药物。它们通过阻止细胞分裂必需的细胞元件装配，抑制细胞复制。
植物来源药物的实例包括长春花生物碱(例如长春新碱、长春碱、长春酰胺、长春利定和长春瑞滨)、鬼臼毒素(例如依托泊苷(VP-16)和替尼泊苷(VM-26))和紫杉烷类(例如紫杉醇和多西他赛)。这些植物来源药物通常起抗有丝分裂药物的作用，它们与微管蛋白结合，抑制有丝分裂。据信，鬼臼毒素例如依托泊苷通过与拓扑异构酶II相互作用导致DNA链分离，干扰DNA合成。
长春新碱(例如硫酸长春新碱，Gensia Sicor Pharmaceuticals，Irvine，CA)是从普通花类药草长春花属植物(Vinca rosea Linn)得到的生物碱。长春新碱原鉴定为Leurocristine，称为LCR和VCR。长春新碱的作用机制与抑制在有丝分裂纺锤体中微管形成，导致在中期阶段的分裂细胞停滞有关。硫酸长春新碱是由以下结构代表的长春碱，22-氧代-，硫酸(1∶1)(盐)
依托泊苷(例如VePesid
Bristol-Myers Squibb Co.，Princeton，NJ，通常又称为VP-16)是鬼臼毒素的半合成衍生物。已证实，依托泊苷造成哺乳动物细胞中期停滞和G2停滞。在高浓度下，依托泊苷引发进入有丝分裂的细胞溶解。在低浓度下，依托泊苷抑制进入前期的细胞进入。依托泊苷的主要的大分子作用似乎通过与DNA拓扑异构酶II相互作用或形成自由基，诱发DNA链断裂。磷酸依托泊苷(例如Etopophos
Bristol-Myers Squibb Co.，Princeton，NJ)是水溶性依托泊苷的酯。磷酸依托泊苷的化学名是由以下结构代表的4′-去甲基鬼臼毒素9-[4，6-O-(R)-乙叉基-b-D-吡喃型葡萄糖苷]，4′-(磷酸二氢盐)
依托泊苷的化学名是由以下结构代表的4′-去甲基表鬼臼毒素9-[4，6-O-(R)-乙叉基-b-D-吡喃型葡萄糖苷]
植物来源的药物用于治疗多种形式的癌症。例如，长春新碱用于治疗白血病、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤、儿童神经胚细胞瘤、横纹肌肉瘤和维尔姆斯瘤。长春碱用于抗淋巴瘤、睾丸癌、肾细胞癌、真菌病和卡泊西肉瘤。已证实多西他赛(Doxetaxel)具有抗晚期乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和卵巢癌的有希望的活性。
依托泊苷对多种肿瘤有活性，其中对小细胞肺癌、睾丸癌和NSCLC最敏感。
生物药物 生物药物是当单独使用或与化疗和/或放疗联用时引起癌/肿瘤消退的一组生物分子。生物药物的实例包括免疫调节蛋白例如细胞因子、抗肿瘤抗原的单克隆抗体、肿瘤抑制基因和癌症疫苗。
细胞因子具有广泛的免疫调节活性。某些细胞因子例如白介素-2(IL-2，阿地白介素)和干扰素-α(IFN-α)证实有抗肿瘤活性，已批准其治疗转移性肾细胞癌和转移性恶性黑素瘤患者。IL-2是对T细胞介导的免疫反应重要的T细胞生长因子。据信，IL-2对某些患者的选择性抗肿瘤作用是细胞介导的区分本身和异物的免疫反应的结果。
干扰素-α包括活性重叠的23个以上的相关亚型。IFN-α证实具有抗多种实体瘤和血癌的活性，似乎尤其对血癌敏感。
干扰素的实例包括干扰素-α、干扰素-β(成纤维细胞干扰素)和干扰素-γ(成纤维细胞干扰素)。其它细胞因子的实例包括红细胞生成素(Epoietin-α)、粒细胞-CSF(非格司亭)和粒细胞、巨嗜细胞-CSF(沙格司亭)。其它非细胞因子免疫调节剂包括卡介苗、左旋咪唑和奥曲肽；与天然激素生长抑素作用类似的长效八肽。
另外，抗癌治疗可包括通过使用抗体的免疫疗法和用于疫苗方法的试剂的治疗。该疗法组中的主要药物是单独的或携带例如毒素或处理癌细胞的化疗药物/细胞毒药物的抗体。抗肿瘤抗原的单克隆抗体是抗由肿瘤表达的抗原，尤其肿瘤特异性抗原的抗体。例如，提出用单克隆抗体HERCEPTIN
(曲妥单抗)抗人表皮生长因子受体2(HER2)，该受体在包括转移性乳腺癌的某些乳腺瘤中过度表达。HER2蛋白过度表达与更攻击性疾病和临床中预后较差有关。HERCEPTIN
作为单独药物用于治疗转移性乳腺癌患者，这种患者的肿瘤过度表达HER2蛋白。
抗肿瘤抗原的单克隆抗体的另一个实例是提出抗淋巴瘤细胞上的CD20和选择性排除正常和恶性CD20+前B和成熟B细胞的RITUXAN
(利妥昔单抗)。
RITUXAN是单独用于治疗复发或顽固性低度或毛囊性CD20+、B细胞非霍奇金淋巴瘤患者的药物。MYELOTARG
(吉姆单抗奥佐米星)和CAMPATH
(阿仑单抗)是可使用的抗肿瘤抗原的单克隆抗体的其它实例。
内皮生长抑素是用于导向血管发生的纤溶酶原的裂解产物。
肿瘤抑制因子是作用为抑制细胞生长和分裂周期从而防止癌发育的基因。肿瘤抑制基因突变造成细胞不对抑制信号网络的一个和多个元件产生反应，越过细胞周期关卡，导致控制细胞生长速度增加-癌。肿瘤抑制因子的实例包括Duc-4、NF-1、NF-2、RB、p53、WT1、BRCA1和BRCA2。
DPC4涉及胰腺癌并参于抑制细胞分裂的胞质途径。NF-1为抑制Ras的蛋白编码、Ras为胞质抑制蛋白。NF-1涉及神经系统的神经纤维瘤和嗜铬细胞瘤以及骨髓白血病。NF-2编码涉及神经系统的脑膜瘤、神经鞘瘤和室管膜细胞瘤的核蛋白。RB为pRB蛋白编码，pRB蛋白是细胞周期主要抑制剂的核蛋白。RB涉及成视网膜细胞瘤和骨、膀胱、小细胞肺和乳腺癌。P53为调节细胞分裂并可诱发凋亡的p53蛋白编码。在多种癌中发现p53突变和/或钝化。WTI涉及肾的维尔姆斯瘤。BRCA1涉及乳腺和卵巢癌，BRCA2涉及乳腺癌。可将肿瘤抑制基因移植到肿瘤细胞中，其中它可发挥其肿瘤抑制功能。
癌症疫苗是诱发身体对肿瘤产生特异性免疫反应的一组药物。正在研究、开发和临床试验中的大多数癌症疫苗是与肿瘤结合的抗原(TAA)。TAA是存在于肿瘤细胞上的结构(即蛋白、酶或碳水化合物)，在正常细胞上相对不存在或稀少。由于对肿瘤细胞相当独特，TAA为免疫系统识别提供靶标并将其摧毁。TAA的实例包括包括神经节苷脂(GM2)、前列腺特异性抗原(PSA)、α-胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)(由结肠癌和其它腺癌例如乳腺、肺、胃和胰腺癌产生的)、与黑素瘤结合的抗原(MART-1、gap 100、MAGE 1，3酪氨酸酶)、乳头瘤病毒E6和E7片段、自身肿瘤细胞和异源肿瘤细胞的全细胞或部分/溶胞产物。
与本发明联用的类视色素或类视色素药物包括维生素A的所有天然、重组和合成衍生物或类似物，例如棕榈酸视黄酯、视黄酰基-β-葡糖苷酸(维生素A1β-葡糖苷酸)、磷酸视黄酯(磷酸维生素A1)、视黄酯、4-氧代视黄醇、4-氧代视黄醛、3-脱氢视黄醇(维生素A2)、11-顺式-视黄醛(11-顺式-视黄醛、11-顺式或新b维生素A1醛)、5，6-环氧视黄醇(5，6-环氧维生素A1醇)、无水视黄醇(无水维生素A1)和4-酮基视黄醇(4-酮基-维生素A1醇)、全反式视黄酸(ATRA；维甲酸；维生素A酸；3，7-二甲基-9-(2，6，6，-三甲基-1-环二十一烷-1-基)-2，4，6，8-壬四烯酸[CAS号302-79-41)、全反式视黄酸的脂质体制剂(例如ATRA-IV)、9-顺式视黄酸(9-顺式-RA；阿利维A酸；Panretin
LGD1057)、(e)-4-[2-(5，6，7，8-四氢-2-萘基)-1-丙烯基]-苯甲酸、3-甲基-(E)-4-[2-(5，6，7，8-四氢-2-萘基)-1-丙烯基]-苯甲酸、芬维A胺(N-(4-羟基苯基)视黄酰胺；4-HPR)、阿维A酯(2，4，6，8-壬四烯酸)、阿维A(Ro10-1670)、他扎罗汀(6-[2-(4，4-二甲基硫色素-6-基)-乙炔基]烟酸乙酯)、维A生育醇酯(9-顺式-维甲酸tocoferil)、阿达帕林(6-[3-(1-金刚烷基)-4-甲氧基苯基]-2-萘甲酸)、莫维A胺(三甲基甲氧基苯基-N-乙基视黄酰胺)和视黄醛。
类视色素类还包括与类视色素有关的分子例如CD437(又称为6-[3-(1-金刚烷基)-4-羟基苯基]-2-萘甲酸和AHPN)、CD2325、ST1926([E-3-(4′-羟基-3′-金刚烷基联苯-4-基)丙烯酸)、ST1878(2-[3-[2-[3-(2-甲氧基-1，1-二甲基-2-氧代乙氧基)苯氧基]乙氧基]苯氧基]异丁酸甲酯)、ST2307、ST1898、ST2306、ST2474、MM11453、MM002(3-Cl-AHPC)、MX2870-1、MX3350-1、MX84和MX90-1(Garattini etal，2004，Curr.Pharmaceut.Design 10433-448；Garattini and Terao，2004，J.Chemother.16；70-73)。与一种或多种RXR结合的类视色素药物包括在与本发明使用的药物申。还包括与一种或多种RXR结合且不与一种或多种RAR结合的类视色素药物(即与RXR选择性结合；rexinoids)，例如二十二碳六烯酸(DHA)、植烷酸、甲氧普烯酸、LG100268(LG268)、LG100324、LGD1057、SR11203、SR11217、SR11234、SR11236、SR11246、AGN194204(参见例如Simeone and Tari，2004，Cell Mol.Life Sci.611475-1484；Rigas and Dragnev，2005，TheOncologist 1022-33；Ahuja et al，2001，Mol.Pharmacol.59765-773；Gorgun and Foss，2002，Blood 1001399-1403；Bischoff et al，1999，J.Natl.Cancer Inst.912118-2123；Sun et al，1999，Clin.Cancer Res.5431-437；Crow and Chandraratna，2004，Breast Cancer Res.6R546-R555)。还包括9-顺式-RA的衍生物。尤其包括3-甲基TTNEB和有关药物例如Targretin
贝沙罗汀；LGD1069；4-[1-(5，6，7，8-四氢-3，5，5，8，8-五甲基-2-萘基)乙炔基]苯甲酸或其药学上可接受的盐或水合物。
所有这些与HDAC抑制剂例如SAHA联用方法的用途均在本发明范围内。
其它药物 其它药物例如辅助疗法也可用于本发明。可用此类辅助药物增加抗癌药物的有效性，或预防或治疗与抗癌药有关的病症例如血细胞数低、过敏反应、中性白细胞减少、贫血、血小板减少、高钙血症、粘膜炎、挫伤、出血、毒性(例如亚叶酸)、疲劳、疼痛、恶心和呕吐。止吐药(例如5-HT受体阻断剂或苯并二氮杂草)、抗炎药(例如肾上腺皮质类固醇或抗组胺药)、食物补充剂(例如叶酸)、维生素(例如维生素E、维生素C、维生素B6、维生素B12)、抑酸剂(例如H2受体阻断剂)可用于增加患者对癌症疗法的耐受性。H2受体阻断剂的实例包括雷尼替丁、法莫替丁和西咪替丁。抗组胺药的实例包括苯海拉明、氯马司汀、氯苯那明、氯苯那明、马来酸二甲茚定和异丙嗪。甾体的实例包括地塞米松、氢化可的松和泼尼松。其它药物包括生长因子例如刺激血红细胞生成的阿法依泊汀(例如Procrit
Epogen
)、刺激嗜中性粒细胞生成的G-CSF(粒细胞集落刺激因子；非格司亭例如Neupogen
)、刺激包括巨嗜细胞的几种血白细胞生成的GM-CSF(粒细胞-巨嗜细胞集落-刺激因子)；和刺激血小板生成的IL-11(白介素-11例如Neumega
)。
亚叶酸(例如亚叶酸钙，Roxane Laboratories，Inc.，Columbus，OH；也称为亚叶酸、亚叶酸钙、甲酰四氢叶酸)可作为叶酸拮抗剂的解药使用，也可加强某些药物例如氟尿嘧啶的活性。亚叶酸钙是N-[4-[[(2-氨基-5-甲酰基-1，4，5，6，7，8-六氢-4-氧代-6-蝶啶基)甲基]氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸的钙盐。
地塞米松(例如Decadron
Merck & Co.，Inc.，Whitehouse Station，NJ)是合成肾上腺皮质类固醇，它可作为控制过敏反应例如药物过敏反应的抗炎药使用。另外，用地塞米松使细胞对抗癌药的细胞毒活性增敏。口服给药的地塞米松片剂含由以下结构代表的9-氟-11-β，17，21-三羟基-16-α-甲基孕-1，4-二烯-3，20-二酮
静脉内给药的磷酸地塞米松含由以下结构代表的9-氟-11β，17-二羟基-16α-甲基-21-(膦酰基氧基)孕-1，4-二烯-3，20-二酮二钠盐
苯海拉明(例如Benadryl
Parkedale Pharmaceuticals，Inc.，Rochester，MI)是用于缓解过敏反应的抗组胺药。盐酸苯海拉明(例如注射用苯海拉明HCl)是由以下结构代表的2-(二苯基甲氧基)-N，N-二甲基乙胺盐酸盐
雷尼替丁(例如Zantac
GlaxoSmithKline，Research Triangle Park，NC)是组胺H2-受体中组胺的竞争性抑制剂，可用于减少胃酸。盐酸雷尼替丁(例如片剂或注射剂)是由以下结构代表的N[2-[[[5-[(二甲基氨基)甲基]-2-呋喃基]甲基]硫基]乙基]-N′-甲基-2-硝基-1，1-乙二胺HCl
西咪替丁(例如Tagamet
GlaxoSmithKline，Research TrianglePark，NC)也是组胺H2受体中组胺的竞争性抑制剂，可用于减少胃酸。西咪替丁是由以下结构代表的N″-氰基-N-甲基-N′-[2-[[(5-甲基-1H-咪唑-4-基)甲基]硫基]-乙基]-胍
Aprepitant(例如EMEND
Merck & Co.，Inc.)是P物质/神经激肽 1(NK1)受体拮抗剂和止吐药。Aprepitant是由以下结构代表的 5-[[(2R，3S)-2-[(1R)-1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]乙氧基]-3-(4-氟苯基)-4-吗啉基]甲基]-1，2-二氢-3H-1，2，4-三唑-3-酮
昂丹司琼(例如Zofran
GlaxoSmithKline，Research Triangle Park，NC)是5-HT3 5-羟色胺受体的选择性阻断剂和止吐药。盐酸昂丹司琼(例如注射用)是由以下结构代表的(±)1，2，3，9-四氢-9-甲基-3-[(2-甲基-1H-咪唑-1-基)甲基]-4H-咔唑-4-酮一盐酸盐二水合物
劳拉西泮(例如劳拉西泮注射液；Baxter Healthcare Corp.，Deerfield，IL)是具有抗惊厥作用的苯并二氮杂
。劳拉西泮是由以下结构代表的7-氯-5(2-氯苯基)-1，3-二氢-3-羟基-2H-1，4-苯并二氮杂
-2-酮
本发明还考虑将地塞米松加入SAHA和硼替佐米的联合药物中，增加细胞对抗骨髓瘤药物的细胞毒性的反应速度和敏感性。在本发明的一个方面，完成用伏立诺他和硼替佐米联合治疗至少1个周期后经历进行性疾病的患者可通过在每个周期的第1-4天和第9-12天，每日p.o.给予20mg地塞米松和按方案给予伏立诺他和硼替佐米治疗。
给予HDAC抑制剂 给药途径 可通过本领域技术人员已知的任何已知的给药方法给予HDAC抑制剂(例如SAHA)。给药途径的实例包括但不限于口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、局部、舌下、肌内、直肠、口颊内、鼻内、脂质体、通过吸入、阴道、眼内、通过导管或支架局部递药、皮下、脂肪内、关节内、鞘内或缓释剂型。可按照任何剂量和给药方案给予SAHA或任一HDAC抑制剂，与抗癌药物的作用一起达到有效治疗疾病的剂量。
当然，SAHA或任一其它HDAC抑制剂的给药途径独立于抗癌药物的给药途径。给予SAHA的特定途径是口服。因此按照该实施方案，通过口服给予SAHA，可通过口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌内、直肠、口颊内、鼻内、脂质体、通过吸入、阴道、眼内、通过导管或支架局部递药、皮下、脂肪内、关节内、鞘内或缓释剂型给予第二种药物(抗癌药物)。
作为实例，可通过此类口服形式如片剂、胶囊剂(其中各自包括缓释或定时释放制剂)、丸剂、散剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、混悬剂、糖浆和乳剂给予本发明HDAC抑制剂。同样，可通过静脉内(例如一次性大剂量或输注)、腹膜内、皮下、肌内或使用药学领域普通技术人员熟知的形式的其它途径，给予HDAC抑制剂。给予HDAC抑制剂的特定途径是口服。
也可通过储库注射剂或植入制剂的形式给予HDAC抑制剂，可按使活性成分缓释的方式配制储库注射剂或植入制剂。可将活性成分压制成小丸或小圆柱体，和作为储库注射剂或植入剂植入在皮下或肌内。植入剂可使用惰性材料例如可生物降解的聚合物或合成聚硅氧烷，例如Dow-Corning Corporation生产的硅橡胶、硅橡胶或其它聚合物。
也可按脂质体递药系统的形式给予HDAC抑制剂例如小单层脂质体、大单层脂质体和多室脂质体。可由多种磷脂例如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱形成脂质体。酪氨酸激酶抑制剂的脂质体制剂也可用于本发明方法。可用酪氨酸激酶抑制剂的脂质体形式增加对抑制剂的耐受性。
也可通过用单克隆抗体作为与化合物分子结合的单独载体，递送HDAC抑制剂。
也可用可溶性聚合物作为靶向药物载体制备HDAC抑制剂。此类聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基-丙基-甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基-天冬酰胺-苯酚或被棕榈酰残基取代的聚环氧乙烷-聚赖氨酸。另外，可用可用于实现控制释放药物的可生物降解的聚合物例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚醛醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两性嵌段共聚物，制备HDAC抑制剂。
在具体的实施方案中，通过口服，用明胶胶囊给予HDAC抑制剂例如SAHA，该胶囊含赋形剂例如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁。
剂量和剂量方案 可根据多种因素选择使用HDAC抑制剂的剂量方案，这些因素包括种类、种族、年龄、体重、性别和所治疗疾病的类型；所治疗疾病的严重程度(即阶段)；给药途径；患者的肾和肝功能；和所使用的具体化合物或其盐。可用剂量方案例如防止、抑制(完全或部分)或阻止疾病发展。
按照本发明，可给予连续或间歇剂量的HDAC抑制剂(例如SAHA或其药学上可接受的盐或水合物)。例如，每周可间歇给予HDAC抑制剂1-6天，或它可表示按周期(例如连续2-8周每日给药，然后不给药的停药期最长达1周)给药，或它可表示隔日给药。可按周期给予组合物，在周期间具有停药期(例如治疗2-8周，在治疗间停药期最长达1周)。
例如，可按最高达800mg总日剂量给予SAHA或任一HDAC抑制剂。可每日一次(QD)给予HDAC抑制剂，或分为多个日剂量例如每日两次(BID)和每日三次(TID)。可按最高达800mg总日剂量例如200mg、300mg、400mg、600mg或800mg，给予HDAC抑制剂，可按一个日剂量或按上述分为多个日剂量给予它们。在具体的方面，给药为口服。
在一个实施方案中，按约200-600mg剂量，每日一次给予组合物。在另一个实施方案中，按约200-400mg剂量，每日两次给予组合物。在另一个实施方案中，按约200-400mg剂量，每日两次，间歇例如每周3、4或5天给予组合物。在一个实施方案中，日剂量为200mg，可按每日一次，每日两次或每日三次给药。在一个实施方案中，日剂量为300mg，可按每日一次，每日两次或每日三次给药。在一个实施方案中，日剂量为400mg，可按每日一次，每日两次或每日三次给药。
可根据任何剂量和给药方案给予SAHA或任一HDAC抑制剂，与抗癌药物的作用一起达到有效治疗癌症的剂量。可按总日剂量给予HDAC抑制剂，该剂量可因患者而异，可按不同的剂量方案给予。例如，可按25-4000mg/m2总日剂量给予患者SAHA或任何HDAC抑制剂。尤其是，可按最高达800mg总日剂量，尤其通过口服，每日一次、两次或三次，连续(每日)或间歇(例如每周3-5日)给予SAHA或任一HDAC抑制剂。另外，可连续即每日或间歇给药。
特定的治疗方案包括连续给予(即每日)总日剂量约200mg-约600mg，每日一次、两次或三次。另一个治疗方案包括每日一次、两次或三次，每周间歇给予总日剂量约200mg-约600mg 3-5天。
在一个特定的实施方案中，按400mg剂量每日一次，或按200mg剂量每日两次，连续给予HDAC抑制剂。在另一个特定实施方案中，按400mg剂量每日一次，或按200mg剂量每日两次，每周三天，间歇给予HDAC抑制剂。在另一个特定的实施方案中，按400mg剂量每日一次，或按200mg剂量，每日两次，每周4天，间歇给予HDAC抑制剂。在另一个特定的实施方案中，按400mg剂量每日一次，或按200mg剂量每日两次，每周5天，间歇给予HDAC抑制剂。
在一个特定的实施方案中，按600mg剂量每日一次，按300mg剂量，每日两次，或按200mg剂量，每日三次，连续给予HDAC抑制剂。在另一个特定的实施方案中，按600mg剂量每日一次，按300mg剂量，每日两次，或按200mg剂量，每日三次，每周3天，间歇给予HDAC抑制剂。在另一个特定的实施方案中，按600mg剂量，每日一次；按300mg剂量，每日两次，或按200mg剂量，每日三次，每周4天，间歇给予HDAC抑制剂。在另一个特定的实施方案中，按600mg剂量，每日一次；按300mg剂量，每日两次，或按200mg剂量，每日三次，每周5天，间歇给予HDAC抑制剂。
另外，可按照任何上述方案，连续给予HDAC抑制剂几周，然后是停药期。例如，可按照任一上述方案，给予HDAC抑制剂2-8周，然后是一周停药期，或按300mg剂量，每日两次，每周给药3-5天。在另一个特定的实施方案中，每日三次，连续给予HDAC抑制剂两周，然后停药一周。
在一个实施方案中，按约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约700mg或约800mg剂量，每日一次，连续(即每日)或间歇(例如至少3天/周)给予组合物。
在另一个实施方案中，按约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约700mg或约800mg剂量，每日一次，给予组合物，至少一个21天疗程，其中给药7天(例如在21天周期中，连续7天或在第1-7天给药)。
在另一个实施方案中，按约400mg、约500mg或约600mg剂量，每日一次，给予组合物，至少一个21天疗程，其中给药14天(例如在21天周期中，连续14天或在第1-14天给药)。
在另一个实施方案中，按约300mg或约400mg剂量，每日一次，给予组合物，至少一个28天疗程，其中给药14天(例如在28天周期中，连续14天或在第1-14天给药)。
在另一个实施方案中，按约400mg剂量，每日一次，给予组合物，例如至少一个28天疗程，其中给药21天(例如在28天周期中，连续21天或在第1-21天给药)。
在另一个实施方案中，按约200mg、约250mg、约300mg或约400mg剂量，每日两次，连续(即每日)或间歇(例如至少3天/周)给予组合物。
在另一个实施方案中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物，至少一个7天疗程，其中给药3天(例如连续给药3天，然后连续4天不给药)。
在另一个实施方案中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物，至少一个7天疗程，其中给药4天(例如连续给药4天，然后连续3天不给药)。
在另一个实施方案中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物至少一个7天疗程，其中给药5天(例如连续给药5天，然后连续停药2天)。
在另一个实施方案中，在21天周期中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物至少一个7天疗程，其中给药3天(例如在21天周期中，连续3天或在第1-3天给药最长达3周)。
在另一个实施方案中，在28天周期中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物至少一个7天疗程，其中给药3天(例如在28天周期中，连续3天或在第1-3天给药最长达4周)。
在另一个实施方案中，在21天周期中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物至少一个7天疗程，其中给药4天(例如在21天周期中，连续4天或在第1-4天给药最长达3周)。
在另一个实施方案中，在21天周期中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物至少一个7天疗程，其中给药5天(例如在21天周期中，连续5天或在第1-5天给药最长达3周)。
在另一个实施方案中，在21天周期中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物例如一个7天疗程，其中给药3天(例如在21天周期中，连续3天或在第1-3天给药)。
在另一个实施方案中，在21天周期中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物例如至少2个7天疗程，其中给药3天(例如在21天周期中，在第1周和第2周，连续3天或在第1-3天和第8-10天给药)。
在另一个实施方案中，在21天周期中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物例如至少3个7天疗程，其中给药3天(例如在21天周期中，在第1周、第2周和第3周，连续3天或在第1-3天、第8-10天和第15-17天给药)。
在另一个实施方案中，在28天周期中，按约200mg、约250mg或约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物至少4个7天疗程，其中给药3天(例如在28天周期中，在第1周、第2周、第3周和第4周，连续3天或在第1-3天、第8-10天、第15-17天和第22-24天给药)。
在另一个实施方案中，按约300mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物例如至少一个14天疗程，其中给药7天(例如在14天周期中，连续7天或在第1-7天给药)。
在另一个实施方案中，按约200mg、约300mg或约400mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物例如至少一个21天疗程，其中给药11天(例如在21天周期中，连续11天或在第1-11天给药)。
在另一个实施方案中，按约200mg、约300mg或约400mg剂量(每剂量)，每日一次，给予组合物例如至少一个21天疗程，其中给药10天(例如在21天周期中，连续10天或在第1-10天给药)。
在另一个实施方案中，按约200mg、约300mg或约400mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物例如至少一个21天疗程，其中给药10天(例如在21天周期中，连续10天或在第1-10天给药)。
在另一个实施方案中，按约200mg、约300mg或约400mg剂量(每剂量)，每日两次，给予组合物例如至少一个21天疗程，其中给药14天(例如在21天周期中，连续14天或在第1-14天给药)。
在一个优选的实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，至少一个21天疗程，其中给药7天。在另一个优选的实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，至少一个21天疗程，其中给药10天。在其它具体的实施方案中，按200mg剂量，每日两次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，至少一个21天疗程，其中给药14天。在进一步优选的实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，至少一个21天疗程，其中给药14天。
另外，还可按照任何上述方案，连续给予HDAC抑制剂几周，然后停药。例如，可按照任一上述方案给予HDAC抑制剂2-8周，然后停药1周，或按300mg剂量，每日两次，每周3-5天。在另一个特定的实施方案中，每日三次，连续给予HDAC抑制剂2周，然后停药1周。
通过静脉内或皮下，使患者接受足以递送约3-1500mg/m2/日例如约3、30、60、90、180、300、600、900、1200或1500mg/m2/日的量的HDAC抑制剂。可在一个延长时间内或每日几次，按照多种合适方式例如大体积低浓度HDAC抑制剂给予此类量。每周可一个或多个连续日、间歇日或其组合(7日时间)给予此类量。或者，在短时间内例如每日一次，每周一日或多日连续、间歇或其组合给予小体积高浓度HDAC抑制剂(7日时间)。例如，可每天给予300mg/m2剂量，连续5天给予总量1500mg/m2/治疗。在另一个给药方案中，连续天数也可以是5，治疗持续连续2或3周，总治疗给予共3000mg/m2和4500mg/m2。
通常，可配制含约1.0mg/mL-约10mg/mL例如2.0mg/mL、3.0mg/mL、4.0mg/mL、5.0mg/mL、6.0mg/mL、7.0mg/mL、8.0mg/mL、9.0mg/mL和10mg/mL浓度的HDAC抑制剂的静脉内制剂，按达到上述剂量的量给药。在一个实例中，在一日内，可给予患者足够体积的静脉内制剂，以使该日总剂量为约300-约1500mg/m2。
可在pH约5-约12下，按照本领域熟知的方法配制皮下制剂，该制剂包含下述合适的缓冲剂和等渗剂。可按一个或多个日皮下给药例如每日1、2或3次递送HDAC抑制剂的日剂量，配制它们。
也可通过局部使用合适的鼻内溶媒或通过透皮途径，用本领域普通技术人员熟知的那些形式的透皮贴剂，按鼻内形式，给予HDAC抑制剂。为按透皮递药系统形式给药，在整个剂量方案中，剂量给予自然是连续而非间歇的。
HDAC抑制剂的任何一种或多种具体剂量和剂量方案也适用于用于联合治疗的任何一种或多种抗癌药，对本领域技术人员而言是显而易见的。另外，抗癌药的具体剂量和剂量方案也可改变，可根据所使用的具体抗癌药确定给药的最佳剂量、给药方案和途径。另外，本文中所述各种给药模式、剂量和给药方案仅描述了具体实施方案，不应视为对本发明广泛范围的限制。剂量和给药方案的任何改变、变化和组合包括在本发明范围内。
给予抗癌药 HDAC抑制剂的任何一种或多种具体剂量和剂量方案也适用于用于联合治疗的任何一种或多种抗癌药。
另外，也可改变抗癌药的具体剂量和剂量方案，根据所使用的具体抗癌药确定给药的最佳剂量、给药方案和途径。
自然，SAHA或任一其它HDAC抑制剂的给药途径独立于抗癌药的给药途径。给予SAHA的特定途径是口服。因此，按照该实施方案，通过口服给予SAHA，且可通过口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌内、直肠、口颊内、鼻内、脂质体、通过吸入、阴道、眼内、通过导管或支架局部递送、皮下、脂肪内、关节内、鞘内或缓释剂型给予其它抗癌药物。
另外，可通过相同给药模式给予HDAC抑制剂和抗癌药物，即通过口服、IV等给予两种药物。但是，通过一种给药模式例如口服给予HDAC抑制剂，通过另一种给药模式例如IV或上述任何其它的给药模式给予抗癌药物也在本发明范围内。
通常给予的常用抗癌药物和日剂量包括但不限于 抗代谢药甲氨蝶呤20-40mg/m2i.v. 甲氨蝶呤4-6mg/m2p.o. 甲氨蝶呤12000mg/m2大剂量疗法 6-巯基嘌呤 100mg/m2 6-硫鸟嘌呤 1-2×80mg/m2p.o. 喷司他汀 4mg/m2i.v. 磷酸氟达拉滨25mg/m2i.v. 克拉曲滨0.14mg/kg BW i.v. 5-氟尿嘧啶500-2600mg/m2 i.v. 卡培他滨1250mg/m2p.o. 阿糖胞苷(Cytarabin) 200mg/m2 i.v. 阿糖胞苷3000mg/m2 i.v.大剂量疗法 吉西他滨800-1250mg/m2 i.v. 羟基脲 800-4000mg/m2 p.o. 培美曲塞 250-500mg/m2 i.v. 抗有丝分裂药长春新碱 1.5-2mg/m2 i.v. 和植物来源药长春碱4-8mg/m2 i.v. 长春酰胺 2-3mg/m2 i.v. 依托泊苷(VP 16) 100-200mg/m2 i.v. 依托泊苷(VP 16) 100mg p.o. 替尼泊苷(VM26)20-30mg/m2 i.v. 紫杉醇(泰素) 175-250mg/m2 i.v. 多西他赛(泰索帝) 100-150mg/m2 i.v. 抗生素放线菌素D 0.6mg/m2 i.v. 柔红霉素 45-6.0mg/m2 i.v. 多柔比星 45-60mg/m2 i.v. 表柔比星 60-80mg/m2 i.v. 伊达比星 10-12mg/m2 i.v. 伊达比星 35-50mg/m2 p.o. 米托蒽醌(Mitoxantron) 10-12mg/m2 i.v. 博来霉素 10-15mg/m2 i.v.，i.m.，s.c. 丝裂霉素C 10-20mg/2 i.v. 伊替立康(CPT-11) 350mg/m2 i.v. 托泊替康 1.5mg/m2 i.v. 烷化剂氮芥 6mg/m2 i.v. 磷酸雌莫司汀 150-200mg/m2 i.v. 磷酸雌莫司汀 480-550mg/m2 p.o. 美法仑8-10mg/m2 i.v. 美法仑15mg/m2 i.v. 苯丁酸氮芥3-6mg/m2 i.v. 泼尼莫司汀40-100mg/m2 p.o. 环磷酰胺 750-1200mg/m2 i.v. 环磷酰胺 50-100mg/m2 p.o. 异环磷酰胺1500-2000mg/m2 i.v. 曲磷胺 25-200mg/m2 p.o. 白消安 2-6mg/m2 p.o. 曲奥舒凡5000-8000mg/m2 i.v. 曲奥舒凡750-1500mg/m2 p.o. 塞替哌 12-16mg/m2 i.v. 卡莫司汀(BCNU) 100mg/m2 i.v. 洛莫司汀(CCNU) 100-130mg/m2 p.o. 尼莫司汀(ACNU) 90-100mg/m2 i.v. 达卡巴嗪(OTIC) 100-375mg/m2 i.v. 丙卡巴嗪100mg/m2 p.o. 顺铂20-120mg/m2 i.v. 卡铂300-400mg/m2 i.v. 激素、细胞因子 干扰素-α 2-10×106IU/m2 和维生素泼尼松 40-100mg/m2 p.o. 地塞米松8-24mg p.o. G-CSF 5-20μg/kg BW s.c. 全反式视黄酸45mg/m2 白介素-218×106IU/m2 GM-CSF 250mg/m2 红细胞生成素150IU/kg tiw 使用本文中所述抗癌药(或此类药物的任何药学上可接受的盐或水合物，或此类药物的任何游离酸、游离碱或其它游离形式)的剂量方案可按照本文中示范性剂量包括为HDAC抑制剂的那些提供的剂量。
可按照多种因素包括种类、种族、年龄、重量、性别和所治疗的疾病类型；所治疗的疾病的严重程度(即阶段)；给药途径；患者的肾和肝功能；和使用的具体化合物或其盐，选择剂量。可使用剂量方案例如治疗、预防、抑制(完全或部分)或阻止疾病发展。
在特定的实施方案中，联合给予抗代谢药物硼替佐米和SAHA。在特定的实施方案中，按约0.5-约0.7mg/m2、约0.7-约1.0mg/m2、约1.0-约1.3mg/m2或约1.3-约1.5mg/m2剂量，给予硼替佐米(例如通过静脉内注射硼替佐米
)。可按3-5个第二一次性大剂量注射例如用3周或5周治疗周期给予剂量。在每3周治疗周期中，可按约1.0mg/m2或约1.3mg/m2/剂量给予硼替佐米2周(例如第1、4、8和11天)，然后停药10天(例如第12-21天)。在特定的实施方案中，可在21天治疗周期中第1和4天，按约0.7mg/m2给予硼替佐米。在其它实施方案中，可在21天治疗周期中第1、4、8和11天，按约0.7、0.9、1.1或1.3mg/m2给予硼替佐米。在每5周治疗周期中，按1.3mg/m2/剂量，每周一次，给予硼替佐米4周(例如第1、8、15和22天)，然后停药13天(例如第23-35天)。可连续给予该剂量至少8个治疗周期。作为特定实例，剂量可给予至少8个3周治疗周期，然后至少3个5周治疗周期。在特定的实施方案中，按小于3.0mg/m2剂量给予硼替佐米。对于超过8个周期的延长疗法，可按以上方案或每周一次连续4周(例如第1、8、15和22天)的维持方案，给予硼替佐米，然后停药13天(例如第23-35天)。在特定的实施方案中，在硼替佐米的连续剂量之间具有至少72小时消除期。或者，可按约0.7mg/m2剂量，例如每周给予硼替佐米一次。尤其是，可一起给予硼替佐米和一种或多种其它抗癌药例如SAHA。作为实例，可按高达400mg总日剂量给予SAHA(例如伏立诺他)，且可按高达0.7、0.9、1.1或1.3mg/m2总日剂量给予硼替佐米。
在优选的实施方案中，在21天中第4、8、11和15天，按0.7mg/m2剂量，每日给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物一次。在其它优选的实施方案中，在21天中第4、8、11和15天，按0.9mg/m2剂量，每日给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物一次。在其它优选的实施方案中，在21天中第1、4、8和11天，按0.9mg/m2剂量，每日给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物一次。
在其它优选的实施方案中，在21天中第1、4、8和11天，按约1.1mg/m2剂量，每日给予硼替佐米一次。在进一步优选的实施方案中，在21天中第1、4、8和11天，按约1.3mg/m2剂量，每日给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物一次。
联合给药 按照本发明，HDAC抑制剂和抗癌药可用于治疗多种癌症，它们包括但不限于实体瘤(例如头和颈、肺、乳腺、结肠、前列腺、膀胱、直肠、脑、胃组织、骨、卵巢、甲状腺或子宫内膜的瘤)、血液系统恶性肿瘤(例如白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)、癌(例如膀胱癌、肾癌、乳腺癌、结肠直肠癌)、成神经细胞瘤或黑素瘤。这些癌的非限制性实例包括弥散性大B-细胞淋巴瘤(DLBCL)、T-细胞淋巴瘤或白血病例如皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)、非皮肤外周T-细胞淋巴瘤、与人T细胞淋巴营养性病毒(HTLV)有关的淋巴瘤、成人T-细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)和急性淋巴细胞白血病、急性非淋巴细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、骨髓瘤、多发性骨髓瘤、间皮瘤、儿童实体瘤、脑成神经细胞瘤、视网膜神经胶质瘤、神经胶质瘤、维尔姆斯瘤、骨癌和软组织肉瘤；成人普通实体瘤例如头和颈癌(例如口腔、喉和食管癌)、泌尿生殖器癌(例如前列腺、膀胱、肾、子宫、卵巢、睾丸、直肠和结肠癌)、肺癌(例如小细胞癌和非小细胞肺癌包括鳞状细胞癌和腺癌)、乳腺癌、胰腺癌、黑素瘤和其它皮肤癌、基细胞癌、转移性皮肤癌、溃疡性和乳头状鳞状细胞癌、胃癌、脑癌、肝癌、肾上腺癌、肾癌、甲状腺癌、髓样癌、骨肉瘤、软组织肉瘤，尤因肉瘤、veticulum细胞肉瘤和卡波西肉瘤。还包括本文中所述儿科形式的任何癌。
皮肤T-细胞淋巴瘤和外周T-细胞淋巴瘤是非霍奇金淋巴瘤形式。皮肤T-细胞淋巴瘤是特征在于恶性T淋巴细胞定位在处于呈递阶段的皮肤的一组淋巴组织增生性病症。CTCL通常涉及皮肤、血流、局部淋巴结和脾。最常见且不活跃形式的CTCL真菌病(MF)的特征在于含嗜表皮性CD4+CD45RO+辅助/记忆T细胞的斑、噬斑或肿瘤。MF可进化为变型白血病、赛塞利综合征(SS)或转化为大细胞淋巴瘤。该病症造成严重的皮肤瘙痒、疼痛和肿胀。目前，通常用类固醇、光化疗和化疗以及放疗治疗CTCL。外周T-细胞淋巴瘤源于由单个T-细胞克隆增殖的成熟或外周(非中枢或胸腺)T细胞淋巴细胞，通常主要是结或外结肿瘤。它们具有T-细胞淋巴细胞细胞-表面标记和T-细胞受体基因的克隆排列。
在美国有约16,000-20,000人受CTCL或PTCL影响。这些疾病有高度征候。斑、噬斑和肿瘤是不同呈递的临床名。斑通常扁平，可能有鳞，看似“皮疹”。真菌病斑经常被错认为湿疹、银屑病或非特异性皮炎直到出现真菌病的适当诊断。噬斑是较厚的隆起的损害。肿瘤是隆起的“肿块”，它可或不可以溃烂。通常的特征是瘙痒或瘙痒症，尽管许多患者未有瘙痒的感觉。出现这些期中的一期或所有三期都有可能。对于多数患者，现有治疗可缓解病情但不能治愈。
在美国，肺癌仍是与癌症有关的死亡的主要原因，30％-40％新诊断的非小细胞肺癌患者出现局部晚期和不能切除的III期疾病(Jemal Aet al.CA Cancer J.Clin.2004；548-29；Dubey and Schiller TheOncologist 2005；10282-291；Socinski MA Semin Oncol.2005 32(2Suppl 3)S 114-8)。用标准化疗方案治疗的IV期疾病患者的平均存活时间为约8-11月(Schiller JH et al.N.Engl.J.Med.2002；34692-98；Fossella F et al.J.Clin.Oncol.2003；213016-3024)。在复发背景下，单一药物治疗的平均存活时间为约5-7月，病情发展的时间仅为8-10周(Shepherd FA et al.J.Clin.Oncol.2000；182095-2103；Fossella FV et al.J.Clin.Oncol.2000；182354-2362)。
非小细胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌病例约85％。绝大多数NSCLC患者出现晚期疾病，该攻击性肿瘤与预后差有关。晚期(IIIB/IV期)NSCLC患者的5年存活率＜5％(Ginsberg RJ et al.在CancerPrinciples and Practice of Oncology，DeVita VT Jr，Hellman S，Rosenberg SA，eds.，第6版Edition，PhiladelphiaLippincott Williamsand Wilkins，2001925-983)。按照改善症状和延长存活的目标，NSCLC治疗己取得进展。目前，铂基治疗方案是治疗晚期NSCLC患者的标准疗法(按照Stewart DJ Oncologist 2004；9 Suppl 643-52的综述)。但是，这些方案与严重的且常见蓄积性血液和非血液毒性有关，限制了剂量浓度。因此，需要新的治疗和联合方案改善这些患者的结果。
按照WHO(世界健康组织)分类法，弥散性大B-细胞淋巴瘤(DLBCL)是最常见的B-细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)，占西方国家中成人非霍奇金淋巴瘤30-40％。标准一线治疗是联合化疗或化疗加抗CD20抗体(利妥昔单抗)。由于在许多国家高成本和不属于保险责任范围，据估计，仅有小百分率的NHL患者可用得起利妥昔单抗。标准二线治疗是外周干细胞移植。在选择数目的癌症中心实施该方法，所以它不是多数患者的治疗选择。已证实治疗DLBCL的作为抢救疗法的EPOCH方案(依托泊苷、泼尼松、长春新碱、环磷酰胺、多柔比星)具有活性，但是，当按单一形式使用时，它很少提供长期缓解。
多发性骨髓瘤的特征在于从事单克隆免疫球蛋白生产的单克隆浆细胞的恶性增殖(Kyle，Multiple Myeloma and Other Plasma CellDisorders(多发性骨髓瘤和其它浆细胞病症)在HematologyBasicPrinciples and Practice.第2版.1995)。尽管多发性骨髓瘤细胞初期对放疗和化疗产生反应，但很少有持久的完全反应，实际上，所有初期反应的患者最终复发并死于该疾病。迄今为止，常规治疗方法尚未达到长期无病存活结果，由此进一步表明开发治疗该不能治愈疾病的新药的重要性(NCCN Proceedings.Oncology.1998年11月)。
按照National Cancer Institute，在美国，头和颈癌占所有癌症3％。多数头和颈癌源于在头和颈中发现的内层结构的鳞状细胞，它们通常称为头和颈的鳞状细胞癌(SCCHN)。某些头和颈癌源于其它类型细胞例如腺细胞。源于腺细胞的头和颈癌称为腺癌。还可通过它们开始出现的区域例如口腔、鼻腔、喉、咽、唾液腺和上颈部淋巴结，定义头和颈癌。据估计在美国，2002年有38,000人发生头和颈癌。约60％患者出现局部晚期疾病。用外科手术和/或放射治疗后，这些患者中仅30％达到长期缓解。对于复发性和/或转移性疾病患者，平均存活为约6个月。
在本发明的各方面，按任何顺序序贯、同时或其组合进行治疗方法。例如可在第二种治疗方法例如抗癌药之前，使用抗癌药的第二种治疗之后，与使用抗癌药的第二种治疗同时或其组合，进行第一种治疗方法例如给予HDAC抑制剂。
在本发明的一个方面，可确定HDAC抑制剂的总治疗期。可在开始用HDAC抑制剂治疗前或用HDAC抑制剂治疗后，给予抗癌药。另外，还可在给予HDAC抑制剂期间给予抗癌药，但无须在整个HDAC抑制剂治疗期发生。类似地，可在开始用抗癌药治疗前或用抗癌药治疗后，给予HDAC抑制剂。另外，还可在给予抗癌药期间给予HDAC抑制剂，但无须在整个抗癌药治疗期发生。或者，治疗方案包括用一种药物即HDAC抑制剂或抗癌药预治疗，然后在治疗期持续时间加入一种或多种其它药物。
在特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药的组合是加性，即联合治疗方案产生单独给予各成分的加性作用的结果。按照该实施方案，HDAC抑制剂的量和抗癌药的量一起组成治疗癌症的有效量。
在另一个实施方案中，当联合治疗方案产生的抗癌结果(例如细胞生长停滞、凋亡、诱导分化、细胞死亡)比单独给予治疗剂量的各成分的加性作用显著更佳时，认为HDAC抑制剂和抗癌药的组合是治疗协同性的。可用标准统计学分析确定何时结果显著更佳。例如，可使用Mann-Whitney检验或某些其它通常公认的统计学分析方法。
在本发明的一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与其它HDAC抑制剂联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与烷化剂联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与抗生素药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与抗代谢药联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与激素药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与植物来源药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与抗血管发生药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与分化诱导药物联合给药。
在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与细胞生长停滞诱导药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与凋亡诱导药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与细胞毒药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与酪氨酸激酶抑制剂联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与辅助药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与生物药物联合给药。在本发明的另一个特定实施方案中，HDAC抑制剂和抗癌药硼替佐米还可与其它HDAC抑制剂、烷化剂、抗生素药物、抗代谢药、激素药、植物来源药、抗血管发生药、分化诱导药、细胞生长停滞诱导药、凋亡诱导药、细胞毒药物、类视色素药物、酪氨酸激酶抑制剂、辅助药或生物药的任何组合联合给药。
联合治疗可通过使癌细胞分化诱导、细胞生长停滞和/或凋亡起作用。疗法联合尤其有利，因为相对于药物单一疗法，可减少联合疗法中的各药物剂量，而仍可达到整体抗肿瘤作用。
在优选的本发明实施方案中，可联合给予HDAC抑制剂和抗代谢药物。尤其是，在一个优选的实施方案中，按200mg剂量，每日两次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，和按0.7mg/m2总日剂量给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。在更具体的实施方案中，按200mg剂量，每日两次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，和按0.9mg/m2总日剂量给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。在其它具体实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，和按0.9mg/m2总日剂量给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。在其它具体实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，和按1.1mg/m2总日剂量给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
在更具体的实施方案中，按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，和按1.3mg/m2总日剂量给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
药用组合物 如上所述，可按适合以下给药途径的任何剂型配制含HDAC抑制剂和/或抗癌药的组合物口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌内、直肠、口颊内、鼻内、脂质体、通过吸入、阴道或眼内给药、通过导管或支架局部递药、或皮下、脂肪内、关节内、鞘内给药或以缓释剂型给药。
可将HDAC抑制剂和抗癌药配制在用于同时给药的同一制剂中，或它们可以处于可按上述同时或序贯给药的两个分离的剂型中。
本发明还包括含HDAC抑制剂的药学上可接受的盐和/或抗癌药的药用组合物。
本文中所述化合物和适用于本发明方法的合适的药学上可接受的盐是常规无毒盐，可包括碱或酸加成盐的盐例如无机碱的盐，例如碱金属盐(例如锂盐、钠盐、钾盐等)、碱土金属盐(例如钙盐、镁盐等)、铵盐；有机碱的盐例如有机胺盐(例如三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、乙醇胺盐、三乙醇胺盐、二环己胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等)等；无机酸加成盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐等)；有机羧酸或磺酸加成盐(例如甲酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐等)；碱性或酸性氨基酸的盐(例如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等的盐)等。
本发明还包括含HDAC抑制剂的水合物和/或抗癌药的药用组合物。
另外，本发明还包括含任何固体或液体物理形式的SAHA或任何其它HDAC抑制剂的药用组合物。例如，HDAC抑制剂可以为晶型、无定形，并具有任何粒度。HDAC抑制剂粒子可以是微粉化的，或可以是聚集的、粒状颗粒、粉末、油、油性混悬液或任何其它形式的固体或液体物理形式。
对于口服给药，药用组合物可以为液体或固体。合适的固体口服制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、小丸等。合适的液体口服制剂包括溶液剂、混悬剂、分散体、乳剂、油等。
通常作为载体或稀释剂使用的任何惰性赋形剂可用于本发明制剂，这些赋形剂例如是树胶、淀粉、糖、纤维素物质、丙烯酸酯或其混合物。这些组合物还可含有崩解剂和润滑剂，另外还可含有选自以下的一种或多种添加剂粘合剂、缓冲剂、蛋白酶抑制剂、表面活性剂、增溶剂、增塑剂、乳化剂、稳定剂、增稠剂、甜味剂、成膜剂或其任何组合。另外，本发明组合物还可以是控释或即释制剂形式。
可给予与根据预定给药形式适当选择的合适的药物稀释剂、赋形剂或载体(本文中统称为“载体”物质或“药学上可接受的载体”)混合的作为活性成分的HDAC抑制剂。本文中使用的“药学上可接受的载体”将包括与给予药物配伍的任何和所有溶剂、分散介质、包衣剂、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收迟滞剂等。在最新版的Remington′sPharmaceutical Sciences中有关于合适的载体的阐述，该书为本领域的标准参考教材，通过引用结合到本文中。
对于液体制剂，药学上可接受的载体可以是水或非水溶液、混悬液、乳液或油。非水溶剂的实例是丙二醇、聚乙二醇和可注射的有机酯例如油酸乙酯。水性载体包括水、醇/水溶液、乳液或混悬液包括盐水和缓冲介质。油的实例是石油、动物、植物或合成来源的油例如花生油、大豆油、矿物油、橄榄油、葵花油和鱼肝油。溶液或混悬液也可包含以下成分无菌稀释剂例如注射用水、盐水溶液、不挥发性油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶剂；抗菌剂例如苄醇或尼泊金甲酯；抗氧剂例如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂例如乙二胺四乙酸(EDTA)；缓冲剂例如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐；和调节张力的物质例如氯化钠或葡聚糖。可用酸或碱例如盐酸或氢氧化钠调节pH。
也可使用脂质体和非水溶媒例如不挥发性油。在本领域中熟知用于药物活性物质的此类介质和试剂的用途。除不与活性化合物配伍的任何常规介质或试剂外，也考虑其在组合物中的用途。也可将补充的活性化合物掺入组合物。
固体载体/稀释剂包括但不限于树胶、淀粉(例如玉米淀粉、预胶化淀粉)、糖(例如乳糖、甘露醇、蔗糖、葡聚糖)、纤维素物质(例如微晶纤维素)、丙烯酸酯(例如聚甲基丙烯酸酯)、碳酸钙、氧化镁、滑石粉或其混合物。
另外，组合物还可包含粘合剂(例如阿拉伯胶、玉米淀粉、明胶、卡波姆、乙基纤维素、瓜尔胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮)、崩解剂(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉、藻酸、二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、瓜尔胶、淀粉羟乙酸钠、羟甲基淀粉钠(Primogel))、各种pH和离子强度缓冲剂(例如氨基丁三醇-HCl、乙酸盐、磷酸盐)，添加剂例如防止吸收到表面的白蛋白或明胶、清洁剂(例如吐温20、吐温80、泊洛沙姆F68、胆汁酸盐)、蛋白酶抑制剂、表面活性剂(例如十二烷基硫酸钠)、渗透促进剂、增溶剂(例如甘油、聚乙二醇)、助流剂(例如胶体二氧化硅)、抗氧剂(例如抗坏血酸、焦亚硫酸氢钠、丁基化羟基回香醚)、稳定剂(例如羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素)、增稠剂(例如卡波姆、胶体二氧化硅、乙基纤维素、瓜尔胶)、甜味剂(例如蔗糖、阿司帕坦、柠檬酸)、矫味剂(例如欧薄荷、水杨酸甲酯或橙香料)、防腐剂(例如Thimerosal、苄醇、尼泊金酯类)、润滑剂(例如硬脂酸、硬脂酸镁、聚乙二醇、十二烷基硫酸钠)、助流剂(例如胶体二氧化硅)、增塑剂(例如酞酸二乙酯、柠檬酸三乙酯)、乳化剂(例如卡波姆、羟丙基纤维素、十二烷基硫酸钠)、聚合物包衣剂(例如泊洛沙姆或poloxamines)、包衣剂和成膜剂(例如乙基纤维素、丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯)和/或助剂。
在一个实施方案中，用防止化合物在身体中快速消除的载体，将活性化合物配制为例如控释制剂包括植入剂和微囊化递药系统。可使用可生物降解、可生物配伍的聚合物例如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备此类制剂的方法对本领域技术人员而言是显而易见的。也可从Alza Corporation和NovaPharmaceuticals，Inc.购买这些物质。脂质体混悬液(包括导向感染细胞的具有病毒抗原的单克隆抗体的脂质体)也可作为药学上可接受的载体使用。可按照本领域技术人员已知的方法例如U.S.专利号4,522,811中所述制备这些。
按便于给药和剂量均一的剂量单位形式配制口服组合物尤其最好。本文中使用的剂量单位形式是指适合作为给予所治疗患者的单位剂量的物理上离散的单位，各单位含经计算可产生需要的疗效的预定量的活性化合物和用于组合的需要的药物载体。本发明剂量单位形式的规格由治疗个体的活性化合物的独特特性和欲达到的特定疗效以及混合这种活性化合物的技术固有的限制决定并直接取决于这些因素。
药用组合物可与给药说明书一起包含在容器、包装物或分配器中。
在本领域中很容易理解含活性成分的药用组合物的制备方法，例如通过混合、制粒或片剂形成方法。通常将活性治疗成分与药学上可接受的和与活性成分配伍的赋形剂混合。对于口服给药，将活性药物与通常用于该目的的添加剂例如溶媒、稳定剂或惰性稀释剂混合，如上详述通过常用方法转变为合适的给药形式，例如片剂、包衣片剂、硬或软明胶胶囊剂；水、醇或油性溶液剂等。
给予患者的化合物的量小于可造成患者中毒的量。在某些实施方案中，给予患者的化合物的量小于致使患者血浆中化合物浓度等于或超过化合物的毒性水平的量。在特定实施方案中，将患者血浆中化合物浓度维持在约10nM。在另一个实施方案中，将患者血浆中化合物浓度维持在约25nM。在另一个实施方案中，将患者血浆中化合物浓度维持在约50nM。在另一个实施方案中，将患者血浆中化合物浓度维持在约100nM。在另一个实施方案中，将患者血浆中化合物浓度维持在约500nM。在另一个实施方案中，将患者血浆中化合物浓度维持在约1000nM。在另一个实施方案中，将患者血浆中化合物浓度维持在约2,500nM。在另一个实施方案中，将患者血浆中化合物浓度维持在约5,000nM。在本发明实践中，应给予患者的化合物的最佳量取决于所用的具体化合物和所治疗的癌症类型。
制剂中活性成分和各种赋形剂的百分率可变化。例如，组合物可含20-90％或尤其50-70％(重量)活性药物。
对于IV给药，在静脉内给药可接受的pH范围内具有合理的缓冲容量的葡糖醛酸、L-乳酸、乙酸、柠檬酸或任何药学上可接受的酸/轭合碱可作为缓冲剂使用。也可使用其中用酸或碱例如盐酸或氢氧化钠将pH调至需要的范围的氯化钠溶液。通常，静脉内制剂的pH范围可为约5-约12。特定的含其中HDAC抑制剂具有异羟肟酸部分的HDAC抑制剂的静脉内制剂的pH范围可为约9-约12。
可在pH约5-约12范围内，按照本领域中熟知的方法制备皮下制剂，该制剂包含合适的缓冲剂和等张剂。可将它们配制成递送活性药物的日剂量的一个或多个每日皮下给药形式。本领域普通技术人员可容易地做出制剂的合适的缓冲剂和pH的选择，它们取决于给予的HDAC抑制剂溶解度。也可在皮下制剂中使用其中已用酸或碱例如盐酸或氢氧化钠将pH调至需要的范围的氯化钠溶液。通常，皮下制剂的pH范围可为约5-约12。特定的含异羟肟酸部分的HDAC抑制剂的皮下制剂的pH范围可为约9-约12。
还可通过局部使用合适的鼻内溶媒，通过鼻内形式；或通过透皮途径，用本领域普通技术人员熟知的透皮贴剂的那些形式给予本发明组合物。为按透皮递药系统形式给药，在整个剂量方案中，剂量给予自然是连续而非间歇的。
本发明还提供选择性诱导瘤细胞终末分化、细胞生长停滞或凋亡，从而抑制此类细胞增殖的体外方法，该方法使细胞与第一种量的N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物，和第二种量的抗癌药接触，其中第一和第二种量一起包括有效诱导细胞终末分化、细胞生长停滞或细胞凋亡的量。
尽管本发明方法可在体外实践，但考虑，选择性诱导瘤细胞终末分化、细胞生长停滞或凋亡的方法的特定实施方案将包括与体内细胞接触，即通过给予需要治疗的具有瘤细胞的患者或肿瘤细胞化合物。
因此，本发明还提供选择性诱导瘤细胞终末分化、细胞生长停滞和/或凋亡从而抑制此类细胞在患者中增殖的方法，该方法按第一种治疗程序，给予患者第一种量的N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物，和按第二种治疗程序给予第二种量的抗癌药，其中第一和第二种量一起包含有效诱导细胞终末分化、细胞生长停滞或细胞凋亡的量。
通过以下实施例举例说明本发明。列出该部分以帮助理解本发明，但无意，且不应视为以任何方式限制权利要求中提出的本发明。
实施例 提供实施例，以便更全面说明本发明的各种实施方案。这些实施例决不应视为限制权利要求中描述的本发明范围。
实施例1SAHA的合成 可按照以下所述的方法或US专利5,369,108中列举的方法，或根据任何其他方法合成SAHA，该专利通过引用整体结合到本文中。
将3,500g(20.09mol)辛二酸放入22L烧瓶中，通过加热将该酸熔融。将温度升至175℃，然后加入2,040g(21.92mol)苯胺。将温度升至190℃，在该温度下保持20分钟。将熔融物倾入含4,017g氢氧化钾的50L水溶液的Nalgene罐中。加入熔融物后，将混合物搅拌20分钟。按相同规模，重复进行反应，将第二批熔融物倾入相同的氢氧化钾溶液。将混合物充分搅拌后，关闭搅拌器，让混合物沉降。
SAHA的合成 步骤1-N-苯基辛二酸单酰胺(Suberanilic acid)的合成
然后使混合物通过硅藻土(4,200g)垫过滤。将产物过滤，除去由苯胺进攻辛二酸两端形成的中性副产物。滤液含产物的盐和未反应的辛二酸的盐。让混合物沉降，因为过滤极缓慢，需花费几天时间。将滤液用5L浓盐酸酸化；将混合物搅拌1小时，然后沉降过夜。将产物过滤，收集，用去离子水(4×5L)洗涤漏斗。将湿滤饼放入含44L去离子水的72L烧瓶中，将混合物加热至50℃，通过热过滤将固体分离(需要的产物被辛二酸污染，辛二酸在热水中的溶解度大的多。通过几次热研磨，将辛二酸除去。通过NMR[D6DMSO]检查产物，监测辛二酸的除去状况)。在50℃下，用44L水重复进行热研磨。再过滤将产物分离，用4L热水冲洗。用Nash泵作为真空源，在65℃下，在真空烘箱中干燥过周末(Nash泵是液体(水)循环泵，抽真空至约29英寸汞柱。用氩气间歇吹扫，帮助排去水)；得到4,182.8g N-苯基辛二酸单酰胺。
产物仍然含少量辛二酸；在65℃下，每次用约300g产物，分次进行热研磨。将各份过滤，再用热水(总计约6L)充分冲洗。重复进行该过程，将所有批产物纯化。由此将产物中的辛二酸完全除去。在烧瓶中，将固体产物和6L甲醇/水(1∶2)混合，搅拌，然后过滤分离，在滤器上晾干过周末。将产物置于盘中，在真空烘箱中，在65℃下，用Nash泵和氩气流干燥45小时。终产物的重量为3,278.4g(32.7％收率)。
步骤2-N-苯基辛二酸酰胺甲酯(Methyl Suberanilate)的合成
向安装机械搅拌器和冷凝器的50L烧瓶中加入前一步中的3,229g N-苯基辛二酸单酰胺、20L甲醇和398.7g Dowex 50WX2-400树脂。将混合物加热至回流，并保持回流18小时。将混合物过滤，除去树脂珠，在旋转蒸发仪上，浓缩滤液至残渣。
将旋转蒸发仪中的残渣移至安装冷凝器和机械搅拌器的50L烧瓶中。向该烧瓶中加入6L甲醇，将混合物加热，得到溶液。然后加入2L去离子水，停止加热。搅拌下，使混合物冷却，然后将烧瓶放入冰浴，将混合物冷却。将固体产物过滤，分离，将滤饼用4L冷甲醇/水(1∶1)洗涤。在真空干燥箱中，在45℃下，用Nash泵将产物干燥总计64小时，得到2,850.2g(84％收率)N-苯基辛二酸酰胺甲酯。
步骤3粗SAHA的合成
向安装机械搅拌器、热电偶和惰性气氛入口管的50L烧瓶中加入1,451.9g盐酸羟胺、19L无水甲醇和3.93L 30％甲醇钠的甲醇溶液。然后向该烧瓶中依次加入2,748.0g N-苯基辛二酸酰胺甲酯、1.9L 30％甲醇钠的甲醇溶液。将混合物搅拌16小时又10分钟。将反应烧瓶(烧瓶1)中约一半反应混合物移到安装机械搅拌器的50L烧瓶(烧瓶2)中。然后将27L去离子水加入烧瓶1，将混合物搅拌10分钟。然后用pH计测pH，pH为11.56。通过加入100ml 30％甲醇钠的甲醇溶液将混合物的pH调至12.02；由此得到澄清溶液(此时，反应混合物含少量固体。调pH，得到澄清溶液，产物在其中沉淀析出)。将烧瓶2中的反应混合物按相同方式稀释；加入27L去离子水；通过向混合物中加入100ml 30％甲醇钠溶液调节pH，得到pH 12.01(澄清溶液)。
通过加入冰乙酸将各烧瓶中的反应混合物酸化，使产物沉淀。烧瓶1的终pH为8.98，烧瓶2的终pH为8.70。通过布氏漏斗和滤布过滤，将两烧瓶中的产物分离。将滤饼用15L去离子水洗涤，在漏斗上加盖，在真空下，将漏斗上的产物部分干燥15.5h。将产物取出，放入5只玻璃盘中。将这些盘放入真空干燥箱中，将产物干燥至恒重。第一干燥期为22小时，在60℃下，用Nash泵作为真空源，用氩气流吹扫。从真空干燥箱中取出盘，称重。将盘放回干燥箱，用油泵作为真空源不用氩气流，将产物再干燥4小时又10分钟。将物质包装在双层4-密耳(mill)聚乙烯袋中，放入外包装塑料容器中。取样后，终重量为2633.4g(95.6％)。
步骤4-使粗SAHA重结晶 使粗SAHA在甲醇/水中重结晶。向安装机械搅拌器、热电偶、冷凝器和惰性气氛入口管的50L烧瓶中依次加入待结晶的粗SAHA(2,525.7g)、2,625ml去离子水和15,755ml甲醇。将该物质加热至回流，得到溶液。然后将5,250ml去离子水加入反应混合物中。停止加热，将混合物冷却。当混合物充分冷却至可安全操作烧瓶时(28℃)，将烧瓶从加热套中取出，放入用作冷却浴的槽中。将冰/水加入槽中，使混合物冷却至-5℃。在低于该温度以下，将混合物保持2小时。将产物过滤分离，将滤饼用1.5L冷甲醇/水(2∶1)洗涤。在漏斗上加盖，将产物在真空下部分干燥1.75h。将产物从漏斗中取出，放入6只玻璃盘中。将盘放入真空干燥箱中，用Nash泵作为真空源，用氩气流将产物在60℃下干燥64.75h。将盘取出，称重，然后放回干燥箱，再在60℃下干燥4小时，达到恒重。第二干燥期的真空源是油泵，不使用氩气流。将物质包装在双层4-密耳聚乙烯袋中，放入外包装塑料容器中。取样后终重量为2,540.9g(92.5％)。
在其它实验中，用以下条件使粗SAHA结晶 表1SAHA结晶条件 所有这些反应条件均产生SAHA多晶型I。
实施例2通过在1∶1的乙醇/水中湿法研磨制备小粒子 按50mg/g-150mg/g(结晶/溶剂混合物)浆状物浓度，将SAHA多晶型I结晶悬浮于1∶1(体积比)EtOH/水溶剂混合物。用IKA-WorksRotor-Stator T50型带超细叶片的高剪切均化器，按20-30m/s速度，将浆状物湿法研磨至SAHA的平均粒度小于50μm，且95％的SAHA平均粒度小于100μm，同时将温度保持在室温。在室温下，将湿法研磨的浆状物过滤，用1∶1的EtOH/水溶剂混合物洗涤。然后将湿滤饼在40℃下干燥。通过以下Microtrac法测得的该湿法研磨物质的最终平均粒度小于50μm。
用由Microtrac Inc.生产的SRA-150激光衍射粒度分析仪分析粒度。在该分析仪上安装ASVR(自动小体积再循环装置)。用0.25％(重量)卵磷脂的ISOPAR G溶液作为分散流体。将每个样品记录三次，计算平均分布。分析作为体积分布的粒度分布(PSD)。报道基于体积的平均粒度和值(＞95％)。
实施例2A通过在1∶1的乙醇/水中湿法研磨大规模制备小粒子 在20-25℃下，将56.4kg SAHA多晶型I结晶加入610kg(10.8kg溶剂/kg SAHA)50％体积/体积200校对精密的(proof punctilious)乙醇和水(50/50EtOH/水)溶液中。使浆状物(～700L)通过装有超微电机(generator)的IKA Works湿法研磨机进行循环直至达到稳态粒度分布。条件是DR3-6，23m/s转子尖端速度，30-35Lpm，3个电机，～96周(1周为通过1个电机的一批体积)，～12小时。
粗略研磨时间(小时)＝96×批体积(L)/(研磨机的自然负荷(draft)(Lpm)×电机#数×60) 将湿滤饼过滤，用水(总计6kg/kg，～340kg)洗涤2×，在40-45℃下，真空干燥。然后将干燥滤饼过筛(595μm目)，包装成精细API。
实施例3在1∶1的乙醇/水中生长平均粒度150μm的大结晶 将25克SAHA多晶型I结晶和388克1∶1的乙醇/水溶剂混合物放入带玻璃搅拌器的500ml夹层树脂罐。在室温下，按照实施例2步骤，将浆状物湿法研磨至粒度小于50μm。将湿法研磨的浆状物加热至65℃，使～85％固体溶解。在65℃下，将热浆状物陈化1-3小时，建立～15％晶种床。在20psig压力下，在搅拌速度400-700rpm下，将浆状物在树脂罐中混合。
然后将批物质缓慢冷却至5℃在65-55℃下保持10小时，在55-45℃下保持10小时，在45-5℃下保持8小时。将冷却的批物质在5℃下陈化1小时，达到小于5mg/g，尤其3mg/g的目标上清液浓度。将该批浆状物过滤，在5℃下，用1∶1的EtOH/水溶剂混合物洗涤。在40℃下，在真空下，将湿滤饼干燥。按照Microtrac法测定，干滤饼的终粒度为～150μm，95％粒子的粒度＜300μm。
实施例4在1∶1的乙醇/水中生长平均粒度为140μm的大结晶 将7.5克SAHA多晶型I结晶和70.7克1∶1的EtOH/水溶剂混合物加入晶种制备容器(500-ml夹层树脂罐)中。在室温下，将晶种浆状物研磨至粒度小于50μm，然后按以上实施例2步骤操作。将晶种浆状物加热至63-67℃，陈化30分钟-2小时。
在另一个结晶器(1升夹层树脂罐)中，加入17.5克SAHA多晶型I结晶和317.3克1∶1的EtOH/水溶剂混合物。将结晶器先加热至67-70℃，使所有固体SAHA结晶溶解，然后冷却至60-65℃，保持溶液略微超饱和。
将晶种制备容器中的晶种浆状物移至结晶器中。在20psig压力下，将浆状物在树脂罐中混合，搅拌器速度类似于实施例3。按照实施例3中的冷却特征，将该批浆状物缓慢冷却至5℃。将该批浆状物过滤，在5℃下，用1∶1的EtOH/水溶剂混合物洗涤。在40℃下，将湿滤饼在真空下干燥。干滤饼的终粒度为约140μm，95％粒子的粒度＜280μm。
实施例4A在1∶1的乙醇/水中大规模生长大结晶 将得自实施例2A(30％总量)的21.9kg精细API干燥滤饼和201kg 50/50 EtOH/水溶液(2.75kg溶剂/kg所有SAHA)加入#1容器-晶种制备罐。将51.1kg SAHA多晶型I结晶(70％总量)和932kg 50/50EtOH/水(12.77kg溶剂/kg所有SAHA)加入#2容器-结晶器。将该结晶器加压至20-25psig，将内容物加热至67-70℃，同时保持该压力，使SAHA结晶完全溶解。然后将内容物冷却至61-63℃，使溶液过饱和。在结晶器中陈化处理期间，将晶种制备罐加压至20-25psig，将晶种浆状物加热至64℃(范围62-66℃)，陈化30分钟，同时保持该压力，使～1/2晶种固体溶解，然后冷却至61-63℃。
将晶种制备罐中的热晶种浆状物迅速移至结晶器(无吹扫)，同时保持两容器温度。将结晶器中的氮气压再调至20-25psig，将该批物质在61-63℃下陈化2小时。在26小时中，按3个线性步骤，将该批物质冷却至5℃(1)在62℃-55℃下保持10小时；(2)在55℃-45℃保持6小时；和(3)在45℃-5℃保持10小时。将该批物质陈化1h，然后将湿滤饼过滤，用水(总计6kg/kg，～440kg)洗涤2×，在40-45℃下，真空干燥。将由该重结晶处理得到的干燥滤饼包装成粗API。按70/30比例，将粗API和精细API共混。
实施例5通过湿法研磨制备第288批小粒子 按50mg/g-150mg/g(结晶/溶剂混合物)浆状物浓度，将SAHA多晶型I结晶悬浮于乙醇水溶液(100％乙醇-50％乙醇/水，按体积比)。用IKA-Works Rotor-Stator T50型带超细叶片的高剪切均化器，按20-35m/s速度，将浆状物湿法研磨至SAHA的平均粒度小于50μm，且95％的SAHA平均粒度小于100μm，同时将温度保持在室温。在室温下，将湿法研磨的浆状物过滤，用EtOH/水溶剂混合物洗涤。然后将湿滤饼在40℃下干燥。通过前述Microtrac法测得的该湿法研磨物质的最终平均粒度小于50μm。
实施例6生长第283批大结晶 将24g SAHA多晶型I结晶和205ml 9∶1的乙醇/水溶剂混合物加入带玻璃搅拌器的500ml夹层树脂罐中。按照实施例1步骤，在室温下，将浆状物湿法研磨至粒度小于50μm。将湿法研磨的浆状物加热至65℃，使～85％固体溶解。将热浆状物在64-65℃下陈化1-3小时，建立～15％晶种床。按100-300rpm搅拌器速度，将浆状物混合。
然后通过以下1个加热-冷却周期将该批物质冷却至20℃在65℃-55℃保持2小时，在55℃下保持1小时，在55℃-65℃下保持～30分钟，在65℃下陈化1小时，在65℃-40℃下保持5小时，在40℃-30℃保持4小时，在30℃-20℃下保持6小时。将冷却的批物质在20℃下陈化1小时。将该批浆状物过滤，在20℃下，用9∶1的EtOH/水溶剂混合物洗涤。在40℃下，将湿滤饼在真空下干燥。按Microtrac法测定，干燥滤饼的终粒度为～150μm，95％的粒子的粒度＜300μm。
将30％第288批结晶和70％第283批结晶共混，得到含约100mgN-辛二酰苯胺异羟肟酸；约44.3mg微晶纤维素；约4.5mg交联羧甲基纤维素钠和约1.2mg硬脂酸镁的胶囊。
实施例7测定经SAHA和硼替佐米处理的多发性骨髓瘤细胞系的生存力 这些实验的目的是，通过4种细胞系评价伏立诺他/硼替佐米联合药物的作用。保留未处理(对照)或用指定浓度的伏立诺他、硼替佐米或两者联合处理的细胞。在使用联合药物的情况下，将细胞用硼替佐米处理6h，在该时间点，将伏立诺他加入温育培养基。初始处理后48h通过标准AlamarBlue试验测定，评价细胞的生存力。
测试同时药物处理和其中将细胞与其中的一种药物一起预温育然后加入第二种药物的各种阶梯方案的作用。另外，还测试单一药物和联合药物的完全剂量-反应曲线。为了举例说明目的，几个定义的浓度对如
图1所示。这些实验的结果说明，将H929细胞与硼替佐米温育6h，然后加入伏立诺他，初始处理48h后，得到对细胞增殖/生存力的“亚加性”(弱于加性但强于任一单独药物)作用。在SKMM2细胞中出现相似结果。在Karpas620细胞情况中，与伏立诺他单一药物相比，硼替佐米预处理未得到加性利益。相反，在U266细胞中，与硼替佐米单一药物相比，联合药物未出现更强活性。因此，数据提示，在分别给予两种药物均出现效力的这些细胞系中，次最适浓度的联合药物具有增强的抗增殖活性。在另一方面，在对其中一个化合物反应极差的细胞中，整体反应由最有效的化合物驱动。
实施例8晚期多发性骨髓瘤患者口服SAHA和联合应用的硼替佐米的I期临床试验 该研究用于测定晚期多发性骨髓瘤患者对口服SAHA(伏立诺他)和标准剂量的硼替佐米联合疗法的最大耐受剂量(MTD)。设计该研究以评价单独的SAHA和与硼替佐米联合给药时的药代动力学。用该研究评价SAHA和硼替佐米的联合给药方案的安全性和耐受性。还用该研究估计联合给予SAHA和硼替佐米时，反应速度、达到反应的时间、反应持续时间、无病情发展的生存和病情发展的时间。在该研究中，测试给予晚期多发性骨髓瘤患者的SAHA和硼替佐米联合药物的全面的安全性和耐受性，以进行进一步研究。
研究设计和持续时间该研究为多中心，开放性，增加剂量，在适合硼替佐米疗法的晚期多发性骨髓瘤患者中SAHA和静脉内注射硼替佐米联合的I期研究。在该非随机试验中，用SAHA治疗剂量水平1和2患者7天，然后停药14天，持续一个21天治疗周期，治疗最高达8个周期。在剂量水平1，在第1和第4天；和在剂量水平2，在第1、4、8和11天，静脉内(IV)一次性大剂量给予硼替佐米。用SAHA治疗后一剂量水平患者14天，然后停药7天，21天为一个治疗周期，治疗最高达8个周期。在第1、4、8和11天给予硼替佐米。参加前一形式试验方案的患者仅按该形式中说明的初始剂量水平治疗。有进行性疾病或不能耐受毒性经历的患者终止试验。在继续治疗方案中，按相同剂量和方案继续给予患者SAHA治疗，该患者无进行性疾病和经过首次8个周期治疗后仍然符合合格标准。
患者样品高达40名晚期多发性骨髓瘤(复发或顽固性疾病)成人患者参加试验。在各剂量水平上，加入试验的患者至少3名，最多6名，确定联合疗法的最大耐受剂量(MTD)。一旦确立MTD，就给予另外6名患者推荐的II期剂量，用以研究方案的药代动力学。合格的患者必须≥18岁；具有0-2的ECOG表现状态；合适的血液、肝和肾功能；具有吞咽胶囊的能力；距离前次化疗、放疗、大手术或其它研究性抗癌疗法≥3周；和已从以前毒性中恢复。
剂量/剂量形式、途径和剂量方案1个治疗周期为3周或21天。按21天治疗周期，用SAHA 400mg P.O.每日(q.d.)治疗剂量水平1和2患者7天，然后停药14天。对于剂量水平1，在第1和第4天，通过静脉内(IV)一次性大剂量给予0.7mg/m2硼替佐米，对于剂量水平2，在第1、4、8和11天，通过静脉内(IV)一次性大剂量给予0.7mg/m2硼替佐米。在21天治疗周期内，用SAHA 400mg P.O.每日(q.d.)治疗后一剂量水平患者14天，然后停药7天。在第1、4、8和11天，IV一次性大剂量给予硼替佐米0.7-1.3mg/m2(见表14)。参加前一形式试验方案的患者仅按SAHA 200mg P.O.b.i.d.初始剂量水平继续治疗14天，然后停药7天，并在第4、8、11和15天IV一次性大剂量给予0.7mg/m2硼替佐米。在同时给予SAHA和硼替佐米日内，先给予SAHA剂量，然后给予硼替佐米。尽管为该SAHA和硼替佐米联合疗法的初期研究目的，目前FDA批准的给予复发性骨髓瘤患者的硼替佐米剂量为1.3mg/m2，但使参加第一剂量水平试验的患者接受0.7mg/m2硼替佐米。如果发现该联合疗法安全，则继续提高剂量。
在21天完全治疗周期内，SAHA的初始剂量水平(剂量水平1)为400mg P.O.q.d.给药7天，然后停药14天。在下表中定义其它潜在剂量水平。
表14每日一次(q.d.)SAHA和硼替佐米联合的给药方案
出现剂量限制毒性的剂量(Barring dose-limiting-toxicities)(DLT)是从剂量水平1升高至剂量水平6的剂量。在本研究中给药未超过剂量水平6。
按照给出的方法操作。如果剂量水平1大于MTD，则终止研究。如果剂量水平1耐受性良好，则剂量上调至剂量水平2。如果剂量水平2大于MTD，则视剂量水平1为MTD，并扩大至总参加数6名患者/MTD组。如果剂量水平2耐受性良好，则剂量上调至剂量水平3。如果剂量水平3大于MTD，则视剂量水平2为MTD，并扩大至总参加数6名患者/MTD组。如果剂量水平3耐受性良好，则剂量上调至剂量水平4。如果剂量水平4大于MTD，则视剂量水平3为MTD，并扩大至总参加数6名患者/MTD组。如果剂量水平4耐受性良好，则剂量上调至剂量水平5。如果剂量水平5大于MTD，则视剂量水平4为MTD，并扩大至总参加数6名患者/MTD组。如果剂量水平5耐受性良好，则剂量上调至剂量水平6。如果剂量水平6大于MTD，则视剂量水平5为MTD，并扩大至总参加数6名患者/MTD组。如果剂量水平6耐受性良好，则视其为MTD，并扩大至总参加数6名患者/MTD组。在调整SAHA或硼替佐米剂量前，研究人员咨询医学监察员。
一旦确定MTD，在另外6名患者中研究推荐的II期剂量。推荐的II期剂量是在评估过在本研究重复周期中得到所有安全性、药效学和效力数据后确定的MTD或小于MTD的剂量。另外，重复周期之间的安全性评估可影响剂量上调的决定。
效力测量用欧洲人组的血液和骨髓移植(EBMT)标准记录使用该联合药物的患者的临床状态(以抗肿瘤活性为标准)(Blade，J.，et al.(1998)British J.Haematol.102(5)，1115-1123)。用该研究估计对联用的SAHA和硼替佐米的反应速度、达到反应的时间、反应持续时间和病情发展的时间。如果合适，研究者每2周期或更频繁地监测并记录疾病的发展/反应。
安全性测量在给药前和整个研究设定的时间间隔内，取得或评价由病毒表现、体检、ECOG表现状态、不良事件、严重不良事件、试验室安全性试验和心电图组成的安全性参数。
治疗方案在剂量水平上，在重复的21天周期中，通过口服给予适当数目的100-mg SAHA胶囊，21天周期由给药7-14天然后停药7-14天组成，停药期间不给予SAHA。在给药期间，尽可能一起服用胶囊和食物(餐后30分钟内)。在任一时间消耗的总剂量不超过设定的剂量，且错过的剂量不予弥补。在每个21天周期开始时，将足够7天治疗的药物分发给剂量水平1和2患者。在每个21天周期开始时，分发后一剂量水平患者14天药物。在给药周期结束时，将任何未使用的药物退回分发点。在每周期结束后，清点胶囊，在研究结束时，派监查员拜访，了解依从性。
在初始剂量水平的第1和第4天和各随后剂量水平的第1、4、8和11天，通过IV一次性大剂量注射硼替佐米。在同时给予SAHA和硼替佐米日内，先给予SAHA剂量，然后给予硼替佐米。使参加第一剂量水平试验的患者接受0.7mg/m2硼替佐米。如果发现联合疗法安全，则调高剂量。本研究中的其它硼替佐米剂量是0.9、1.1和1.3mg/m2。在每周期中，在剂量水平1的第1和第4天和剂量水平2-6的第1、4、8和11天，在给予硼替佐米前，预计绝对嗜中性粒细胞数(ANC)≥1,000/μL和血小板数≥50,000/μL。
临床试验室试验在筛选期和所有周期的第1、8、11和15天进行不同临床试验室试验。试验室试验包括测量血液学、化学、凝血和尿分析。还包括骨髓瘤疾病测量，尤其血清蛋白电泳、定量免疫球蛋白、血清免疫固定、24小时尿蛋白电泳和尿免疫固定。其它血清试验还包括β-hCG(仅在具有怀孕潜力的妇女中进行)、β2微球蛋白和C-反应蛋白。报告并跟踪任何治疗-突发性临床显著性试验室异常。
参加推荐的II期剂量水平试验的患者的药代动力学(PK)样品一旦确定MTD，让该患者群体中的6名新患者加入推荐的II期剂量研究。推荐的II期剂量为在评估本研究中重复周期中的所有安全性、药效学和效力数据后确定的MTD或小于MTD剂量。另外，可用重复周期间的安全性评价影响剂量上调的决定。仅在该组患者中进行药代动力学测量研究。在周期1的第3天，在给药前、给药后15分钟和给药后30分钟，采集SAHA PK样品。在给药后1、2、3、5、8、10和12小时，继续采集PK样品。在周期1中第11天，在早晨，给予门诊患者SAHA，然后立即通过IV一次性大剂量给予硼替佐米。在给药前、给药后15分钟和给药后30分钟，采集SAHA PK样品。在给药后1、2、3、5、8、10和12小时，采集SAHA PK样品。另外，还在给药前和给药后5、10、15和30分钟，采集硼替佐米PK样品。在给药后1、2、3、5、8、10、12和24小时，继续采集硼替佐米PK样品。硼替佐米PK样品用于保存目的。PK参数包括浓度-时间曲线下面积(AUC)，最大血浆或血清浓度(Cmax)、达到最大血浆或血清浓度的时间(Tmax)和表观半衰期(t1/2)。通过PK样品分析，得到SAHA的PK参数(AUC0-12、Cmax和Tmax)和硼替佐米的PK参数(AUC0-inf、Cmax、Tmax和表观t1/2)。
SAHA和硼替佐米的具体剂量、剂量上调和调整对于一个完整的21天治疗周期，SAHA的起始剂量水平(剂量水平1)是400mgP.O.q.d.给药7天，然后停药14天。其它潜在剂量水平和剂量调整见上表说明。如果SAHA的剂量400mg P.O.q.d.×14天和0.7mg/m2硼替佐米不能耐受，则将SAHA剂量下调至400mg P.O q.d.×10天。如果SAHA剂量400mg P.O q.d.×10天不能耐受，则将SAHA再第二次下调至400mg P.O q.d.×7天。对于在各剂量水平上的接受400mg P.O.q.d.×14天的SAHA和上调至0.9、1.1和1.3mg/m2的硼替佐米的患者，先将硼替佐米下调回一个剂量水平。再将SAHA第二次下调至400mgP.O.q.d.×10天。
实施例9晚期多发性骨髓瘤患者口服SAHA联合硼替佐米的I/II期临床试验 该研究用于测定晚期多发性骨髓瘤患者对口服伏立诺他和标准剂量的硼替佐米联合疗法的最大耐受剂量(MTD)。另外，还用该研究评价伏立诺他和硼替佐米联合给药方案的安全性和耐受性，对联用的伏立诺他和硼替佐米的反应速度、达到反应的时间、反应和反应持续时间、病情发展的时间评估。
该研究为多中心，开放性，剂量递增，给予符合硼替佐米疗法的晚期多发性骨髓瘤的患者伏立诺他并联合给予硼替佐米静脉内注射的I期研究。在该非随机试验中，用伏立诺他治疗患者14天，然后停药7天，每一治疗周期为21天，最高达8个周期。在第4、8、11和15天，通过静脉内(IV)一次性大剂量注射给予剂量水平1和2患者硼替佐米。在第1、4、8、11天，通过静脉内(IV)一次性大剂量注射给予后一剂量水平的患者硼替佐米。在各周期中的第1-4天和第9-12天，可一起用地塞米松20mg/日p.o.和按研究方案给予的伏立诺他和硼替佐米，治疗用伏立诺他和硼替佐米药物联合完成至少1个治疗周期后经历进行性疾病的患者。
如果经过伏立诺他、硼替佐米和地塞米松的两个治疗周期后还经历进行性疾病，这种患者必须永久终止。有不能耐受毒性的经历的患者须终止试验。按相同剂量和方案，继续用伏立诺他治疗经过首个8个周期后疾病不再发展且继续符合合格标准的患者。
高达40名晚期多发性骨髓瘤(复发或顽固性疾病)成人患者参加这些试验。在各剂量水平上，加入试验的患者至少3名，最多6名，以确立联合疗法的最大耐受剂量(MTD)。一旦确立MTD，就给予另外6名患者推荐的II期剂量，以研究方案的药代动力学。合格的患者≥18岁。
1个治疗周期为3周或21天。通过口服(p.o.)b.i.d.连续给予伏立诺他胶囊14天(第1-第14天)。在每个周期中，每周两次，通过静脉内(IV)一次性大剂量注射给予硼替佐米2周。在同时给予伏立诺他和硼替佐米日内，先给予伏立诺他剂量，再给予硼替佐米。尽管出于该初期研究伏立诺他和硼替佐米联合药物的安全性目的，目前FDA批准的给予复发性骨髓瘤患者的硼替佐米剂量为1.3mg/m2，但使参加第一剂量水平试验的患者接受0.7mg/m2硼替佐米。如果发现联合疗法安全，则继续提高剂量。本研究中的其它硼替佐米剂量是0.9、1.1和1.3mg/m2。在21天治疗周期中，用200mg b.i.d.伏立诺他p.o.治疗剂量水平1和2患者14天，然后停药7天。伏立诺他治疗可最高达8周期。在第4、8、11和15天，通过静脉内(IV)一次性大剂量给予硼替佐米。在21天治疗周期中，按剂量400mg q.d.，用伏立诺他p.o.治疗随后剂量水平的患者14天，然后停药7天。伏立诺他治疗可最高达8周期。在第1、4、8和11天，给予硼替佐米。请参考下表1。
表1 出现剂量限制毒性的剂量(Barring DLT)是由剂量水平1升至剂量水平5的剂量。在本研究中给药未超过剂量水平5。
程序如下 如果剂量水平1大于MTD，则终止研究。
如果剂量水平1耐受性良好，则剂量上调至剂量水平2。
o如果剂量水平2大于MTD，则视剂量水平1为MTD，且扩大至总参加人数6名患者/MTD组。
如果剂量水平2耐受性良好，则剂量上调至剂量水平3。
o如果剂量水平3大于MTD，则视剂量水平2为MTD，且扩大至总参加人数6名患者/MTD组。
如果剂量水平3耐受性良好，则剂量上调至剂量水平4。
o如果剂量水平4大于MTD，则视剂量水平3为MTD，且扩大至总参加人数6名患者/MTD组。
如果剂量水平4耐受性良好，则剂量上调至剂量水平5。
o如果剂量水平5大于MTD，则视剂量水平4为MTD，且扩大至总参加人数6名患者/MTD组。
如果剂量水平5耐受性良好，则视其为MTD，且扩大至总参加人数6名患者/MTD组。
一旦确立MTD，在另外6名患者中研究推荐的II期剂量。推荐的II期剂量为通过评价在本研究重复周期中得到的所有安全性、药效学和效力数据确定的MTD或小于MTD剂量。
虽然详细显示了本发明并通过参考其特定实施方案进行了阐述，但本领域技术人员可以理解，在不偏离所述本发明的含意的前提下，可对其中形式和细节进行各种改变。本发明范围包括权利要求。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种在有需要的患者中治疗多发性骨髓瘤的方法，所述方法包括经口给予所述患者i)由以下结构代表的SAHA(N-辛二酰苯胺异羟肟酸)或其药学上可接受的盐或水合物；
和ii)(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸(硼替佐米)或其药学上可接受的盐或水合物，其中按治疗多发性骨髓瘤有效的量给予所述SAHA和硼替佐米。
2.权利要求1的方法，其中静脉内给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
3.权利要求1-2中任一项的方法，其中在至少一个21天疗程内，有7天按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
4.权利要求1-2中任一项的方法，其中在至少一个21天疗程内，有10天按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
5.权利要求1-2中任一项的方法，其中在至少一个21天疗程内，有14天按200mg剂量，每日二次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
6.权利要求1-2中任一项的方法，其中在至少一个21天疗程内，有14天按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
7.权利要求1-6中任一项的方法，其中重复给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，最长达8个21天疗程。
8.权利要求1-7中任一项的方法，其中在21天中的第4、8、11和15天，按0.7mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
9.权利要求1-7中任一项的方法，其中在21天中的第4、8、11和15天，按0.9mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
10.权利要求1-7中任一项的方法，其中在21天中的第1、4、8和11天，按0.9mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
11.权利要求1-7中任一项的方法，其中在21天中的第1、4、8和11天，按约1.1mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
12.权利要求1-7中任一项的方法，其中在21天中的第1、4、8和11天，按约1.3mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
13.权利要求1-2中任一项的方法，其中按200mg剂量，每日两次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量0.7mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
14.权利要求1-2中任一项的方法，其中按200mg剂量，每日两次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量0.9mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
15.权利要求1-2中任一项的方法，其中按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量0.9mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
16.权利要求1-2中任一项的方法，其中按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量1.1mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
17.权利要求1-2中任一项的方法，其中按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量1.3mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
18.权利要求1-17中任一项的方法，其中给予SAHA和硼替佐米。
19.权利要求1-17中任一项的方法，所述方法还包括通过口服给予地塞米松或其药学上可接受的盐或水合物，其中在至少一个21天疗程的第1-4天和第9-12天，按20mg剂量，每日一次，给予所述地塞米松或其药学上可接受的盐或水合物。
20.一种药用组合物，所述组合物包含i)由以下结构代表的N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物；
和ii)[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
21.权利要求20的药用组合物，所述组合物包含SAHA和硼替佐米。
权利要求
1.一种在有需要的患者中治疗多发性骨髓瘤的方法，所述方法包括给予所述患者i)由以下结构代表的SAHA(N-辛二酰苯胺异羟肟酸)或其药学上可接受的盐或水合物；
和ii)(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸(硼替佐米)或其药学上可接受的盐或水合物，其中按治疗多发性骨髓瘤有效的量给予所述SAHA和硼替佐米。
2.权利要求1的方法，其中通过口服给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
3.权利要求1的方法，其中静脉内给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
4.权利要求1-3中任一项的方法，其中在至少一个21天疗程内，有7天按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
5.权利要求1-3中任一项的方法，其中在至少一个21天疗程内，有10天按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
6.权利要求1-3中任一项的方法，其中在至少一个21天疗程内，有14天按200mg剂量，每日二次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
7.权利要求1-3中任一项的方法，其中在至少一个21天疗程内，有14天按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物。
8.权利要求1-7中任一项的方法，其中重复给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，最长达8个21天疗程。
9.权利要求1-8中任一项的方法，其中在21天中的第4、8、11和15天，按0.7mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
10.权利要求1-8中任一项的方法，其中在21天中的第4、8、11和15天，按0.9mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
11.权利要求1-8中任一项的方法，其中在21天中的第1、4、8和11天，按0.9mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
12.权利要求1-8中任一项的方法，其中在21天中的第1、4、8和11天，按约1.1mg/2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
13.权利要求1-8中任一项的方法，其中在21天中的第1、4、8和11天，按约1.3mg/m2剂量，每日一次，给予[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
14.权利要求1-3中任一项的方法，其中按200mg剂量，每日两次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量0.7mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
15.权利要求1-3中任一项的方法，其中按200mg剂量，每日两次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量0.9mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
16.权利要求1-3中任一项的方法，其中按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量0.9mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
17.权利要求1-3中任一项的方法，其中按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量1.1mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
18.权利要求1-3中任一项的方法，其中按400mg剂量，每日一次，给予SAHA或其药学上可接受的盐或水合物，并按总日剂量1.3mg/m2，给予硼替佐米或其药学上可接受的盐或水合物。
19.权利要求1-18中任一项的方法，其中给予SAHA和硼替佐米。
20.权利要求1-18中任一项的方法，所述方法还包括通过口服给予地塞米松或其药学上可接受的盐或水合物，其中在至少一个21天疗程的第1-4天和第9-12天，按20mg剂量，每日一次，给予所述地塞米松或其药学上可接受的盐或水合物。
21.一种药用组合物，所述组合物包含i)由以下结构代表的N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物；
和ii)[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧代-3-苯基-2-[(吡嗪基羰基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸或其药学上可接受的盐或水合物。
22.权利要求21的药用组合物，所述组合物包含SAHA和硼替佐米。
全文摘要
本发明涉及在有需要的患者中治疗癌症的方法，该方法为给予有需要的患者第一种量的组蛋白脱乙酰酶(HDAC)抑制剂例如N-辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物，和第二种量的一种或多种抗癌药物包括硼替佐米。可给予包括治疗有效量的HDAC抑制剂和抗癌药物。在各方面，HDAC抑制剂和抗癌药物的作用可以为加性或协同。
文档编号A01N37/18GK101299921SQ200680041075
公开日2008年11月5日 申请日期2006年11月3日 优先权日2005年11月4日
发明者S·弗兰克尔, P·多伊特施, S·兰多尔夫, B·法恩 申请人:默克公司