专利名称：一种蜜环菌子实体的人工栽培方法、其培养基及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种蜜环菌子实体的人工栽培方法，属于食用菌栽培技术领域。
背景技术：
蜜环菌[Armillaria mellea(Vahl ex Fr.)Quel]又名榛蘑，属于担子菌亚 门、伞菌目、白蘑科、蜜环菌属的一种著名的药食兼用真菌。蜜环菌在世界上 各大洲均有分布，在我国主要分布于黑龙江、吉林、内蒙古及台湾等省区。野 生的蜜环菌多数生长在夏、秋两季的雨后，多丛生于老树或死树的基部，也能 寄生于活树上，在灌木丛和草地上也可大量生长。我国东北地区民间早就有采 集蜜环菌子实体食用并治疗疾病的习惯，经常食用可以预防视力减退、夜盲症、 眼炎、粘膜失去分泌能力以及皮肤干燥，并可抵抗某些呼吸道和消化道感染等 疾病。蜜环菌子实体还是一种地方性药材资源。
蜜环菌的一个重要特征就是其独特的根状菌索(Rhizomorphs)，菌索可以
在地下连成一个巨大的网络，如果有连续的营养供应，它甚至可以存活上百年。 菌索的主要功能是无性繁殖，同时，菌索在蜜环菌营养生长过程中主要发挥运 输氧气、水分和营养物质的作用，其结构和功能要比植物的根要复杂。
蜜环菌是一类具有重要经济价值的高等真菌。是名贵中药天麻和猪苓栽培必 备的共生菌，蜜环菌的菌索侵入天麻块茎或猪苓菌核后被后者消化利用，成为 它们的营养源。
蜜环菌化学成分的研究报道很多，已经分离鉴定出倍半萜醇芳香酸酯类成
分37个；二萜类成分7个，均为二萜酸；甾醇类成分4个；色素类成分3个；
以及服-取代的腺苷类化合物、 一个黄酮类化合物(大豆黄素)、4个酚性化 合物赤藓醇、甘露醇、杜鹃花酸、苔藓酸和甘油醇-a-单油酸酯等[1]。蜜环菌 多糖具有免疫调节，抑制肿瘤的药理作用。蜜环菌提取物还具有催眠镇静作用 和抗惊厥功能。商品化药物"天麻蜜环菌片"由蜜环菌菌丝体和其提取物制成。 药理研究结果表明，液体培养的蜜环菌菌丝体具有镇静作用、抗惊厥作用、 增强小鼠耐缺氧能力的作用，能提高机体免疫力、降低尼古丁引起的小鼠死亡
率，对鼠全脑缺血有脑保护作用，可以增加脑血流量和冠状动脉血流量。以蜜 环菌菌丝体为原料开发的蜜环菌片临床上用于治疗由高血压、椎基底动脉供血
不足、美尼尔氏症、植物神经功能紊乱等引起的眩晕症、血管性头痛，对帕金 森综合症和中风后遗症也有明显治疗效果。
研究蜜环菌子实体的栽培的方法和技术，可以为我国的食用菌栽培领域提 供新的栽培品种。
国内外目前对于蜜环菌的作为可食用的子实体栽培的研究报道还没有，其子 实体栽培也没有形成产业化。
发明内容
本发明的目的在于克服上述已有技术的不足而提供一种操作简单，培养周期 短，子实体产率高，菌坯可以全部综合利用，无污染无废弃物，可以进行工厂 化栽培的一种蜜环菌子实体的人工栽培方法。
本发明的目的可以通过如下措施来达到一种用于栽培蜜环菌子实体的培养
基，其特征在于其配方重量比组分为18 25%的粮食作物，75 82%的水。较佳 地，其配方重量比组分为20 25%的粮食作物，75~80%的水。更佳地，其配方 重量比组分为21 23%的粮食作物，77 79%的水。
为了进一步实现本发明的目的，所述的粮食作物为麦麸。 为了进一步实现本发明的目的，所述的粮食作物为麦麸和玉米面，麦麸和玉
米面的比例从10: l到l: 1。较佳地，麦麸和玉米面的比例从10: l到3: 1。更 佳地，麦麸和玉米面的比例从10: l到5: 1。
为了进一步实现本发明的目的，所述的粮食作物为麦麸和大米面，麦麸和大 米面的比例从10: l到l: 1。较佳地，麦麸和大米面的比例从10: l到3: 1。更 佳地，麦麸和大米面的比例从10: l到5: 1。
为了进一步实现本发明的目的，所述的粮食作物为麦麸和甘薯面，麦麸和甘 薯面的比例从10: l到l: 1。较佳地，麦麸和甘薯面的比例从10: l到3: 1。更 佳地，麦麸和甘薯面的比例从10: l到5: 1。
一种蜜环菌子实体的人工栽培方法，其特征在于其包括如下步骤
a) 准备菌种蜜环菌菌种；
b) 配制培养基其配方重量比组分为18 25%的粮食作物，75~82%的水；
c) 在种子培养基中培养蜜环菌，获得蜜环菌种子。d)将步骤c)中制得的蜜环菌种子接种到步骤b)中制得的培养基上，15 30 。C下暗培养至25-35天时，转移到17 19 °C、相对湿度90%、每天12h散射光条件 下培养，10 15天后子实体开始形成，子实体成熟时采摘；
为了进一步实现本发明的目的，所述的步骤c)中的种子培养基为液体种子 培养基，其配方体积比组分为2.0%的葡萄糖，0.6。/。的蛋白胨，0.06%的硫胺素， 1.0%的乙醇，磷酸二氢钾O. 3%，水96.04%， pH值6.0;用250ml三角瓶，装量 100ml/250ml瓶，12rC灭菌30min，冷却至室温后接种蜜环菌菌种，在旋转式摇 床上旋转，在转速120rpm、温度25。C的条件下，培养7 10天，成为蜜环菌液体 种子。
为了进一步实现本发明的目的，所述的步骤c)中的种子培养基为固体种子 培养基，固体种子培养采用麦芽汁琼脂固体培养基，接种蜜环菌菌种后温度25 °C;暗培养时间15-20天，成为蜜环菌固体种子。
上述所栽培的蜜环菌子实体用于功能性饲料添加剂，其是将采摘的蜜环菌 子实体的菌坯晾干后作为功能性饲料添加剂用。
上述所栽培的蜜环菌子实体用于药品生产原料，其是将采摘的蜜环菌子实 体的菌坯用水提取，提取物作为药品生产原料，提取后的废渣作为饲料。
本发明同已有技术相比可产生如下积极效果本发明经过多年广泛而深入 细致的研究，根据蜜环菌独特的菌索生长特性和独特的固体培养特性，采用农 副产品作为原料，制成固体或半固体的培养基，培养蜜环菌菌丝体进而诱导培 养子实体，该方法操作简单，培养周期短，子实体产率高，菌坯可以全部综合 利用，无污染无废弃物，具有综合效益。生产后的菌坯可以用作功能性饲料添 加剂，也可以用于提取药用原料，菌坯中富含多种水解酶类，如纤维素酶、半 纤维素酶、漆酶、蛋白酶等，还含有具有免疫调节活性的多糖，是一种理想的 功能性饲料添加剂。
具体实施例方式下面对本发明的具体实施方式
作详细说明 实施例1:
菌种蜜环菌菌种，来源于中国普通微生物保藏管理中心，保存在PDA培
养基斜面上，保藏编号为5.130。
蜜环菌液体种子的制备250ml三角瓶装液体种子培养基100ml，液体种子 培养基配方体积比组分为如下2.0%的葡萄糖，0.6%的蛋白胨，0.06%的硫胺素，
1.0%的乙醇，磷酸二氢钾O. 3%， pH值6. 0，水96.04%。 12rC灭菌30min，冷却 至室温后后接种保存在PDA培养基斜面上的蜜环菌菌种两块(黄豆粒大小)，25 。C，旋转式摇床上转速120rpm、温度25。C条件下培养7 10天，成为蜜环菌液 体种子。
培养基的配制培养基配方按重量比取25%的麦麸和玉米面，75%的水，
麦麸和玉米面的比例为10: 1;
蜜环菌子实体的栽培用栽培瓶分装装培养基，装量至少150g (湿重)/
瓶，牛皮纸封口。 12rC灭菌30min，，冷却后以无菌操作方式接种蜜环菌液体种 子5-10ml，尽量使蜜环菌液体种子在培养基表面均匀分布，放置25i:条件下暗 培养，培养至25-30天时，转移到17 19 'C、相对湿度90%、每天12 h散射光 条件下培养。转移后的10 15天子实体开始形成，子实体成熟时(菌伞形成， 内菌幕破裂)采摘。子实体采集后，将菌坯干燥(晒干、晾干或烘干)，可以用 于功能性饲料添加剂或菌坯用水提取，提取物可以作为药品生产原料(天麻蜜 环菌片)，提取后的废渣仍可以直接作为词料，整个生产过程具有综合效益，没 有废弃物。 实施例2
基本同实施例l，其区别是菌种蜜环菌菌种，来源于中国普通微生物保藏 管理中心，保存在PDA培养基斜面上，保藏编号为5. 146。
培养基的配制培养基配方按重量比取18%的麦麸，82%的水。 实施例3
基本同实施例l，其区别菌种蜜环菌菌种，来源于中国农业微生物保藏管
理中心，保存在PDA培养基斜面上，保藏编号为50801。
是培养基的配制培养基配方按重量比取23%的麦麸和大米面，77%的水， 麦麸和大米面的比例为3: 1。
实施例4:
基本同实施例l，其区别是菌种蜜环菌菌种，来源于中国工业微生物保藏
管理中心，保存在PDA培养基斜面上，保藏编号为14066。
培养基的配制培养基配方按重量比取21%的麦麸和甘薯面，79%的水， 麦麸和甘薯面的比例为5: 1。 实施例5:
基本同实施例l，其区别是培养基的配制培养基配方按重量比取20%的 麦麸和玉米面，80%的水，麦麸和玉米面的比例为7: 1。
且采用是固体培养基培养的蜜环菌固体种子，蜜环菌固体种子的制备固 体种子培养基采用麦芽汁琼脂固体培养基，接种保存在PDA培养基斜面上的蜜
环菌菌种后温度25'C;暗培养时间15-20天，成为蜜环菌固体种子。
实施例6:
基本同实施例5，其区别是培养基的配制培养基配方按重量比取24%的 麦麸和大米面，76°/。的水，麦麸和大米面的比例为l: 1。 实施例7:
基本同实施例5，其区别是培养基的配制培养基配方按重量比取19%的 麦麸，81%的水。
权利要求
1、一种用于栽培蜜环菌子实体的培养基，其特征在于其配方重量比组分为18~25％的粮食作物，75~82％的水。
2、 根据权利要求l所述的一种用于栽培蜜环菌子实体的培养基，其特 征在于其配方重量比组分为20 25%的粮食作物，75 80%的水。
3、 根据权利要求1或2所述的一种用于栽培蜜环菌子实体的培养基， 其特征在于所述的粮食作物为麦麦i或麦麸和玉米面或麦麸和大米面或麦麸 和甘薯面。
4、 根据权利要求3所述的一种用于栽培蜜环菌子实体的培养基，其特 征在于所述的麦麸和玉米面或麦麸和大米面或麦麸和甘薯面的比例从10: 1到l: 1。
5、 根据权利要求3所述的一种用于栽培蜜环菌子实体的培养基，其特征在于所述的麦麸和玉米面或麦麸和大米面或麦麸和甘薯面的比例从10: 1 到3: 1。
6、 一种蜜环菌子实体的人工栽培方法，其特征在于其包括如下步骤a) 准备菌种蜜环菌菌种；b) 配制培养基其配方重量比组分为18~25%的粮食作物，75 82%的水；c) 在种子培养基中培养蜜环菌，获得蜜环菌种子；d) 将步骤c)中制得的蜜环菌种子接种到步骤b)中制得的培养基上， 15 30。C下暗培养至25-35天时，转移到17 19 。C、相对湿度90%、每天12h散 射光条件下培养，10 15天后子实体开始形成，子实体成熟时采摘。
7、 根据权利要求6所述的一种蜜环菌子实体的人工栽培方法，其特征 在于所述的步骤c)中的种子培养基为液体种子培养基，其配方体积比组分 为2.0%的葡萄糖，0.6%的蛋白胨，0.06。/o的硫胺素，1.0%的乙醇，磷酸二 氢钾O. 3%，水96.04%， p膽6.0;用250ml三角瓶，装量100ml/250ml瓶，121 。C灭菌30min，冷却至室温后接种蜜环菌菌种，在旋转式摇床上旋转，在转 速120rpm、温度25t:的条件下，培养7 10天，成为蜜环菌液体种子。
8、 根据权利要求6所述的一种蜜环菌子实体的人工栽培方法，其特征在于所述的步骤C)中的种子培养基为固体种子培养基，固体种子培养采用麦芽汁琼脂固体培养基，接种蜜环菌菌种后温度25℃;暗培养时间15-20天，成为蜜环菌固体种子。
9、 权利要求6或7或8所述的蜜环菌子实体用于功能性饲料添加剂，其 是将采摘的蜜环菌子实体的菌坯晾干后作为功能性饲料添加剂用。
10、 权利要求6或7或8所述的蜜环菌子实体用于药品生产原料，其是将 采摘的蜜环菌子实体的菌坯用水提取，提取物作为药品生产原料，提取后的 废渣作为词料。
全文摘要
本发明公开了一种蜜环菌子实体栽培的方法，其步骤包括准备蜜环菌菌种；配制培养基其配方重量比组分为18～25％的粮食作物，75～82％的水；在种子培养基中培养蜜环菌，获得的蜜环菌种子接种到制得的培养基上，15～30℃下暗培养至25-35天时，转移到17～19℃、相对湿度90％、每天12h散射光条件下培养，10～15天后子实体开始形成，子实体成熟时采摘，采摘的蜜环菌子实体的菌坯晾干后可作为功能性饲料添加剂用，菌坯用水提取，提取物作为药品生产原料，提取后的废渣作为饲料，本发明具有子实体发生周期短、产量高、菌胚全部综合利用、无废弃物等优点。
文档编号C05F11/00GK101343195SQ20071011334
公开日2009年1月14日 申请日期2007年10月13日 优先权日2007年10月13日
发明者静 刘, 刘林德, 屈慧鸽, 张秋胜, 程显好, 静 缪, 葛宜和, 高兴喜 申请人:鲁东大学