专利名称：圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法
技术领域：
本发明属于经济林的栽培方法，特别是涉及药用、观赏植物圆齿野鸦椿组织培养方法。
技术背景圆齿野鴉椿(^/""力A 10"/"// J^Wa)为省沽油科野鴉椿属常绿小乔木，种子油可 制肥皂；树皮可制栲胶；根、果性温，味微苦。祛风除湿，止血止痛，发表散寒。根治产 褥热，趺打损伤；果治睾丸肿痛，子宫脱垂。圆齿野鸦椿具有观花、观叶和赏果的效果， 观赏价值高。挂果时间长，从9月下旬外果皮变红到翌年3月果实脱落，观果时间长达半 年，红色艳丽的瞢荚果给秋冬季节增添了许多喜庆色彩，使人陶醉。野鸦椿作为观赏树种， 应用范围广，可群植、丛植于草坪，也可用于庭园，公园等地布景。但由于圆齿野鸦椿的 种子有深休眠的特点，从釆种到播种出苗跨度3年，而且出苗率低，要能获得优良的发芽 率，获得更多的健壮苗。对种子进行沙藏催芽；江西农业大学等单位开展了播种繁育方法 研究，但其发芽率在65%左右，具备很好的实用前景，但仍然较低，没能符合生产实际需要。 生产中，特别大规模药用价值的开发时，更需要是能够满足大面积种植的优良纯化的组培 苗，因此急需要成熟的组织培养技术，但在专利公开以前没有一个有关其组织培养的报道， 更没有成功的实例。 发明内容本发明的目的是提供一种圆齿野鴉椿茎段的组织培养方法。 本发明的方法是以如下方式实现的1. 取材方法选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段，在距离带芽节点1-2 厘米处剪取，去除多余的叶片和2/3叶柄；用洗衣粉漂洗干净后，用自来水滴冲3-5小时；2. 培养基培养基的配制基本培养基为MS, Ag, Su， pH值为5.8,生长激素为BA、 IBA、 KT、 NAA、 IAA、 Zu，附加物为Ac等；培养基的厚度一般为lcm左右；诱导培养基—MS+BA ( 2mg/L ) +NAA (0. 3mg/L) +S u ( 20g/L ) +Ag ( 7g/L ) +Ac ( 2 ~ 2. 5g/L ) 诱导培养基—MS+ Zu( 2 ~ 5mg/L )+IAA (lmg/L) + NAA (0. 3mg/L) +Su( 39g/L )+ Ag( 0. 7g/L ) 生根培养基—1/2MS+IBA (0. 5mg/L) +Su (20g/L) +Ag (7g/L)3. 材料消毒处理先对材料进行适当的修剪，用洗衣粉清洗材料，再将材料放入干净的烧杯中用自来水冲洗30分钟，把水新干置超净工作台备用，用75%的酒精盖过材料，摇荡，3-5秒钟后去除酒精，加入0. 1%升汞(HgCl2)处理12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲洗材料2-3次后，倒去无菌水即可进行接种；4. 诱导培养取生长健壮的新芽切割成约0.5 ~ 1.5cm的茎段，削除新芽、表皮以及 残留的芽外壳，保留2/3新芽幼嫩叶柄以保护腋芽，分别接种在诱导培养基中；5. 培养条件光照时间12~16h/d光照强度1500-20001x温度24°C±1。C6. 增殖培养将上述诱导培养、生长健壮的丛生芽切割开，分别接种在增殖培养基中；7. 诱导生根将继代诱导培养出来的幼苗切取单株，带有2-3片叶子，株高l-2cm， 转移至生根培养基中；8. 小苗移栽当试管苗长至3 4cm高，叶子有5 7片，根有3 5条，长度约2 ~ 3cm 时，就可进行移栽；先把要移栽的苗搬移到培养室外，炼苗3~ 5天，以增强试管苗对室 外环境的适应能力；然后打开瓶盖锻炼2~ 3天，再从培养瓶中取出，洗去根部培养基， 移入蛭石和腐殖土(l: 2)混合的基质中，小苗移栽后放入室温中，保湿遮阴。采用本发明方法进行，茎段经过培养，20 - 25天即可以萌发出生长健壮的新芽；再经 过20 - 30天左右的扩增，15 20天左右诱导生根后即可成苗、移栽，移栽成活率可达90 %以上；成活后的长势良好、株形健壮挺拔，扩繁系数在15倍以上。下面结合实施例对本发明作进一步说明。具体实施例实施例1:取材方法选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段，在距离带芽节点l-2 厘米处剪取，去除多余的叶片和2/3叶柄；用洗衣粉漂洗干净后，用自来水滴冲3小时； 培养基培养基的配制基本培养基为MS, Ag, Su, pH值为5.8，生长激素为BA、 IBA、 KT、 NAA、 IAA、 Zu,附加物为Ac等；培养基的厚度一般为lcm左右；诱导培养基—MS+BA (2mg/L) +NAA (0. 3mg/L)+S u (20g/L) +Ag ( 7g/L ) +Ac (2. 5g/L) 诱导培养基—MS+ Zu ( 2mg/L ) +IAA (lmg/L) + NAA (0. 3mg/L) +Su ( 39g/L ) + Ag ( 0. 7g/L ) 生根培养基—1/2MS+IBA (0. 5mg/L) +Su (20g/L) +Ag ( 7g/L )材料消毒处理先对材料进行适当的修剪，用洗衣粉清洗材料，再将材料放入干净的 烧杯中用自来水冲洗30分钟，把水新干置超净工作台备用，用75%的酒精盖过材料，摇荡， 5秒钟后去除酒精，加入0. 1°/。升汞(HgCl2)处理12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水 冲洗材料3次后，倒去无菌水即可进行接种；诱导培养取生长健壮的新芽切割成约0.5cm的茎段，削除新芽、表皮以及残留的芽 外壳，保留2/3新芽幼嫩叶柄以保护腋芽，分别接种在诱导培养基中；培养条件光照时间15h/d光照强度1500-20001x温度24。C±1°C增殖培养将上述诱导培养、生长健壮的丛生芽切割开，分别接种在增殖培养基中； 诱导生根将继代诱导培养出来的幼苗切取单株，带有2片叶子，株高1.5cm,转移至 生根培养基中；小苗移栽当试管苗长至化m高，叶子有5片，根有3条，长度约3cm时，就可进行 移栽；先把要移栽的苗搬移到培养室外，炼苗3天，以增强试管苗对室外环境的适应能力； 然后打开瓶盖锻炼2天，再从培养瓶中取出，洗去根部培养基，移入蛭石和腐殖土(l: 2) 混合的基质中，小苗移栽后放入室温中，保湿遮阴。
权利要求
1. 圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法，其特征是1)取材方法选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段，在距离带芽节点1-2厘米处剪取，去除多余的叶片和2/3叶柄；用洗衣粉漂洗干净后，用自来水滴冲3-5小时；2)培养基培养基的配制基本培养基为MS，Ag，Su，pH值为5.8，生长激素为BA、IBA、KT、NAA、IAA、Zu，附加物为Ac等；培养基的厚度一般为1cm左右；诱导培养基→MS+BA(2mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)+Ac(2～2.5g/L)诱导培养基→MS+Zu(2～5mg/L)+IAA(1mg/L)+NAA(0.3mg/L)+Su(39g/L)+Ag(0.7g/L)生根培养基→1/2MS+IBA(0.5mg/L)+Su(20g/L)+Ag(7g/L)3)材料消毒处理先对材料进行适当的修剪，用洗衣粉清洗材料，再将材料放入干净的烧杯中用自来水冲洗30分钟，把水沥干置超净工作台备用，用75％的酒精盖过材料，摇荡，3-5秒钟后去除酒精，加入0.1％升汞(HgCl2)处理12分钟，将汞液倒入废汞瓶，用无菌水冲洗材料2-3次后，倒去无菌水即可进行接种；4)诱导培养取生长健壮的新芽切割成约0.5～1.5cm的茎段，削除新芽、表皮以及残留的芽外壳，保留2/3新芽幼嫩叶柄以保护腋芽，分别接种在诱导培养基中；5)培养条件光照时间12～16h/d光照强度1500-20001x温度24℃±1℃6)增殖培养将上述诱导培养、生长健壮的丛生芽切割开，分别接种在增殖培养基中；7)诱导生根将继代诱导培养出来的幼苗切取单株，带有2-3片叶子，株高1-2cm，转移至生根培养基中；8)小苗移栽当试管苗长至3～4cm高，叶子有5～7片，根有3～5条，长度约2～3cm时，就可进行移栽；先把要移栽的苗搬移到培养室外，炼苗3～5天，以增强试管苗对室外环境的适应能力；然后打开瓶盖锻炼2～3天，再从培养瓶中取出，洗去根部培养基，移入蛭石和腐殖土(1∶2)混合的基质中，小苗移栽后放入室温中，保湿遮阴。
全文摘要
本发明属于涉及一种圆齿野鸦椿茎段的组织培养方法，其选取当年萌发饱满新芽、或带芽饱满的当年生茎段为外殖体，经过诱导培养，20～25天即可以萌发出生长健壮的新芽；再经过20～30天左右的扩增培养，15～20天左右诱导生根培养后即可成苗、移栽，移栽成活率可达90％以上；成活后的长势良好、株形健壮挺拔，扩繁系数高。
文档编号A01G31/00GK101263789SQ200810071010
公开日2008年9月17日 申请日期2008年5月8日 优先权日2008年5月8日
发明者何碧珠, 蔡丽娟, 邱万翔, 邹双全 申请人:福建农林大学