含亚硝酸盐毒素的杂食动物诱饵的制作方法

专利名称：：含亚硝酸盐毒素的杂食动物诱饵的制作方法
技术领域：
：本发明涉及人道地控制杂食野生动物，特别是野生猪。因此，此处使用的术语"人道"和"人道地"是指对目标动物物种不造成不适当痛苦的方法。被本发明避免或降到最低的痛苦征兆包括出血、过度呕吐、哼叫、几种中枢神经系统破坏(包括兴奋过度、抽搐、运动失调、腿震颤和腿划动同时俯卧)和延长死亡。优选地，死亡发生在摄入本发明的诱饵后2-3个小时内。本发明涉及的目标有害动物是杂食野生动物，优选地是杂食野生哺乳动物。更优选地，本发明针对野生猪和负鼠种群的控制。应理解的是此处使用的术语"野生"是指野外生存的，其种群或数量不可被容易地控制的目标有害动物物种(即杂食动物)。在澳大利亚，例如，许多野生动物如狗、山羊、猫和猪最初在英国人定居过程中是作为家养物种、适合狩猎的物种引入的或为了可能控制其它有害动物目的而引入的。在逃入野外后，这样的动物变成野生的，采用并繁荣于不受人类帮助的独立生活。许多野生动物是被引入的物种，并且它们在野外的存在是不需要的，因为它们可以不利地影响农业事业如农作物生产和放牧。被引入物种的野生动物区别于本地或家养物种。这些野生动物还常常造成不利的环境影响，特别地是当它们的种群增加时。由于已经将这些野生动物归类为有害动物，并且需要将这些动物的种群控制在最小或，如果可能，从野外或高度农业的或保守的阀(conservationvalve)地区完全根除它们。应该理解的是虽然本发明所述的诱饵不能区分野生和非野生家养动物，只计划将诱饵用于控制野生动物种群并且应该采取相应的合适措施以保证不将诱饵散播在家养动物的种群中。还要理解的是"野生"还包括过度丰富的本地物种，其局部种群可需要控制以便降低疾病传播的危险或过度啃食本地和/或农业上的重要植物。上文中的术语"活性剂"是指以所需方式影响目标野生动物的生理的试剂。本发明所述的活性剂是亚硝酸盐。亚硝酸盐包括亚硝酸钠、亚硝酸钾以及亚硝戊酯。最优选地，活性剂是亚硝酸钠或亚硝酸钾，并且更优选地是亚硝酸钠。在本发明所述的诱饵中使用的亚硝酸盐是可以从商家获得的。应该理解的是在通常的下饵活动中，在目标动物物种的寻食区域内散播多种诱饵。单一诱饵对单一目标动物可不提供致死剂量，即使被完全食用。但是优选地，亚硝酸盐是以对目标野生动物致死剂量的量提供。就是说，在单一诱饵中亚硝酸盐的量是能有效杀死野生杂食动物的量。应该理解的是，杀死野生杂食动物的亚硝酸盐的致死剂量将通常取决于物种的生理和重量。关于野生猪，致死剂量优选地是至少135mg/kg亚硝酸盐。因此，对于一只重60kg的野生猪，为了提供致死剂量，单一诱饵需要包括至少8.lg亚硝酸盐。更优选地，致死剂量是270-540mg/kg之间。因此，因为在通常条件下无论何处遇到的大多数成年野生猪可以重约30-300kg之间，在单一诱饵中优选的亚硝酸盐的量是8.lg-162g之间。更优选地，在单一诱饵中优选的亚硝酸盐的量在30g以下，并且甚至更优选地在20g以下，如在15g以下。对于野生负鼠，致死剂量优选是也至少135mg/kg，并且更优选地是至少163mg/kg。更优选地，致死剂量是400-600mg/kg。在单一诱饵中亚硝酸盐的优选剂量是在1.9g-4.9g之间。亚硝酸盐可包含高达诱佴的总重量的25重量％。优选地，亚硝酸盐可包含高达诱饵的总重量的15重量％。本发明所述的诱饵还由固体或半固体载体材料组成。将载体材料设计成对于目标野生动物有吸引力的、美味的和可食用的，并且因此这种通常含有对于目标野生动物是潜在食物来源的成分或成分的混合物，或由上述的成分或成分的混合物组成。另外，诱饵应该具有适合目标动物食用的硬度，但是足够结实以便能够容易地储藏和运输，并且优选地，还能在从固定的翼或从直升机飞行器上的空中分散过程中，在冲击地面产生的力量下保持完整。对于针对控制野生杂食动物如野生猪的本发明，载体材料选自对于目标杂食动物有吸引力的、美味的和可食用的食物来源。例如，载体材料可含有动物或植物衍生的成分和任何这些成分的组合，或由上述的成分和任何这些成分的组合组成。适合的动物成分的例子包括鱼肉、骨头、肉、动物内脏、皮肤、蛋、乳蛋白、酪蛋白和脂肪。适合的植物衍生成分的例子包括糠(pollard)、麸(bran)、玉米(corn)、植物纤维、面粉、水果、蔬菜、种子、谷类和麦秆。优选地，考虑到非目标物种选择载体材料，这样可以减少非目标物种对诱饵的潜在食用。因此，对制成载体材料的成分的特定类型和量的选择可以根据要避免的非目标物种的不同而不同。例如，在非目标物种是食草动物(即特定的鸟类物种、有袋类动物等)的情况下，可以选择主要是由动物衍生成分组成的载体材料。当针对澳大利亚的野生猪这是特别优选的，在澳大利亚，大多数非目标本地物种有严格的食谱范围并且许多非目标物种是专一食草动物或很少被杂食动物诱饵吸引的食结谷粒植物的鸟。载体材料还可以包括特定的化学引诱剂，如风味剂(flavourant)或芳香材料(odourants)。化学引诱剂可以是天然的或人工香料(artificialessence)，如香蕉、蜜、茴香籽(aniseed)、糖蜜(molasses)、肉桂油(cinnamonoil)和巧克力。载体材料还可以包含本领域已知的其它添加剂，如着色剂、防腐剂、粘合剂、填充剂、pH调节剂等。例如，在优选的具体实施方式中，载体材料含有着色剂(染料)使诱饵为绿色以对非目标物种(如鸟类)掩藏诱饵。鸟类通常偏爱吃与成熟果实相一致的黄色和红色食物。还可以加入防腐剂和粘合剂以便给完成的诱饵提供机械强度并且减少在储存时过早降解的危险。此外，为了增加目标特异性，诱饵还可以包括其它非目标物种的驱逐剂，如已知是鸟类驱逐剂的甲基邻氨基苯甲酸(methylanthranilate)。理论上不想被结合，据信诱饵中的亚硝酸盐通过在红血细胞中造成高铁血红蛋白(MetHb)形成而起作用，高铁血红蛋白防碍氧气运输，并且在特定剂量通过高铁血红蛋白血症造成快速死亡。已经报道，家养家畜如猪通过亚硝酸中毒而意外死亡(见例如，Vyt，Petal，ViaamsDiergeneesk皿digTijdschrift，2005，74，359-363;Gibson.R.，TheVeterinaryRecord,March22,1975，p270;McParland，P.J.，etal，TheVeterinaryRecord,Marchl，1980，p201;Counters，D.E.etal，TheVeterinaryRecord,May3，1975，p412;Winks，W.R.，TheQueenslandjournalofAgriculturalScience,Vol.7，No.1and2，MarchandJune1950，pp1-14;andLondon,W.T.，etal，J.A.V.M.A，Vol150，No.4，pp398_402.)。从对各种动物的高铁血红蛋白形成和减少的研究的报道中(见Smith&Butler.，Am.J.Physiology.210(2):347-350，1966)，似乎MetHb形成的易感性以快速MetHb形成率被快速MetHb减少率抵消的方式，与MetHb减少率相关。在该研究中，观察到猪对于高铁血红蛋白血症特别易感，因为猪不能有效地减少MetHb。其原因是，猪具有独特的低水平高铁血红蛋白还原酶，这使它们对于高铁血红蛋白形成化合物是高度易感的。因此，本发明所述的制备的诱饵特别适合于控制杂食野生动物(如野生猪和负鼠)，它们由于生理性的低水平的高铁血红蛋白还原酶或该酶的低活性而对于高铁血红蛋白血症敏感。本发明人已经汇编了某些杂食动物物种对亚硝酸钠(SN)的易感性，并且在下面表1中概述表197/18页物种NADH-Methb大约强词大约诱饵体型大约还原酶水平(gavage)致死致死剂量大小SN致剂量(mg/kg)(mg/kg)(kg)死剂量(gm)有袋类动物普通刷尾负鼠30.616348942.0北方棕袋鼠(Northernbrownbandicoot)522326962L4真哺乳亚纲动物(Eutherians)物种NADH-Methb大约强饲大约诱饵体型大约还原酶水平(gavage)致死致死剂量大小SN致剂量(mg/kg)(mg/kg)(kg)死剂量(gm)猪121033105015.5大鼠10972910.10.03浣熊--1500.75小鼠532357050.030.02现在也已经鉴定亚硝酸盐不仅以有效的毒素起作用，中毒和死亡还快速发生并且相对无痛苦。作用的机理是由于由亚硝酸诱导的降低的高铁血红蛋白氧气运输能力，大脑中快速缺氧的发展。因此该中毒的第一症状之一是出现意识丧失，和一氧化碳作用的方式很大程度上是一样的。已经将一氧化碳作为人道地处理不想要动物的方法，并且因为该过程一氧化碳被认为是可用的最人道的技术之一。这与遭受华法林中毒(各种器官出血导致疼痛，如跛行等)、磷中毒(如肝衰竭导致缓慢延迟死亡，其造成长时间感到有病等)和1080中毒(无意识、癫痫发作和从癫痫发作中恢复，癫痫发作可经常导致在癫痫发作中的损伤)的严重临床症状形成反差。而且，用亚硝酸盐死亡的速度很快，所以任何症状只经历短期时间。因此，本发明所述诱饵的优点是相对于存在的野生杂食动物诱饵，其提供一种更人道的选择。因此，本发明的另一个方面涉及用于人道地控制野生杂食动物的诱饵，其包含固体或半固体载体材料和亚硝酸盐，其中亚硝酸盐是对于杂食动物提供致死剂量的量。为了增强或补充亚硝酸盐的高铁血红蛋白形成能力，并且因此增强或补充本发明所述的诱饵的致死性，该诱饵还可以包括额外的高铁血红蛋白形成物质。这样的物质包括血红蛋白的直接氧化剂，如其他的亚硝酸盐像亚硝戊酯、或亚甲基蓝、甲苯胺蓝(toluidineblue)和硫代硫酸钠。还可以包括非直接氧化剂，如氨基苯酚(例如o-氨基苯基(o-aminophenyl)、p-氨基苯酚、m-氨基苯酚)、丙氨酸、间位二甲苯酸(metaxylidine)、羧胺(例如苯羧胺(phenylhydroxylamine))、肼(hydrazine)、乙酰苯胺(acetanilid)、乙酰氧乙苯胺(acetophenetidin)、m_苯二胺，亚石肖基苯(nitrosobenzene)、石肖基苯(例如o—二石肖基苯、p—二石肖基苯、m—二石肖基苯、三石肖基苯、0—石肖基甲苯(o—nitrotoluol)、m—石肖基甲苯、p-硝基甲苯、2，4-二硝基甲苯、2，6-二硝基甲苯、2，4，6-三硝基甲苯、!!1-氯硝基苯、!11-氨基硝基苯、2，4-二硝基氯苯(dinitrochlorobenzene)、和p-硝基-o-甲苯胺)、磺胺类，(如氛苯石黄月安)、酉昆(quinone)、p_氛基乙酉先苯(p_aminoacetophenone)、蔡(napthalene)、二甲基氨基嘧啶(dimethylaminopyridine)(4-DMAP)、氨基苯丙酮(aminopropiophenones)(例如p-氨基苯丙酮)。这些物质可以单独地或共同地增强或促进高铁血红蛋白的发展或可以减慢诱导的高铁血红蛋白转变(还原)回正常的血红蛋白。活性剂可以与载体材料以任何允许将活性剂递送到目标有害动物的方式活性剂结合使用。例如，可以将该活性剂大量地掺入到载体材料中或包被在载体材料的表面。在一个具体实施方式中，载体材料可以是已经用亚硝酸盐浸泡或包被或密切地与亚硝酸盐混合的谷粒种子。在进一步的具体实施方式中，本发明所述的诱饵可以采取肉片的形式(即动物的尸体部分)，其中将亚硝酸盐包被在肉的表面或掺入肉中，例如通过将亚硝酸盐的溶液或分散相注射到肉中。在优选的具体实施方式中，将亚硝酸盐简单地分散到整个载体材料中形成诱饵。更优选地是将亚硝酸盐平均地分散到整个载体材料中。可以通过简单混合载体材料和需要量的亚硝酸盐实现分散。在图1中显示的诱饵1是圆柱形状，并且包括含有均匀分散于整个载体材料中的亚硝酸钠3的固体载体材料2。通过覆盖1的外周的一个薄包装4加固固体载体材料和由此产生的诱饵。在另一个具体实施方式中，固体或半固体载体材料形成诱饵的外表面，并且可以物理性接触含有亚硝酸盐的核心。因此在该具体实施方式中，将含有活性剂的核心定位于固体载体材料中，且并不分散于整个载体材料。这可以包括多个核心。应该理解的是将该含有活性成分的核心置于载体材料的内部，这样优选地没有核心的表面从载体材料中伸出。优选地，是将核心定位于固体载体材料的中心。更优选地是将核心定位于固体载体材料的中心，这样没有核心表面暴露在外部环境中。因此，固体载体材料完全覆盖或包围定位于其中的核心。如图2显示的诱饵5是圆柱形，并且包括与集中于中心的核心1有物理性接触的固体载体材料6和核心l，将核心1用载体材料完全覆盖或包围，这样没有核心表面暴露在外部环境中。固体载体材料和因此因此产生的诱饵用覆盖5外周的一个薄包装8加固。具有定位于固体或半固体载体材料中的核心的主要优点是小的非目标动物或只是尝试该诱饵载体材料的动物不能轻易地接近核心和因此接近活性剂。这使诱饵更具有目标特异性。还应该理解的是短语"含有活性剂的核心"意思是在任何大的程度上核心不允许将活性剂(亚硝酸盐)释放到周围的载体材料中。该特征将有助于防止非目标动物的食用。因此，活性剂作为封装的或结合(bound)的活性剂存在于核心中。因此，核心可以由能够含有该活性剂的任何合适材料组成。但是需要的是核心材料具有硬度和目标动物易于食用的风味。例如，核心可以包括封装用形成基质的材料，该材料被用于例如，制药工业。通常的封装用材料包括明胶、碳水化合物(包括多糖和单糖)、脂肪酸、蜡和动物脂(tallow)。如上讨论在一个具体实施方式中，本发明所述的诱饵包含核心，该核心优选地"与固体或半固体载体材料有物理性接触"。这意味没有物理屏障将核心和载体材料分开。由于核心是由不允许活性剂(在任何大的程度上)渗入周围载体材料的合适的成分制成，这才成为可能。因此本发明的另一个好处是为了在核心包含活性剂，不必用包被材料(例如虫胶材料或丙烯酸酯聚合物)包被该核心。这允许轻松的制备，因而提供某些制备成本的好处。这还增加被目标动物例如野生猪食用的可能性，由于猪在吃食前用嘴衔住诱饵材料并且可以吐出诱饵中硬的或非天然的成分。在该具体实施方式中，核心可以由疏水的成分制成，这样在核心和载体材料之间有有限的水交换。核心还需要在储存中稳定，但是在野外，其变得易受天气和生物降解的破坏，以至在环境中诱饵不能保持长时间。核心还需要是充分地热稳定，以至当热的地区使用诱饵时(在这些地方诱饵直接暴露在夏日阳光中)，核心的成分不熔化或浸入载体材料中。核心由在其中含有活性剂(亚硝酸盐)的这样的成分组成，并且因此当将诱饵暴露在正常的环境条件下时核心维持有限的稳定性。因为还计划核心对目标动物是有吸引力的、美味的和可食用的，核心还可包含引诱剂，如风味剂或消味剂(odourant)。另外，核心还可以包含本领域已知的其它添加剂如防腐剂、粘合剂、保湿剂(humectant)、填充剂、pH调节剂等。例如，为了在储存、运输和使用中保持活性剂的活性，在诱饵的生产过程中可以向核心加入抗氧化剂。通常的抗氧化剂包括苯甲酸钠、亚硫酸氢钠等。可以通过在制药或农用化学品工业中用作形成小球或药片的常规技术形成本发明所述的优选的诱饵。对于技术人员显然的是诱饵的实际形状不是关键参数，并且任何可得到的形状的诱饵是在本发明的范围内。但是，例如，当将诱饵用于空中下饵活动中时，一种特别的形状可以是有优势的。例如，一种特定的形状可以为了增加诱饵的空气动力学或物理强度，并且允许更精确的散播而起作用。另外，诱饵的大小和形状可以进一步增加目标的特异性。例如，对于较大动物的较大诱饵减少较小非目标物种可以搬运诱饵或可以食用足量的诱饵而提供致死剂量的可能12性。本发明所述的优选的诱佴可以例如通过直接压縮或通过用阿基米德螺杆压出机(Archimedesscrewextruder)简单的挤压处理形成。在后面的系统中挤压是通过阿基米德螺杆实现的，阿基米德螺杆挤压载体混合物使其通过形成形状的管嘴或进入外包装。压出机中的载体当其被压出时可以被切割或分割，或在将载体切割成所需长度以使诱饵形成不同的大小或重量之前，可以允许其部分或完全固化。可以通过切片方法(例如固定的刀)进行切割以便控制获得诱饵的长度。诱饵小球的直径和纵向形状可以通过管嘴孔和外皮(用做含诱饵)的直径和形状来控制。为了有助于基于上面程序的制备过程，可以加入另外的添加剂或赋形剂，如水或粘合剂如淀粉、明胶或阿拉伯胶。润滑剂也可有助于上述的小球生产。在进一步的具体实施方式中，载体材料是通过最初称重和在混合器/压出机中混合所有的干成分而形成的。然后加入液体成分并且混合以便形成可挤压的糊或悬浮物。可以将亚硝酸盐加入糊和悬浮物中并且连续混合以分散该盐。然后将混合物压入薄包装中以便一旦载体材料形成固体，使载体材料形成特定的形状。优选的包装包括非或半渗透天然和合成多聚物薄膜，薄膜是可食用的，如合成的纤维素薄膜包装。当诱饵是在空中下饵活动中使用时，用这种方式使用的包装是特别优选的，因为当将其从空中分散时，包装给诱饵提供增加的强度(冲击抗性)。包装也是优选的，因为其增加了处理的容易性并且还有助于减少非目标动物的摄取，并且还可以和印刷标签一起制作，以便提供适当的额外标记和安全信息或进一步伪装诱饵以便减少非目标物种的摄取。虽然认识到的是，可使用其它材料如塑料皮，生物能降解的包装(如合成纤维素薄膜或天然胶原包装)是有利的，因为其允许未经食用或部分食用的诱饵天然降解。这还减少诱饵被非目标物种食用的可能性。在该具体实施方式中，还通常优选地是用弓I诱剂包被包装，以使诱饵保留其对目标动物的吸引力。例如，可以用鱼油或其它引诱剂包被包装。本发明所述的优选的诱饵当亚硝酸盐完全分散在整个载体材料中时可以通过上面的过程制作。对于核心中含有亚硝酸盐的具体实施方式，无需加入亚硝酸盐和核心，可以完成有形状的固体载体材料的制作。这可以通过在有形状的固体或半固体载体材料中打孔以形成便于插入核心的定量给料孔实现。可以将核心的成分(包括亚硝酸盐)以其在插入后部分或完全固化的液体、悬浮液或糊引入孔中。选择性地，可以使核心成形并且允许其固化(或部分或完全)然后插入定量给料孔。因此，在具体实施方式中，核心的制备可以通过将核心成分引入包装材料而形成核心的形状，该形状是为了插入定量给料孔而可修正的。在该具体实施方式中，还需要从可食用的材料制备核心包装。因此这样的具体实施方式意味核心和载体材料物理性可用包装材料分开。优选地，然后将同样载体材料的塞子插入定量给料孔或别的孔中，这些孔在将核心成分定量加入载体材料后关闭，以便使核心不暴露在外部环境中。因此，本发明的另一个方面给杂食野生动物提供具有可食用的外层的诱饵，该诱饵包含核心和固体或半固体载体材料，其中核心含有作为活性剂的亚硝酸盐并且核心位于固体或半固体载体材料内。本发明进一步提供制备杂食野生动物用诱饵的方法，该诱饵包括与固体或半固体载体材料有物理性接触的核心，其中该核心含有作为活性剂的亚硝酸盐并且该核心位于固体或半固体载体材料内，所述方法包含(a)混合载体材料成分以形成糊或悬浮混合物；(b)将混合物压入包装；(c)在包装中使混合物至少部分固化，因此形成固体或半固体载体材料；(d)在固体或半固体载体材料内形成定量给料孔；(e)混合核心成分和活性剂以形成液体或悬浮物以制备固体形式的核心；(f)用液体、悬浮物部分填充定量给料孔或步骤(e)的固体形式的核心；并且(g)用固体或半固体载体材料充填定量给料孔的剩余体积。本发明还提供人道地控制杂食野生动物的方法，该方法包括在所述杂食野生动物寻食区域内散播至少一种本发明所述的诱饵的步骤。本发明所述的诱饵尤其适用目标特异的地面或空中下饵制度。优选使用的方法包括确定目标野生动物种群和在野生动物寻食的地点或区域内散播一定量的诱饵。散播诱饵的量取决于需要控制的种群中目标动物的数量。如前所述，本发明所述的诱饵的优点之一是其可以比现有诱饵更有目标特异性的形成存在。为了进一步增加目标特异性，可以设计更好地针对所需野生动物的下饵活动。例如，野生猪需要每日接近水。因此在较干旱地区或在每年的较干旱时段，可以将诱饵散播在已知水点的周围。另外，野生猪有夜间或黄昏的生活方式，因此在下午晚时散播诱饵可以有助于将非目标物种的接触降到最小。另外，还已知野生猪具有非常大的、几乎完全重叠的家园范围。因此，将成组诱饵很好地分开放置也可以有助于将非目标死亡降到最小。不能并且不应该认为本说明书对任何在先出版物(或由其衍生的信息)或任何已知事物的引用是承认或认可或任何形式提示在先出版物(或由其衍生的信息)或已知事物形成在与该说明书密切相关的领域的部分公知常识。整个该说明书和随附的权利要求，除非上下文需要，不然词"包含"及其变化形式如"包括"和"含有"，应理解为暗示包括所称的整数或步骤或整数或步骤的组，但不排除任何其它整数或步骤或整数或步骤的组。现在将参考下列实施例描述本发明的某些具体实施方式，这些实施例只用于说明的目的并且不用于限制上述一般性的范围。实施例实施例1-制备含疏水毒性核心的诱饵a)配方成分足够为每个诱饵提供25g亚硝酸钠的亚硝酸钠、蜡、动物脂、丙烯乙二醇、水、盐、糖、明胶、柠檬酸、山梨酸钾、苯甲酸钠、亚硫酸氢钠、亮蓝染料、鱼肉、玉米、面粉、糠、金枪鱼油和纤维性包装(涂有金枪鱼油)。b)配制过程阶段1混合可以首先称重用作载体材料的干成分，然后在双向带状混合器/压出机中干着混合1分钟。在预热(80°C)液体成分(含有除毒素的所有水溶性添加剂)后可以加入金枪鱼油和动物脂，并且继续混合3分钟直到获得均衡的硬度和颜色。阶段2挤压和冷却可以将温的混合物压入55mm直径的可用少量的金枪鱼油涂抹的合成纤维包装，压成所需长度并且允许冷却并且固化过夜成坚实有弹性的硬度。阶段3切割可以将固化的长包装压出品切成需要长度以形成约长90mm和直径55mm约240g重的成形载体材料。阶段4形成用于在成形载体材料中插入核心的定量给料孔可以将切割下来的成形的载体材料转移到打孔装置中，该装置从一个切割末端通过载体材料的中心，到距离成形的载体材料的底部2cm内，形成轻微锥形的圆柱形的约15mm直径的定量给料孔。阶段5制备含有亚硝酸钠的核心可以在8(TC熔化状态下，配制蜡和上等动物脂的疏水混合物中的新制备的亚硝酸钠悬浮物，并且将其转移到适用于温度调节控制的加套罐的精确测量泵中，在其中将混合物持续搅动同时维持在70-80°C。阶段6定量给料和封闭然后可以通过经游尺校准的测量泵，将亚硝酸钠悬浮物泵入定量给料孔，在孔中使其固化。10ml体积的悬浮物可以给予每个诱饵25g剂量值的亚硝酸钠。然后通过第二次冲击用载体材料封闭定量给料孔的开放末端，以确保毒素核心在载体材料内并且远离诱饵的末端。阶段7装箱和批次编号然后可以将完成的诱饵装进装有橡胶密封的防揭盖和标有被认可的标签和制造时间、批次编号和过期时间的高强度20L聚丙烯桶中。实施例2-制备含亚硝酸钠/蜜的毒性核心的诱饵a)配方成分足够为每个诱饵提供25g亚硝酸钠的亚硝酸钠，丙烯乙二醇、水、盐、糖、明胶、蜜、柠檬酸、山梨酸钾、苯甲酸钠、亚硫酸氢钠、亮蓝染料、鱼肉、玉米、面粉、糠、金枪鱼油和纤维性包装(涂有金枪鱼油)。b)配制过程阶段l混合可以首先称重用作载体材料的干成分，然后在双向带状混合器/压出机中干着混合1分钟。在预热(80°C)液体成分(含有除毒素和蜜的所有水溶性添加剂)后可以加入金枪鱼油和动物脂，并且继续混合3分钟直到获得均衡的硬度和颜色。阶段2挤压和冷却可以将温的混合物压入55mm直径的可用少量的金枪鱼油涂抹的合成纤维包装，压成所需长度并且允许冷却、固化过夜成坚实有弹性的硬度。阶段3切割可以将固化的长包装压出品切成需要长度，以形成约90mm长和55mm直径约240g重的成形载体材料。阶段4形成用于在成形载体材料中插入核心的定量给料孔可以将切割下来的成形的载体材料转移到打孔装置中，该装置从一个切割末端通过载体材料的中心，到距离成形的载体材料的底部2cm内，形成轻微锥形的圆柱形的约15mm直径的定量给料孔。阶段5制备并且定量给料含有亚硝酸钠的核心可以将新制备的亚硝酸钠和蜜的混合物加入定量给料孔中。实施例3制备毒素分散在整个载体中的诱饵a)配方成分足够提供每个诱饵25g的亚硝酸钠、丙烯乙二醇、水、盐、糖、明胶、柠檬酸、山梨酸钾、苯甲酸钠、亚硫酸氢钠、亮蓝染料、鱼肉、玉米、面粉、糠、金枪鱼油和纤维性包装(涂有金枪鱼油)。b)配制过程阶段l混合可以首先称重包括亚硝酸钠的载体材料的干成分，然后在双向带状混合器/压出机中干着混合l分钟。在预热(80°C)液体成分后，可加入金枪鱼油并且继续混合3分钟直到获得均衡的硬度和颜色。阶段2挤压和冷却可以将温的混合物压入55mm直径的可以用少量的金枪鱼油涂抹的合成纤维包装，压成所需长度并且允许冷却并且固化过夜成坚实有弹性的硬度。阶段3切割可以将固化的长包装压出品切成需要长度以形成约90mm长和55mm直径约240g重的成形载体材料。阶段4装箱和批次编号然后可以将完成的诱饵装进装有橡胶密封的防揭盖和标有被认可的标签和制造时间、批次编号和过期时间的高强度20L聚丙烯桶中。实施例4-试验数据入圈(Pen)试验在RobertWicks有害动物研究中心(昆士兰州天然资源、矿和水部)俘获的野生猪群落由在昆士兰州英格尔伍德周围地区商业捕猎者捕获的野生猪组成。将俘获的不同性别、年龄和大小的野生猪将野生猪随机赶开并用于进行试验。将野生猪安置在有目的建造的野生猪的住所。用两种不同的试验检测对野生猪作为毒素的亚硝酸钠。一种试验是通过强饲将亚硝酸钠递送给麻醉的野生猪(概念验证试验(proofofconc印ttrial))，和第二种在食物中将亚硝酸钠递送给野生猪的试验(诱饵递送试验)。概念验证试验该试验发生在2006年1月。试验的设计在图表1中展示。通过用16号针头肌肉注射到四头肌中，将21只俘获的野生猪用克他命(ketamine)(20mgkg—0和甲苯噻嗪(1.2mgkg—0麻醉。为每个预先称重的野生猪准备已知剂量的亚硝酸钠，并将其溶解或悬浮在等渗水中(15-70ml)。然后将获得的液体通过食管强饲给予单个野生猪。在野生猪的不同组中试验多个亚硝酸钠剂量。在给药后，仔细观察野生猪的临床症状和死亡。亚硝酸钠的给料制度概括如下并且见于图表1。图表1演示概念验证试验的实验设计流程图每个剂量率有三只野生猪。概念验证试验的实验设计亚硝酸钠90135180mgkg"mgkg"mgkg-1三只未处理的野生猪作为对照。将它们麻醉，强饲15ml等渗水，并且从内部或外部颈静脉进行静脉穿剌。特别地，18强饲，将1英寸针头插入接近前胸骨颈静脉沟的尾部并且用3ml注射器提供吸力。然后在与试验中的其它野生猪的相同条件下，使野生猪从麻醉中恢复，但是没有进一步静脉穿剌。将对照和恢复的野生猪用步枪安乐死。对这些野生猪进行死后检查并且收集适当样品。在有或无碳酸钠时，对12只麻醉野生猪通过胃管强饲给予亚硝酸钠(NaN02)(在下文用SN表示)。对对照野生猪使用同样的方法。特别地，三只野生猪接受30g碳酸钠(给予25ml等渗水)紧接着给予溶于15ml水中的180mgkg—1SN。三只野生猪只接受溶于15ml水的18mgkg—^N。给予三只野生猪溶于15ml水的135mgkg—1的SN。其余三只野生猪给予溶于15ml水的90mgkg—1的SN。在给予该毒素的1分钟内，对SN定量给药的野生猪(非135mgkg—1组)从血液取样。然后在之后的数分钟或数小时的不同时间对野生猪机会性取样。对较小野生猪，较频繁地取血液样品，但是在取血液样品时，由于SN的效应这些野生猪是镇静的或是半清醒的。对从麻醉中快速恢复的野生猪，或是较大的野生猪，与其它野生猪相比，取样较不频繁。还对所有的野生猪在死后立即(在1分钟内)取血样。血样用于评估高铁血红蛋白水平(Met315Hb)。将自动放射血氧浓度计(RadiometerCopenhagen提供的ABL520型)用于血液MetHb分析。将一个组的每个个体的MetHb数据集中，以产生对于以单一剂量率给药的多个野生猪的剂量反应曲线。不对接受135mgkg—^勺野生猪取血样直到其死亡。对所有野生猪进行死后检查。计算SN中毒的野生猪的平均死亡时间和MetHb峰水平。用Kruskal-Wallis统计检验测定在有或无碳酸钠时在不同SN剂量下死亡时间之间的任何显著不同。将接受单一剂量率的每组野生猪的系列MetHb水平集中并且对时间绘图。对数据制作趋势线。对三个较高剂量率使用对数函数，而对90mgkg—工野生猪的组制作多项式趋势线。这产生不同剂量的SN和可能的增效剂(synergist)(碳酸钠)对MetHb水平的效应的视图。用Primer(V.5)由SN杀死的野生猪产生的数据进行多维标度和ANOSIM检验(Clarke17禾口Gorley2001PRIMERV.5:Usermanual/tutoria1.PRIMER—E-PlymouthUK.;Clarke禾口Warwick2001Changeinmarinecommunities:anapproachtostatisticalanalysisandinterpretation，2ndedition,PRMER-ELtd,PlymouthUK)。该程序对数据作了少数几个假设并且由一系列单变量、多变量和作图常数(gr即hicalroutine)组成用以分析样品的矩阵。特别地，通过多维标度(MDS)的排列用于在视觉上区分基于各个变量的野生猪(死亡时间、高铁血红蛋白水平峰、呼吸困难的时间和呕吐的时间)。使用一个因素，剂量率。将数据标准化并且进行30个随机重排。用ANOSIM测定这些变量之间的显著差别是不是由于剂量率。用SIMPER(Primer的功能)测定剂量率之间的差别或什么剂量率最不同。诱佴递送试验在2005年10月和2006年6月进行试验。两个试验都设计为测试当野生猪自由地食用食物中的毒素时，SN对它们是致命的这一假设。在(见图表2)测试亚硝酸钠的第二个试验中，使用24只野生猪。在毒素试验前，给每只野生猪每天预先喂养在毒素试验中它们要接受的诱饵替代物10天(诱饵或干小麦)。在试验中，六只野生猪作为对照不接受毒素，但接受诱饵替代物(载体材料)。其中，三只接受小麦喂养，三只接受在实施例2中描述的类型制作的诱饵。将剩余18只野生猪分为三组，每组六只动物。每组中的三只猪接受250或500g的小麦(根据体型大小和由此决定的毒素递送总剂量)，并且其它三只接受l或2种诱饵(再次，毒素决定的量)。六只野生猪的每个连续的组接受增加的剂量的亚硝酸钠135(最低的成功的强饲剂量)、270和540mgkg—、每15分钟观察野生猪，共6小时，然后是每小时观察，共6小时，然后在临床现象发生后12小时(如果它们还活着)进行安乐死。图表2验证在喂养试验中毒素的实验设计的流程图每个剂量率含有六只动物，这六只动物平均分配在两种诱饵载体材料中。六只用作对照。亚硝酸钠试验的实验设计题入圈试验概念验证试验对照野生猪对照野生猪都在麻醉、取血样和强饲中存活。临床现象专一地只是由18于麻醉。这些现象包括持续30-50分钟的无意识。所有3只动物试图在60分钟站立，为了取样，给予麻醉剂后并且所有动物正常地在75-120分钟站立。在注射麻醉试剂后三个小时，所有野生猪站立、行走、吃食并且喝水并且看起来正常。将这些动物在麻醉后3小时用步枪安乐死。在全面检查胸和腹部器官并且检查骨骼肌和皮下组织后，死后的发现结果是不显著的。唯一检查到的不正常是与通过剌孔注射麻醉物质相关的在四头肌中的小血肿。亚硝酸钠野生猪给予12只野生猪(并且这些中的三只也接受了碳酸钠)SN。在给予SN的时候，对于所有野生猪，最初的MetHb水平接近O。但是给予SN造成所有取样的野生猪的血MetHb值快速增加。三个较高剂量似乎比低剂量(90mgkg—、见图3)对血MetHb造成更快和更大的增加。对每个处理组最佳拟合的绘图线似乎和数据吻合的很好，没有r2值小于0.88。碳酸钠似乎不能作为接受其的动物的增效剂，该动物具有与只接受高剂量SN组相似的曲线。所有九只接受135mgkg—1剂量或大于该剂量的野生猪都死亡。平均的死亡时间是106士75(S.D.)分钟(42-130范围)。被杀的野生猪的平均MetHb峰水平是82X。三只接受90mgkg—1的SN的野生猪中只有一只死亡。该单独死亡在MetHb水平开始下降后在取血样后即刻发生，并且可能是处理过程中氧化应激的结果。以较高剂量中毒的野生猪似乎更快地死亡(见表2)。但是，用Kruskal-Wallis检验，在三种致死处理(180mg/kg、180mg/kg(和碳酸钠)和135mg/kg)之间的死亡时间没有显著不同(K=5.067，d.f.=2，P=0.079)。表2给予SN的每个野生猪组的剂量率、结果和MetHb峰水平1(见图3)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>工这是大约的峰水平，因为取样时间可以不与MetHb峰的时间一致。但是在绘制和拟合(fitting)"最佳拟合线(lineofbestfit)"之后，这些值似乎是大约的峰值。2虽然死亡可能是因为处理部分高铁血红蛋白血症的过程中突然发生的，单一个体死亡用了302分钟。3评估了三只动物中的两只。在概念验证试验中，有时难以区别哪个临床现象是由于麻醉，哪个是由于中毒。与对照野生猪的比较有助于解决这一问题。当考虑在亚硝酸中毒野生猪的临床现象时，有两组野生猪。显示共同现象的一组是接受^135mgkg—^勺九只野生猪，而第二组是接受90mgkg—1的三只野生猪。接受较高剂量的野生猪通常不从麻醉中完全恢复并且快速死亡，有最少的临床现象。这九只动物中有两只恢复意识，并且在SN的全部效应变得明显之前试图站立，并且它们又似乎失去意识。当它们有意识时七只动物呕吐l-4次之间，但是干呕未延长。动物在强饲后约30-60分钟变得呼气困难，并且逐渐变坏直到出现恰在临死前发生的显著的气喘。不协调的是，在九只动物中的两只发生蹒跚和短暂的痉挛性癫痫发作，并且当这些野生猪接近死亡时间时该情况变得明显。接受较低剂量的野生猪显示昏睡时间延长，该昏睡在4-6小时逐渐变弱。中毒后三小时，三只动物中的两只发生呕吐。一只动物在定量给药和取血样后约5小时死亡。两只野生猪在接受90mg/kg剂量的SN后存活并且在给药后14小时具有接近0的MetHb水平。MDS分析证实，某些剂量率产生明显不同于其它野生猪的症状，这些不同是基于临床现象、死亡时间和MetHb水平的相对不同之上的(见图4a)。四只接受高或低剂量的野生猪有广泛的不同。但是，多数野生猪彼此间表现出区别很少，并且这些个体都接受了较高剂量。通常，较高剂量倾向于与更快的时间死亡相符合(见图4b)。总体ANOSIM分析显示，接受每个剂量的野生猪组之间的差别是显著的(R=0.296，P=0.02)。清楚的是，在野生猪之间的最大不同是当用SMPER分析时，是接受90mgkg—1组和所有其它野生猪之间。换句话说，在90mgkg—1野生猪和所有其它剂量率之间的所有成对系数的平均不同是约23%(见表3)。接受90mgkg—1并且死亡的野生猪比接受更高剂量SN的野生猪的呕吐时间更长，MetHb峰值更低，并且死亡时间更长(该剂量率的两只野生猪未死亡并且未用MDS分析)。较高剂量造成较短时间出现临床现象和死亡。表3.基于SIMPER分析计算的所有成对系数的野生猪剂量率各组之间的不同该表证明接受90mgkg—1的野生猪与接受较高剂量的其它野生猪之间最不同。不同数字越高，成对比较越不同。108S代表的组接受180mgkg—1和碳酸钠。成对剂量率比较(mgkg4)180S对18010.44180S对1357.82180对13513.0890对13522.3890对180S20.5590对18025.76在摄入亚硝酸后死亡的所有动物中在死后检查出异常。唯一一致的现象是深色或20巧克力颜色的血和随后可见良好的血管形成的器官和组织的变色。某些动物(2)在不同地方，通常是胸腔，显现血液凝固块或明显出血。一只野生猪有大量出血流入胸腔，出血广泛可足以促进死亡。有一只有MetHb峰水平为90.1%，在强饲后47分钟死亡的44.8kg雄性野猪。大部分野生猪肺部苍白色伴有一些出血的淤斑。一只动物有部分厚度的胃溃疡且在网膜上有一些相关的出血。这可以是已有的病理特征或与强饲管的通过相关。相反，在90mgkg—1组或对照野生猪中未检测到异常。诱佴递送试验美味性低剂量(135mgkg—0毒素诱饵容易地被食用，其中毒素和蜜集中在诱饵的中部(见实施例2)。在270和540mgkg—1剂量率，每组三只动物中的两只食用诱佴和毒素，第三只食用中心蜜/SN块的周围部分，并且未食用大多数毒素。在135mgkg—、毒素与蜜混合且在小麦中的"块"中，三只野生猪中的两只拒绝任何毒素，但是食用毒素"块"周围的小麦。当将毒素分散在整个诱饵基质(载体材料)中，这两只动物容易地食用了毒素。对于其他接受小麦中较高剂量的野生猪，将毒素与一勺蜜混合在整个小麦中，并且所有的野生猪容易地食用了谷物和毒素。死亡大部分动物在10-30分钟内食用了全部诱饵材料。六只动物接受了诱饵基质中的最低有效强饲剂量135mgkg—1SN，但是没有动物死亡。五只动物食用270mgkg—1SN，且一只死亡。来自该270mg/kg剂量组的其余(final)动物只食用了诱饵中的部分毒素，并且没有死亡。食用任一基质中含有的540mgkg—1的所有动物死亡(4/4;每种基质2只)。第五只动物开始显现临床不适同时其继续食用了小麦，并且只吃掉给予的500g小麦中的370g，但是仍旧死亡了。假设即使毒素分散在整个小麦中，其接受了约400mgkg—1SN。来自高剂量组的其余(final)动物食用了诱饵中的部分剂量(未知量)的SN并且仍然存活。所有死亡动物死亡的平均时间是141±49分钟(S.D.)。接受540mgkg—1全剂量的动物的死亡的平均时间是122士49分钟(S.D.)。所有动物显示临床现象的平均时间是84士41分钟。接受540mgkg—1全剂量的动物显示临床现象的平均时间是80±51分钟。接受亚致死剂量的动物在约600士187分钟(10±3小时)后恢复。中毒野生猪的平均体重是25士llkg，且有四只雄的和两只雌的。权利要求一种杂食野生动物用诱饵，其包含固体或半固体载体材料和亚硝酸盐。2.根据权利要求1所述的诱饵，其中亚硝酸盐是亚硝酸钠。3.根据权利要求1或2所述的诱饵，其中亚硝酸盐是对野生动物提供致死剂量的量。4.根据权利要求3所述的诱饵，其中致死剂量是至少135mg/kg亚硝酸盐。5.根据权利要求1或2所述的诱饵，其中亚硝酸盐的量在30g以下。6.根据权利要求5所述的诱饵，其中亚硝酸盐的量在15g以下。7.根据权利要求1至6中任一项所述的诱饵，其中杂食野生动物是野生猪。8.根据权利要求1至6中任一项所述的诱饵，其中杂食野生动物是野生负鼠。9.根据权利要求1至8中任一项所述的诱饵，其中载体材料是用亚硝酸盐浸泡或包被的或即刻与亚硝酸盐混合的谷物种子。10.根据权利要求1至8中任一项所述的诱饵，其中载体材料是在掺有亚硝酸盐的肉片。11.根据权利要求1至8中任一项所述的诱饵，其中亚硝酸盐分散在整个载体材料中。12.根据权利要求11所述的诱饵，其中载体材料实质上包含动物衍生成分。13.根据权利要求11所述的诱饵，其中载体材料包含鱼肉。14.根据权利要求11至13中任一项所述的诱饵，其中诱饵是圆柱形并且用包在诱饵外周的薄包装加固。15.—种杂食野生动物用诱饵，其外部可食用层包含核心和固体或半固体载体材料，其中该核心含有作为活性剂的亚硝酸盐，并且该核心位于固体或半固体载体材料之内。16.—种人道地控制杂食野生动物用诱饵，其包含固体或半固体载体材料和亚硝酸盐，其中亚硝酸盐是为杂食野生动物提供致死剂量的量。17.根据权利要求15至16中任一项所述的诱饵，其中杂食野生动物是杂食野生猪。18.根据权利要求15至16中任一项所述的诱饵，其中杂食野生动物是杂食野生负鼠。19.一种制备包括固体或半固体载体材料和亚硝酸盐的杂食野生动物用诱饵的方法，所述方法包含(a)将载体材料成分和亚硝酸盐混合形成糊或悬浮混合物；(b)将该混合物压入包装中；并且(c)使该混合物在包装中至少部分固化因而形成诱饵；20.—种制备包含与固体或半固体的载体材料有物理性接触的核心的杂食野生动物用诱饵的方法，其中该核心含有作为活性剂的亚硝酸盐，并且该核心位于固体或半固体载体材料之内，所述方法包含(a)混合载体材料成分，形成糊或悬浮混合物；(b)将混合物压入包装；(c)使混合物在包装中至少部分固化，因而形成固体或半固体载体材料。(d)在固体或半固体载体材料内形成定量给料孔；(e)将核心成分和活性剂混合，形成液体或悬浮物，制备固体形式的核心；(f)用步骤(e)中的液体、悬浮物或固体形式核心的部分填充定量给料孔；并且(g)用固体或半固体载体材料充填定量给料孔的剩余体积。21.—种人道地控制杂食野生动物的方法，其包括在所述杂食野生动物寻食区域内散播至少一种包含固体或半固体载体材料和亚硝酸盐的诱饵的步骤。22.根据权利要求21所述的方法，其中杂食野生动物是野生猪。23.根据权利要求21所述的方法，其中杂食野生动物是野生负鼠。全文摘要本发明涉及诱饵，尤其是用于以人道方法控制野生杂食动物种群的诱饵。本发明还涉及生产该诱饵的方法。文档编号A01N59/00GK101742913SQ200880008084公开日2010年6月16日申请日期2008年2月28日优先权日2007年2月28日发明者B·考利德,L·D·斯特皮斯,S·汉弗莱斯,S·洛培兹申请人:侵害性动物Crc有限公司