专利名称：用桔青霉诱导子提高滇重楼根状茎中甾体皂苷含量的方法
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默领域
本发明涉及一种提高滇重楼根状茎中甾体皂苷含量的方法，特别是涉及一种 利用桔青霉诱导子促进滇重楼根状茎中甾体皂苷含量的方法。
背景技术：
滇重楼是延龄草科重楼属的多年生草本植物，主要分布于中国西南部，特别 是云南、四川及贵州等地。滇重楼是名贵的药用植物，其根状茎中含有的留体皂 苷类化合物主要包括偏诺皂苷和薯蓣皂苷，是其主要活性成分，具有抗癌、止血、 消炎、镇痛、止咳平喘和免疫调节等活性。滇重楼生长周期长、繁殖率低、生物 量积累少。近年来，随着市场对其需求量的迅速增长，人们在野外对其肆意的采 挖，使滇重楼资源分布破碎化，严重影响了其在原产地的生长和繁衍，导致滇重 楼已逐步步入濒危植物行列，重楼的工业药用原料出现严重紧缺。因此对其进行 人工驯化栽培已迫在眉睫。
利用病原物诱导子激活植物细胞中的次生代谢途径已成为提高植物细胞培养 物中目标产物产量的有效手段之一。桔青霉诱导子是一种真菌诱导子，在植物与 真菌的相互作用中能快速、有选择性地诱导植物特定基因的表达，进而活化特定 的次生代谢途径，积累特定的目的次生产物，被广泛地用于促进多种植物细胞中 次生代谢产物的合成。
目前尚未出现利用桔青霉诱导子来促进滇重楼中根状茎的生长，提高其中甾 体皂苷含量的方法。
发明内容
本发明的目的在于弥补现有技术的不足，提供一种用桔青霉诱导子提高滇重 楼根状茎中甾体皂苷含量的方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是 一种用桔青霉诱导子提高滇重 楼根状茎中甾体皂苷含量的方法，包括以下步骤
(1) 将桔青霉诱导子溶于水，配制成浓度为76 304mgGE/L的桔青霉诱导子溶液；
(2) 在一个自然年度的7~8月份对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次桔青霉 诱导子溶液，直到叶片上的桔青霉诱导子溶液将要滴落时停止喷施。
上述步骤(l)中是将桔青霉诱导子溶于水，配制成浓度为304mgGE/L的桔青霉诱
3导子溶液。
上述步骤(2)中是于傍晚时分，对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次桔青霉诱 导子溶液。
上述步骤(2)中是对展叶完全的滇重楼叶片的正反两面均匀喷施一次桔青霉诱 导子溶液。
上述步骤(2)中是在每年的7 8月份对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次桔青 霉诱导子溶液。
实验结果表明，本发明中采用浓度为304mgGE/L的桔青霉诱导子溶液，在每 年的7~8月份于傍晚时分，对展叶完全的滇重楼植株的叶片正反两面均匀喷施一 次，直至其根状茎可以入药，能够达到最佳效果。
本发明的优点如下
(1) 所需药品、仪器设备简单便宜，只需制备桔青霉诱导子，再加上喷施设备 (如喷壶或喷雾器)即可实施，因此投入少，成本低；
(2) 实施过程简单易行，使滇重楼当年生根状茎、往年生根状茎中总甾体皂苷 含量分别提高了54%、 97%,且本方法对人畜无毒害，对环境无影响。
具体实施例方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步说明。本发明实施例中所用的桔青霉 诱导子是利用现有技术制备的。 实施例l
将桔青霉诱导子溶于水，配成浓度为76mgGE/L的桔青霉诱导子溶液，在每年 的7 8月份于傍晚时分，对展叶完全的滇重楼植株的叶片正反两面均匀喷施一次， 直到叶片上的桔青霉诱导子溶液将要滴落时停止喷施。另取与上述喷施量等量的 水，采用同样方法对展叶完全的滇重楼植株上的叶片正反两面进行均匀喷施作为 对照。如遇下雨，可进行补喷。待滇重楼倒苗后，用RP-HPLC方法检测根状茎中 甾体皂苷含量。结果显示，当年生根状茎、往年生根状茎中总甾体皂苷含量分别 提高了24%、 53%。 实施例2
采用与实施例l相似的方法进行实验，不同之处在于采用浓度为152mgGE/L的
桔青霉诱导子溶液对滇重楼的叶片喷施。结果显示，当年生根状茎、往年生根状 茎中总甾体皂苷含量分别提高了15%、 42%。实施例3
采用与实施例l相似的方法进行实验，不同之处在于采用浓度为228mgGE/L的 桔青霉诱导子溶液对滇重楼的叶片喷施。结果显示，当年生根状茎、往年生根状 茎中总甾体皂苷含量分别提高了18%、 89%。 实施例4
采用与实施例l相似的方法进行实验，不同之处在于采用浓度为304mgGE/L的 桔青霉诱导子溶液对滇重楼的叶片喷施。结果显示，当年生根状茎、往年生根状 茎中总甾体皂苷含量分别提高了54%、 97%。
权利要求
1.一种用桔青霉诱导子提高滇重楼根状茎中甾体皂苷含量的方法，其特征在于包括以下步骤(1)将桔青霉诱导子溶于水，配制成浓度为76～304mgGE/L的桔青霉诱导子溶液；(2)在一个自然年度的7～8月份，对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次桔青霉诱导子溶液，直到叶片上的桔青霉诱导子溶液将要滴落时停止喷施。
2. 根据权利要求1所述的用桔青霉诱导子提高滇重楼根状茎中甾体皂苷含量的方 法，其特征在于步骤(l)中是将桔青霉诱导子溶于水，配制成浓度为304mgGE/L 的桔青霉诱导子溶液。
3. 根据权利要求1或2所述的用桔青霉诱导子提高滇重楼根状茎中甾体皂苷含量的 方法，其特征在于步骤(2)中是于傍晚时分，对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施 一次桔青霉诱导子溶液。
4. 根据权利要求1~3中任一项所述的用桔青霉诱导子提高滇重楼根状茎中甾体皂 苷含量的方法，其特征在于歩骤(2)中是对展叶完全的滇重楼叶片的正反两面均 匀喷施一次桔青霉诱导子溶液。
5. 根据权利要求1~4中任一项所述的用桔青霉诱导子提高滇重楼根状茎中甾体皂 苷含量的方法，其特征在于步骤(2)中是在每年的7~8月份，对展叶完全的滇 重楼叶片均匀喷施一次桔青霉诱导子溶液，直至其根状茎可以入药。
全文摘要
本发明公开了一种用桔青霉诱导子提高滇重楼根状茎中甾体皂苷含量的方法，包括以下步骤将桔青霉诱导子溶于水，配制成浓度为76～304mgGE/L的桔青霉诱导子溶液；在一个自然年度的7～8月份对展叶完全的滇重楼叶片均匀喷施一次桔青霉诱导子溶液，直到叶片上的桔青霉诱导子溶液将要滴落时停止喷施。可每年进行此操作，直至滇重楼的根状茎可以入药。本发明所需药品、仪器设备简单便宜，投入少，成本低，易于推广；实施过程简单易行，能显著提高滇重楼根状茎中甾体皂苷含量，使当年生根状茎、往年生根状茎中总甾体皂苷含量分别提高了54％、97％，且本方法对人畜无毒害，对环境无影响。
文档编号A01G1/00GK101513163SQ20091006142
公开日2009年8月26日 申请日期2009年4月3日 优先权日2009年4月3日
发明者李家儒, 杨昌红, 赵庭周, 韦建荣 申请人:武汉大学;云南白药集团股份有限公司