专利名称：一种快速高效构建团头鲂半同胞家系的方法
技术领域：
本发明属于鱼类育种方法领域，具体涉及一种团头鲂半同胞家系的构建方法。
背景技术：
团头鮮(Megalobrama amblycephala Yih, 1955),又名武昌鱼，隶属于硬骨鱼纲， 鲤形目，鲤科，鲂属，其自然分布仅局限于长江中下游少数几个湖泊中。团头鲂是我国重要的草食性经济鱼类之一，由于其食性广、成本低、生长快、成活率高、易捕捞，能在池塘中产卵繁殖，凡具有味美、头小、含肉率高、体形好、规格适中等优点，因而被作为优良的草食性鱼类品种在全国普遍推广。近年来，团头鲂成为市场畅销品种，养殖经济效益较好。因而市场对团头鲂优良苗种的需求十分迫切，亟待规范团头鲂的苗种繁育生产，加快团头鲂的种质资源保护和良种选育进程。由于团头鲂苗种生产中普遍存在近亲繁殖的现象，导致种质退化加剧。常规苗种的生长速度较慢，不仅影响了团头鲂的生长性能，而且在一定程度上制约了团头鲂在更大范围的推广。虽然我国已经选育出生长速度较快的团头鲂新品种“浦江一号”，其选育方法采用传统的群体选育法，其后代性状不稳定。目前国内亟待挖掘和创新种质资源，选育出生长速度快、抗逆性好的团头鲂优良品种。目前国际上在水产动物的选育越来越倾向运用大规模家系选育技术，而运用大规模家系选育，构建半同胞家系是必不可少的，因为选育中很多遗传参数都要通过半同胞家系进行估计。有报道认为，在虹鳟(Kincaid et al. 1977 ；Gjerde 1986)、大西洋鲑(Gjerde 1986，1999)、罗非鱼(Longalong et al. 1999 ；Gall et al. 2002)、斑点叉尾鮰(Rezk et al. 2003)、银大麻哈鱼(Cerda et al，2003)、南美白对虾(Fjalestad et al. 1997 ；Hetzel et al. 2000)、东部牡蛎(Davis 2000)以及国内对中国对虾(田焱2007 ;杨翠华2007)以及大菱鲆(栾生等2008)、长牡蛎(王庆志等，2009)等的选育中已有成功实施案例。然而，在实际构建团头鲂的半同胞家系中，仍存在亲本发育不同步，雌鱼产卵的数量和质量不稳定、 雄鱼精液不足，导致半同胞构建效率不高等突出问题。而且由于亲本的发育不一致，使得半同胞构建不同步，构建周期也比较长。迄今为止尚未见到有关团头鲂半同胞家系的构建方法的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种团头鲂半同胞家系的构建方法，该方法能满足后续的大规模团头鲂家系选育要求。本发明通过以下技术方案实现一种构建团头鲂半同胞家系的方法，其步骤包括I)在自然年份I月上旬，选择2龄以上且体重大于O. 5kg的团头鲂提前进行个体培育，用PIT电子标记通过注射器注入至团头鲂背鳍基部，做好相应记录，培育6个月；2)在当年的6月份，起捕步骤I)的团头鲂，人工注射激素调节其性腺发育使其同步，第一次注射激素时，只注射雌鱼，注射的激素为绒毛膜促性腺激素，注射剂量为I μ g/kg 体重；3)在第一次注射激素12h后，对雌、雄团头鲂进行第二次注射激素，注射的激素及剂量绒毛膜促性腺激素为4 μ g/kg体重；地欧酮为2mg/kg体重；4)构建团头鲂半同胞家系其中构建母系半同胞家系按团头鲂I尾雌性配2尾雄性的比例配置，或雌性团头鲂的怀卵量超过超过50万粒，按I尾雌性配3尾雄性的比例构建团头鲂母系半同胞家系；其中构建父系半同胞家系按团头鲂I尾雄性配2尾雌性，或个体精液量超过2ml，按I尾雄性配3尾雌性构建父系半同胞家系；5)在步骤3)团头鲂第二次注射激素6_8h后，以手指轻压雌性团头鲂腹部卵子能自动流出，即可进行人工授精；6)将团头鲂雌鱼捞出，擦去体表水分，将卵挤入擦干的不锈钢碗内，将所取的卵分成2等分，分置于两个不锈钢碗内，待用；或将超过50万粒的卵分成3等分，分置于三个不锈钢碗内，待用；然后向所述分置的不锈钢碗内挤入2尾雄性团头鲂的精液(约
O.8-1. Iml),再加入20ml生理盐水,轻轻搅拌至3_4min ;分别用黄泥水对团头鮮的受精卵进行脱粘，清水漂净后放置孵化缸孵化即可；其中步骤2)所述的个体培育的步骤为单独养殖，放养密度为每666. 7m2养殖水面放养200-300尾，养殖期间饲料日粮的配比按重量份为30%的草鱼混养浮性商品饲料，70% 青饲料(例如黑麦草或苏丹草等)。步骤3)和5)两次注射激素的时间的间隔依据水温情况而定，当水温为20_22°C 时，间隔时间为12h ;当水温高于22-25°C时，间隔时间为8h。步骤6)所述的生理盐水，为O. 6%浓度的生理盐水，即将O. 6g氯化钠加少量蒸馏水溶解并定容至100ml。步骤6)所述的黄泥水，是黄泥加水充分搅匀后过40目网即可。本发明具有以下优点I.本发明对设备要求不高，操作简便，团头鲂半同胞家系构建成功率显著提高，一般实验室内和养殖场所均能达到，且构建团头鲂家系也只需3-4人即可进行批量构建。2.在构建团头鲂家系时可以平衡各个家系的数量，以保证各个家系的后代的一致性，有效解决了半同胞家系构建不同步的问题，大大缩短了家系构建的周期，易于进行家系标准化培养。3.本发明对团头鲂亲鱼损伤小，亲本可在来年继续用于繁殖，且子代存活率高。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明实施应用进行说明。本发明的实施例是在国家级团头鲂原种场(湖北省鄂州市)进行实施，选用的团头鲂亲鱼来至江西省鄱阳湖、湖北省梁子湖和和湖北省的淤泥湖的野生团头鲂，共73尾， 其中雌性24尾，雄性49尾。试验于当年12月份左右开始，将用于构建团头鲂半同胞家系的亲本进行单独养殖，即放养密度为200kg/666. 7m2养殖水面。按重量份计，饲喂的日粮比例为30%的草鱼混养浮性商品饲料(购自武汉高龙饲料有限公司)和70%的青草(如种植的黑麦草和苏丹草)进行育肥，一直持续到第二年6月的繁殖前。翌年6月份左右，当养殖水温达20_22°C时，将团头鲂亲鱼捕起，用PIT电子标记 (购自广州洪腾条码技术有限公司)通过注射器注入至团头鲂背鳍基部，将雌雄团头鲂分开暂养并禁食，在暂养池给予充分的曝气以保证溶氧大于5mg/L。表I六月龄团头鲂半同胞家系间体重和体长的的比较
权利要求
1.一种构建团头鲂半同胞家系的方法，其特征在于其步骤包括1)在自然年份I月上旬，选择2龄以上且体重大于O.5kg的团头鲂提前进行个体培育， 用PIT电子标记通过注射器注入至团头鲂背鳍基部，做好相应记录，培育6个月；2)在当年的6月份，起捕步骤I)的团头鲂，人工注射激素调节其性腺发育使其同步， 第一次注射激素时，只注射雌鱼，注射的激素为绒毛膜促性腺激素，注射剂量为I μ g/kg体3)在第一次注射激素12h后，对雌、雄团头鲂进行第二次注射激素，注射的激素及剂量绒毛膜促性腺激素为4 μ g/kg体重；地欧酮为2mg/kg体重；4)构建团头鲂半同胞家系其中构建母系半同胞家系按团头鲂I尾雌性配2尾雄性的比例配置，或雌性团头鲂的怀卵量超过超过50万粒，按I尾雌性配3尾雄性的比例构建母系半同胞家系；其中构建父系半同胞家系按团头鲂I尾雄性配2尾雌性，或个体精液量超过 2ml，按I尾雄性配3尾雌性构建团头鲂父系半同胞家系；5)在步骤3)团头鲂第二次注射激素6 8h后，以手指轻压团头鲂腹部卵子能自动流出，即可进行人工授精；6)将团头鲂雌鱼捞出，擦去体表水分，将卵挤入擦干的不锈钢碗内，将所取的卵分成 2等分，分置于两个不锈钢碗内，待用；或将超过50万粒的卵分成3等分，分置于三个不锈钢碗内，待用；然后向所述分置的不锈钢碗内挤入团头鮮2尾雄鱼的精液O. 8-1. Iml,加入 20ml生理盐水，轻轻搅拌至3 4min ;分别用过40目网的黄泥水对团头鲂的受精卵进行脱粘，清水漂净后放置孵化缸即可；其中步骤2)所述的个体培育的步骤为单独养殖，放养密度为每666. 7m2放养200 300 尾，养殖期间饲料日粮的配比按重量份为30%的草鱼混养浮性饲料，70%青饲料。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，步骤3)和5)两次注射激素的时间的间隔依据水温情况而定，当水温为20-22°C时，间隔时间为12h ;当水温高于22-25°C时，间隔时间为8h。
全文摘要
本发明属于淡水鱼育种技术领域，具体涉及一种构建团头鲂半同胞家系方法，步骤包括1)选择体重大于0.5kg的团头鲂提前进行个体培育，用电子标记进行标记，个体培育6个月；2)在当年的6月份，调节其性腺发育使其同步，第一次注射时，只注射雌鱼，注射绒毛膜促性腺激素；3)第一次注射12h后，对雌、雄亲本进行第二次注射，为绒毛膜促性腺激素和地欧酮；4)构建团头鲂半同胞家系母系半同胞家系按1雌配2雄；父系半同胞家系按1雄配2雌；5)第二次注射后，以手指轻压团头鲂腹部卵子能自动流出，即可进行人工授精；6)将取的卵分成2等分，分置不锈钢碗内，以2尾雄鱼的精液授精，用黄泥水对受精卵脱粘，清水漂净后放置孵化缸即可。
文档编号A01K61/00GK102599079SQ20111002855
公开日2012年7月25日 申请日期2011年1月24日 优先权日2011年1月24日
发明者曹小娟, 曾聪, 王卫民, 罗伟, 高泽霞 申请人:华中农业大学