专利名称：一种报春苣苔叶柄扦插诱导不定芽和不定根的繁育方法
技术领域：
本发明属于植物繁育技术领域，具体涉及一种报春苣苔叶柄扦插诱导不定芽和不定根的繁育方法。
背景技术：
报春苣苔(Primulina tabacum Hance)为苦苣苔科多年生小型草本植物，自1881 年美国人亨利在粤北连州连江流域的石壁上发现了报春苣苔这一珍稀植物后，它又神秘消失了 125年。直到前几年，国内有关媒体报道了在连州再次发现了报春苣苔这一濒危保护植物。它的发现对研究岭南古气候、土壤和动植物演变无疑具有重大的学术价值。由于该物种生存环境要求特殊、地理分布狭小、种群数量很少，已被国家确定为中国第一批重点一级保护的珍稀濒危保护植物。以报春苣苔的叶柄扦插进行繁育生根方面的技术，国内外均未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种报春苣苔叶柄扦插诱导不定芽和不定根的繁育方法，利用本方法可以繁育得到不定芽和不定根，再将不定芽分株后移栽，短时间内可获得大批的小苗，进而长成植株，从而为更好的保护和利用该珍稀濒危植物，建立了一套简单、快速、有效的繁殖体系和植株再生体系，有效的保护和繁殖该国家第一批一级物种，使之解除濒危状态，为今后更进一步保护和利用该物种奠定良好的基础。本发明的报春苣苔叶柄扦插诱导不定芽和不定根的繁育方法，其特征在于，包括以下步骤在每年的2 4月份，取报春苣苔(Primulina tabacum Hance)的0. 5 IOcm 长的带叶片的叶柄作为外植体；将外植体浸泡于植物生长调节剂中IOmin 2h，然后再扦插于基质中，或者先将外植体扦插于基质中，然后再往基质喷洒植物生长调节剂5 100ml/1200cm2l 3次；外植体的扦插生长环境为遮阳、通风、透气的温室大棚中，控制环境温度为18 32°C，相对湿度为50 95%，浇水保湿，直至长出不定芽和不定根；所述的基质为河沙、珍珠岩和蛭石中的两种或三种的混合物；所述的植物生长调节剂是指含有下述三种浓度的物质6-苄基嘌呤(BA)I 10mg/L、吲哚-3- 丁酸(IBA) 1 10mg/L和萘乙酸(NAA) 1 10mg/L中的一种或两种，或者所述的植物生长调节剂为吲哚乙酸(IAA)I 10mg/L。所述的基质优选为河沙、珍珠岩和蛭石中的两种或三种按体积比1 1或 1:1: 1混合。在河沙和珍珠岩(1:1，ν/ν)基质上，叶柄用ΙΒΑ1. Omg/L浸泡30分钟后再插入基质后培养50 60天后，每个叶柄最多可繁殖8. 8个新的不定芽，其不定根的诱导率可达 90%以上，将不定芽进行分株后，移栽到沙石、珍珠岩和蛭石作为基质的沙盆中壮苗，能保证较高的成活率，成活率可达90%以上，然后长成小苗，进而可长成报春苣苔植株。一般三个月内就可以由一个叶柄外植体诱导出多个新的植株。本发明通过选择合适的外植体，再经植物生长调节剂处理，扦插于合适的基质中， 在合适的条件下培养，而诱导出不定芽和不定根，经分株移栽长成小苗进而长成植株。本发明能简单方便、快速有效，在短时间内繁殖出大批的小苗，进而长成植株。从而为更好的保护和利用该珍稀濒危植物，建立了一套简单、快速、有效的繁殖体系和植株再生体系，有效的保护和繁殖该国家第一批一级物种，使之解除濒危状态，为今后更进一步保护和利用该物种奠定良好的基础。
具体实施例方式以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。实施例1 在2月观号，取成年报春苣苔2. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以1. Omg Γ1 IBA水溶液浸泡处理30分钟后，将该叶柄斜扦插入河沙、蛭石和珍珠岩 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为 90%，不定芽平均数为8. 8个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩(1 1 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例2:在3月10号，取报春苣苔3. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，先在河沙和珍珠岩(1 l,v/v)混合的基质中扦插，叶片立于基质面上，对每个扦插的盆(长X宽X高= 30cmX40cmX10cm)进行喷洒l.Omg厂1 IBA水溶液IOml共两次。扦插生长环境为遮阳、 四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95% 之间，相隔两天浇水以保湿。培养55天后，生根率为65%，平均诱导不定芽4.5个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石和珍珠岩(1 1，ν/ν)的基质中，常规条件下， 20d后成活率为90%。实施例3:在4月15号，取报春苣苔5. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 5. Omgr1BA水溶液浸泡处理1小时后，然后将该叶柄扦插于河沙和珍珠岩(1 1，ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，每天浇水以保湿，培养60天后，生根率为51%，存活的叶片平均有8. 3 个不定芽。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石和珍珠岩(1 1，ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例4:在4月15号，取报春苣苔0. 5cm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 LOmgr1BA水溶液浸泡处理2小时后，然后将该叶柄扦插于河沙和珍珠岩(1 1，ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，每天浇水以保湿，培养60天后，生根率为63%，存活的叶片平均有6. 0 个不定芽。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石和珍珠岩(1 1，ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例5:在3月15号，取报春苣苔IOcm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 LOmgr1IAA水溶液浸泡处理IOmin后，然后将该叶柄扦插于河沙和珍珠岩(1 l,v/v)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，每天浇水以保湿，培养60天后，生根率为70%，存活的叶片平均有5. 9 个不定芽。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石和珍珠岩(1 1，ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例6 在3月10号，取报春苣苔2. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 10. Omgr1IAA水溶液浸泡处理10分钟后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩(1 1 1， ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间， 相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为72%，不定芽平均数为6. 6个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩 (1:1: 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例7在3月10号，取报春苣苔5. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 l.Omg T1NAA水溶液浸泡处理10分钟后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩(1 1 1， ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间， 相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为45%，不定芽平均数为3.0个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩 (1:1: 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例8在3月10号，取报春苣苔5. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 10. OmgL-1IBA水溶液浸泡处理池后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩(1 1 l,v/v/ ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为83%，不定芽平均数为8. 5个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩(1 1 1， ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例9在3月10号，取报春苣苔8. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 l.Omg L-1BA水溶液浸泡处理池后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩(1 1 1, ν/ν/ν) 混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为80%，不定芽平均数为7. 9个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩(1 1 1， ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例10在3月10号，取报春苣苔4. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 10. Omgr1NAA水溶液浸泡处理IOmin后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩(1 1 1， ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间， 相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为70%，不定芽平均数为6. 6个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩 (1:1: 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例12在3月10号，取报春苣苔6. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 1. Omg U'M+8. Omg L^1IBA水溶液浸泡处理IOmin后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为 23%，不定芽平均数为0.6个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩(1 1 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例13在3月10号，取报春苣苔5. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 5. Omg ^ΒΑ+δ. Omg LlBA水溶液浸泡处理2小时后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为 44%，不定芽平均数为5. 9个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩(1 1 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例14在3月10号，取报春苣苔5. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 9. Omg L^BA+l. Omg L^1NAA水溶液浸泡处理1小时后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为 50%，不定芽平均数为4. 9个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩(1 1 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例15在3月10号，取报春苣苔7. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 9. Omg L^1IBA+!. Omg L-1NAA水溶液浸泡处理30min后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩(1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为 54 %，不定芽平均数为62个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩(1:1: 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例16在3月10号，取报春苣苔9. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，将外植体先以 3. Omg ^ΒΑ+δ. Omg L^1NAA水溶液浸泡处理90min后，将该叶柄斜插入河沙、蛭石和珍珠岩 (1:1: 1，ν/ν/ν)混合的基质(装于盆中长X宽X高=30cmX 40cmX IOcm)中，叶片立于基质面上，扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿，培养50天后，生根率为 45%，不定芽平均数为5. 1个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石、蛭石和珍珠岩(1 1 1，ν/ν/ν)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例17 在3月10号，取报春苣苔3. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，先在河沙和珍珠岩(1 1，ν/ν)混合的基质中扦插，叶片立于基质面上，对每个扦插的盆(长X宽X高 =30cmX 40cmX IOcm)中的基质上进行喷洒5. Omg L4BA水溶液50ml共三次。扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在 50 95%之间，相隔两天浇水以保湿。培养55天后，生根率为61%，平均诱导不定芽3. 5 个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石和珍珠岩(1 l,v/v)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例18 在3月10号，取报春苣苔4. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，先在蛭石和珍珠岩(1 l,v/v)混合的基质中扦插，叶片立于基质面上，对每个扦插的盆(长X宽X高= 30cmX40cmX IOcm)中的基质进行喷洒5. Omg IZ1NAA水溶液IOOml —次。扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿。培养55天后，生根率为61%，平均诱导不定芽3. 5个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石和珍珠岩(1 l，v/v)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。实施例19 在3月10号，取报春苣苔3. Ocm长的带叶片的叶柄作为外植体，先在河沙和珍珠岩(1 l,v/v)混合的基质中扦插，叶片立于基质面上，对每个扦插的盆(长X宽X高= 30cmX 40cmX IOcm)中的基质进行喷洒1. Omg LlBA水溶液5ml共两次。扦插生长环境为遮阳、四面通风、透气的温室大棚中，控制环境温度在18 32°C之间，相对湿度控制在50 95%之间，相隔两天浇水以保湿。培养55天后，生根率为65%，平均诱导不定芽4. 5个。叶柄诱导的丛生不定芽经分成单个芽，移栽于沙石和珍珠岩(1 l，v/v)的基质中，常规条件下，20d后成活率为90%。
权利要求
1.一种报春苣苔叶柄扦插诱导不定芽和不定根的繁育方法，其特征在于，包括以下步骤在每年的2 4月份，取报春苣苔(Primulina tabacum Hance)的0. 5 IOcm长的带叶片的叶柄作为外植体；将外植体浸泡于植物生长调节剂中IOmin 池，然后再扦插于基质中，或者先将外植体扦插于基质中，然后再往基质喷洒植物生长调节剂5 100ml/1200cm2l 3次；外植体的扦插生长环境为遮阳、通风、透气的温室大棚中，控制环境温度为18 32°C，相对湿度为50 95%，浇水保湿，直至长出不定芽和不定根； 所述的基质为河沙、珍珠岩和蛭石中的两种或三种的混合物； 所述的植物生长调节剂是指含有下述三种浓度的物质6-苄基嘌呤(BA)I 10mg/L、 吲哚-3- 丁酸(IBA) 1 10mg/L和萘乙酸(NAA) 1 10mg/L中的一种或两种，或者所述的植物生长调节剂为吲哚乙酸(IAA)I 10mg/L。
2.根据权利要求1所述的报春苣苔叶柄扦插诱导不定芽和不定根的繁育方法，其特征在于，所述的基质为河沙、珍珠岩和蛭石中的两种或三种按体积比1 1或1 1 1混合O
全文摘要
本发明公开了一种报春苣苔叶柄扦插诱导不定芽和不定根的繁育方法。本发明通过选择合适的外植体，再经植物生长调节剂处理，扦插于合适的基质中，在合适的条件下培养，而诱导出不定芽和不定根，经分株移栽长成小苗进而长成植株。本发明能简单方便、快速有效，在短时间内繁殖出大批的小苗，进而长成植株。从而为更好的保护和利用该珍稀濒危植物，建立了一套简单、快速、有效的繁殖体系和植株再生体系，有效的保护和繁殖该国家第一批一级物种，使之解除濒危状态，为今后更进一步保护和利用该物种奠定良好的基础。
文档编号A01G31/00GK102405755SQ201110269949
公开日2012年4月11日 申请日期2011年9月13日 优先权日2011年9月13日
发明者吕金凤, 张新华, 胡玉姬, 马国华 申请人:中国科学院华南植物园